长期毒性试验教学案例
第15章长期毒性作用及其试验方法课件
七、观察及测定指标
药物的长期毒性试验基本上可通过对实验动物的体 格检查，日常观察，食耗及饮水量，体重和器官重 量，血液学指标，心电图描记，尿液分析，临床生 化检验及病理组织学研究加以确认。
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基本概念和目的
长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异：
1. 给药的期限不同。
急性毒性试验为一次性给药或 24 小时内多 次给药；
长期毒性试验为连续多日接触一定剂量给药， 给药期限为临床用药的 3-4 倍时间。 对长期毒性试验各国之间无统一的时间规定。
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基本概念和目的
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注：有些资料记载的动物体型系数（R）为此表中R 值的1000 倍，如小鼠R 为59，大鼠R 为 90，这不影响药物剂量的折算。
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对于标准体重的动物：
每只用量（mg/只）DB＝ DA· KB KA
千克体重剂量（mg/kg）dB＝ dB· KB KA
KA，KB，RA，RB 值由上表查找。
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试验设计原则及方法
五、限度试验
经济合作与开发组织（OECD）提出如果一种 化合物以1000mg/kg的剂量，按规定期限连续 给药，不产生任何可观察到的毒性反应，而且根 据结构相关药物的已有资料，估计不会产生毒性 的话，就不需要再用三个剂量来进行试验，除非 预期临床需要更高的剂量。
剂量水平选择的方法
➢（1）半数致死量（LD50）法 ➢（2）短期蓄积试验过渡法 ➢（3）药代动力学（MBS）法 ➢（4）最大耐受量法（MTD法） ➢（5）临床拟用剂量法（ACD法） ➢（6）等效剂量法
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长期毒性作用及其试验方法演示文稿
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
Beagle犬：原产英国，纯种小猎兔犬 Beagle犬的特点：体型小,毛短,性情温和,亲人,抗病力强
缺点：价格昂贵
二、实验动物
2. 起始月(周)龄 一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
长期毒性作用及其试验方 法演示文稿
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
第一节
基本概念和目的
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小 时内多次给予受试药物后，一定时间内所产生的 毒性反应。
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物 三个剂量 给药途径应与临床拟用途径相同
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
一、一般原则和要求
总体原则
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。 高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。 同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
第二节
试验设计原则及方法
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
中药毒理学教案教学设计
临床用药中潜在风险点识别
01
02
03
04
药物相互作用
多种药物同时使用可能产生相 互作用，导致药效增强或减弱
，甚至产生不良反应。
药物过敏
部分患者对某些药物成分过敏 ，用药后可能出现皮疹、呼吸
困难等严重过敏反应。
药物剂量不当
药物剂量过大或过小都可能影 响治疗效果，甚至引发中毒或
治疗失败。
药物使用时机不当
感谢您的观看
其他特殊毒性评价方法
根据中药特点和研究需求，探讨其他特殊毒 性评价方法，如致癌性、致敏性等。
04 中药安全性评价与风险管 理
中药安全性评价原则及方法论述
评价原则
遵循整体观念、辨证论治、个体化治疗等中医药基本原则，结合现代毒理学理 论和方法，科学、客观、全面地评价中药的安全性。
评价方法
包括急性毒性试验、长期毒性试验、生殖毒性试验、遗传毒性试验、致癌试验 、局部刺激性试验、过敏性试验等，以及基于临床用药经验的上市后安全性再 评价。
患者因长期过量服用含有强心苷的中药导 致中毒，表现为心律失常、心力衰竭等症 状。经停药、抗心律失常等治疗后好转。
蓖麻毒蛋白中毒案例
砒霜中毒案例
患者因误食含有蓖麻毒蛋白的中药导致中 毒，表现为呕吐、腹泻、脱水等症状。经 洗胃、补液等治疗后好转。
患者因误服含有砒霜的中药导致中毒，表现 为恶心、呕吐、腹痛等症状。经催吐、洗胃 等治疗后好转。
器官。
各类毒性成分作用机制剖析
生物碱类
通过抑制酶活性、干扰细胞代谢等途径产生毒性，如乌头 碱可抑制胆碱酯酶活性，导致乙酰胆碱堆积，引起神经肌 肉接头处传导阻滞。
苷类
通过影响细胞膜的通透性、抑制酶活性等方式产生毒性， 如强心苷可抑制Na+/K+-ATP酶活性，导致细胞内钾离 子浓度降低，进而影响心肌细胞收缩力。
优选长期毒性作用及其试验方法
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
大鼠起始周龄要求在 6 ~8周龄； 如果试验周期超过3个月以上，则将起始周龄降至
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蓄积作用的表现形式
作用量积蓄 功能性蓄积
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
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给药的期限不同
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给药的剂量范围不同
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观察的毒效应不同
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二、目的与意义
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长期毒性试验的目的
1 预测受试物可能引起的临床不良反应
2 判断受试物反复给药的毒性靶器官或组织
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
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给药的期限不同
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
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给药的期限不同
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给药的剂量范围不同
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蓄积作用 (accumulation action)
当较长时间连续、反复给药时，如果给药的时 间间隔和剂量超过机体消除药物的能力，就会出 现药物进入机体的速度 (或总量) ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ过排除的速度 (或总量) 的现象，此时药物就有可能在体内逐渐 增加并贮存起来，即蓄积作用。
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长期毒性试验免费范文精选
长期毒性试验药物毒性是否产生，取决于：a药物本身的理化特性 b给药情况 c如何被机体代谢对一特定药物而言，最重要的影响毒性的因素：a给药途径 b体内停留时间 c给药频率（影响靶组织的药物浓度）1.半数有效量（ED50）：能引起50%的动物或实验标本产生反应的浓度或剂量。
2.半数致死量（LD50 ）：能引起50%的动物死亡的浓度或剂量。
3.治疗指数：TI=LD50/ ED50药物实验动物的LD50和 ED50的比值称为治疗指数（TI），用以表示药物的安全性。
4.安全范围：ED99~LD1（或ED95~LD5）之间的距离。
值越大越安全。
有效量曲线和致死量曲线的斜率不一样时，以TI评价药物的安全性并不可靠。
（原因？）六、药物毒性作用类别药物不良反应（adverse reaction)：凡是不符合用药目的并为病人带来不适或痛苦的有害反应统称为药物不良反应。
包括：副反应、后遗效应、停药反应、毒性反应、变态反应、特异质反应、致癌性、致畸性、致突变性；（三)药物毒性临床前评价程序（三水平）第一水平，急性毒性试验：第二水平，长期毒性试验（第一阶段）第三水平，长期毒性试验（第二阶段）（四）药物毒理学研究在新药临床试验各阶段的任务第一期临床研究→探索安全的人用剂量第二期临床研究→安全性 {疗效（有效性）不良反应（安全性）第三期临床研究→大范围的社会考察不良反应监测→提高疗效，降低不良反应多数毒物发挥其毒性作用至少经历四个过程：a毒物吸收后经过多种屏障转运到一个或多个靶部位；b进入靶部位的终毒物与内源靶分子发生交互作用；c毒物引起机体分子、细胞和组织水平功能和结构紊乱；d机体启动不同水平的修复机制。
当此机制低下或功能和结构紊乱超过机体修复能力时，机体即出现组织坏死、癌症、纤维化等毒性损害。
长期毒性试验的意义a判断受试药物能否进行临床试验；b预测人类临床用药时可能毒性和安全范围；c制定临床试验中的防治措施；d确定应该着重评价的生理生化指标；e选择I期临床试验时的初试剂量，等。
优选长期毒性作用及其试验方法
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给药的剂量范围不同
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蓄积作用 (accumulation action)
当较长时间连续、反复给药时，如果给药的时 间间隔和剂量超过机体消除药物的能力，就会出 现药物进入机体的速度 (或总量) 超过排除的速度 (或总量) 的现象，此时药物就有可能在体内逐渐 增加并贮存起来，即蓄积作用。
优选长期毒性作用及其试验方法
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
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第一节
基本概念和目的
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一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
一类新药：Beagle犬 二类新药：杂种狗
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一 种为啮齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类， 首选狗。
☆在吸入给药时，猴是首先推荐的动物，因为它在 呼吸系统的解剖学和生理学方面比其它动物更接 近人类。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
3 推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围
4 提示临床试验中需重点监测的指标
5 为临床试验中的解毒或解救措施提供参考
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长期毒性试验的意义
了解实验动物能耐受的最大剂量，找出完
全无毒的安全界量，这个界量是判断一个待选 新药是否有进一步开发研究的价值以及能否过 渡到临床试用的重要依据，同时，也可为其它 毒性实验和临床初始剂量的选择提供依据。因 此长期毒性试验是临床前安全性评价的主要内 容，它与急性毒性试验、生殖毒性以及致癌性 等毒理学研究有着密切的联系，是新药报批临 床时重点审评项目之一，是药物从药学研究进 入临床试验的重要环节。
研究生《动物毒理学》教案
研究生《动物毒理学》教案一、课程简介1.1 课程名称：动物毒理学1.2 课程性质：研究生课程1.3 课程目标：使学生掌握动物毒理学的理论知识，培养学生的实验技能，提高学生在实际工作中分析和解决动物毒性问题的能力。
二、教学内容2.1 动物毒理学的定义、发展史和研究方法2.2 毒物的吸收、分布、代谢和排泄2.3 毒物的毒性评价和毒性作用机制2.4 常见动物毒物及其毒性作用2.5 实验动物的选择和饲养管理三、教学方法3.1 讲授：讲解基本概念、理论体系和最新研究动态。
3.2 实验：进行毒性实验，培养学生的实验技能和动手能力。
3.3 讨论：组织学生针对案例进行分析讨论，提高学生的思维能力和解决问题的能力。
四、教学要求4.1 学生应掌握动物毒理学的基本理论和实验方法。
4.2 学生能独立完成毒性实验，掌握实验操作技巧。
4.3 学生能分析毒物毒性作用机制，解决实际问题。
五、教学评价5.1 平时成绩：包括课堂表现、作业完成情况等。
5.2 实验报告：对实验结果进行分析和讨论。
5.3 期末考试：考察学生对课程知识的掌握程度。
六、教学内容6.1 动物毒理学实验技术：包括毒物剂量测定、毒性效应观察、生物样品分析等。
6.2 短期毒性实验：急性毒性试验、亚急性毒性试验等。
6.3 长期毒性实验：亚慢性毒性试验、慢性毒性试验等。
6.4 特殊毒性实验：遗传毒性试验、生殖毒性试验、发育毒性试验等。
七、教学内容7.1 毒物代谢与毒效关系：研究毒物在体内的代谢过程及其对毒效的影响。
7.2 毒物毒性与剂量-反应关系：探讨毒物剂量与毒性效应之间的关系。
7.3 毒物毒性与时间关系：分析毒性效应随时间的变化规律。
7.4 毒物联合毒性：研究两种或多种毒物共同作用时的毒性效应。
八、教学内容8.1 动物毒理学应用领域：环境保护、食品安全、药品评价等。
8.2 实验动物福利与伦理：了解实验动物的福利要求，遵守实验动物伦理原则。
8.3 数据处理与统计分析：掌握毒理学实验数据处理方法，进行统计分析。
3、毒理学第三讲 长期毒性试验
大白鼠
2.5
3
＞3家兔67 Nhomakorabea＞7
狗
10
12
＞12
猴
15
18
＞18
2.给药的剂量范围不同
长期毒性试验的给药剂量比急性毒性要小得多。
--急性毒性试验为一次性大剂量给药；长期毒性试验为低剂量长期积累。
急性试验无毒的药物，长期反复给药后，虽然在较低的剂量水平，但是由于量与质上的
积累作用，可能会导致生理内环境的紊乱，产生毒性反应。
使用本方法时要注意染毒期间定期(每 4 天一次)给动物称重，按实测体重，调整化学毒 物的染毒绝对量。 3.剂量固定的 20 天蓄积法：
通常采用经口灌胃染毒方式，将动物随机分为 5 个组，包括阴性对照组和 1/20 LD50、 l/10 LD50、1/5 LD50 和 1/2 LD50 四个剂量组，每组动物数 10 只，雌雄各半。每日染毒一次， 连续染毒 20 天。观察每组雌雄合计的死亡动物数量。
•工业毒理学——3－6 个月 •食品毒理学——6 个月~1 年 •环境毒理学——6 个月~1 年 •药物毒理学——临床疗程的 3~4 倍 •致癌试验——接近或等于动物的预期寿命 创新药物试验周期不少于 90 天，超过 180 天的新药可以在试验开始 90 天后同时进行 I 期临床试验。 （p153 表 14-2 我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定） 四、剂量水平的选择
出现毒性反应。同时应设溶剂或者已知药物的毒性对照组。
2.动物：应是年轻健康、来源清楚，对药物敏感、与人类代谢相类似的动物。
3.给药途径：与临床拟用途径一致。
4.观察指标：应能反映实验动物功能及结构的完整性是否受到损害。
一般是以药政部门的技术要求规范为核心，同时兼顾给药时限和给药剂量这两个重要因
食品科学毒理学实验教案
食品科学毒理学实验教案一、实验目的1. 让学生了解和掌握毒理学的基本概念、原理和方法。
2. 培养学生对食品安全性的认识，提高防范意识。
3. 通过对食品中毒理学实验的学习，使学生能够识别和判断食品安全风险。
二、实验原理1. 毒理学基本概念：毒理学是研究外源化学物质对生物体产生有害效应的科学。
2. 食品安全性评价：通过对食品中化学污染物、微生物等有害因素的检测和评估，确定食品安全性。
3. 实验方法：主要包括急性毒性实验、慢性毒性实验、遗传毒性实验等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：实验动物（如小鼠、大鼠）、食品样品、试剂等。
2. 实验仪器：显微镜、离心机、分析天平等。
四、实验步骤1. 急性毒性实验：（1）准备实验动物，对其进行体重测量和分类。
（2）将食品样品配制成不同浓度，分别给予实验动物。
（3）观察实验动物的食欲、活动状况、死亡情况等，记录数据。
（4）对实验数据进行统计分析，得出急性毒性LD50值。
2. 慢性毒性实验：（1）准备实验动物，对其进行体重测量和分类。
（2）将食品样品配制成不同浓度，分别给予实验动物。
（3）观察实验动物的生活状况、体重变化、病理变化等，记录数据。
（4）对实验数据进行统计分析，评估慢性毒性影响。
3. 遗传毒性实验：（1）准备实验材料，如细菌、细胞等。
（2）将食品样品配制成不同浓度，分别处理实验材料。
（3）观察实验材料的遗传变异情况，如突变频率、基因损伤等。
（4）对实验结果进行统计分析，评估遗传毒性影响。
五、实验结果与分析1. 通过对急性毒性实验数据的分析，得出食品样品的急性毒性LD50值。
2. 分析慢性毒性实验数据，评估食品样品对实验动物长期健康的影响。
3. 分析遗传毒性实验结果，判断食品样品是否具有遗传毒性。
注意事项：1. 实验过程中要严格遵守实验室规定，确保实验安全。
2. 对待实验动物要有人道主义精神，确保其福利。
3. 实验数据要真实可靠，避免误差。
1. 实验报告内容：（1）实验目的（2）实验原理（3）实验材料与仪器（4）实验步骤（5）实验结果与分析（6）讨论与结论（7）参考文献2. 实验报告格式：（1）食品科学毒理学实验报告（2）作者：实验者姓名（3）日期：实验完成日期（4）单位：实验所在学校或研究机构七、实验考核与评价1. 实验考核内容：（1）实验操作技能（3）实验结果分析与讨论2. 实验考核方式：（1）实验操作过程观察：占比30%（2）实验报告评分：占比40%（3）实验结果分析与讨论：占比30%八、实验拓展与研究1. 拓展方向：（1）食品毒理学在食品安全评价中的应用（2）新型食品毒性检测技术研究（3）食品安全与健康的关系2. 研究方法：（1）文献综述：查阅相关领域的研究成果和进展。
长期毒性作用及其试验方法演示文稿
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
大鼠起始周龄要求在 6 ~8周龄； 如果试验周期超过3个月以上，则将起始周龄降至
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一、一般原则和要求
总体原则
给药途径应与临床拟用途径相同
口服给药大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量为 每天1~2ml/100g，也可将受试药物混在饲料或水 中给予，但要保证每只动物按规定剂量在一定时 间内服入，静脉注射大鼠时可采用腹腔代替，各 剂量组采用等容量不等浓16
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物 三个剂量 给药途径应与临床拟用途径相同
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一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
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一、一般原则和要求
总体原则
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。 高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。 同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
长期毒性作用及其试验方法演示 文稿
优选长期毒性作用及其试验方法
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
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第一节
基本概念和目的
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一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
中草药毒理学教学
包括根及根茎类、茎木类、皮类、叶类、 花类、果实及种子类、全草类、藻菌地衣 类、树脂类、其他类等。
具有天然性、多样性、复杂性、双向调节 作用和相对安全性等特点。
中草药的有效成分及作用机制
01
有效成分
02
作用机制
包括生物碱、黄酮类、挥发油、苷类、有机酸等。
中草药通过多成分、多靶点的作用方式，对人体进行整体调节，达到 治疗疾病的目的。其作用机制包括调节免疫功能、抗炎作用、抗氧化 作用、抗肿瘤作用等。
完善中草药毒理学评价体系
建立全面、系统的中草药毒理学评价体系，包括体内外实验、临床试 验等多层次评价，确保评价结果的科学性和准确性。
加强中草药与其他药物的相互作用研究
探讨中草药与化学药物、生物制剂等其他药物之间的相互作用，为临 床合理用药提供参考。
推动中草药毒理学研究的国际化合作
加强与国际同行之间的交流与合作，共同推动中草药毒理学研究的发 展和进步。
中草药毒理学的临床应用 与注意事项
中草药在临床上的合理应用
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02
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辨证论治
根据中医理论，针对不同 病症选择合适的中草药进 行治疗。
配伍禁忌
注意中草药之间的相互作 用，避免配伍禁忌导致不 良反应。
剂量控制
根据患者病情、年龄、体 质等因素，合理控制中草 药的用量。
中草药不良反应的监测与报告
不良反应监测
加大对中草药市场的监管力度，严厉打击 制售假冒伪劣中草药的违法行为，保障消 费者的合法权益。
建立全国性的中草药不良反应监测体系，及 时发现和处理中草药的不良反应事件，保障 患者的用药安全。
THANKS
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药物相互作用
注意中草药与其他药物之间的 相互作用，避免不良反应的发
【教学课件】第十四章-长期毒性作用及其试验方法
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
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处于生长发育阶段的动物对药物 的毒性反应较敏感；
年龄较大的动物反应性降低, 存在 3 许多自发性疾病干扰试验结果。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄 啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
Wistar大鼠 SD大鼠
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
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二、实验动物
理想动物的标准：
对受试物的生物转化与人体相近； 对受试物敏感； 已有大量历史对照数据。
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
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第十四章 长期毒性作用及其试验方法
long-term toxicity impact and test method
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第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
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基本概念和目的
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一、定义
药物毒理学：长期毒性 重复给药毒性
实验动物的选择
1-3个月长期毒性试验
年龄：大鼠80~100g（6-8 周龄） 狗 8~12月 小鼠10~15g
数量：啮齿类≥20 犬≥6~8
性别：雌雄各半
6~12个月长期毒性试验
年龄：大鼠: 初断乳 50~70g
狗 <8月 数量：啮齿类≥40
犬≥8 性别：雌雄各半
如果设计要求在染毒受试物期间处死一部分动物，进行某些指标动态观 察，则在试验开始时应相应增加实验动物数。
类型
处理组与阴性对 照组两两比较
连续性数据,正态分布
方差齐 方差不齐
t 检验
t’检验
离散性数据
二项分布
泊松分布
卡方检验、Fisher 确 切概率法，u 检验
u 检验
分布末知
非参数法，如 Wilcoxon 秩和检验
多个处理组与阴 Dunnett 改进的 平方根反正弦转换， Suissa 和 Salmi 非参数法，如多重比
中剂量组 低剂量组 阴性对照组 组距：2~5倍，最低不小
于2倍
实验分组和剂量设计
剂量选择的一般步骤
★ 急性/单剂量毒性试验→剂量范围发现研究→90天毒性试验。
急性/单剂量毒性试验→14/28天毒性试验→90天毒性试验
★ 直接从急性毒性资料来确定慢性毒性试验的剂量经常有困难，
可能高估或低估受试物的长期毒性。
剂量范围研究设计——非啮齿类
剂量 (mg/kg/天，
或ppm)
实验开始
动物数
试验前和结 束时实验室
检查
大体尸解
*最高剂量 雌1/雄1
雌1/雄1全部存活动物 Nhomakorabea组织病 理学检
查
新版长期毒性实验-新版-精选.pdf
长期毒性试验操作规程1.目的：观察连续重复给予受试物对动物所产生的毒性反应，首先出现的症状和严重程度，毒副反应的靶器官及其恢复和发展情况。
确定无毒反应剂量，为拟定人用安全剂量提供参考。
2. 动物和材料：2.1动物一类新药首选Beagle犬和猴类，应写明供应单位。
根据试验周期的长短，一般选择性成熟青年动物为受试动物。
二、三、四类新药要求放松一些，但要根据实际情况选择合适的实验动物。
实验前大动物应检测心电，并做血液学和血液生化学分析，指标在正常范围内的动物，方可作为受试动物。
小动物分组方式通常采用随机分组，雌雄各半。
大动物通常每组动物4-6只，雌（无孕）雄各半，随机分组。
2.2 受试物和实验室3.试验方法3.1 剂量和分组3.1.1 一般设2-3个剂量组，一类新药应设三个剂量组和一个对照组。
剂量一般用g（或mg）/kg或单位/kg表示。
低剂量组略高于临床试验人用日最高剂量或按体表面积折算的动物药效学有效剂量。
低剂量组不应出现毒性反应。
高剂量组原则上应产生明显或严重的毒性反应或个别动物死亡。
在高、低两个剂量之间按等比关系再设置一个中剂量。
3.1.2 对照组不给受试物仅给等容量的溶媒或赋形剂。
如这些成分可能有毒性时，应另设一组对照组。
限度试验：如果经小鼠急性毒性口服给药剂量大于5g/kg或注射给药剂量大于2g/kg仍不出现毒性反应和死亡或仅个别动物有毒性反应时，可考虑只作一个高于临床拟用剂量50倍的剂量。
3.2 给药途径与方法3.2.1 给药应与临床用药途径一致。
3.2.2 口服药途径每天于喂食前定时给予。
若将受试物混在饲料、水中给予，每动物应分笼饲养，并采取严格有效措施，以保证每只动物按量在一定时限内服完。
3.2.3 经静脉、肌肉或皮下途径，其注射部位可于四肢或臀部等处交替进行。
3.2.4 受试物最好是每周7天连续给予，如试验周期在90天以上，可考虑每周给药6天，每天定时给药。
每周可根据体重情况调整给药量，按等容量不等浓度配制药物。
长期毒性试验-文档资料
适宜温度为 18~27 ℃ 。
ห้องสมุดไป่ตู้
犬
单笼饲养，定量喂食。
Beagle 狗实验前至少驯 养 1~2 周; 杂种狗应先检疫，驱虫。
相对湿度为 40%~70%。
光照宜持续 12 小时明亮，12 小时黑暗。
通风条件良好。
所用饲料应符合动物的营养标准。
雌雄动物应分开饲养，每笼不宜超过 5只
2.饲养管理
如果一种化合物以1000mg/kg 的剂量，按规定期限连续给药， 不产生任何可观察到的毒性反 应，而且根据结构相关药物的 已有资料，估计不会产生毒性 的话，就不需要再用三个剂量 来进行试验，除非预期临床需 要更高的剂量。
6.给药方法及时限
每天给药，每周必须给药 7 天。给药期限长（3个月或以上） 的药物每周至少应给药6天。
主要因素
温度(℃ ) 湿 度 动物类别
小鼠、大鼠
20-26 40-60%
豚鼠、家兔
18-28 40-60% 18-28
犬
40-60%
换气次数
气流速度 压 力 洁 净 度 落下细菌 照 噪 明 声
10-15次/h
13-18cm/s 正 压 100000级 ＜＝3个/皿
150-300 Lux
10-15次/h
低剂量 X高剂量 计算
高剂量组--产生明显或严重的毒性反应，或个 别动物死亡（但死亡率应控制在 20% 以内）； 空白对照--溶媒或其它赋形剂，若溶媒或赋形剂有毒性时则增加 正常对照组
<3月，大鼠♂♀各20只/组 ≥3月，大鼠♂♀各30只/组 大动物6-8只/组（♂♀各半）
5.剂量及分组
在选择合适的剂量时还应考虑到： ①药物在体内的生物蓄积作用。对于高蓄积性药物应 适当减少其剂量，否则在长期毒性试验结束时各剂量均有 可能出现毒性作用；
长期毒性作用及其试验方法 ppt课件
long-term toxicity impact and test method
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第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
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第一节
基本概念和目的
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一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小 时内多次给予受试药物后，一定时间内所产生的 毒性反应。
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别3
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
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第二节
试验设计原则及方法
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一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
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一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
《长期毒性试验》课件
展望
• 长期毒性试验应该更好地结合现代科 技手段进行
• 研究方向要更加多样化，应用对象更 加广泛
• 应该探索和建立其他模式，以更全面， 直观，普遍地评估实验物质对健康的 影响
生理、生化和组织学指标的 检测
长期毒性试验中，需要对实验动物 大量检测并比对其生理、生化和组 织学指标的改变，如肝肾功能，血 液流变学，氧化应激水平等。
长期毒性试验的数据分析
线性剂量-反应模型
该模型可以对人体内长期接 触实验物质后的剂量和反应 之间的关系进行分析，并通 过相关曲线将剂量-反应关系 定量化，以为优化剂量和规 范使用提供依据。
长期毒性试验的应用和意义
1 推动药物研发
长期毒性试验可以有效推动新药研发，对待药物的剂量、安全性和合理用药等方面进行 评估，为临床疗效和治疗效果提供重要依据。
2 建立化学物品安全评价体系
长期毒性试验为有关部门和机构建立起一个完整的化学物品安全评价体系，于化学危害 性的评估和防控提供重要的参考与依据。
生态流行学分析
该类分析方法从人群的角度 去分析，通过对人群中存续 时间较长的疾病与实验物质 暴露的关系进行分析，以发 现相关规律与相应的救治与 预防的策略。
生物信学分析
通过获取实验样本内某些生 物学物质，如基因、蛋白质、 代谢物等的数据信息，进行 计算、处理，以期发现与实 验物质暴露相关的生物标记， 从而对实验物质进行安全评 估。
《长期毒性试验》PPT课件
欢迎大家来到《长期毒性试验》课程，本课程将为您全面解读长期毒性试验 的定义、目的、方法、数据分析、应用和意义。
长期毒性试验的定义
定义
长期毒性试验是评估、研究 某一化学物质、药物或其他 物质对人体或动物体内长期 使用后的影响的一种生物学 检测手段。
长期毒性作用及其试验方法要点PPT学习教案
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一、一般原则和要求
总体原则
给 药 途 径 应 与临床 拟用途 径相同
口服给药大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量 为每天1~2ml/100g，也可将受试药物混在饲料或 水中给予，但要保证每只动物按规定剂量在一 定时间内服入，静脉注射大鼠时可采用腹腔代 替，各剂量组采用等容量不等浓度给药。特殊 情况另作说明。
☆ 如研究计划生育用药，应选择猴或其 他大动 物。
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Beagle犬：原产英国，纯种小猎兔犬 Beagle犬的特点：体型小,毛短,性情温和,亲人,抗病力强
缺点：价格昂贵
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄 一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄 一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
：
原因
1 长期毒性试验的给药期限较长
；
处于生长发育阶段的动物对药 2 物的毒性反应较敏感；
3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果
。
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临床拟用 给药时间
毒性试验期限
啮齿类动物
非啮齿类动物
﹤5天
2周
2周
﹤2周
1月
1月
2-4周
3月
3月
1-3月
6月
6月
﹥3月
6月
9月
每天给药最好固定时间。
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5.剂量及分组
▪ 至少3个给药组, 单位: mg(ml,IU) /kg 或 /m2 ▪ 以不等浓度等容量给药 ▪ 低剂量组--高于有效剂量，不出现毒性反应(一般为动物有效剂量
或临床治疗量的2~3倍)
▪ 中剂量组（1-n个）--产生轻微或中等度毒性反应 按 低剂量X高剂量计算
①药物在体内的生物蓄积作用。对于高蓄积性药物应 适当减少其剂量，否则在长期毒性试验结束时各剂量均有 可能出现毒性作用；
②药物是否有可能被特殊的酶所“解毒”或“活化增 毒”，而这些酶又是否易被药物本身所诱导或抑制。
③药物在消化道中的稳定性。与胃肠道内容物有亲和 性的药物，则应酌情增加剂量。
5.剂量及分组
犬
单笼饲养，定量喂食。
Beagle 狗实验前至少驯 养 1~2 周;
杂种狗应先检疫，驱虫。
雌雄动物应分开饲养，每笼不宜超过 5只
2.饲养管理
主要因素
温度(℃ ) 湿度 换气次数 气流速度 压力 洁净度 落下细菌 照明 噪声 臭气
小鼠、大鼠 20-26 40-60% 10-15次/h 13-18cm/s 正压 100000级 ＜＝3个/皿
量毒关系、产生时间，达峰时间, 持续时间及反 复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、耐受性
▪ 找到毒性反应靶器官： Target organ ▪ 明确毒性反应是否可逆： Reversibility
————确定“DOSTR”
二、长期毒性试验的基本内容和要求 1.试验动物
▪ 二种动物，啮齿类首选大鼠，非啮齿类用犬(Beagle犬), 必要时用猴；
非啮齿类动物
2周
2周
1月
1月
3月
3月
6月
6月
6月
9月
7.观察及测定指标
Ø 试验前，啮齿类动物至少应进行5天的适应性观察，非啮齿类动物 至少应驯养观察1~2周，应对动物进行一般观察及血液生化学指标的 检测。
Ø 试验期间，至少应每天或每两天作一次详细的观察。
Ø 试验结束时，必须留1/3的动物做恢复期的观察试验，其观察期时 间一般不超过28天。
150-300 Lux
＜60 db
氨浓度＜20 ppm
动物类别 豚鼠、家兔 18-28 40-60% 10-15次/h 13-18cm/s 正压 100000级 ＜＝3个/皿
150-300 Lux
＜60 dbቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
氨浓度＜20 ppm
犬 18-28 40-60% 10-15次/h 13-18cm/s 负压
▪ 动物应写明供应单位信息，品系及生产合格证号；
▪ 大鼠6-8周龄，体重差异不超过平均体重的20％。3个月 以上可选5-6周龄大鼠；
▪ Beagle犬4-12月龄；
▪ ♂♀各半，数量相同 。或选用敏感性别的动物
2.饲养管理
啮齿类动物
适宜温度为 18~27 ℃ 。 相对湿度为 40%~70%。 光照宜持续 12 小时明亮，12 小时黑暗。 通风条件良好。 所用饲料应符合动物的营养标准。
3.受试物
▪ 受试物应能充分代表临床试验受试物和上市药品；
▪ 因此受试物应采用制备工艺稳定、符合临床试用质量 标准规定的样品；
▪ 一般用中试样品，并注明受试物的名称、来源、批号 含量（或规格） 、保存条件及配制方法等。
4.给药途径
▪ 与临床给药途径一致 ▪ 混入饲料或饮水中灌服时： ▪ 保证受试药分布均匀 ▪ 在配制饲料或溶于饮水后仍旧稳定 ▪ 计量准确 ▪ 临床iv 时, 大鼠给药周期＞1月，可用ip代替，im或sc应
▪ 每天给药最好固定时间。
按我国药政管理部门的要求，长期毒性试验的给药期限一般为临 床疗程的3~4倍时间。 创新药品试验周期应不少于90天， 超过 180天的新药可以在试验开始90天后，同时进行I期临床试验。
6.给药方法及时限
临床拟用 给药时间
﹤5天 ﹤2周
2-4周
1-3月
﹥3月
毒性试验期限
啮齿类动物
实验动物与动物实验——
第2讲 长期毒性试验 № 2. Chronic Toxicity Test
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1
一、长期毒性试验的目的意义
▪ 确定毒性剂量： Toxic dosage ▪ 发现安全范围： Safety margin ▪ 研究毒性反应： Toxic reaction: 性质、程度、
Ø（4）最大耐受量法（MTD法） 狗可采用大鼠一半左右的剂量。
Ø（5）临床拟用剂量法（ACD法）根据大鼠急性毒性 (MTD)
Ø（6）等效剂量法
大鼠3个月：分别为1、1/3及
根据临床拟用剂量（3个月）
1/10MTD；
采用50~100倍、25~50倍和10~20倍临床剂量
狗和猴可采用大鼠一半左右的剂量。
▪ 高剂量组--产生明显或严重的毒性反应，或个 别动物死亡（但死亡率应控制在 20% 以内）；
▪ 空白对照--溶媒或其它赋形剂，若溶媒或赋形剂有毒性时则增加 正常对照组
<3月，大鼠♂♀各20只/组 ≥3月，大鼠♂♀各30只/组 大动物6-8只/组（♂♀各半）
5.剂量及分组
在选择合适的剂量时还应考虑到：
狗可分别采用30~50倍、15~25倍和5~10倍临床剂量
猴可采用与狗相近的剂量或略低于狗的剂量进行试验
5.剂量及分组 ——限度试验
我国SFDA规定： 如小鼠急性毒性的口服 给药剂量大于 5g/kg， 注射给药剂量大于 2g/kg 仍未产生毒性反 应和死亡，或仅个别动 物有毒性反应时，可考 虑只做一个高于临床拟 用剂量50倍(狗用30倍) 的剂量组。
可供参考的具体方法 Ø（1）半数致死量法（LD50法） Ø（2）短期蓄积试验过渡法
大鼠3个月:采用约LD50的1/10、 1/50和1/100剂量，狗各剂量组 可采用一半剂量。
根据药代动力学最大有效安全浓 度（MCD）
Ø（3）药代动力学法（MBS法）
大鼠3个月:采用大鼠的1.0 、 3.3~6.6 和10~20 MCD;
经济合作与开发组织(OECD) 提出：
如果一种化合物以1000mg/kg 的剂量，按规定期限连续给药， 不产生任何可观察到的毒性反 应，而且根据结构相关药物的 已有资料，估计不会产生毒性 的话，就不需要再用三个剂量 来进行试验，除非预期临床需
要更高的剂量。
6.给药方法及时限
▪ 每天给药，每周必须给药 7 天。给药期限长（3个月或以上） 的药物每周至少应给药6天。