细胞组分的分级分离
翟中和细胞生物学各章习题及答案
《细胞生物学》习题及解答第一章绪论本章要点：本章重点阐述细胞生物学的形成、发展及目前的现状和前景展望。
要求重点掌握细胞生物学研究的主要内容和当前的研究热点或重点研究领域，重点掌握细胞生物学形成与发展过程中的主要重大事件及代表人物，了解细胞生物学发展过程的不同阶段及其特点。
二、填空题1、细胞生物学是研究细胞基本规律的科学，是在、和三个不同层次上，以研究细胞的、、、和等为主要内容的一门科学。
2、年英国学者第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是。
3、1838—1839年，和共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的。
4、19世纪自然科学的三大发现是、和。
5、1858年德国病理学家魏尔肖提出的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
6、人们通常将1838—1839年和确立的；1859年确立的；1866年确立的，称为现代生物学的三大基石。
7、细胞生物学的发展历史大致可分为、、、和分子细胞生物学几个时期。
三、选择题1、第一个观察到活细胞有机体的是（）。
a、Robert Hookeb、Leeuwen Hoekc、Grewd、Virchow2、细胞学说是由（）提出来的。
a、Robert Hooke和Leeuwen Hoekb、Crick和Watsonc、Schleiden和Schwannd、Sichold和Virchow3、细胞学的经典时期是指（）。
a、1665年以后的25年b、1838—1858细胞学说的建立c、19世纪的最后25年d、20世纪50年代电子显微镜的发明4、（）技术为细胞生物学学科早期的形成奠定了良好的基础。
a、组织培养b、高速离心c、光学显微镜d、电子显微镜四、判断题1、细胞生物学是研究细胞基本结构的科学。
（）2、细胞的亚显微结构是指在光学显微镜下观察到的结构。
（）3、细胞是生命体的结构和生命活动的基本单位。
（）4、英国学者Robert Hooke第一次观察到活细胞有机体。
东南大学农学院2021级《细胞生物学》考试试卷(621)
东南大学农学院2021级《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（40分，每题5分）1. 细胞外被是指与细胞膜中的蛋白质或脂类分子共价结合的糖链。
（）答案：正确解析：细胞之外被又称糖萼，它是细胞膜的正常结构组分，不仅对膜蛋白起保护调节作用，作用而且在细胞识别中起重要作用。
2. M6P受体蛋白是高尔基体反面网络上特有的受体蛋白，主要起到分拣溶酶体的酶的作用。
（）答案：错误解析：M6P受体蛋白不是高尔基体反面网络上特有的受体蛋白，质膜上也有M6P受体蛋白。
3. 有丝分裂中核膜变为碎片，因此能像内质网和高尔基体等膜被细胞器一样在两个子细胞间分配。
（）答案：正确解析：事实上，核膜与内质网膜之间是连续糖蛋白的，四个因此某些区段含有突显两个来源的膜。
4. 细胞壁可以看作是高等植物细胞的胞外基质，但它仅仅起支持与保护作用。
（）答案：错误解析：基质不仅起支持与动物细胞保护作用，而且其中的某些寡糖具有信号分子的接收器作用。
5. 核小体的核心蛋白由H1、H2A、H2B、H3各两分子组成的八聚体。
（）答案：错误解析：H1不是核小体的核心蛋白，应该是H4。
6. 高尔基体和内质网上所有与糖基化有关的蛋白都是可溶性蛋白。
（）答案：错误解析：都是整合蛋白。
7. 水孔蛋白除容许水分子通过细胞质膜之外，还可跨膜转运脂溶性分子和不带电荷的有机小分子。
（）答案：错误解析：水孔蛋白只容许水分子通过。
这种严格的选择性首先源于通道内高度倾斜度保守的氨基酸残基侧链（Arg、His以及Asp）与通过的水分子形成肽键，其实是非常平坦的孔径，仅0.28nm。
8. 细胞坏死往往会引起炎症，而程序性细胞死亡不会引起炎症，根本原因是细胞是否破裂。
（）答案：正确解析：程序性细胞死亡不会导致细胞破裂，因而不会有伤口，也就不会已引起感染。
复习题选修课细胞生物学
细胞生物学复习题一、填空题1、细胞生物学是研究真核细胞、和的一门学科，它是一门正在发展形成中的学科，其发展经历从经典的研究、研究到目前的究三个阶段。
2、年英国学者第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是。
3、1838—1839年，和共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的。
4、1858年德国病理学家魏尔肖提出的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
5、目前发现的最小最简单的细胞是，其直径只有。
6、真核细胞亚显微水平的三大基本结构体系是、和。
7、光学显微镜的组成主要分为、和三大部分，光学显微镜的分辨率由、和三个因素决定。
8、荧光显微镜是以为光源，电子显微镜则是以为光源。
9、细胞组分的分级分离方法有、和。
10、离心分离技术分离细胞组分的常用方法有和。
11、杂交瘤是通过和两种细胞的融合实现的，由此所分泌的抗体称为。
12、观察活细胞的内部结构可选用显微镜，而观察细胞的形态和运动可选用显微镜。
13、体外培养的细胞，不论是原代细胞还是传代细胞，一般不保持体内原有的细胞形态，而呈现出两种基本形态即和。
14、细胞膜的最显著特性是和。
15、细胞膜的膜脂主要包括、和，其中以为主。
16、门控的离子通道对离子的通透有高度的，根据控制门开关的调控因子的不同，门控离子通道可分为门通道、门通道及门通道。
17、Ca2+泵主要存在于膜和膜上，其功能是将Ca2+输出或泵入中储存起来，维持内低浓度的Ca2+。
18、小分子物质通过、或等方式进入细胞内，而大分子物质则通过或作用等方式进入细胞内。
19、根据物质运输方向及离子沿梯度的转移方向，协同转运又可分为协同转运与协同转运。
20、糙面内质网上合成的蛋白质主要去向有、及等。
21、蛋白质的糖基化修饰主要分为和；其中主要在内质网中进行，而则主要在中进行。
22、真核细胞中，是合成脂类分子的细胞器。
23、细胞质中合成的蛋白质如果存在，该蛋白质将转移到内质网上继续合成。
细胞生物学题库
3、如果用匀浆法破裂肝细胞，将破裂的细胞膜（颗粒状）和细胞质分离，在细胞质中加入肾上腺素，其结果是（ D ）A、产生cAMPB、肾上腺素与其受体结合B、激活腺苷酸环化酶D、以上均不对4、相差显微镜可用来观察活细胞和未经染色的标本。
对6、在G蛋白中，α亚基的活性状态是（ A ）。
A、与GTP结合，与βγ分离B、与GTP结合，与βγ聚合C、与GDP结合，与βγ分离D、与GTP结合，与βγ聚合11、硝酸甘油治疗心绞痛的作用原理是：硝酸甘油在体内转化成NO，从而可舒张血管，减轻心脏负荷和心肌的需氧量。
对13、Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内（ C ）。
A、蛋白质的分布与定位B、脂肪的分布与定位C、DNA的分布与定位D、RNA的分布与定位18、以下哪一类药物可以抑制胞质分裂？( D )A. 紫杉酚B. 秋水仙素C. 长春花碱D. 细胞松弛素22、从结构上高尔基体主要由单层扁平囊组成。
27、目前认为核定位信号是存在于亲核蛋白内的一些短的氨基酸序列片段，富含水量碱性氨基酸残基，如Lys、Arg，此外还常常含有Pro。
对29、信号假说中，要完成含信号肽的蛋白质从细胞质中向内质网的转移需要细胞质中的信号识别颗粒和内质网膜上的信号识别颗粒受体的参与协助。
32、小肠上皮细胞表面的指状突起是微绒毛，其中含有微丝细胞质骨架成分。
47、分子伴侶是高尔基器的驻留蛋白。
错48、蛋白质的糖基化修饰N-连接主要在内质网进行，指的是蛋白质上的天冬酰胺残基与N-乙酰葡萄糖胺直接连接，而O－连接则是蛋白质上的酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基与N-乙酰半乳糖胺直接连接。
2、真核细胞中核糖体的基本类型可分为游离核糖体、附着核糖体。
3、指导分泌性蛋白到糙面内质网上合成的决定因素是信号识别颗粒。
错正确应为蛋白质N端的信号肽。
5、在高尔基体的顺面膜囊上存在M6P的受体，这样溶酶体的酶与其他蛋白区分开来，并得以浓缩，最后以出芽的方式转运到溶酶体中。
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义细胞是构成生命体的基本单位，由多种不同的细胞组分组成，包括细胞膜、细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等等。
有时需要对这些组分进行分级分离，以便对它们进行更加准确的研究。
本文将简要介绍细胞组分的分级分离原理及其意义。
一、细胞组分的分级分离原理1.离心分离离心分离是指通过离心机对样品进行高速离心，从而分离出不同密度的细胞组分。
在离心分离过程中，样品中的组分会随着转速增加而沉淀到不同的位置。
例如，通过离心可以将细胞核和线粒体分离出来。
2.凝胶电泳分离凝胶电泳是指将样品注入到聚丙烯酰胺凝胶中，然后通过电泳将不同大小的分子分离出来。
较大的分子会被凝胶阻滞，不能通过凝胶移动，而较小的分子则会迅速通过凝胶。
这种方法可以将蛋白质、DNA和RNA等分离出来。
3.峰值分离峰值分离是指将样品通过柱层析分离出来。
柱层析是一种利用不同分子的大小、形状、电荷和亲和性的差异分离化合物的方法。
例如，通过柱层析可以将核糖体不同组分分离出来。
二、细胞组分的分级分离意义1.提高细胞学研究的精度通过分级分离细胞组分，可以更加准确地研究细胞生物学。
例如，分离出核糖体的不同组分可以研究它们在蛋白质合成过程中的作用，从而更好地了解细胞代谢的机制。
2.提高疾病诊断的准确性某些疾病的诊断需要分离出细胞组分，例如，癌症诊断需要分离出癌细胞。
分级分离细胞组分可以提高疾病诊断的准确性，从而更好地治疗和预防疾病。
3.推动药物研发许多药物是从天然产物中提取出来的，例如植物中的药物。
通过分离出植物中不同的化合物，可以研究它们的结构和功能，从而更好地开发出新的药物。
总之，分级分离细胞组分可以提高细胞学研究的精度，提高疾病诊断的准确性，推动药物研发。
这种方法对相关领域的研究和发展非常重要。
细胞组分的分级分离
离心机机型 低速离心机 高速离心机 超速离心机
转速 8 000转/分 8 000~25 000转/分 25 000 ~ 80 000转/分
分离方法
❖ 差速离心分离法：利用不同离心速度产生的不同离 心力，将各种亚细胞组分和各种颗粒分开。
❖ 密度梯度离心分离法：将要分离的细胞组分铺放在密 度逐渐增加的介质表面，在超速离心力的作用下， 不同的组分以不同的沉降速率沉降，形成不同的 沉降带。
❖ 离心技术：
1. 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各种大分子基 本手段。
2. 转速为10-25kr/min的离心机称为高速离心机。
3. 转速>25kr/min，离心力>89Kｇ者称为超速离心机。
4. 目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。
颗粒直径 103nm 102~104nm 102nm
线粒体含量较多；长度适合观察，约5μm；肝脏较软，易 于破碎，并且适于快速提取，因而利于保持线粒体活性。
细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒体、溶酶体和其 他微体、核糖体和大分子。
詹纳斯绿B可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线 粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使詹纳斯绿B染料始终保持 氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中詹 纳斯绿B被还原成无色的化合物。
差速离心法differential centrifugation
匀浆
离心
1 000G20分钟
细
胞
细胞骨架
细胞骨架
核
离 心 10 000G
20
分 钟
核 糖 体 等
离心0.26%脱氧胆酸钠 微
离心
15 000G20分钟
海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》考试试卷(36)
海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（35分，每题5分）1. 肌肉的收缩是细肌丝收缩的结果。
（）答案：错误解析：肌肉的收缩是粗肌丝和细肌丝相对滑动的结果。
2. 来源于质膜的不同信号能通过细胞内不同信号途径间的相互作用而被整合。
（）答案：正确解析：3. 通常未分化细胞的核质比高而衰老细胞的核质比低。
（）答案：错误解析：衰老细胞内水分减少，致使蛋白质脱水收缩，体积变小，染色质固化，核膜内折，所以核质比高。
4. G蛋白偶联受体中，霍乱毒素使G蛋白α亚基不能活化，百日咳毒素使G蛋白α亚基持续活化。
（）答案：错误解析：霍乱毒素，使α亚基丧失GTP酶的活性并处于持续活化状态；百日咳毒素抑制Gi的活性。
5. 大多数真核基因是不连续基因，在RNA中出现的部分称为外显子。
（）答案：错误解析：外显子是指由在成熟的RNA上的序列。
在基因中外显子被内含子隔开，转录后经过加工被连接核糖体在一起，生成成熟的RNA分子。
6. 微管在着丝粒处成核然后连接至动粒。
（）答案：错误解析：微管在中心体处成核组装，然后连接到动粒。
7. 正常细胞发生癌变时游离的核糖体增多，而附着的核糖体和内质网的数目相应减少。
（）答案：错误解析：正常细胞发生癌变后，与癌细胞恶性增殖、扩散等过程相关的蛋白成分会过表达，从而使得增大粗面内质网的数目增多，附着核糖体的数目增多。
2、名词解释（40分，每题5分）1. DNA合成期答案：DNA合成期指细胞周期中合成DNA的时期，也称S期。
核内的DNA以至于都在这一时期合成，使核内DNA的量倍增。
在S期中，由各条染色体（或染色体的不同部分）所进行的DNA合成是有快有慢的。
另外新的组蛋白也在S期合成。
解析：空2. 灯刷染色体答案：灯刷染色体是指在两栖类卵母细胞进行减数分裂第一次分裂开展时，停留在两线期的染色体，它是一个二价体，包含4条染色单体，每条染料单体由一条染色质纤维构成，每条纤维分化为主轴半圆形以及主轴两侧数以万计的侧环，而且双线期同源染色体尚未完全解除，因此可以见到交叉，其形状如灯刷，故名灯刷染色体。
某大学生物工程学院《细胞生物学》考试试卷(23)
某大学生物工程学院《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（45分，每题5分）1. G蛋白偶联受体被激活后，使相应的G蛋白解离成α、β、γ三个亚基，以进行信号传递。
（）答案：错误解析：G蛋白三聚体结合GTP后解离出成α亚基和βγ亚基复合物，β与γ亚基并未解离。
2. 有丝分裂中核膜变为碎片，因此能像内质网和高尔基体等膜被细胞器一样在两个子细胞间分配。
（）答案：正确解析：事实上，核膜与内质网膜之间是连续的，因此某些区段含有具两个来源的膜。
3. 微管存在于所有真核生物细胞中。
（）答案：错误解析：人的红细胞中没有微管，另外，原核生物中没有微管。
4. 单一核糖体只能合成一种类型的蛋白质。
（）答案：错误解析：细胞质所有的核糖体都是相同的，可以合成任何由特定mRNA 翻译的特定蛋白质。
翻译后，核糖体从mRNA上释放出来，再开始翻译新的mRNA。
5. NLS是亲核蛋白入核的充分必要条件。
（）答案：错误解析：NLS只是亲核蛋白入核的一个必要条件，其入核转运还需要其他蛋白质因子的帮助，同时还受到其他因素的影响。
6. 癌的发生涉及两类基因：原癌基因和肿瘤抑制基因，这两类基因中的任何一个拷贝突变都会导致癌变。
（）答案：错误解析：只有当肿瘤抑制基因两个拷贝都丢失了或两个拷贝都失活了才会使细胞失去增殖的控制，只要肿瘤抑制基因有一个拷贝是正常的，就能够正常调节细胞的周期。
7. 凋亡小体中的染色质块外一般包有核膜来源的双层膜结构。
（）答案：错误解析：凋亡起始时骨架杂乱，细胞间接触消失，细胞间黏附力下降；细胞质和核浓缩，显微镜下观察可发现细胞膜发泡，染色质凝集，沿着核膜形成新月形帽状结构；随着细胞膜内折，染色质断裂成片段，染色质片段及线粒体等细胞器反折的细胞膜包围并逐渐分开，形成单个的凋亡小体。
细胞生物学实验技术一
(2)脱水
定义：借助某些化学溶剂置换组织内水分的过程 常用的脱水剂：酒精
(3)包埋
定义：将组织块包入包埋剂使组织硬化的过程。 常用的包埋剂：液体石蜡、树脂
(4)切片
1-10 μm
（5）染色
采用某些化学物质特异性或选择性地与细 胞内的某些成分相互作用，从而原位显示 细胞某种成分或结构的方法
A 选择性染色
观察组织的表面三维结构
冰冻断裂电镜-观察生物膜结构
A 冰冻组织( N2) B 重金属喷镀(Pt) C 喷碳加固(C) - SEM D 复型 - TEM
冰冻蚀刻电镜-观察生物膜结构
A 冰冻组织( N2)
B 真空中升华
C 重金属喷镀(Pt) D 喷碳加固(C) - SEM E 复型 - TEM
负染电镜技术-观察纤维状\颗粒状成分
活体细胞观察
5.激光扫描共焦显微镜
（ Laser Scanning Confocal Microscope）
(1)原理
在显微镜基础上配置激光光源，扫描装置， 共轭聚焦装置和检测系统而形成的显微镜。
单色激光光源
光源后－照明针孔－点光源
检测器前－探测针孔 分层扫描 三维重建
共扼
（2）应用
A 细胞的三维重建
考马斯亮蓝 – 蛋白质 Brachet反应
hematoxylin-eosin
B 特异性染色
酶 + 底物
+ substrate
抗原 + 抗体
antigen
** *
* * *
antibody
酶标记 荧光标记
*
*
*
*
*
*
3.荧光显微镜技术
(1) 原理
实验九--细胞组分的分级分离
3.将剪碎的肝组织倒入匀浆管中，使匀浆器下端浸 入盛有冰块的器皿中，研磨3～5次，用8层湿纱布 过滤匀浆于离心管中。然后制备一张涂片①，做 好标记，自然干燥。
有什么不同？涂片③在你的实验结果中 纯度如何？ 3.描述一下涂片⑤所见结果。
谢 谢大家
以上有不当之处，请大家给与批评指正， 谢谢大家！
14
• 6.将①、②、③涂片用1％甲苯胺兰染色后盖上盖 片即可观察。
高速离心分离提取线粒体步骤：
1.•将上述装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取 出，配平后，以17000r/min离心20分钟，弃上清，留取沉 淀物。
2.加入0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L•氯化钙液 1ml•， 用吸管吹打 成悬液， 以17000r/min离心20分钟。将上清吸入另一试管。 留取沉淀物，加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化钙 溶液混匀成悬液。
• 4.将装有滤液的离心管配平后，放入离心机， 2500r/min离心15分钟；⑴取上清液，移入高速离 心管中，保存于有冰块的烧杯中，待分离线粒体 用;⑵同时涂一张上清液片②做好标记，自然干燥； ⑶余下的沉淀物进行以下步骤。
• 5.用6ml 0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化钙溶液， 悬浮沉淀物，以2500r/min离心15分钟弃上清，将 残留液体用吸管吹打成悬液，滴一滴于干净的载 玻片上，涂片③，自然干燥。
3.取沉淀物上清液和悬液，分别滴一滴于干净的载玻片上（分 别标记为④、⑤），涂片，各滴一滴0.02％詹纳斯绿B染液， 盖上盖片染20分钟。
细胞组分的分级分离方法
细胞组分的分级分离方法
细胞组分的分级分离方法包括密度梯度离心法、贴壁培养法、超速离心法、层析法和电泳法。
密度梯度离心法是根据细胞密度的不同，在高速离心机中经过长时间离心，使细胞分层沉淀，形成密度梯度。
根据密度梯度的不同，可以将不同密度的细胞分开。
这种方法分离效果好，可以获得较为纯的细胞，适用于大多数细胞类型的分离。
但这种方法需要使用大型设备，操作也比较复杂，需要专业人员操作。
贴壁培养法是根据细胞贴壁生长速度的不同，将不同种类的细胞分离。
这种方法需要在培养皿中加入适量的培养液，然后将待分离的细胞悬液加入培养皿中，让其在培养液中贴壁生长。
由于不同种类的细胞贴壁生长速度不同，因此经过一定时间的培养，可以观察到不同种类的细胞在培养皿中形成的“岛屿”状分布。
根据不同种类的细胞形成的“岛屿”状分布的不同，可以将它们分离出来。
此外还有超速离心法、层析法和电泳法等方法。
这些方法各有特点，可以根据实验需求选择合适的方法进行细胞组分的分级分离。
某理工大学生物工程学院《细胞生物学》考试试卷(1412)
某理工大学生物工程学院《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（15分，每题5分）1. SDS是离子型去垢剂，可以用于膜蛋白的纯化。
（）答案：错误解析：SDS对蛋白质的作用较为间歇性，可以引起蛋白质变性，因此在纯化膜蛋白之时，常采用但非离子型去垢剂。
2. 核糖体存在于一切细胞内。
（）答案：错误解析：极个别高度分化的细胞内没有核糖体，如哺乳动物成熟的完备红细胞等。
3. 细胞外基质中的分泌蛋白主要是从高尔基体分泌小泡中分泌到细胞外的。
（）答案：正确解析：分泌蛋白主要在粗面内质网上合成，在进入胞质加工修饰，通过膜泡运输的方式分泌到细胞外基质中会。
2、名词解释（20分，每题5分）1. 简单扩散答案：简单扩散又称自由扩散，属被动运转的一种，是指脂溶性物质或分子质量小且不带电荷的物质在膜内外存在浓度差的条件下沿着浓度梯度通过细胞质膜的现象。
分子或离子的这种自由扩散这种方式的跨膜运转，不需要细胞量身定制能量，也不须要膜蛋白的协助。
解析：空2. 接触抑制（contact inhibition）答案：接触抑制是指细胞培养过程中出现明显的一种体外现象。
在培养开始后，分散的细胞悬液在培养瓶中不久就会贴附在瓶壁上，原来呈圆形的细胞一经贴壁便会迅速铺展而变成多种形态，随即细胞开始分裂，贴壁土壤形成致密的单层细胞。
当细胞分裂、生长到表面相互接触时，就会停止增殖，维持相互接触的持续保持单层细胞状态直至衰老，这就是接触抑制。
解析：空3. isodensity centrifugation答案：isodensity centrifugation的中文名称是等密度离心，是指根据被分离所称样品的密度差异来分离样品的方法。
在这种离心分离方法中，要用电磁辐射密度梯度产生一种密度梯度，这种密度梯度覆盖了待分离物质的密度，这样，通过离心使不同密度的颗粒悬浮到相应的介质密度区。
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义细胞是生命的基本单位，由许多不同的组分构成。
为了研究细胞的结构和功能，需要对细胞组分进行分离和分析。
细胞组分的分级分离是一种常用的方法，它可以将细胞组分按照大小、密度、电荷等性质进行分离，从而得到纯净的组分，进一步研究其结构和功能。
细胞组分的分级分离原理主要是利用离心力将细胞组分分离。
离心是一种利用离心机产生的离心力将混合物中的不同组分分离的方法。
离心力的大小取决于离心机的转速和离心管的半径。
当混合物被置于离心管中，离心机开始旋转时，离心力会使得组分向离心管底部沉淀。
不同组分的沉淀速度不同，从而实现了分级分离。
细胞组分的分级分离可以分为多个步骤，每个步骤都可以得到不同的组分。
首先，通过低速离心将细胞碎片和细胞核分离。
然后，通过高速离心将线粒体、内质网和溶酶体等细胞器分离。
最后，通过超高速离心将核糖体和蛋白质分离。
这样，就可以得到纯净的细胞组分，进一步研究其结构和功能。
细胞组分的分级分离在生物学研究中具有重要的意义。
首先，它可以帮助我们了解细胞的结构和功能。
通过分离不同的细胞组分，可以研究它们的结构和功能，进一步了解细胞的生理和生化过程。
其次，它可以帮助我们研究疾病的发生和治疗。
许多疾病都与细胞组分的异常有关，通过分离和分析这些组分，可以更好地了解疾病的发生机制，为疾病的治疗提供依据。
最后，它可以帮助我们开发新的药物和治疗方法。
许多药物和治疗方法都是基于细胞组分的研究开发的，通过分离和分析细胞组分，可以发现新的药物和治疗方法，为人类健康做出贡献。
细胞组分的分级分离是一种重要的生物学研究方法，它可以帮助我们了解细胞的结构和功能，研究疾病的发生和治疗，以及开发新的药物和治疗方法。
细胞生物学练习题
填空题1-501．细胞内能进行蛋白质修饰和分选的细胞器有内质网和高尔基体。
2．线粒体中ATP的合成是在线粒体内膜上进行的,ATP合成所需能量的直接来源是质子动力势能。
3．胞吞可分为两种类型：胞吞物质若为溶液的，则称为胞饮作用，若胞吞物为大的颗粒，形成的囊泡较大，则称为吞噬作用。
4．磷脂合成是在细胞质中内质网光面上合成的，合成的磷脂向其他细胞部位转移的方式主要是出芽和磷脂交换。
5．光面内质网是合成脂质的主要场所；粗面内质网是合成蛋白质的主要场所。
6．常用于分离和研究膜蛋白的离子型去垢剂是SDS，非离子型去垢剂是Triton x-100 。
7．G蛋白偶联的受体所介导的信号通路中，磷脂酰肌醇途径产生胞内两个第二信使，分别是二酰基甘油（DAG）和三磷酸肌醇（IP3）。
8．细胞学的经典时期为19世纪的最后25年，此时的重要发现有原生质理论的提出，细胞器的发现，细胞分裂的研究。
9．细胞生物学的发展可分为三个层次：【显微水平】（研究细胞形态、大小）；【超微（亚显微）水平】（研究细胞器结构与功能）；【分子水平】（研究细胞重大生命活动及其调控）{这也是细胞生物学研究的三个层次}10．目前阶段学科的特点：活体细胞为重点研究对象；重大生命活动为主要研究内容；生命活动的分子机制调控机制；多层次上特别是纳米尺度上解释细胞生命本质为目标；多领域、多学科交叉研究。
11．19世纪自然科学的三大发现是（细胞学说）、（能量转化与守恒定律）和（达尔文的进化论）12．人们通常将1838—1839年确立的（细胞学说）;1859年（达尔文）确立的（进化论）;1866年孟德尔确立的遗传学,称为现代生物学的三大基石。
13．1855 德国人魏尔肖（R. Virchow）提出“（一切细胞来源于细胞”）（omnis cellula e cellula）的著名论断，进一步完善了细胞学说。
14．病毒核酸是病毒的遗传信息唯一的贮存场所,是病毒的感染单位:病毒蛋白质构成病毒的外壳（壳体）具有保护作用。
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义细胞组分的分级分离原理是基于分离细胞内的细胞质和细胞器，以及其中彼此紧密相连的大量二级结构（如膜蛋白结构）。
也就是说，分级分离的原则是根据不同类型的大分子结构和功能来进行的，而不是细胞的整体解剖结构，以此来获得最佳的细胞组分结构。
分级分离的方法可以分成两类：非物理分离和物理分离。
非物理分离是基于化学性质的，比如pH值、电导率和小分子大分子之间的亲和力。
物理分离主要是基于细胞大小、材料结构、细胞性质等。
分级分离的意义在于可以获得高纯度的细胞组分，而且可以探究细胞内细胞组分之间的关系及其影响细胞的生理和功能。
如利用高通量测序技术以及细胞分离技术，可以获得不同细胞组分之间的蛋白质和基因组的组成结构。
而进一步通过细胞功能的分离方法，可以解析细胞内细胞组分之间的一对一关系及其相互作用是如何影响细胞表
型的。
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东南大学农学院2021级《细胞生物学》考试试卷(14)
东南大学农学院2021级《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（35分，每题5分）1. 溶酶体中成熟的水解酶分子带有独特的标记——甘露糖6磷酸（M6P），它是溶酶体水解酶分选的重要识别信号。
（）答案：错误解析：前半句错误，溶酶体中成熟的溶酶体已经被成形去合酶，不具有M6P标志。
在高尔基体M6P是溶酶体水解酶分选的重要识别信号。
2. 染色体上由于“位置效应”形成的非活性区在所有细胞后代中都能稳定的遗传下去。
（）答案：错误解析：基因表达有所在位置效应，有的活性基因变位到异染色质区附件使会失活。
3. 亚显微结构即超微结构。
（）答案：正确解析：亚显微结构又称超微结构。
指在普通光学显微镜下观察不能分辨清楚的细胞内各种微细结构。
4. 在有蛋白质合成抑制剂存在的情况下，孕酮和成熟卵细胞的细胞质都能诱导卵母细胞成熟。
（）答案：错误解析：在有蛋白质合成抑制剂存在的情况下，成熟卵细胞的细胞质都能诱导完备卵母细胞成熟，而孕酮不能，因为不能合成MPF。
5. 经过流式细胞仪分离出来的细胞不能继续培养。
（）答案：错误解析：如果染色整个过程不影响染色细胞活性，经流式细胞仪分离出来的细胞可以继续培养。
6. 程序性死亡的细胞之所以能够被吞噬细胞识别和吞噬，是因为这些细胞的表面具有被吞噬的信号，目前研究得最清楚的被吞噬信号是存在于程序性死亡细胞质膜脂双层外叶的磷脂酰乙醇胺分子。
（）答案：错误解析：被吞噬信号是存在于程序性死亡细胞质膜脂双层外叶的磷脂酰丝氨酸。
7. 不能正确折叠的畸形肽链或未装配成寡聚体的蛋白质亚基，不论在内质网膜上还是在内质网腔中，一般都不能进入高尔基体。
（）答案：正确解析：2、名词解释（40分，每题5分）1. 基底膜（basement membrane）答案：基底膜简称基膜，是上皮下非细胞结构的薄层，是一种由胶原、糖蛋白和蛋白聚糖类物质组成的细胞外实质结构。
细胞组分分级分离实验报告
细胞组分分级分离实验目的分级分离细胞核和线粒体实验原理1.相关概念细胞组分分级分离：依据细胞内各种结构的比重和大小不同，在同一离心场内的沉降速度也不同的原理，采用差速离心法或密度梯度离心法，将细胞各种组分分离出来。
常用分离方法：差速离⼼法——不同转速；密度梯度离⼼法——不同浓度的介质2.分离方法（1）差速离⼼法特点：介质密度均⼀；离⼼⼒由低向⾼；逐级离⼼（差速）。
⽤途：初步分离；分离⼤⼩相差悬殊的细胞组分。
细胞器沉降顺序：细胞核→线粒体→溶酶体、过氧化物酶体→内质网、⾼尔基体→核糖体（2）密度梯度离⼼法特点：介质密度不均⼀；呈现密度梯度；离心力相同（等速，超速）⽤途：纯化分离细胞器等颗粒组分待分离颗粒沉降顺序：各待分离颗粒的沉降与其密度相等或相近的梯度柱范围常⽤介质及要求：蔗糖、⽢油、氯化銫；能产⽣密度梯度，且密度⾼时，粘度不⾼；PH中性或易调为中性；浓度⼤时渗透压不⼤；对细胞⽆毒3.染色方法甲基绿-哌罗宁染色：核酸呈酸性，与碱性染料甲基绿-哌罗宁染液具有亲和力，这两种碱性染料有选择的特异性染色，甲基绿把DNA染成绿色，哌罗宁把RNA染成红色。
詹纳斯绿B染色：詹纳斯绿B可专一性地对线粒体进行超活染（体外活染），这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使詹纳斯绿B染料始终保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中詹纳斯绿B则被还原成无色的化合物。
实验设计思路实验结果分散相的线粒体被染成浅蓝色，呈圆形或椭圆形颗粒。
如果线粒体聚集成堆则被染成深蓝色，难以辨认。
注意事项1.过滤前要先将纱布湿润2.匀浆缓冲液预冷(0℃—4℃)3.冰浴上研磨，匀浆搗杆垂直插入匀浆管中，上下转动研磨3-5次，尽可能充分破碎细胞(适度研磨)，缩短匀浆时间。
4.离心机温度应设为4℃5.整个分离过程不宜过长,要尽快。
6.得到的沉淀物须加预冷蔗糖缓冲液将其悬浮后再涂片，制线粒体滴片时，悬浮液只需一小滴，量太多线粒体易聚集成堆，不便观察。
细胞生物学填空题
第一章绪论1、细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学，是在显微水平、亚显微水平、和分子水平三个不同层次上，以研究细胞的细胞结构与功能、细胞增殖分化、衰老与凋亡，细胞信号传递，真核细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等为主要内容的一门科学。
2、 1665 年英国学者胡克第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是列文虎克。
3、1838—1839年，施莱登和施旺共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的基本单位。
4、19世纪自然科学的三大发现是细胞学说，能量转化与守恒定律，达尔文的进化论。
5、1858年德国病理学家魏尔肖提出细胞来自细胞的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
6、人们通常将1838—1839年施莱登和施旺确立的细胞学说；1859年达尔文确立的进化论1866年孟德尔确立的遗传学，称为现代生物学的三大基石。
7、细胞生物学的发展历史大致可分为细胞的发现，细胞学说的建立，细胞学经典时期，实验细胞学时期和分子细胞生物学几个时期。
第二章细胞基本知识概要1、所有细胞的表面均有由脂类和蛋白质构成的细胞膜；所有的细胞都含有两种核酸；所有细胞都以二分分裂方式增殖；所有细胞内均存在蛋白质生物合成的机器核糖体。
2、病毒是迄今发现的最小的、最简单的专性活细胞内寄生的非细胞生物。
3、病毒核酸是病毒的遗传信息唯一的贮存场所，是病毒的感染单位；病毒蛋白质构成病毒的外壳（壳体），具有保护作用。
***4、病毒的增殖一般可分为病毒侵入细胞、病毒核酸的侵染；病毒核酸的复制、转录与蛋白质的合成；病毒的装配、成熟与释放三个阶段。
5、原核细胞的遗传信息量小遗传信息载体仅由一个环状的DNA构成，细胞内没有专门的细胞器和核膜，其细胞膜具有多功能性性。
6、一个细胞生存与增殖必须具备的结构为细胞膜、遗传信息载体DNA与RNA、进行蛋白质生物合成的一定数量的核糖体和催化酶促反应所需要的酶。
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义。
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义。
细胞组分的分级分离原理及其意义：
一、分级分离原理
1、离心分离
把细胞组分，如核糖体、细胞质等，悬浮在生化介质中，用中央偏心
的方法将悬浮体快速分级，分为悬浮层和沉淀层，从而脱除低分子的
悬浮物，获得纯的细胞组分。
2、逆流洗涤法
介质会具有不同的物质等离子强度、温度等，将原悬浮液放置在此种
不同介质下，形成微孔隙，有效运载溶液，将微粒通过微孔小于亚细
胞级分子得到分离。
3、冷凝分离
冷凝作用可有效地将微粒形态，质量，大小不同而可悬液的细胞组分，按分子量和形状进行有效分离。
二、分级分离的意义
1、节约成本
由于分级分离的方法节省了消耗的流体，可以有效的节约经济成本。
2、提高效率
分级分离能以高速度进行解离，可以大大减少操作时间，从而提高效率。
3、保护过滤目标物
使用分级分离可以减少操作时间和免疫试剂，可以有效地预防细胞组分的损伤，从而保护需要分离的目标物质。
4、增强产品的纯度
使用分级分离技术可以使分离的细胞组分具有更高的纯度，并可以便捷的获得细胞质、线粒体、核糖体等细胞组分的复合物。
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作业： 1. 比较分离细胞核的3张涂片有何不同，为什么？ 2. 比较分离线粒体的2张涂片有何不同，为什么？
1、为什么要饥饿小鼠？ 2、为什么使用肝细胞？ 3、细胞器沉降顺序？ 4、詹纳斯绿B染色原理？
线粒体正常情况下一般呈圆形，饥饿时，缺乏供能营养物质， 线粒体会数目减少，大量的嵴会消失，会使线粒体形状变得细 长，因而易于观察。
细胞组分的分级分离
主要过程：匀浆、差速离心、分析。
匀 浆：低温条件下，在等渗介质中，制成各种细胞
器的混合液。
差速离心：在均一介质中，由低速到高速逐级离心，使
细胞器按照比重从大到小逐渐沉降的方法。
分 析：用细胞化学和生物化学方法进行定量和定性
检测。
小白鼠脱臼处死，迅速开腹，取出肝脏，剪成大块，冲洗 一半肝组织，0.25M蔗糖洗3次，加3ml 0.25M蔗糖，剪碎 匀浆（5-8次），6层纱布过滤至10ml离心管 取出1ml至dorf管（A），3000rpm，10min 沉淀加至1ml 1M蔗糖，悬 3800rpm,10min 上清入dorf管(B)
线粒体含量较多；长度适合观察，约5μ m；肝脏较软，易 于破碎，并且适于快速提取，因而利于保持线粒体活性。
细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒体、溶酶体和其 他微体、核糖体和大分子。 詹纳斯绿B可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线 粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使詹纳斯绿B染料始终保持 氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中詹 纳斯绿B被还原成无色的化合物。
加至1ml
涂片1
涂片2
12000rpm,20min
弃上清，沉淀加少量 0.25M蔗糖，悬
涂片3 涂片5
加0.25M蔗糖，悬
沉淀
上清
涂片4
1.染核酸
涂片1，2，3
2.染线粒体
涂片4，5
95%乙醇固定5min，晾干
甲基绿-哌罗宁染色15min，冲洗 丙酮分色，沾2-3次 冲洗，晾干