沙门氏菌培训[1]

分别从TTB和SC增菌 液中取1环，接种到
BS和HE琼脂上培
养
TTB增菌液在42℃、 SC增菌液在36℃ 各培养18～24小时
HE琼脂在36℃
培养18～24小时
沙门氏菌培训[1]
可疑菌落判 定
科玛嘉显色琼脂阳性
BS琼脂Βιβλιοθήκη HE琼脂XLD琼脂
科玛嘉显色琼脂阴性
沙门氏菌培训[1]
生化试验
2、接种至TSI，先 在斜面上划线， 然后再底层穿刺。
西翰普顿沙门氏菌、都柏林沙门氏菌 属于单相菌，H抗原只存在第一项。
O1价抗原与其他抗原 和平共处，O5、O27 价抗原存在或不存在。
H抗原第二项H1和H2 价抗原存在或不存在
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌菌型的表示方法
• 血清型以数字和字母表示.
例如:查考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表. 鼠伤寒沙门氏菌: O抗（1，4，[5]，12）， 第Ⅰ相H抗原（i） 第Ⅱ相H抗原( 1,2)。
1、先从BS、HE或 XLD或显色培养基 上挑取可疑菌落。
3、将接种TSI完毕的 接种针不要灭菌， 直接在营养琼脂平 板上划线。
4、将TSI和 NA至于 36℃， 18～24h培养
沙门氏菌培训[1]
TSI鉴定
根据上表中可理解为只有在斜面和底层产碱、不产H2S、 不产气的情况下可不进行生化鉴定，直接判定为非沙门 氏菌，其余任何情况均需进行生化鉴定。
它的血清型应表示为:鼠伤寒沙门氏菌（ 1，4，[5]，12：i：
1，2）
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌的判定原则
采用血清学的方法,按照考夫曼-怀特沙门氏菌 属抗原表解判定菌型.
沙门氏菌培训[1]
考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表
菌名
基桑加尼沙门氏菌 维也纳沙门氏菌 埃森沙门氏菌 金斯敦沙门氏菌 鼠伤寒沙门氏菌
2010
—GB 4789.4-
沙门氏菌培训[1]
增菌和选择性培养
沙门氏菌培训[1]
25g样品
分别从BS和HE琼脂 上挑选可以菌落进 行TSI初步生化鉴定
36℃ 8~18h 培养
1ml BPW增菌液
+10ml TTB
225ml BPW
1ml BPW增菌液
+10ml SC
BS琼脂在36℃培养
40～48小时
法
沙门氏菌培训[1]
59种沙门氏菌的血清列表
O1
O2
O4
O5
O7
O8
O9
O10 O11 O14
O15 O19 O20 O27 O34 O46 O3,19 Ha
Hb
Hc
Hd Hf Hg Hh Hi Hk Hm Hn Hp Hr
Hs Ht Hu Hv Hw Hx Hy Hz Hz6 Hz10
Hz13 Hz15 Hz28 Hz29
蛋的污染 蛋及其制品沙门氏菌检出率为3.9%-43.7%，由于吃蛋引起鼠伤寒病的
病例报告逐渐有增加的趋势。 环境污染 食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。沙门氏菌在粪
便、土壤、食品、水中可生存5个月至2年之久。 传播问题 恢复期患者和无症状的带菌者也是常见的传染源。
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌检测标准
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
生化特性
1）发酵葡萄糖，麦芽糖，甘露醇和山梨醇产气。 2）不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。 3）不产吲哚、V-P反应阴性。 4）不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。
伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢 沙门氏菌发酵糖不产气，大多数鸡白痢沙门氏菌不 发酵麦芽糖。
沙门氏菌培训[1]
血清学特性
1相或第2相的新鲜待检菌株。 4.培养后，其已知相细菌的动力受到抑制，解离出另一相的细菌，
并向周围蔓延生长，形成一个大的菌落。 5.检查其菌落的边缘部分，即可确定该菌株的另一相H抗原。 6.该方法通常1~3天内可以有结果。
沙门氏菌培训[1]
位相变异试验的其余方法
• U形管法 • 小玻管法 • 小套管法 • 软琼脂斜面
沙门氏菌
— 抗原
沙门氏菌培训[1]
O、H、Vi抗原
Vi抗原 是一种特殊的菌体抗原，属于K抗原
群（如伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门 氏菌和都柏林沙门氏菌都含有Vi抗原）
O抗原 也称菌体抗原，是细胞壁的组成成分
H抗原（即鞭毛抗原） H抗原与抗血清的反应成絮状或绒状。 大部分沙门氏菌H抗原都具有两相。 第一相被称为特异性相，第二相为非特
（D）、O3，10（E）、O11（F）。 3. 确定O群之后，分别用HA(a、b、c、d、i、z10、z29）HB、HC、HD四种多价H血清检查。 4. 用3.所确定的多价H血清所包括的所有H因子血清逐一检查定为第1相或第2相H抗原。 5. 检出第1相H抗原而未检出第2相H抗原，或检出第2相H抗原而未检出第1相H抗原的，要
用位相变异的方法再检查其另一个相。单相菌不必作位相变异检查。 6. 综合O和H因子血清以及Vi因子血清的检查结果，按照考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表
解判定沙门氏菌的菌型。
沙门氏菌培训[1]
位相变异的解释
• 将一个双相沙门氏菌的菌株在琼脂平板上划线分离，所 得的菌落中，有的有第1相H抗原，有的则有第2相H抗 原。若任意挑取一个菌落在培养基上多次传代，其后代 又可出现部分是第1相而另一部分是第2相的菌落。这种 两个相的H抗原可以交相产生的现象称为位相变异。
沙门氏菌具有复杂的抗原结构。 一般沙门氏菌具有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原 和表面抗原(Vi荚膜或包膜抗原)三种抗原。
沙门氏菌培训[1]
传播途径
肉的污染 肉及其制品的沙门氏菌检出率美国为20%—25%、英国为9.9%、日本
检查进口家禽的污染率为10.3%，国内肉类沙门氏菌检出率在1.1%— 39.5%。
沙门氏菌培训[1]
三糖铁生化试 验
只在TSI产碱的 情况下可判定 无沙门氏菌， 其余任何情况 均需进行生化
鉴定
底层产H2S
底层产酸 斜面产碱
斜面底层 产酸
产碱
底层产酸
斜面产碱 底层产H2S
产酸产气 产酸产气产H2S
沙门氏菌培训[1]
生化试验
1、准备一只2ml无菌生理盐水试管、酒精灯、接种环、生化鉴定套装 。 2、从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，接种至生理盐水中，制成0.5个 麦氏浊度。 3、依次在各个安瓿（bu\）瓶中滴加菌悬液3滴。 4、在赖氨酸脱羧酶肉汤及对照和氰化钾及对照中个滴加无菌石蜡覆 盖。 5、在36℃培养18～24h。
沙门氏菌培训[1]
A～F群 对应的O价
抗原
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌抗原表中符号意义：
__
指溶原状态下O因子可以并存，和平共 处。
{}
指O因子不相容，只能有一种。
[]
指O或H因子有存在或不存在的可能性。
沙门氏菌培训[1]
O10、O15、O15，O34 价抗原不相容只存在一种。
都柏林沙门氏菌存在 或不存在表面Vi抗原。
沙门氏菌培训[1]
—O抗原
为脂多糖，性质稳定。 比较耐热，100℃不被破坏，也不 易被酒精破坏； O抗原以阿拉伯数字表示，从1排 到67，但删去了9个抗原，现在有58 个抗原； 凡含有群特异性共同抗原的菌型 归类为一个O群，以主要抗原来表示， 某些次要抗原可以出现在多个群中。
沙门氏菌培训[1]
-H抗原
汤汤
对
照
沙门氏菌培训[1]
生化试验
色氨酸肉 汤经36℃， 18～24h培 养后滴加 靛基质试 剂，片刻 观察结果
阳性为玫 瑰红色。
色氨酸脱 羧酶及对 照和氰化 钾及对照 转种结束 后需滴加 液体石蜡 覆盖试验 管方可进 行培养。
靛基质 试验+ 时补做 甘露醇 山梨醇 试验， 试验阳 性后进 行血清 学鉴定
H2
Hlv HA HB HC HD
H5 H6 H7 Heh Hgp
Vi
A-F群多 价O
A-F群多 价O
Henx
H1.2.3.5
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
沙门氏菌培训[1]
TSI-时， 进行 ONPG 试验，
ONPG 阴性 时进 行血 清学 鉴定。
H2S+、靛基质- 、尿素-、KCN-、赖氨酸+后 进行血清学鉴定。
沙门氏菌培训[1]
色氨酸
吲哚试 验阴性
赖氨 酸
阳性 对照 阴性
尿素 酶
阴性
KCN 及 对照 阴性
甘露醇 山梨醇
阳性
0NPG 阴性
符合 符合 符合 符合
符合
无荚膜和芽孢，都具有周身鞭毛（除鸡白 痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外），能运动，大 多数具有菌毛，能吸附于宿主细胞表面或凝集豚 鼠红细胞。
沙门氏菌培训[1]
培养特性
A 需氧及兼性厌氧菌。 B 在普通琼脂培养基上生长良好，培养24h后， 形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边 缘整齐的菌落，其菌落特征亦与大肠杆菌相似（无 粪臭味）。 C 鉴别培养基（麦康凯、SS、伊红美蓝）：一般 无色菌落。 D 三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并 产气。
异性相。
沙门氏菌培训[1]
—vi抗原
因与毒力有关而命名为vi抗原。 由聚-n-乙酰-d-半乳糖胺糖醛酸组成。 不稳定，经60℃加热、石碳酸处理或人工传 代培养易破坏或丢失。 Vi抗原存在于细菌表面，可阻止o抗原与其 相应抗体的反应。vi抗原的抗原性弱。当体内菌 存在时可产生一定量抗体；细菌被清除后，抗 体也随之消失。 故测定vi抗体有助于对伤寒带菌者的检出。 新从患者标本中分离出的伤寒杆菌、丙型副 伤寒杆菌等有此抗原。