心肌梗死(MI)小鼠模型具体方法及步骤
标准动物实验报告
实验名称：小鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡检测实验目的：1. 观察心肌梗死后心肌细胞凋亡情况。
2. 分析心肌梗死后心肌细胞凋亡与心肌功能的关系。
3. 探讨心肌梗死后心肌细胞凋亡的干预策略。
实验材料：1. 实验动物：清洁级雄性C57BL/6小鼠，体重20-25g，购自XX动物实验中心。
2. 试剂：TUNEL试剂盒、DAPI染料、Trizol试剂、RT-PCR试剂盒、ELISA试剂盒等。
3. 仪器：显微镜、荧光显微镜、PCR仪、凝胶成像系统、酶标仪等。
实验方法：1. 实验分组：将小鼠随机分为正常组、心肌梗死组、干预组，每组10只。
2. 心肌梗死模型的建立：采用冠状动脉结扎法建立小鼠心肌梗死模型。
3. 心肌细胞凋亡检测：- TUNEL染色：取心肌组织，按TUNEL试剂盒说明书进行操作，观察心肌细胞凋亡情况。
- DAPI染色：取心肌组织，按DAPI染料说明书进行操作，观察心肌细胞核形态。
4. 心肌功能检测：- 心肌收缩力检测：采用Langendorff离体心脏灌流技术，记录心肌收缩力。
- 心肌细胞损伤程度检测：采用ELISA试剂盒检测心肌细胞损伤标志物（如肌酸激酶、乳酸脱氢酶等）。
5. 干预措施：干预组在心肌梗死模型建立后给予干预药物，观察心肌细胞凋亡及心肌功能的变化。
实验结果：1. TUNEL染色结果显示，心肌梗死组心肌细胞凋亡率显著高于正常组和干预组（P<0.05）。
2. DAPI染色结果显示，心肌梗死组心肌细胞核形态异常，较正常组和干预组明显增大、浓染。
3. 心肌收缩力检测结果显示，心肌梗死组心肌收缩力显著低于正常组和干预组（P<0.05）。
4. 心肌细胞损伤程度检测结果显示，心肌梗死组心肌细胞损伤标志物水平显著高于正常组和干预组（P<0.05）。
5. 干预组心肌细胞凋亡率、心肌细胞核形态、心肌收缩力及心肌细胞损伤标志物水平均显著低于心肌梗死组（P<0.05）。
讨论：本研究采用冠状动脉结扎法建立小鼠心肌梗死模型，通过TUNEL染色和DAPI染色检测心肌细胞凋亡情况，结果显示心肌梗死组心肌细胞凋亡率显著高于正常组和干预组，表明心肌梗死后心肌细胞凋亡是心肌损伤的重要机制。
在无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型的简易方法
在无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型的简易方法建立小鼠心肌梗死模型是研究心脏疾病机制和寻找新的治疗方法的重要手段之一、传统的建立小鼠心肌梗死模型的方法通常需要进行开胸及结扎冠状动脉手术，手术创伤大且操作复杂。
为了减少对小鼠的伤害，同时提高模型建立的效率，研究者提出了无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型的简易方法。
1.实验材料准备：- 公共实验室小鼠（如Balb/C、C57BL/6等）- 地慢心脏梗死模型配套器械（如PureHeart Mini心脏梗死模型器材）2.实验步骤：步骤1：术前准备-按照实验要求准备相应的实验材料和设备-将小鼠逐个放入麻醉箱内进行麻醉，待小鼠完全昏迷（通常需要2-3分钟）步骤2：无创性通气条件下建立心肌梗死模型-麻醉后，将小鼠固定在手术台上，用消毒剂彻底擦拭小鼠胸部和腹部皮肤-将小鼠放置在体温控制垫上，保持恒温（37°C）- 将PureHeart Mini心脏梗死模型器材的针头插入小鼠第四肋间（左胸骨中线处），注意避免伤及心脏和其他重要组织-设定模型器材中压力泵的速率、时间和压力参数，以便形成合适的胸腔内压，有效模拟心脏梗死条件-开始通气，继续观察针头指针的转动方向，确保小鼠心脏受到一定程度的阻塞-经过一定时间后，停止通气并移除器材步骤3：术后处理-将小鼠放回饲养箱内恢复，可以提供温暖的环境和足够的饮食-关注小鼠的身体状态和行为，观察是否出现异常情况-根据实验设计，选择合适的时间点进行进一步的实验操作，如心电图监测、组织采集等3.实验注意事项：-建议在合适的无菌实验环境中进行实验操作，确保操作的无菌性-手术和实验过程中需要注意小鼠的麻醉深度和麻醉时间，避免对小鼠造成不必要的伤害-实验结束后，请做好相关废弃物和污染物的处理工作，以保护实验环境和生物安全无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型是一种简易、有效的研究方法，可以显著减少对小鼠的手术损伤。
通过该方法建立的心肌梗死模型可用于研究心肌损伤和修复机制，以及筛选心脏保护药物和治疗方法。
心肌梗死动物模型具体方法及步骤
心肌梗死动物模型具体方法及步骤原型物种人来源结扎冠状动脉左前降支（LAD）导致心梗模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，3-4W，雌雄各半，体重为180g-200g。
实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期72h建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死，是一种急性及严重的心脏状态。
心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现，需要冠状动脉不断提供的血流供应，当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞，使得冠状动脉的血流急剧减少或中断，便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血，心肌无法得到足够氧气，最终导致心肌不可逆的缺血性坏死，心脏的收缩和舒张功能降低，机体供血不足，严重者最终导致机体死亡。
1. 大鼠用3%戊巴比妥钠（30mg/kg），腹腔注射麻醉，用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发（充分暴露手术区），用碘酒和75％乙醇术区消毒。
2.气管插管：麻醉后，夹趾检测无反应即可进行MI手术。
打开外置光源、显微镜开关，打开呼吸机，设置好各参数（呼吸比2：1，潮气量6-8 mL，频率70 次/min），将气管插管沿声门插入气管，取下大鼠接上呼吸机，观察大鼠呼吸状况，胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功，即可进行MI手术。
3. 大鼠采用右侧卧位，用眼科剪在左前肢腋下，用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏，显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包，充分暴露左冠状动脉前降支（LAD）或所在区域。
4. 结扎冠状动脉：于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线，于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD)，以完全阻断LAD血流。
5.关胸：结扎完成后，5-0缝线完全缝合胸腔开口（保证无缝隙、无错位）关闭胸腔，由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。
6.术后管理：术后密切关注大鼠状态，有无呼吸异常等。
待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管，正常饲养。
小鼠心肌纤维化造模
小鼠心肌纤维化造模
操作流程及步骤：
1、取筛选后的纯合健康成年小鼠，准备手术器械。
2、小鼠麻醉：20g-阿氟汀0.3ml，腹腔注射[1]。
3、剃毛暴露术区。
4、小鼠固定，头-尾-四肢。
5、气管插管，连通呼吸机[2-4]。
6、开胸：第二与第三肋间附近开皮-钝性分离浅部肌肉层、深部肌肉层、穿
透胸膜暴露心脏。
7、用拉钩将上下肋骨拉开，暴露术野。
8、手术针在左心尔正下方2mm处穿入结扎[5]。
9、关胸，封皮。
10、撤掉呼吸机，放在温暖处待小鼠复苏。
11、2周后超声，4周左右造模成功。
心得体会及注意事项：
1、注意小鼠腹腔注射操作规范。
2、最难步骤需要多加练习。
3、插入标志胸部起伏有明显憋气感，拔出支撑导丝憋气症状明显改善.。
4、连通呼吸机后失去自主呼吸，呼吸频率与呼吸机一致。
5、成功标志：所结扎动脉供血下端心肌因缺血而出现缺血性白色。
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估1 对象与方法?1. 1研究对象清洁级雄性Spreague-Dawley (SC)大鼠20 只，体质量250〜300 g (275± 15. 3) g,由广州中医药大学实验动物中心提供。
随机分为假手术组和心肌梗死组。
1 .2 研究方法?1 . 2. 1 MI 模型的建立[2-3] 氯胺酮( 75 mg/kg )腹腔注射麻醉，经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间)，连接小动物呼吸机予以正压通气，潮气量3〜5 ml/100 g ，呼吸频率60次/min，吸呼比1? : ?1。
左侧胸部备皮，消毒手术区域，经胸骨左缘第4 肋间开胸，钝性分离肌肉，以眼科开睑器撑开肋间肌切口，暴露心脏，剪开心包，于肺动脉圆锥与左心耳之间距主动脉根部2~3 mm处，用7-0眼科无创缝合针，穿过前降支深部连同一小束心肌一并结扎。
根据心电图和心肌组织颜色确定冠脉结扎成功。
逐层缝合胸壁，自主呼吸恢复后拔出通气导管。
大鼠清醒后送动物房饲养,规律照明,自由进食和饮水。
术后连续3 d 予以青霉素40 万U 腹腔注射以预防感染。
假手术对照组除不结扎冠状动脉外，其余步骤相同。
1. 2. 2 超声心动图检查[4]3% 戊巴比妥钠( 45 mg/kg )腹腔注射麻醉，用Philips Sonos 5500型多功能超声诊断仪( S12探头，频率5~12 MHz),在胸骨旁以二维超声和M型超声测量左室收缩末径（LVSd、左室舒张末径（LVDd、舒张期左室后壁厚度（PWd、舒张期左室前壁厚度（AWd Ml组为梗死区室壁厚度）、左室射血分数（LVEF和短轴缩短率（FS）,分别计算梗死区变薄指数（BBZS即舒张期左室前壁厚度/后壁厚度）和非梗死区增厚指数（ZHZS即舒张期左室后壁厚度/前壁厚度）。
所有参数均在3 个连续的心动周期中进行测量并取平均值。
1．2．3 血流动力学检查[5]3%戊巴比妥钠（45mg/kg）腹腔注射麻醉，气管切开插管，保持呼吸道通畅。
动物实验心肌梗死面积的评估
动物实验心肌梗死面积的评估下文是关于动物实验心肌梗死面积的评估相关内容，希望对你有一定的帮助：动物实验心肌梗死面积的评估(一) 动物心梗实验设计方案联系个人所学专业，选取某种或某类疾病，设计相关实验的动物模型，详细描述其方法及步骤，并阐述所选动物种类和级别的理由以及该动物日常生活和实验的环境要求（包括进出该环境的顺序），实验过程中的注意事项MicroRNA-378(miR-378)在心肌肥厚中的研究一、实验原理：microRNA(miRNA)是一类小分子非编码单链RNA，长约22个碱基，能通过与靶mRNA3’非翻译区(3’UTR)互补配对，使其翻译受到抑制，从而在转录后水平对生物体内基因时序性表达起到精细调节作用。
miRNA的表达变化与心肌肥厚的发生、发展密切相关。
本实验通过异丙肾上腺素和去甲肾上腺素诱导实验动物心肌肥厚，然后用PCR技术测定心肌细胞中miRNA的变化。
二、实验目的：通过统计学方法观察miRNA在正常心肌细胞和心肌肥厚的心肌细胞中的差异，从而将miRNA作为诊断心肌肥厚的潜在的生物学标志。
三、实验材料及步骤：Wistar雄性大鼠30只（200～250g/只，SPF级别），异丙肾上腺素（ISO），去甲肾上腺素（NE），生理盐水。
分组及造模采用随机数表的方法讲30只wistar大鼠随机分成三组，每组10只，分别为对照组、ISO处理组、NE组。
ISO处理组：10只大鼠连续7天背部皮下注射ISO（ 4 mg/kg/天），制成心肌肥厚模型。
NE处理组：10只大鼠连续7天背部皮下注射NE（4 mg/kg/天），制成心肌肥厚模型。
对照组：10只大鼠同法背部皮下注射生理盐水（4 mg/kg/天），制成心肌肥厚模型。
检测造模是否成功高频超声检测分别于造模后第2周，称取大鼠质量，10％水合氯醛麻醉大鼠后，仰卧固定，将其胸前部剃毛，应用TOSHIBA-6000超声诊断仪，频率为MHz的探头置于其胸左侧，取径(LVEDD，LVESD)。
在无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型的简易方法
在无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型的简易方法目的：探讨建立小鼠心肌梗死模型的快速简易方法，提高动物存活率。
方法：使用戊巴比妥钠麻醉小鼠，在无创性机械通气的条件下开胸，将心脏轻轻挤出胸腔后，用手术针钩断冠状动脉的左前降支（LAD），通过观察存活率、心电图改变和组织病理学染色来评价心肌梗死模型是否成功。
同时与冠状动脉结扎组进行比较。
结果：LAD钩断术后心电图出现ST段抬高，TTC染色可见明显的梗死区域，术后4周心肌发生纤维化；模型组的术后存活率为85%，而冠状动脉结扎组则为54%。
结论：应用这种改良的新方法可以快速并成功地建立小鼠心肌梗死模型。
标签：心肌梗死；戊巴比妥钠；机械通气；冠状动脉结扎冠状动脉发生粥样硬化时可引起血管管腔狭窄或阻塞，导致心肌缺血、缺氧和坏死即心肌梗死，甚至最终演变成为心衰[1-2]。
在我国随着经济的发展，冠心病的发病率死亡率都在逐年增长，因此对冠心病的防治研究十分重要[3-4]。
在应用动物模型研究心肌梗死的致病机理以及使用药物进行干预时，都会涉及到心肌梗死模型的建立。
以往报道的心肌梗死模型制作方法包括冠状动脉左前降支（LAD）结扎法、血栓形成法、药物注射法、球囊堵塞法、Ameriod环套扎法和冷冻法，其中应用得最为普遍的是LAD结扎法[5-13]。
在实验动物的选择上，大鼠、兔、羊、猪和犬应用得较多[14]。
近年来，随着转基因技术的成熟，小鼠已成为基因功能研究中不可取代的模式生物。
然而小鼠体型较小，在应用传统的LAD结扎法制作心肌梗死模型时受到了极大的限制，而且存活率也比较低。
为了提高小鼠的心肌梗死术后存活率，并减少其在手术中承受的痛苦，极大程度地提高动物福利，该项研究从麻醉方法、呼吸支持到手术方法进行了一系列改良，成功地建立了一种全新的且极为简易的小鼠心肌梗死模型制作方法。
1 材料与方法1.1 实验动物SPF级昆明（KM）小鼠，雄性，6～8周龄，体重25～30 g，由中山大学实验动物中心提供，动物实验在中山大学实验动物中心的屏障环境下进行，使用许可证号：SYXK（粤）2011-0112。
石蜡切片-小鼠心脏组织-心衰模型-实验步骤
石蜡切片操作流程及步骤：1、样品4℃过夜[1,2]。
2、清洗水槽及过滤网[3]。
3、打开机器开关，调节水池温度21℃、展片水池温度45℃、烘片温度55℃[4]。
4、固定包埋组织块[5]。
5、调节出水水流大小[6]。
6、调节切片厚度5um、10 um[7]。
7、将包埋组织块下调至与刀片位置同一平面，前后距离使其与刀片距离恰好接触[8]。
8、开始切片带出现完整的组织切横切面将其随水流传送至水池中[9-13]。
9、选择较好的切片，用载玻片将其从21℃水池中捞出。
每个石蜡取5-6张片子[14-15]。
10、放到展片水池中展开、载玻片编号[16]。
11、55℃烘干，无水滴后可收片。
心得体会及注意事项：1、包埋组织块冻存温度过低会冻坏，不冻存石蜡粘性大不容易切片。
2、操作期间应放入冰中储存，自备冰块。
3、水槽中石蜡会堵塞上水滤网影响出水速度。
4、展片水池水要在展片前达到预设温度。
5、要固定牢固，固定不牢切片时容易破坏样品。
6、以中间水柱恰好达到刀片位置最佳，水流过小切片不易冲下，水流过大会导致切片破坏。
7、5 um染色效果更佳，根据不同组织染色要求调节切片厚度。
8、若前后位置调节不精确可使距离稍大，随后手动摇轮慢慢靠近，每次前进距离为提前设定距离5um或10 um。
9、切片期间不出现严重的黏附，粘连，裂片，不要轻易停止，切片要匀速.10、切片过薄会迅速升温从0℃升至21℃或更高，若随意停止，石蜡黏附性增加会导致粘刀片等问题影响继续操作。
11、若一个样本操作时间过长应取下放入冰块一段时间再继续操作。
12、原则没有大问题匀速不要随意停。
13、换新刀片（刀片上有黏附石蜡会导致切片裂开，最好换至新刀片）。
14、尽量清理水池多余无用切片及碎石蜡，但是要小心不要碰坏样品切片。
15、每个载玻片取2-3个组织最佳。
16、展片不足会有褶皱影响染色结果，展片时间过长会导致组织裂开。
病理生理学实验设计报告
病理生理学实验设计报告一、实验题目探究某种药物对小鼠心肌梗死模型的治疗效果二、实验目的本实验旨在研究某种药物对心肌梗死小鼠模型的治疗作用，通过检测相关生理指标和病理变化，评估该药物在心肌梗死治疗中的潜在价值。
三、实验原理心肌梗死是由于冠状动脉供血急剧减少或中断，导致相应心肌持久而严重的缺血缺氧，引起心肌坏死。
在小鼠心肌梗死模型中，通过结扎冠状动脉左前降支可模拟心肌梗死的发生。
给予实验药物后，观察其对心肌梗死面积、心肌细胞凋亡、炎症反应、心功能等方面的影响，以探讨其治疗机制。
四、实验材料与方法（一）实验动物选用 6-8 周龄的雄性 C57BL/6 小鼠，体重约 20-25g，购自_____动物实验中心。
实验动物在标准环境中饲养，自由饮食和饮水，适应环境 1 周后进行实验。
（二）主要试剂与仪器1、实验药物：＿____（纯度>98%），用生理盐水配制。
2、戊巴比妥钠：用于麻醉小鼠。
3、心电图机：记录小鼠心电图。
4、超声心动图仪：检测小鼠心功能。
5、组织切片染色试剂：如苏木精伊红（HE）染色剂、TUNEL 凋亡检测试剂盒等。
（三）实验分组将小鼠随机分为 3 组，每组 10 只：1、假手术组（Sham 组）：只开胸但不结扎冠状动脉左前降支，给予等量生理盐水。
2、心肌梗死模型组（MI 组）：结扎冠状动脉左前降支，建立心肌梗死模型，给予等量生理盐水。
3、药物治疗组（Drug 组）：结扎冠状动脉左前降支后，给予实验药物治疗。
（四）实验步骤1、小鼠麻醉：腹腔注射戊巴比妥钠（50mg/kg）麻醉小鼠。
2、手术操作：在小鼠左侧胸部做切口，暴露心脏，用丝线结扎冠状动脉左前降支，造成心肌梗死。
假手术组只穿线不结扎。
3、术后处理：缝合切口，给予抗生素预防感染。
术后 24 小时开始，药物治疗组每天腹腔注射实验药物，假手术组和心肌梗死模型组给予等量生理盐水，连续给药 2 周。
4、指标检测心电图检测：在术前、术后 24 小时和 2 周分别记录小鼠心电图，观察 ST 段变化。
小鼠心梗模型的建立与无创评价
通 过 结 扎 冠 状 动 脉 左 前 降 支 的 方 法 建 立 了小 鼠 心 肌 梗 死 模 型 并
【 键词 】 小 鼠 ；模 型 ， 物 ； 肌 梗 死 ； 声 心 动 图 关 动 心 超 【 图分 类 号 】Ｒ ５ ． 中 ６４ １ 【 献 标 识 码 】Ａ 文 【 章 编 号 】１０ ￣８ ７ ２ １ ）３０ ９ —３ 文 ０５ － （０ ０ ０ －１６０ ４
降 到 术 后 ｌ 的 （ ９ ８±１ ． ０ ％ ， 短 分数 由手 术 前 的 （ １ ４±２ ８ ） 下 降 到 （ ６ １ ９ ０ ） ；缩 ６． ．５ ％ ２ ． ． １ ％ 心 － ４
左 室 收缩 末 直 径 由 （ ３ ９４１９ ） ｍ 扩 大 到 （ ６５±７３ ）／ 舒 张末 直 径 由 （ ５９± ．２ ｍ 扩 大 到 （８ ９± １． ． ８ － ３． ．７ ｘ ｍ， ３． ３ １） ４． ６ ０ ） ｍ。病 理 学 检 查 见 明 显瘢 痕形 成 。结 论 ．５
昆明 雄 性 小 鼠 ２ ０只 ， 管 插 管 后 由 左侧 第 ４肋 问 进 胸 ， 扎 冠 状 动 脉 左 前 降 支 建 立 小 鼠 心 肌 梗 死 模 型 ， 模 型 建 气 结 在
立 的 前 １ｄ和 术 后 １ｄ ｌ周 分 别 使用 心脏 超 声 柃 测 左 室 收 缩 末 直 径 、 张 末 直 径 、 短 分 数 和射 血 分 数 ， 于 术 后 、 舒 缩 并 第 ８天进 行 病 理 检 查 。结 果 小 鼠 心肌 梗 死 模 型 建 立 过程 中早 期 死 亡 率 １％ （／ ０ ， 后 １ 内 死 亡 率 １ ％ （／ ０ ２２ ） 术 周 ５ ３ ２ ） 经 过 超 声 评 价 ， 模 成 功 率 为 ７ ％ （ ５２ ） ０， 造 ５ １／ ０ 。小 鼠心 功 能 明 显 下 降 ， 血 分 数 由 手 术 前 的 （ ２ １４ ．５ ％ 下 射 ９． － ４ ） ３
微创建立小鼠心肌梗死模型及其评价
微创建立小鼠心肌梗死模型及其评价张红霞;刘艳;李玲萍;贺忠梅【摘要】目的探索一种微创建立小鼠心肌梗死模型的方法,并利用超声心动图进行评价.方法 40只C57BL/6雄性小鼠随机分为心梗组(MI,n=30)与假手术组(Sham,n=10).术前及术中用异氟烷对动物行吸入麻醉,于左胸3、4肋间做一1.0 cm左右切口,将心脏从胸壁窗口挤出.MI组结扎冠脉左前降支建立心梗模型;Sham 组冠脉只穿线不结扎,其余操作同MI组.术后4周采用超声心动图检测心脏结构与功能,经心肌组织病理学分析以判断模型成功与否.结果 MI组小鼠存活率为78.6％,Sham组为100％.超声结果显示,与Sham组相比,MI组小鼠的LVAWd、LVAWs、EF及FS均明显降低(P＜0.05),LVIDd与LVIDs明显增加(P＜0.05).Masson染色可见MI组小鼠的左心室腔明显增大,心室壁变薄,纤维化面积增加[(13.54±1.39)％比(0.08±0.03)％,P＜0.01].结论采用本法制备小鼠心梗模型具有微创、快捷、高效、无需使用呼吸机的优势,而且模型稳定可靠.【期刊名称】《中国心血管病研究》【年(卷),期】2014(012)004【总页数】4页(P334-336,383)【关键词】心肌梗死;动物模型;微创;超声心动图【作者】张红霞;刘艳;李玲萍;贺忠梅【作者单位】030001 太原市,山西医科大学生理学系,细胞生理学山西省重点实验室;030001 太原市,山西医科大学生理学系,细胞生理学山西省重点实验室;030001太原市,山西医科大学生理学系,细胞生理学山西省重点实验室;030001 太原市,山西医科大学生理学系,细胞生理学山西省重点实验室【正文语种】中文【中图分类】Q95-33;R542.2+2心肌梗死（myocardial infarction，MI）是一种发生率和病死率极高的严重病症，对其发病机制与防治策略的研究需要高效稳定的动物模型。
心肌梗死的动物模型制作 (1)
心肌梗死的动物模型制作[ 08-10-02 17:11:00 ] 作者：靳激扬编辑：Studa_hasgo122【关键词】心肌梗死模型动物心肌梗死是严重危害人类健康的心血管疾病，也是主要致死因素之一。
在心血管疾病研究中，动物模型被广泛用于发病机制和药物治疗研究。
研究目的不同则所需的动物模型平台亦不同，心肌梗死动物模型的有效建立是完成相关实验的前提，对研究急、慢性心肌梗死的病理演变过程、诊断及治疗均有重要意义。
目前国内外常见的建立心肌梗死动物模型的方法主要有两大类：⑴采用各种方法直接造成冠状动脉狭窄或堵塞，其试验周期短，可以观察梗死后再灌注对心肌细胞的损伤。
⑵诱发冠状动脉粥样硬化形成狭窄与梗死，其试验周期长，死亡率较高。
通过开胸结扎不同部位冠状动脉建立急性心肌梗死模型已沿用多年[1～5]，结扎大鼠冠状动脉是医学实验中已得到公认、最常用的心肌梗死模型。
国外多采用Jons法[6]即在自主呼吸下，开胸迅速挤出心脏，结扎冠状动脉。
结扎时固定部位于左心耳下缘与肺动脉圆锥间，以左冠状静脉主干为标志，连同一小束心肌一同结扎，于左心耳根部下方2mm处进针，在肺动脉圆锥旁出针，深度为0.3mm～0.5mm，过浅缝线易于脱落、血管结扎不完全，过深易致传导阻滞。
由于大鼠冠状动脉发育变异较大，血管常显示不清，此时可固定部位盲扎，亦可达到结扎目的。
观察近心尖的左室前壁，是否失去原有光泽，而显暗灰色或青紫色；收缩力是否降低或消失。
观察心电图是否逐渐出现ST 段弓背向上抬高及Q波等，心电图变化才能说明冠脉结扎情况，只有看到上述肯定结果，才可关闭胸腔，否则需重新结扎冠脉。
此法结扎冠状动脉后心电图及病理表现相似，多为广泛前壁心肌梗死，稳定性较好。
在开胸状态下直接用缝合线结扎冠状动脉分支，造成该支配区域的永久性缺血。
此法动物创伤大、死亡率高，要求术者技术娴熟，动作快，难度大。
大鼠右肺四叶，左肺一叶，呈海绵状，有时左肺将心脏大部分覆盖，因此在开胸时最易伤及充气的肺组织。
小鼠心肌梗死模型建立的简化方法研究
小鼠心肌梗死模型建立的简化方法研究作者：史建伟来源：《中西医结合心血管病电子杂志》2018年第27期【摘要】目的探讨小鼠心肌梗死模型建立的简化方法。
方法选入昆明小鼠35只进行心肌梗死动物模型实验研究，在人工气道开通过程中，借助经皮冠状动脉球囊成形术导丝简化插管，并实施冠状动脉左前降支开胸结扎术，统计术后小鼠存活率、心电图走势以及心肌染色情况。
结果 35只小鼠心梗模型建立成功，术后一天33只小鼠存活，术后两周，共存活31只；33只小鼠心肌染色提示心肌梗死。
结论导丝简化气管插管联合开胸式冠状动脉左前降支结扎术，操作简便，能够提高小鼠心肌梗死模型建立成功率，借鉴价值极高。
【关键词】心肌梗死；动物模型；导丝插管【中图分类号】R259 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095.6681.2018.27..02心肌梗死动物模型的建立能够模拟心梗发生，有利于医疗界深入研究心肌梗死，提高心梗防治效果。
为探讨简单易行、切实有效的小鼠心肌梗死模型建立对策，本研究小组开展了实验研究。
现报道如下。
1 材料与方法1.1 研究动物本次研究动物源自某实验动物中心养殖的昆明雄性小鼠，入选小鼠鼠龄11～12周，体重25～30 g，共选入35只。
1.2 器械和用品本次研究所用医疗器械包括小动物呼吸机、心电图机；工具有眼科专用剪、镊，刀片、直/弯钳、大头针、缝合针、留置针、持针器及经皮冠状动脉球囊成形术导丝；医疗用品包括消毒碘酒/酒精，2%戊巴比妥钠溶液、医用胶带、动物手术台等。
1.3 方法①术前监护。
以50 mg/kg的标准，经腹腔为小鼠注射2%戊巴比妥钠溶液实施诱导麻醉，用药后5～7 min后，实施夹趾反射试验，若提示阳性结果则可继续注射麻醉药，以初始剂量的10%～20%为准；准备就绪后，摆放小鼠体位为右侧卧位，将5-0尼龙线系在小鼠前上切牙并连接操作台边缘，确保鼠鼻与边缘保持5～10 mm距离，同时，应用医用胶带将小鼠四肢、尾巴等部位进行妥善固定；借助刀片将手术部位毛发剔除，并使用碘酒、酒精进行全面消毒；启动心电图机，并妥善连接小鼠肢体与机器，实现导联监测。
心肌梗死实验报告
本研究旨在建立心肌梗死动物模型，观察心肌梗死后心脏功能及心肌细胞损伤情况，为心肌梗死的研究和治疗提供实验基础。
二、实验材料1. 实验动物：SPF级Balb/c小鼠，雄性，周龄6-8周，体重20-22g。
2. 仪器设备：手术显微镜、手术器械、手术缝合线、心电图机、超声心动仪、显微镜、电子天平等。
3. 药物与试剂：戊巴比妥钠、碘酒、乙醇、氯化钠溶液、磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）、苏木精、伊红等。
三、实验方法1. 动物分组：将实验小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 建立心肌梗死模型：（1）3%戊巴比妥钠80mg/kg腹腔注射麻醉小鼠；（2）剃除小鼠胸部及腋下毛发，用碘酒和75%乙醇消毒手术区；（3）气管插管，保持呼吸道通畅；（4）切开小鼠胸腔，暴露心脏，找到左冠状动脉前降支（LAD）；（5）用无损伤缝合线结扎LAD，造成冠状动脉狭窄或闭塞；（6）观察小鼠手术过程中是否有心脏骤停，如有，立即进行心肺复苏；（7）术后缝合胸腔，给予适量氯化钠溶液静脉滴注。
3. 观察指标：（1）术后2周，观察小鼠心脏功能变化，包括心率、血压、心电图等；（2）术后4周，观察小鼠心肌细胞损伤情况，通过苏木精-伊红染色观察心肌细胞形态学变化；（3）术后8周，观察小鼠心脏组织病理学变化，通过显微镜观察心肌细胞坏死、纤维化等。
1. 术后2周，实验组小鼠心率、血压、心电图均与正常小鼠无明显差异。
2. 术后4周，实验组小鼠心肌细胞出现明显损伤，表现为细胞核固缩、细胞质减少、细胞间隙扩大等。
3. 术后8周，实验组小鼠心脏组织出现纤维化、心肌细胞坏死等病理学变化。
五、讨论本研究成功建立了心肌梗死动物模型，通过观察小鼠心脏功能及心肌细胞损伤情况，为心肌梗死的研究和治疗提供了实验基础。
实验结果显示，结扎LAD可导致心肌梗死，心肌细胞出现明显损伤，心脏组织出现纤维化、心肌细胞坏死等病理学变化。
本研究结果表明，心肌梗死动物模型在心肌梗死的研究和治疗中具有重要意义。
快速制作心肌梗死模型
快速制作心肌梗死模型发表时间：2020-10-13T15:04:57.503Z 来源：《健康世界》2020年第17期作者：快速制作心肌梗死模型[导读] 心肌梗死（MI）是指冠状动脉阻塞，供血不足导致的心肌缺血性坏死徐秋语西安交通大学医学部陕西西安 710061摘要：心肌梗死（MI）是指冠状动脉阻塞，供血不足导致的心肌缺血性坏死，，目前在45岁以下人群发病率呈逐年上涨的趋势，由于心肌梗死的发病急、危害性大等特点，心梗逐渐成为威胁人类生命健康的一大疾病，因此，研究心肌梗死的实验便十分重要，本文章主要为广大研究人员提供一个切实有效可行的快速造模方法。
本方法采用电凝法，是一种不需要呼吸机麻醉机，且成功率较高的方法。
经大量重复实验证明，成活率可达百分之七十及以上。
该种方法便捷，快速，性价比高，成功率高。
因此是一种比较好的方法。
关键词：心肌梗死；电凝法；快速造模；心梗小鼠随着世界人口老龄化的加剧，以及人们生活水平的提高，改善，冠心病在人群中的发病率普遍提高，目前有不少实验对此课题进行研究，而建模又是实验必备的重要环节。
因此，心肌梗死动物实验模型建立的成功与否将直接决定了对心肌梗死研究的成败。
本文致力于介绍一种快速简便成功率高的心梗小鼠建模方法。
1.材料和方法1.1动物SPF级BALB/C雄性小鼠105只，11周龄，体重39＋—2g，购自于西安交通大学动物实验中心，手术在西安交通大学实验室进行，严格按照实验动物使用的3R原则。
、1.2手术器械，试剂。
5-0缝线，外科手术器械，自制固定板，便携式无影灯，5％水合氯醛，75％酒精，台式电凝止血笔。
1.3术前准备将小鼠腹腔注射麻醉后，固定于固定板上，将无影灯打开，提前预热电凝止血笔，整个过程无需呼吸机。
1.4手术方法（1）将用水合氯醛麻醉过的小鼠固定于固定板上。
（2）用酒精消毒术区皮毛。
（3）在小鼠第4肋间隙附近斜向上內做一1.5厘米左右的切口。
（4）用5-0手术风险打一荷包松结备用。
高效建立成年小鼠心肌梗死模型
高效建立成年小鼠心肌梗死模型李晓群;高凌志;张进;杜建霖;蒲获;刘亚杰;翁敏杰;佘强【摘要】目的探讨高效建立小鼠心肌梗死模型的方法.方法分别采用右侧卧位及仰卧位两种方法来建立模型,通过观察心电图变化、检测cTNT、病理检测等方法来证明模型成功,并以比较其存活率、手术时间、出血量、肺损伤率等来评价两种方法的高效性.结果结扎后心肌局部变苍白,心电图ST-T段抬高,cTNT呈阳性,心肌纤维化,右侧卧位方法建模小鼠存活率显著提高.结论右侧卧位横切口开胸结扎冠脉是一种更高效的建模方法.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2012(031)004【总页数】4页(P635-638)【关键词】心肌梗死;右侧卧位;纤维化;高效【作者】李晓群;高凌志;张进;杜建霖;蒲获;刘亚杰;翁敏杰;佘强【作者单位】重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400010【正文语种】中文【中图分类】Q959.837;Q95-33心肌梗死(Myocardial infarction，MI)严重威胁着人类健康，动物心肌梗死模型的建立有助于我们更好地研究心肌梗死的机制、治疗、预防等。
为更贴近临床，我们采用经典的经冠状动脉结扎法建立小鼠心梗模型(Wang et al.，2006)。
传统建立心肌梗死模型方法采用仰卧位胸骨左侧纵切口，手术创伤大，出血量大，易损伤肺，且不易暴露心脏血管，存活率低，不适用于小鼠心梗的操作。
我们在此基础上做了改进，采用右侧卧位横切口开胸，创伤小，直接暴露冠脉左前降支，且不易损伤肺，操作便捷，可显著提高心梗小鼠的存活率，从而为进一步研究奠定重要基础。
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心肌梗死(MI)小鼠模型具体方法及步骤原型物种人
来源结扎左冠状动脉前降支（LAD）法致心梗
模式动物品系SPF级Balb/c小鼠，雄性，周龄为6w~8w，体重为
23g~27g。
实验分组实验分三组：模型组（10只），对照组（10只），空白组（10只）。
实验周期0h、3h、6h、12h、24h、72h
建模方法1. 3%戊巴比妥钠80mg/kg腹腔注射麻醉，用小鼠剃毛器剃除小鼠胸部及腋下毛发（充分暴露手术区），用碘酒和75％乙醇手术区消毒。
2.气管插管：麻醉后，夹趾检测无反应即可进行MI手术。
打开外置光源、显微镜开关，打开呼吸机，设置好各参数（呼吸频率110bpm），将气管插管沿声门插入气管，取下小鼠接上呼吸机，观察小鼠呼吸状况，胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功，即可进行MI手术。
3.小鼠采用右侧卧位，用眼科剪在左前肢腋下，用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏，显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包，充分暴露左冠状动脉前降支（LAD）或所在区域。
4. 结扎冠状动脉：于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取7-0带针缝合线，于左心耳下缘2mm处进针，缝线穿过LAD，以完全阻断LAD 血流。
5. 关胸：结扎完成后，6-0缝线完全缝合胸腔开口（保证无缝隙、无错位）关闭胸腔，由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。
6.术后管理：术后密切关注小鼠状态，有无呼吸异常等。
待小鼠自然苏醒后将小鼠从呼吸机上取下并取下气管插管，正常饲养。
模型评价
1.心脏功能评价由Laplace定理可知：S=Pr/2h，P为心室内压，r为心腔内径，h为心壁厚度。
在心脏压力负荷过重的情况下，为适应心脏做功增加，室壁厚度增加，左室室壁应力增加，提高心脏收缩功能起到早期代偿的机制；但持续的压力超负荷，可促进心肌肥厚，导致心肌细胞的坏死及凋亡，心脏的收缩和/或舒张功能受到损害，最终发展为慢性心力衰竭甚或心源性猝死。
可通过超声或血流动力学检测来评价心功能。
M超图像，测量左室舒张末期及收缩末期内径(LVIDd、LVIDs)，同时系统将会自动计算出相应的射血分数（EF%）及左室短轴缩短率（FS%）。
2. TTC染色测量梗死面积
迅速取下心脏，清洁并挤压心脏蘸干血渍，4°C生理盐水冲洗干净后蘸干，于-20°C冰箱冷冻15min至心脏变硬，取出并用刀片自心尖向心底沿房室沟方向切成1mm厚切片，共切5片，迅速将切片置于5ml 37°C 1% PH为7.4的TTC磷酸缓冲液中，水浴15min，TTC染色后梗死区为白色，梗死边缘区为砖红色，正常区为红色。
3 病理学评价
取出心脏，剔除血管、脂肪等杂质，心脏放纱布上蘸干残留的血渍和溶液并称重后放入4%多聚甲醛溶液中保存，24h后行脱水、包埋、石蜡切片，各个标本选择固定位置（乳头肌水平）切片，做HE染色。
HE 染色结果可见，对照组心肌排列整齐、细胞质丰富均匀、间质正常；模型组部分心肌细胞核丢失、
心肌细胞呈空泡样变、梗死区可见心肌组织紊乱、梗死区心肌细胞消失，代之以纤维瘢痕组织。
取出心脏，剔除血管、脂肪等杂质，心脏放纱布上蘸干残留的血渍和溶液并称重后放入4%多聚甲醛溶液中保存，24h后行脱水、包埋、石蜡切片，各个标本选择固定位置（乳头肌水平）切片，做HE染色。
HE 染色结果可见，对照组心肌排列整齐、细胞质丰富均匀、间质正常；模型组部分心肌细胞核丢失、心肌细胞呈空泡样变、梗死区可见心肌组织紊乱、梗死区心肌细胞消失，代之以纤维瘢痕组织。