猪圆环病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒

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珠三角地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及序列分析

小量提取试剂盒、ｘＴｑＤＥａＮＡ聚合酶购于宝生物工程（连）限公司，Ｃ一大有ＰＶ２阳性血清、性血清阴
ＰＶ２可引起断奶后仔猪多系统衰竭综合征（Ｍ— Ｃ－）ＰＷＳ、）猪皮炎肾病综合征（Ｄ）繁殖障碍等相关ＰＮＳ、
２结果
２１病料Ｐ．ＣＲ扩增结果
．
：１ｔｕｆｆ
ＰＶ２Ｃ－标准阳性血清，照组加阴性血清，７℃温育对３
１ｈ再用ＰＳ洗涤３次，次５ｒｉ；ＦＴ；Ｂ每ｎ加ＩＣ标记的ａ羊抗猪ＩＧ染色，７℃温育ｌｈ最后用ＰＳ洗涤３ｇ３；Ｂ
接种到有Ｐ —５的ｌＫｌ２孔细胞板上，每个梯度接种８孔，按照１２５的方法处理后，间接免疫荧光试验．．用测病毒的ＴＩ５。ＣＩ。）
１２８全基因组序列Ｐ．．ＣＲ的扩增用ＰＰ４和３、
ｔｔ
物Ｐ５５＿：，ＡＣＡＴＧＧＴＴＡＣＡＣＧＧＡＴＡＴＴＧＴ一下３，
１材料与方法
１１材料．
１１１细胞和病料无ＰＶ１污染的Ｐ１．．Ｃ一Ｋ一５细
游引物
Ｐ：５一６ＡＡＴＴＡＣＴＡＣＣＣＴ— ＡＧＧＡＣ
以上引物由上海生物工程技术服务有限公司合成。１２３模板的制备１．．３份病料研磨后用组织
ＤＮＡ提取试剂盒抽提ＤＮＡ，一２于Ｏ℃保存。１２４病料的ＰＲ检测．．ＣＰＲ的反应体系：ＮＡＣＤ

猪圆环病毒2型核酸载体构建及分子免疫研究

ｗａｓｐａａｅｆｅｉｍｕｎｉｙ，Ｔｙｐｈｙｅｗａｅｒｄｗｉｈｍｉｅｓｌｅｔｔｎｈｅｅｓｅｒｔｄｂｅｏｒｍｔｌｍｏｃｔｓｐｒｐａｅｔｃｐｅｎａｈｅｅｄｏｆｔｘｐｅｉｅ．Ｔｙｐｒｍｎｔｌｍｈｏｃｅｐｒ — ｙｔｏｌｆｒｔｏｎｗａｘｍｉｅｔＴＴｅｈｎｎｔｂｙｌｖｌｗｅｅｄｅｅｔｄｓｎｎｒｃＳＡ．ＴｈｅｒｓｔｓｗｅｈａｉｅａｉｓｅａｎｄｗｉｈＭｍｔｏｄａｄａｉｏｄｅｅｓｒｔｃｅｕｉｇｉｄｉｅｔＥＩＩｅｕｌｓｈｏｄｔｔ
医师，事畜牧技术研究与推广工作。从
＊［讯作者］马友记， — ｉｙｍａｇａ．ｄ．ｎ通Ｅｍａｌｊ＠ｓｕｅｕｃ：
４２
ＪｕｎｌｏｉｌｃｅｃｎｅｅｉａｙＭｅｉｉｅｏｒａｆＡｎｍａｉｎｅａｄＶｔｒｎｒｄｃｎＳ
因的真核双表达质粒ｐＲＥ－ａ —一Ｆ经酶切、ＣｌＳＣｐｏＩＮ，【ＰＲ鉴定和测序表明构建成功。将该质粒免疫６
～
８周龄ＢＢｃ系小鼠，隔２周免疫１次，免２次，次免疫前采血分离血清，ＡＬ／纯每共每实验结束时
Ｖｏ．１１３
Ｎｏ４．
２１０２
１材料和方法
１１质粒及菌株．
体分别用Ｂｌ和Ｘｏ双酶切，ｇⅡ ｈＩ回收酶切产物用ＤＡＮ

猪圆环病毒抗原ELISA试剂盒说明书

猪圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)水平。

实验原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中猪圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)。

用纯化的圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪圆环病毒II型抗原(PCVⅡAg)的存在与否。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

锐捷——中国第一个PCV-2型ELISA抗体检测试剂盒

由表４可知， “ 捷 ” 与进Ｉ试大量实验表明， “ 捷 ” 具有特异锐Ｚｌ锐
剂盒（班牙某公司）的总符合性强、稳定性好和符合率高等优西
率为９６以上，说明 “ 捷 ” ０．％锐
点，适宜临床样品的大规模检测，
注：定标准：／判ｓＰ≥ ０２，则为阳性＃．６＜ＳＰ＜０２，则为可疑，需重复检测；．５０１／．５ＳＰ≤ ０１，则为阴性。／．６
该蛋白具有 “ 活性、高纯度、高高稳定和高特
异 ”的特点，
准的二类新兽药【兽药注册证新书证号：（０９新兽药证字２０）
２１号】已获得农业部核发的兽药，
保了 “ 捷 ” 的特异性、敏感性和锐
稳定性，为ＰＣＶ一２型诊断及疫苗免疫效果评估提供了关键技术手段，
用基因工程、蛋白质工程和免疫
表１“ 捷 ”特异性试验锐
填补了国内在该技术领域的空白，
现已隆重上市。
一
．
“ 捷 ” 特点锐
１亲和层析纯化技术，获得了ＰＣＶ２流行毒株的ｄａＣｐ蛋白，
与ＣＳＦＶ、
ＰＰＶ、ＰＲＶ、
ＰＲＲＳＶ
ＰＣＶ一１标
准阳性血清

猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒

【产品名称】猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒说明书加入100μL阳性对照品。

盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。

4.洗板：甩去孔内液体，每孔注满（若用洗板机每孔加250μL）工作浓度洗涤液洗涤3通用名称：猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒英文名称：Porcinecircovirus（PCV）Type2AntibodyTestKit【包装规格】96份/盒、192份/盒【预期用途】本试剂盒采用间接ELISA方法定性检测猪血清或血浆中的特异性猪圆环病毒2 型抗体，可作为猪圆环病毒2型疫苗的免疫监测及该病的辅助检测指标。

【检测原理】如果待检样品中含有猪圆环病毒2型抗体，就会与包被板上的猪圆环病毒2型重组抗原及第二步加入的抗猪二抗酶标结合物特异性结合。

间接结合在包被板上的抗猪二抗酶标结合物与底物反应的显色状况即可反映出样品中是否含有保护水平的猪圆环病毒2 型抗体。

【主要组成成份】【储存条件及有效期】2~8℃保存，防止冷冻，有效期为12个月。

【适用仪器】含450nm和630nm波长酶标仪；37℃恒温设备；可调微量移液器。

【样品要求】1.本试剂仅适用于检测猪血清或血浆。

2.为取得最佳实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品；3.短期（3天内）将进行检测的血清样品可存放于2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃以下，避免反复冻融。

【检验方法】1.洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×（2号液）按1：10稀释（例如，取100mL洗涤液10×，加900mL蒸馏水或去离子水混合），充分混匀即为工作浓度洗涤液。

2.样品稀释：用样品稀释液（5 号液）将待检血清按1:40 稀释（血清稀释板使用方法详见说明书背面），充分混匀。

阴性、阳性对照品不用稀释，直接加样。

3.加样反应：样品孔，每孔仅加入100μL待检样品；空白对照2孔，每孔仅加入100μL样品稀释液；阴性对照2孔，每孔仅加入100μL阴性对照品；阳性对照2孔，每孔仅次，每次均需停留1分钟；最后一次甩净，拍干。

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展猪圆环病毒2型（PRRSV-2）是一种重要的猪类病毒，它会引起猪的严重疾病，并对全球猪业产生了极大的经济影响。

对猪圆环病毒2型的检测技术和研究进展一直备受关注。

本文将从PRRSV-2的检测技术和研究进展两个方面进行介绍。

一、猪圆环病毒2型检测技术1. 实时荧光RT-PCR技术实时荧光RT-PCR技术是目前用于PRRSV-2检测的主要方法之一。

该技术通过分离RNA，然后利用逆转录酶将RNA转化为cDNA，再利用聚合酶链式反应（PCR）进行扩增，最后通过荧光探针实时检测扩增产物的数量。

这种技术具有灵敏度高、特异性好、快速准确等优点，已经成为PRRSV-2检测的金标准。

2. 基因组测序技术随着生物技术的不断发展，基因组测序技术在PRRSV-2的检测中也得到了广泛应用。

通过对PRRSV-2的基因组进行测序，可以对该病毒的进化特征、毒株变异等进行深入研究，为疫苗研发、病毒溯源等提供重要参考。

3. 免疫学检测方法除了分子生物学方法外，免疫学检测方法也是PRRSV-2检测的重要手段之一。

ELISA、免疫荧光法等免疫学检测方法可以通过检测猪血清中的抗体水平，来进行PRRSV-2感染的诊断和流行病学调查。

4. 快速检测试剂盒随着POCT（ Point of Care Testing）技术的发展，一些快速检测试剂盒也逐渐应用于PRRSV-2的检测中。

这些试剂盒可以在实验室外、无需专业设备的情况下进行快速检测，为疫情监测、动物交易等提供了便利。

以上几种技术各有优缺点，但在实际应用中可以根据需要进行选择和结合，以提高PRRSV-2的检测效率和准确性。

1. 病毒进化特征研究随着基因组测序技术的广泛应用，人们对PRRSV-2的毒株进化特征有了更深入的了解。

研究表明，PRRSV-2存在着较高的遗传多样性和进化速度，不同地区、不同时间和不同种类的PRRSV-2之间存在着较大的遗传差异，这对疫苗的制备和疫情防控提出了更高的要求。

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展猪圆环病毒2型（PRRSV-2）是一种严重危害猪健康的病毒，对猪场养殖业造成了严重的经济损失。

猪圆环病毒2型检测技术及研究的进展备受关注。

本文将对猪圆环病毒2型检测技术及研究进展进行介绍。

猪圆环病毒2型是一种RNA病毒，主要感染猪的肺泡巨噬细胞和树突细胞，引起猪的呼吸道疾病。

该病毒具有高变异性和抗原异质性，使得对其检测和控制具有一定的困难。

目前，针对猪圆环病毒2型的检测技术主要包括病毒抗原检测、病毒核酸检测和抗体检测。

病毒抗原检测是目前应用最为广泛的检测技术之一，其原理是利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或荧光素酶免疫吸附测定（FIA）等方法检测猪血清、血浆或组织样品中的猪圆环病毒2型抗原。

病毒核酸检测则是通过聚合酶链式反应（PCR）技术检测病毒在猪体内的核酸含量，可快速、准确地检测猪圆环病毒2型的感染情况。

抗体检测则是通过酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法检测猪血清或血浆中的病毒抗体水平，用于评估猪圆环病毒2型的感染和免疫情况。

近年来，针对猪圆环病毒2型的检测技术不断得到改进和提高，使得对该病毒的检测更加快速、准确和灵敏。

新型ELISA检测试剂盒的开发，可以大大缩短检测时间，提高检测的准确性；PCR技术的改进也使得对病毒核酸的检测更为灵敏和快速；抗体检测方面也出现了更加精准的检测方法，能够更好地评估猪圆环病毒2型的感染和免疫情况。

除了检测技术的不断改进之外，针对猪圆环病毒2型的研究也在不断深入。

研究人员对猪圆环病毒2型的传播途径、致病机制、病毒变异性等方面进行了深入研究，为更好地控制和防治该病毒提供了重要的理论支持。

研究人员还不断寻找新的疫苗和药物来应对猪圆环病毒2型的感染，为猪场养殖业的健康发展提供有力的支持。

一种猪圆环病毒Ⅱ型ELISA抗体检测试剂盒的临床应用

ＣｌｎｃｌＡｐｉａｉｎｓｏｉｉａｐｌｔｏｆＡｎｔｂｄｔｃｉｎＥＬＩＡｉｃｉｏｙＤｅｅｔｏＳＫｔ
ｆｒＰｏｃｎｒｏｉｕｐｅ２ｏｒｉｅＣｉｃｖｒｓＴｙ
ＺＡｕ—ｌｇ，ＩＯＹＨＯＹｏＪＡｕ—ｌＹｎｗｉ，Ｉｉｇ— ｉ，ＡＧＢｏ—ｓｏｎａ，ＵＨｏｇ— ｅＬｎｊＹＮａｎＹｅｈｕ
２１，５３：１～４４／０１４（）３３，７赵玉龙，等
中国兽药杂志
・１・３
一
种猪圆环病毒 Ⅱ型ＥＩＡ抗体ＬＳ检测试剂盒的临床应用
赵玉龙，玉兰，焦郁宏伟李莹洁杨保收，，
０１０；．北省兽医药品监察所，家庄７００２河石００５）５０１
ｃｍａｙｌｉｄａｄＺｅｉｇｕｉｒｔ．ｈｅｕｔｒｖａｄｔａｉＢｏｉｇａｅｆｅｅｐｏｉｃ０ａｐｅｏｐｎｍｔｎｈｊｎｎｅｓｙＴｅｒｌｅｅｌｔｎａｄｎｒａｏｂｉｒｎｅ３６ｓｍｌｉｅａｖｉｓｓｅｈＨｖｓ
ｒｇｎｗｒｐｓｉｉｈ３７ｏｆｃｏａ．ｈｅｕｔｓｏｅｈｔｄａｎｓｃｓｎｉｖｙＤＮ）ｅｉｅｅｏｉｖｗｔｔｅ８．％ｆｉｅｔｎｒｔＴｅｒｓｌｈｗｄｔａｉｏｔｅｓｉｉ（Ｓ，ｏｔｅｈｎｉｅｓｇｉｔｔ
ｏ４ｅｕｓｍｐｅｒｓｔｖｆ３９ｓｒｍａｌｓｗｅｅｐｏｉｉｅ，ｔｅｉｅｔｎｒｔｓ８６ｈｎｆｅｉａｅｗａ７．８％，７ｓｍｐｅｆ９ｅｍａｌｓｉｈｎｉｏ７ａｌｓｏ２ｓｒｕｓｍｐｅｎＳａｘ

猪瘟疫苗在猪圆环病毒2型阳性猪场的免疫效果观察

ｄｃｉｅａｄｒｓｉａｏｙｓｎｒｍｅｖｒｓ，ＲＲＳ）ｕｔｖｎｅｐｒｔｒｙｄｏｉｕ，ＰＶ、
的７５日龄三元猪作为本研究的试验用动物，验猪试分别来自２个猪场，中１其２头猪来自广西某ＰＶ一Ｃ２
动物医学进展。００３（１：３２２１，１１）２ —６
ＰｒｇｒｓｎＶｅｅｉａｙＭｅｉｉｏｅｓｉｔｒｎｒｄｃｎｅ
猪瘟疫苗在猪圆环病毒２型阳性猪场的免疫效果观察
潘艳，李军，榻雄标，陈泽祥，胡帅，杨威，永平，力干，宇舟谢许谢
繁殖与呼吸障碍综合征病毒（ＲＲＶ）测试剂盒ＰＳ检为北京爱德士元亨生物科技有限公司产品，圆环猪
病毒２型（Ｃ一）ＰＶ２抗体检测试剂盒为武汉科前动物
ＰＶ－Ｃ２等病毒对机体免疫系统造成损伤，得正常使的免疫应答受到抑制［。司兴奎等［通过建立８．９］
程（连）限公司产品，胶成像系统为美国Ａ１大有凝一ｐａ公司产品，ＮＡ酶抑制剂为宝生物工程（连）ｈＲ大有限公司产品。Ｔｒｏ为美国Ｉｖｔｏｅｉｌｚｎｉｇｎ公司产ｒ品，Ｖ反转录酶为美国ＰｏｇＭＬｒｍｅａ公司产品，猪瘟病毒（ｌｓｉｌｗｉｅｆｖｒｖｒｓＳＶ）体和猪Ｃａｓａｓｎｅｅｉ，ＣＦ抗ｃｕ

国内5种猪圆环病毒PCV2抗体检测试剂盒的比较试验

国内5种猪圆环病毒PCV2抗体检测试剂盒的比较试验吴华伟;高金源;邓永;范鹃;郎洪武;陈晓春【摘要】为了解国内PCV2灭活疫苗效力检验用PCV2抗体检测试剂盒的质量,参照农业部第683号公告有关规定,对国内5个厂家生产的5种PCV2抗体检测试剂盒进行了敏感性、特异性和符合率测定,并比较了试剂盒间的符合率.结果表明:5个PCV2抗体检测试剂盒特异性检测结果均在90%左右,但敏感性差异较大(57.7%～100%),且各试剂盒间检测结果的符合率较差(仅为63.2%).总体来看,国产PCV2抗体检测试剂盒质量参差不齐,仅2个试剂盒适合用于PCV2抗体检测.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2011(045)006【总页数】3页(P11-12,15)【关键词】猪圆环病毒;抗体检测试剂盒【作者】吴华伟;高金源;邓永;范鹃;郎洪武;陈晓春【作者单位】中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;扬州优邦生物制药有限公司,江苏扬州,225008;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081【正文语种】中文【中图分类】S852.659.2猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)，属于圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属的成员，是目前发现的最小的动物病毒。

自20世纪90年代发现该病毒以来，PCV2病毒在世界各国迅速蔓延。

我国于2000年检测到了该病毒的存在［1］。

PCV2抗体检测对于进行PCV2流行病学调查、疫苗效果评价及试验用阴性猪的筛选等具有重要意义。

目前，PCV2抗体检测的常用方法有病毒中和试验(SN)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验法(IPMA)。

鉴于SN方法费时耗力，且PCV2病毒在细胞上很难出现细胞病变，常需借助免疫荧光试验(FA或IFA)进行结果判定。

猪圆环病毒2型抗体胶体金检测试纸条的研制

断奶仔猪多系统衰竭综合征（ｏ —ｗａｉＰｓｔｅｎｇｎｍｌ —ｓｓｍｃｗｓｎｙｄｏｅＰｕｔｙｔｉａｔｇｓｎｒｍ，ＭＷＳ主要是由ｉｅｉ）猪圆环病毒２型（Ｃ一２引起。猪圆环病毒有ＰＶ）ＰＶ一１ＰＶ一Ｃ和Ｃ２两种基因型，ＣＰＶ一１不具有致病性，在正常血清中广泛存在。ＯＦ但Ｒ１编码Ｒｐｅ蛋白，引起ＰＶ两个血清型之间抗原交叉反应是Ｃ的主要原因，因此只能用于鉴别ＰＶ¨ 。ＯＦＣＲ２编码病毒衣壳蛋白（ａＣｐ蛋白）具有很强的免疫原，性，两型之间不存在抗原交叉反应。因此Ｃｐ蛋在ａ白可作为ＰＶ一Ｃ２抗体检测的首选抗原］。本文通过表达的Ｃｐ蛋白，ａ结合胶体金标记技术，建立ＰＶ一２抗体胶体金检测试纸条，养猪场开展Ｃ为ＰＶ一抗体监测提供简便方法。Ｃ２
Ａｂｔａｔａｅｎｔｅｐｎｉｌｆｃｌｉａｏｄｉｓｒｃ：Ｂｓｄｏｈｒｃｐｅｏｏｌｄｌｌｍｍｕｏｈｏｔｇａｈｉｏｇｎｃｒｍａｏｒｐｙ，ｗｔｈｒ —ｓｄｕｃｔｔｅｕｔｎｉｔｅｔｉｏｉｍｉａｅｒｄｃｉｈｒｏｍｅｈｄ．ｃｌｉａｏｄｓｐｗａｒｐｒｄａｄａｐｉｄｔｅｅｔｔｅａｔ —ＰＶ一２ａｔｏｙＣ一２ａｄａｔ — ｔｏｏｌｄｌｇｌｔｓｐｅａｅｎｐｌｄｔｃｈｎｉＣｏｉｒｅｏｎｉｄ．ＰＶｂｎｉｎＰＶ一２ＭｏｏｌｎｌａｔｏｙｗｓｃａｅｎｔｅｔｓｒｇｏｎｏｔｏｏｅｒｓｅｔｅｙｈｃｕａｙｏｒｓＣｎｃｏａｎｉｄａｏｔｄｏｅｔｅｉｎａｄｃｎｒｌｚｎｅｐｃｉｌ．Ｔｅａｃｒｃｆｓｐｉｂｈｖｔｉ

猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗(LG株)在规模猪场的应用效果观察

一
，
（）空白对照组：选取未免疫疫苗的繁殖母２猪、哺乳仔猪各３。０头试验过程中繁殖母猪疫苗免疫组记录母猪生产成绩如：总产仔数、产活仔数、死胎、平均产活仔数、均出生重，猪２ｌ平均重和２平仔８Ｅ龄８日龄断奶窝活数；猪疫苗免疫组记录５ｌ、０１龄、ｆ０Ｅ龄９３１０日龄各阶段成活率、５发病情况。分别在２１日龄，２８日龄，２Ｅ龄、９Ｅ龄、６１龄进行ＰＶ４ｌ４ｌ５３Ｃ２抗体检测。并按下列公式计算猪群免疫保护率。猪群免疫保护率＝（免疫组死胎弱仔率一免非疫组死胎弱仔率）／非免疫组死胎弱仔率Ｘ１０％０２结果与分析
察１周有无异常反应，如无异常即开展下面的试验。１试验褚群．４繁殖母猪疫苗免疫组：３将批受试疫苗随机选择母猪３群进行疫苗免疫，每批免疫母猪１３。分群０头别在产前一个月颈部肌肉注射疫苗２Ｌ头。ｍ／（）仔猪疫苗免疫组：将３批受试疫苗随机１选择仔猪３群进行疫苗免疫，每批免疫１３头，群０分别以颈部肌肉注射方式在１４日龄一免ｌＬ头，ｍ／
２１安全试验．
１材料与方法１疫．１苗
ＰＶ灭活疫苗（Ｃ２ＬＧ株）由哈尔滨维科生物技术开发公司提供，批号为２１０３２１０４２１０５０００，０００，０００。
１ＥＩＡ抗体检测试剂盒．２ＬＳ
试验结果表明，Ｃ２疫苗免疫２ＰＶ８日龄断奶仔猪未见异常反应，明疫苗是安全的。说２２母猪免疫后的生产成绩．

嵌合型猪圆环病毒PCV1-2 及PCV2 ORF2 真核表达

嵌合型猪圆环病毒PCV1-2及PCV2 ORF2真核表达质粒对商品猪的免疫保护研究1程旭，宋益，盛瑜，高崧，刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室，江苏扬州（225009）E-mail：gsong@摘要：应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒PCV1-2及真核表达质粒pcDNA3.1/V5-His-orf2作为免疫原免疫母源抗体ELISA效价在0.07-0.60不等的商品猪，九头猪随机分为四组，第1组为3头，其余3组均为2头。

第1组肌肉注射免疫TCID50为10 3.5的PCV1-2病毒/头，第2组肌肉注射真核表达质粒200µg/头, 第3组肌肉注射空载体（pcDNA3.1）200µg/头, 第4组不免疫作为攻毒对照组。

在免疫后42天，PCV1-2组及真核表达质粒组产生了PCV2抗体。

免疫后42天所有组攻毒PCV2和PRRSV，剂量分别为2×104.5TCID50/头和106TCID50/头。

攻毒后21天攻毒对照组猪淋巴结比免疫组猪显著肿大，免疫组猪血清、淋巴结中PCV2病毒载量低于对照组，攻毒对照组猪淋巴结中PCV2抗原含量高于免疫组，这些结果表明嵌合型猪圆环病毒PCV1-2及真核表达质粒肌肉注射免疫商品猪后，对PCV2感染能产生保护性免疫应答，有可能成为候选疫苗。

关键词：嵌合型猪圆环病毒PCV1-2，真核表达质粒，免疫保护猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）是由Tisher等于1974年在PK15细胞中发现[1]。

该病毒为20面体对称，无囊膜，以滚环方式进行复制，其基因组是一种环状、单股负链DNA。

该病毒有两个基因型：PCV1和PCV2。

前者无致病性，广泛存在于猪群中；后者首先由Allan 等从患断奶仔猪多系统衰竭综合征（postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）的猪群中分离并证明为PMWS的重要病原[2]，该病以进行性消瘦，呼吸困难，淋巴结肿大，发育迟缓，黄疸及皮肤苍白等为主要特征[3，4]。

成年种公猪圆环病毒2型血清抗体的检测结果初报

１材料与方法
表１不同品种成年公猪圆环病毒２型血清抗体检测结果
辐射范围较广，Ｃ一种公猪群中的高感染率对ＰＶ２在
养猪业的发展有较大影响，因此对种公猪进行健康
监测尤为重要。
３２本试验主要从６个较大的生猪供精站随机采．
３１由于生猪人工授精站种公猪精液的对外供用，．
收稿日期：０００—８２１—１１
ｒｌｆｃｅｏｒ［￣ＪＶｅＤａｎＩｖｓ，０６１：８ —８．ａｙｉｅｔｄｂａｓＪ．ｔｉｎｅｔ２０，８３０３４ｌｎ－ｇ
Ｅ］安徽农业科学，０８３（）１２，４８Ｊ．２０，６４：３４１１．［］曹杰，春傲．口径牛瘤胃瘘管手术新方法［］畜牧与兽医，２王大Ｊ．
３讨论
［］ＭｃｎｏｈＫＨａｄｎＰｒｅ，ｔ１Ｎｅｔｄｐｌｍｅ— ２ＩｔｓＡ，ｒｉｇＪＣＳ，ａｋｒｅａ．ｓｅｏｙｒｓ
ａｅｃａｎｒａｔｏｅｅｔｏｎｄｄｒｔｎｏｏｃｎｅｃｒｏｉｕｓｈｉｅｃｉｎｄｔｃｉｎａｕａｉｆｐｒｉｉｃｖｒｓｏｔｐｅ２ｉｅｎｗｉｈｓｅｍｒｈｌｇｃｌａａｙｓｓｆｏｎｔ — ｕｎｓｍｅｔｐｒｍｏｐｏｏｉａｎｌｉｒｍａｕ
１１待检血清样品按各站公猪数的３进行抽．０样，临床健康的５对４头成年种公猪（中杜洛克１其５头，白１长８头，大约克２１头）静脉采血，采集血耳共清５４份，分离血清， ℃保存待检。所有公猪均未免４疫过任何猪圆环病毒２型疫苗。１２主要试剂猪圆环病毒２型ＩＧ检测试剂盒．ｇ（够检测猪血清中抗ＰＶ一能Ｃ２的ＩＧ抗体）荷兰赛ｇ，迪公司产品（号为３１０）批１０５。１３血清抗体的ＥＩＡ检测方法按照猪圆环病．ＬＳ毒间接ＥＩＡ检测试剂盒说明进行抗体检测。ＬＳ

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

ｄｔｃｉｎｏｎｉｏｉｓａａｎｏｃｎｉｏｉｓｔｐｅｅｔｆａｔｄｅｇｉｔｐｒｉｅｃｒｖｒｙｅ２ｏｂｃｕ
ＺＨＡＮＧＺｈａ－ｉ，ＬＩＣｈｎ－ｉＥＩＹａＶＵ，ＹＵＡＮｉ，ＨＵＡＮＧ－ｉｏｘａＵａｇｍｎｇ，Ｗｎ－（ＪｎｇＬｉｐｎｇ
方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株（ｆ１接种重组杆状病毒，对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化，制备了Ｓ－）２５重组蛋白抗原，表达量占总蛋白的１．％左右；Ｎ２亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为９．％；重组蛋白批８７ｉ０１可被特异性抗体识别，具有良好的免疫活性。用建立的ＥＩＡ法对３ＬＳ０份已知阴性血清样本检测临界ｏ４值为Ｄ蛐０３３ＬＳ与ＩＭＡ对１０血清进行平行检测符合率为９．，特异性为９．．；ＥＩＡ４Ｐ５份５３％１２％，敏感性为９．；与其６５％
他几种常见猪病毒参考血清无交叉反应。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为４．０％～４８．％和８．９％～９．９％；
置－０℃保存１２２个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果，接种后第５周抗体阳转，第８周～９周抗体水
猪圆环病毒２型ＥＩＡ抗体检测试剂盒的研制及应用ＬＳ
张朝霞，刘长明，危艳武，袁婧，黄立平
（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／传染病研究室，黑龙江哈尔滨１ＯＯ）猪５Ｏ１

猪圆环病毒检测卡说明书(完整版)

猪圆环病毒抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【产品名称】通用名称：猪圆环病毒抗体快速检测试剂盒（胶体金法）汉语拼音：Zhu Y uanhuan Bingdu Kangti Kuaisu Jiance Shiji He(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪圆环病毒(Pseudorabies,PR)抗体。

【原理】猪圆环病毒抗体检测试剂盒（胶体金法），系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本（全血、血清、血浆）中抗猪圆环病毒抗体的方法。

整个试验只需20分钟，操作简便、快速、准确，灵敏度高、结果直观、容易判定。

本试剂盒内还设计一张“金标试纸与ELISA试验实物参照图”，用试纸检测线的颜色与实物参照图对照，便可粗略估计样品中的抗体滴度。

【试剂盒组成】1.猪圆环病毒抗体检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【试验方法】1.在检测卡的加样孔内加入2滴（100ul）待检血清或血液样品。

2.将检测卡平放于桌面上，在室温下静置20分钟内判定结果。

超过20分钟的结果只能作为参考。

【产品特点】1.敏感：阳性检出率达到98%；2.特异：不与其它常见猪病如猪瘟、伪狂犬、细小病毒发生交叉反应，特异性97%；3.方便：肉眼判断、无需仪器、操作简单；4.快速：20分钟即可以出结果，有利于疫情的快速鉴别和免疫水平监测；5.用途：适合于各级防检部门、猪场、兽医站广泛使用。

【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。

检测线(T)的颜色越深，表明猪圆环抗体的滴度越高。

阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。

无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。

【诊断参考】1.如果该猪未接种过猪圆环病毒疫苗:a)当被检样品检测线（T）处无明显色带出现，说明被检测样品中没有猪圆环病毒抗体。

如果猪群健康，应当及时进行猪圆环病毒疫苗接种。