侵袭性曲霉菌感染检查方法
侵袭性真菌病实验室诊断方法临床应用
一、微生物学检查的临床应用
3.血清学检查 ● 样本类型多为血清，部分检查可用于脑脊液、BALF或其他体液。 ● 常用方法为：隐球菌荚膜多糖抗原检测（CrAg）、曲霉半乳甘露聚糖
抗原检测（GM实验）和真菌1，3-β-D葡聚糖检测（G实验）。 ● 隐球菌荚膜多糖抗原检测用于诊断隐球菌病，脑脊液或血清抗原阳性
是隐球菌病的确诊证据。
一、微生物学检查的临床应用
● GM实验适用于怀疑侵袭性曲霉病的患者，检查血清或BALF。阳性结 果是侵袭性曲霉病临床诊断证据之一。还需要结合临床表现、其他真菌 学检查以及影像学表现综合判断。
● G实验可用于怀疑侵袭性真菌病（包括念珠菌病、曲霉病、肺孢子菌 病等，不包括隐球菌病、毛霉病）的患者。阴性结果排除真菌感染的意 义更大。
检测中有应用前景。 ● 二代测序不作为常规检测推荐，疑难病例可开展对无菌组织、无菌体
液或BALF的二代测序。
二、组织学检查的临床应用
● 免疫抑制人群怀疑真菌感染时，应尽可能做组织活检。 ● 活检组织做病理学检查同时，应采集新鲜组织做组织真菌培养。 ● HE染色不易发现真菌成分，应做针对真菌的特殊染色：六胺银染色
荧光染色后进行真菌直接显微镜检查。
一、微生物学检查的临床应用
2.真菌培养和鉴定 ● 在送检真菌培养检查同时，应尽可能同时送检真菌直接镜检。 ● 组织标本进行组织病理检查时，同时应进行真菌培养检查。 ● 真菌培养所需时间长于细菌培养，一般需要7 d，特殊情况需要2~4周
以上，如果怀疑双相真菌感染（马尔尼菲篮状菌、组织胞浆菌等），应 同时在28 ℃和37 ℃两个温度下培养。
侵袭性真菌病的 实验室诊断方法临床应用
一、微生物学检查的临床应用
1. 真菌直接镜检 ● 怀疑真菌感染患者的BALF标本及无菌体液（除血液外），应做真菌直
一文读懂侵袭性真菌病的G试验和GM试验
一文读懂侵袭性真菌病的G试验和GM试验侵袭性真菌病（invasive fungal disease, IFD）系指真菌侵入人体，在组织、器官或血液中生长、繁殖，并导致炎症反应及组织损伤的感染性疾病。
随着器官移植、肿瘤化疗、免疫抑制剂使用、侵袭性操作等不断增多，侵袭性真菌病的发病率越来越高，尤其是免疫功能低下者。
早期诊断及恰当的抗真菌治疗是降低病死率的关键，但IFD 的临床表现相对缺乏特异性，仅根据临床症状难以早期诊断，故误诊率高。
因此，所有国内外IFD指南中均明确指出，临床诊断和确诊的依据必须包括病原微生物的实验室检查，后者是诊断标准极为重要的组成部分。
临床上迫切希望能有更加简便、快速、创伤性小、耐受性好、敏感性和特异性均较高的检测方法，帮助临床早期诊断和及时治疗。
因此，近些年来，G试验和GM试验得到了大家的关注和热门推崇，其在临床上用于诊断侵袭性真菌病具有非常重要的价值和意义。
什么是G实验？G试验是用于检测真菌细胞壁主要成分之一的(1-3)-β-D葡聚糖，因为其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有此成分，且人体发生侵袭性深部真菌感染过程中，(1-3)-β-D葡聚糖可持续释放入血及其他体液中，使其含量增高（浅部真菌感染无类似现象）。
在临床表现、微生物学证据及胸部高分辨率CT出现征象前，血清中(1-3)-β-D葡聚糖水平已经高于正常值（比发热或其他临床症状平均早4～5天，比胸部高分辨率CT平均早9.3天），且不受机体免疫状态影响。
因此，血液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据，对除了隐球菌和接合菌之外的所有侵袭性深部真菌感染的早期诊断具有重大意义，即可用于念珠菌属、镰刀菌属、曲霉属、青霉/拟青霉、毛孢子菌等真菌所致侵袭性感染的诊断，能很好地指导临床及早使用抗真菌药物，尤其是对于念珠菌血症，G试验是首选检验。
G试验的缺点是仅可判定是否存在真菌感染，但不能确定真菌的具体菌种，且接合菌（毛霉、根霉等）或隐球菌感染时，G试验为阴性。
侵袭性真菌感染的3种免疫学检测方法的应用研究
侵袭性真菌感染的3种免疫学检测方法的应用研究肿瘤、AIDS患者、器官移植、导管留置及相应药物的广泛使用，使得侵袭性真菌感染的患者在不断增加。
侵袭性真菌感染现在使用最普遍的免疫学检测方法包括G实验、GM实验和隐球菌荚膜多糖抗原检测，具有灵敏度高，特异性强等特点，作为早期检测工具，为侵袭性真菌感染的病情诊断和用药评价提供了参考依据。
该文就此3种常见的免疫学方法在临床中的应用研究作一综述。
标签：侵袭性真菌感染；免疫学检验方法；应用研究Application Research on Three Immunologic Test Methods of Invasive Infections with FungiJIAO Er-li，LI Yue-yu，MA Wen-huiInner Mongolia Steel Hospital，Baotou，Inner Mongolia，014010 China [Abstract] The wide application of tumor，AIDS patients，organ grafting，catheter retaining and corresponding drugs makes the patients with invasive infections with fungi constantly increase，the most common immunological method of invasive infections with fungi at present included G experiment，GM experiment and cryptoceccal capsular polysaccharide antigen test with characteristics of high sensitivity and strong specificity，as an early test tool，it provides reference basis for the disease diagnosis and medication assessment of invasive infections with fungi. The paper summarizes the application of the three common immunologic methods in clinic.[Key words] Invasive infections with fungi；Immunology detection method；Application research随着实体器官的移植、骨髓的移植、留置导管、肿瘤及AIDS患者等的增多，临床对免疫抑制剂、抗生素、激素以及抗肿瘤药物等的广泛使用，侵袭性真菌感染（IFI）的病人也在不断增加。
半乳甘露聚糖检测用于侵袭性曲霉菌早期感染诊断的研究
半乳甘露聚糖检测用于侵袭性曲霉菌早期感染诊断的研究目的评价酶联免疫吸附试验（ELISA）检测半乳甘露聚糖（GM）抗原在侵袭性曲霉菌（IA）早期感染诊断和疗效监测中的临床价值。
方法以62例呼吸内科、重症医学科及血液内科造血干细胞移植（HSCT）患者为研究对象，针对患者连续检测，共检测标本188份。
采用ELISA法测定患者血清中GM含量，测定浓度可达0.5ng/ml。
同时对所选病例进行G实验检测和真菌培养，所得结果与GM结果联合分析。
结果以1.0为阳性界值，GM检测的敏感性为53.8%，特异性100%，诊断符合率88.7%；以0.5为阳性界值，敏感性为84.6%，特异性96.7%，诊断符合率95.2%。
G实验显示以GM0.5为阳性界值GM阳性患者血浆（1-3）-β-D-葡聚糖含量为（68.58±12.76）pg/ml，GM阴性患者血浆（1-3）-β-D-葡聚糖含量为（3.18±1.25）pg/ml，两组数据经t-检验比较具有统计学意义（P＜0.05）。
GM检测可早于真菌培养方法9d预测曲霉感染。
曲霉菌感染患者GM的连续监测显示抗曲霉菌治疗前GM水平保持在较高水平，抗真菌治疗有效患者的GM 含量呈下降趋势，无效死亡患者仍保持较高水平。
结论血清GM检测是侵袭性曲霉菌早期感染诊断和疗效监测的有用指标，与G实验联合应用判断效果更好。
标签：半乳甘露聚糖；曲霉菌；早期感染近年来侵袭性曲霉菌感染（IA）发病率逐渐增多，已经成为免疫功能低下患者致死率高的主要原因。
有报道称在造血干细胞移植（HSCT）患者中IA的发病率为2%～26%，实体器官移植患者中的发病率为1%～15%，死亡率可达到74%～92%。
在中性粒细胞减少的患者（抗肿瘤治疗后）和使用免疫抑制剂（干细胞移植、器官移植特别是骨髓抑制）或皮质类固醇的患者，患者一旦发生曲霉菌感染，死亡率高达50%～90%。
研究开发早期、快速、准确的诊断方法对疾病的预后具有决定性的意义。
曲霉菌检测 曲霉菌感染检测经典方法
曲霉菌感染检测经典方法-GM试验半乳甘露聚糖（Galactomannan，GM）抗原检测曲霉菌感染的经典血清学方法之一，简称GM试验。
半乳甘露聚糖是曲霉菌特有的细胞壁多糖成份，当机体感染曲霉菌后，随着菌丝生长，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放出来，是最早释放的抗原，被认为是一种可靠的侵袭性曲霉菌感染早期诊断的生物标记物。
半乳甘露聚糖抗原具有热稳定性和可溶性，通常可在血清，脑脊液和肺泡灌洗液中检测。
GM的释放量通常与感染的菌量成正相关，可反映机体感染的程度。
每周两次使用GM试验对高危患者的病情和治疗效果进行监测和评估。
临床中的高危人群是免疫功能缺陷和高剂量服用激素患者，如：恶性血液肿瘤，实体器官移植，移植物抗宿主疾病患者等，所以GM的应用科室通常分布在血液科，移植科（中心），肿瘤科，呼吸科，ICU，皮肤科和儿科。
GM试验的开展除了在公立医院实验室辅助临床医生诊断侵袭性曲霉菌病外，还可在大型私立实验室和一些制药公司做新抗真菌药物的药效评估。
GM抗原检测是欧洲癌症研究和治疗组织（European Organization for Research and Treatment Cancer, EORTC）和真菌病研究组（Mycoses Study Group, MSG）推荐的侵袭性曲霉菌病的真菌学检测标准之一，美国Bio-Rad公司研发的用于检测血清中GM抗原的曲霉菌抗原检测试剂盒（PlateliaTM Aspergillus Ag），在2014年初获得CFDA批准。
Bio-Rad公司的曲霉菌抗原检测试剂盒（PlateliaTM Aspergillus Ag）（见下图）采用酶联免疫双抗体夹心分析法检测血清中半乳甘露聚糖抗原。
经典的ELISA检测流程，灵敏度性和特异性分别达到了92.1% 和97.5%，[1] 最低检出限为0.4ng/ml，可在临床症状出现前6天和诊断前10 天即可检出GM抗原，[2] 真正实现侵袭性曲霉菌病的早期诊断。
肺部侵袭性曲霉菌感染的实验室检查
来， 随着 抗 肿 瘤 药 物 、 免 疫 抑 制 剂 和 器 官 移 植 等 治 疗 的广 泛 开
展， 以及 在 危 重 患 者 中广 谱 抗 生 素 的 长 期 使 用 ， 侵 袭 性 真 菌 感
菌， 所 以其检测 阳性只能提示深 部真菌感染 的存在 ， 无 法 用 于 具 体 种 属 的 鉴 定 。其 检 测 原 理 是 通 过 １ ， ３ 一 Ｄ 葡 聚 糖 肽 链 葡
医 院检 验 科 ２ １ ０ ０ ２ ９ ）
【 摘 要】 目的 了解 半 乳 甘 露 聚 糖 （ ＧＭ 试 验 ） 和 ０ — １ ， ３ 一 Ｉ ）葡 聚糖 （ Ｇ试验 ） 在 肺 侵 袭 性 曲霉 菌 感 染 检 查 中 的 作 用， 为临 床诊 断 肺 曲霉 菌 病提 供 帮 助 。方 法 。 对该 院 ２ ０ １ １年 １ ～１ ２月 ３ ２例 临 床 疑 似 肺 曲 霉 菌 感 染 患 者 的 痰 液 、 肺
染（ ｉ ｎ ｖ ａ ｓ ｉ ｖ ｅ ｆ ｕ ｎ ｇ ａ ｌ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ， Ｉ Ｆ Ｄ ） 的发 病 率 逐 年 上 升 ¨ １ 。随 着 氟
康唑在高危人群 中广 泛预 防性 使用 ， 白 色 念 珠 菌感 染 有 所 减
少， 而 非 念珠 菌 及 曲 霉 菌 的 感 染 有 所 增 加 ｌ ２ ］ 。 临 床 Ｅ由 于 侵 袭 性 曲霉 菌 病 的增 加 ， 如 何 正 确 地诊 断 和 准确 检测 曲霉 菌感 染
［ ３ ］ 王培 华 ． 输 血技 术学 ［ Ｍ］ ． ２版 ． 北京： 人 民卫 生 出版社 ，
２０ｌ ０： １ ６７ １６ ８ ．
肺 部侵 袭性 曲霉 菌 感 染 的 实验 室检 查
许 英 ， 陈友华 （ １ ． 江 苏省 泰 州市 中医院检验 科 ２ ２ ５ ３ ０ ０ ； ２ ． 南 京 医科 大 学第一 附属
侵袭性肺曲霉病诊断及治疗论文
侵袭性肺曲霉病诊断及治疗【中图分类号】r519 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2013）05-0743-02侵袭性肺曲霉病（invasive pulmonary asper.gillosis，ipa）指由曲霉引起的支气管肺部真菌感染，临床分为原发性和继发性。
原发性ipa较罕见。
继发性侵袭性肺曲霉病的易感人群主要是免疫功能低下者，包括接受高剂量免疫抑制治疗、中性粒细胞减少症、造血干细胞移植（hsct）术后、实体器官移植术后、艾滋病及cgd 者。
值得注意的是，侵袭性曲霉病也可发生在免疫功能正常者，如慢性坏死性肺曲霉病常发生在存在结构性肺病（如肺结核及肺脓肿等）的患者，或轻度免疫功能低下的患者（如糖尿病、营养不良及慢性阻塞性肺疾病等），甚至接受低剂量糖皮质激素治疗者，以及无免疫性疾病史的其他疾病重症患者。
目前ipa的诊断主要根据临床高危因素、临床症状、胸部影像学及实验室诊断，治疗主要以抗真菌药物为主。
1 ipa的诊断ipa是一种严重的真菌感染，病死率高达62 ～85% ，如在慢性阻塞性肺疾病（copd）中lpa的病死率可高达67%～100%[1]，与中性粒细胞缺乏症合并lpa患者相比，在无中性粒细胞缺乏症合并ipa 者重的ipa病死率更高[2]。
确诊病例需要组织病理学依据或自正常无菌部位标本曲霉培养呈阳性。
临床诊断病例需有宿主因素（如发生于中性粒细胞减少症、移植及接受免疫抑制治疗者等）、临床依据（症状、体征和影像学特征）和微生物学证据，拟诊病例需有高危因素，临床症状。
现常用的检查方法有以下几种。
1.1 ct早期影像学表现为胸膜下单发或多发结节或斑片状阴影，数天后病灶周围出现晕轮征，10～15d后肺实变区周围坏死、液化出现新月征。
这是较为特征的征象。
但能够侵犯血管的其他真菌（如隐性菌、毛霉及根霉等）或细菌（如铜绿假单孢菌等）感染也可产生类似的ct征象。
除前述典型征象外，ct显示楔形梗塞或空洞形成对诊断也有帮助。
过敏性支气管肺曲霉菌病、半侵入性或慢性坏死性曲霉菌病、侵袭性曲霉菌病等肺曲霉菌病影像表现及鉴别诊断
临床曲霉菌、过敏性支气管肺曲霉菌病、半侵入性或慢性坏死性曲霉菌病、侵袭性曲霉菌病等肺曲霉菌病影像表现及鉴别诊断早肺曲霉病感染并不罕见，特别是在慢性阻塞性肺病和免疫力下降的情况下。
CT在检测隐匿性或小病变方面比普通胶片更敏感，在描述疾病程度和曲霉菌数量方面更准确。
自信的诊断很困难，它基于细胞学和组织学。
肺曲霉病是一种真菌感染，大部分时间由烟曲霉（Spergillus Fumigatus）引起，烟曲霉是自然环境中广泛存在的条件致病真菌，其产生的气传袍子，可被吸人呼吸道末端，引起曲霉致敏相关的疾病，例如过敏性哮喘、过敏性肺炎、变应性支气管肺曲霉病(Allergic bronchop-ulmonary aspergillosis, ABPA)等疾病。
区分4种类型的肺曲霉病。
1、曲霉菌（腐生性曲霉病）。
2、过敏性支气管肺曲霉菌病（ABPA）。
3、半侵入性或慢性坏死性曲霉菌病。
4、侵袭性曲霉菌病（可分为气道侵袭性和血管侵袭性）。
曲霉菌免疫活性宿主中的曲霉菌感染。
最常见的根本原因：结核病，结节病，肺气肿，支气管扩张，肺尘埃沉着病，纤维化肺病，肿瘤，肺梗塞，支气管囊肿，肺隔离症和继发于肺孢子虫肺炎的肺气肿。
单个或多个，它主要发生在上叶。
曲霉菌的临床表现是咯血。
胸部X光片和CT扫描显示（图：1,2,3,4,5,6,7）：1、肺部空腔，包含坚实的圆形物质，通过空气边缘与墙壁分开。
此功能称为“空气新月”标志。
2、另一个常见特征是腔壁和邻近胸膜增厚。
3、这种真菌球可能是移动的。
图1：腐生性曲霉菌。
肺窗仰卧MDCT扫描显示重力依赖性腔内肿块。
图2：腐生性曲霉菌。
图1患者的俯卧MDCT扫描，肺窗显示重力依赖性腔内肿块。
图3：轴向CT显示55岁女性的曲霉病患者发现空气新月形上叶与固结区域相关，周围有磨玻璃样改变。
图4：轴位CT显示右下叶的团块，中央区域为空洞，考虑诊断为曲霉菌，术后诊断为肺癌。
图5：矢状图显示了与支气管扩张相关的右上叶曲霉瘤。
侵袭性肺曲菌病的CT表现及相关病理
(CTPA) findings and proven invasive mold disease.
Clinical Infectious Diseases 2012;54(5):610–6
影像表现-血管侵袭型曲菌病
9. 肺门或纵隔淋巴结肿大 10.胸腔积液
青岛大学附属医院
19
青岛大学附属医院
20
细菌球形肺炎
曲霉菌，20天
青岛大学附属医院
21
分类
血管侵袭性 气道侵袭性（支气管肺炎型） 慢性坏死型（半侵袭型）
Coagulati on Necrosis
影像表现-血管侵袭型曲菌病
3. 反晕轮征 （reversed halo sign)
圆形磨玻璃样被实 性实变肺组织环包 绕
病理：肺梗死伴出 血，外周重
青岛大学附属医院
10
影像表现-血管侵袭型曲菌病
4. 空气半月征
肿块或结节内半月 形气体密度影，实 际为空洞
Day 0
7
青岛大学附属医院
14
CAILLOT et al. JClinOncol 2001;19:253
0114
M/5Y， 急淋
0120
0207
15
030青岛大学附属医院
影像表现-血管侵袭型曲菌病
6. 单发或多发楔形高密度 影，内见空气支气管征 病理基础：肺亚段、 段或叶的梗死；或真 菌侵袭支气管壁, 向 远侧播散，产生炎性 渗出，实变
侵袭性曲霉菌病的诊断
河南省人民医院放射科
应用激素等综合治疗后（2012-5-1）
ogo
甲功五项较2012-4-18好转
T3:0.36ng/ml(0.61-1.81) T4:4.5ug/dl(4.5-10.9) FT3:2.39pmol/L(3.5-6.5) FT4:11.42pmol/L(11.5-22.7) TSH3UL:0.003uIU/ml(0.55-4.78)
临床以黄疸原因待查收住入院
河南省人民医院放射科
入院辅助检查
2012-4-18 血常规：
ogo
WBC:5.8×109/L,Neu:4.1×109/L,RBC:4.91×1012/L,Hb:141g/L,PLT:90×109/L
AFP:141.60ng/ml(0-16) CEA:2.5ng/ml(0-6)
河南省人民医院放射科
2015-1-5MRI
ogo
2018/7/2
河南省人民医院放射科
37
ogo
2015-1-1应用伏立康唑治疗后，发热、咳 嗽及咯血症状逐渐好转 2015-1-5出现右眼视物模糊 2015-1-8日右眼失明
河南省人民医院放射科
2015-1-6CT
ogo
2018/7/2
河南省人民医院放射科
ogo
河南省人民医院放射科
肝脏相关实验室检查
ogo
HBV-M: HBsAg:阳性 HBsAb:阳性 HBeAg:阳性 HBeAb:阴性HBcAb:阳性
HBV-DNA:2.55×105IU/ml 肝功能： ALT:380U/L AST:299U/L TP:57.8g/L ALB:38.1g/L GLO:19.7g/L TBIL:616.7umol/L DBIL:391.4umol/L IBIL:255.3umol/L ALP:248U/L GGT:59U/L PA:28mg/L CHE:1.8KU/L TBA:336.3umoL/L
侵袭性曲霉病的诊断与治疗指南
前言
▪ 侵袭性真菌病（invasis fungal disease，IFD）的诊断分为确诊、 临床诊断、拟诊和未确定四个级别[1]，针对上述四个级别的治疗 策略也各有不同。
▪ 国内外相关指南均明确指出：临床诊断和确诊的依据必须包括病 原微生物的实验室检查，实验室检查是诊断标准极为重要的组成 部分。
断为金标准，NGS的灵敏度显著高于培养（50.7% vs 35.2%）， 而二者的特异度无显著区别。对于新发、罕见、疑难的感染性疾 病，以及免疫缺陷患者，NGS能显著提高病原体的检出率，可作 为上述疾病的一线检测方法。
侵袭性曲霉病的诊断
▪ 但NGS用于诊断IA时仍存在一定的局限性[15,16]： ①检测的敏感性与人源背景微生物水平相关； ②临床标本来源复杂多样，可能存在病原体信息太少而导致数据丢失或数据混杂； ③缺乏标准数据及统一的数据分析流程； ④数据库的完整性及准确性参差不齐，且检测人员及技术水平对检测结果亦存在影响； ⑤NGS技术自身的局限性； ⑥多数mNGS检测需在第三方实验室集中进行，样本寄送耗时较长； ⑦价格昂贵、基因量少等。
▪ 17项研究的荟萃分析及系统汇总：BALF PCR检测诊断确诊及临床诊断IA的敏 感性和特异性分别达91%和92%；阳性似然比为11.90，阴性似然比为0.10[13]。
侵袭性曲霉病的诊断
▪ 近年来，NGS被逐渐用于IA等感染性疾病的诊断。 ▪ 指南明确指出[14]：NGS对真菌的检出率显著高于培养；以临床诊
▪ 曲霉菌侵袭累及肺泡和细支气管壁，影像学可呈现非特征性改变 如支气管周围实变影、支气管扩张征、小叶中心型微小结节影、 树芽征和磨玻璃样改变等表现，为曲霉菌气道侵袭特征性表现。
▪ IPA特征性CT影像学包括：致密、边界清楚的病变（伴或不伴晕 征）、空气新月征、空洞、楔形/节段性或大叶性病灶[1]。
侵袭性真菌感染的实验诊断-2011
LA ELISA
25-70 50-90
90-100 80-90
Sabetta et al. JID 1985; 152: 946 Ansorg et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1994; 13: 582 Verweij et al. JCM 1995; 33: 3150 Maertens et al. Blood 2001; 97: 1604 Herbrecht et al. J Clin Oncol 2002; 20: 1898
一、念珠菌属（Candida）
以下列念珠菌属最常见:
白色—（C.albicans）
光滑—（C.glabrata） 热带—（C.tropicalis） 近平滑—（C.parapsilosis） 克柔—（C.krusei） 都柏林—（C.dubliniensis） 季也蒙—（C.guilliermondii）。
菌,季也蒙念珠菌和葡萄牙念珠菌
近平滑念珠菌BG水平较低
Clin.Infect. Dis. 2005.41:654–659.
J. Clin. Microbiol. 2005.43:5957–5962
J. Clin. Microbiol. 2008.46:1009–1013
BG检测用于念珠菌血症
BG检测敏感度明显高于Mannan检测
曲霉菌孢子是链状的，成熟后脱落， 2~5μm，易在空气中悬浮。
经空气吸入孢子致病，与定植无关。
曲霉鉴定主要依靠形态学特征
包括: 菌落颜色，分生孢子梗形态、颜色，产孢结
构数目，顶囊形态等。
烟曲霉耐高温，40℃（38.5~50℃）生长良好。
G试验和GM实验的区别及其临床意义
G试验和GM实验的区别及其临床意义在医学检验领域，G 试验和 GM 实验是两种常用于诊断真菌感染的重要检测方法。
它们对于真菌感染的早期诊断、病情监测以及治疗效果评估都具有重要的价值。
然而，这两种实验在原理、适用范围、检测结果的解读等方面存在着明显的区别。
首先，我们来了解一下 G 试验。
G 试验检测的是真菌细胞壁的成分——（1,3）βD葡聚糖。
真菌在生长和繁殖过程中，会不断释放这种物质进入血液和体液中。
当人体受到真菌感染时，血液中的（1,3）βD葡聚糖含量会显著升高。
G 试验的适用范围相对较广。
它可以用于检测多种真菌感染，包括念珠菌、曲霉菌、镰刀菌等。
而且，不仅在免疫功能正常的患者中具有诊断价值，对于免疫功能低下的患者，如接受器官移植、长期使用糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的患者，以及患有恶性肿瘤、重症感染等疾病导致免疫功能受损的患者，G 试验同样具有重要意义。
在检测方法上，G 试验通常采用的是酶联免疫吸附法（ELISA）或光度测定法。
这些方法操作相对简便，能够快速得出检测结果。
接下来，我们再看看 GM 实验。
GM 实验检测的是血清中的半乳甘露聚糖抗原。
半乳甘露聚糖是曲霉菌细胞壁的一种成分，在曲霉菌感染的早期，就可以释放到血液中。
GM 实验主要用于诊断曲霉菌感染，尤其是侵袭性曲霉菌感染。
对于其他真菌感染，GM 实验的诊断价值相对较低。
GM 实验的检测方法也多为酶联免疫吸附法，但其检测结果的准确性可能会受到多种因素的影响。
例如，使用某些抗生素、食用某些含有半乳甘露聚糖的食物等，都可能导致假阳性结果。
那么，G 试验和 GM 实验在临床应用中有哪些区别呢？从检测的真菌种类来看，G 试验能检测多种真菌，而 GM 实验主要针对曲霉菌。
从适用人群来说，两者在免疫功能低下患者中的应用都很重要，但G 试验的适用范围更广一些。
在检测结果的解读方面，G 试验阳性并不一定能确诊真菌感染，因为某些细菌感染、血液透析、使用某些生物制剂等情况也可能导致 G试验假阳性。
急性侵袭型肺曲霉病应该做哪些检查？
急性侵袭型肺曲霉病应该做哪些检查？
*导读：本文向您详细介急性侵袭型肺曲霉病应该做哪些检查，常用的急性侵袭型肺曲霉病检查项目有哪些。
以及急性侵袭型肺曲霉病如何诊断鉴别，急性侵袭型肺曲霉病易混淆疾病等方面内容。
*急性侵袭型肺曲霉病常见检查：
常见检查：血常规、胸部平片、胸部CT检查、嗜酸性粒细胞数、免疫球蛋白G、经支气管镜肺活检、痰液细菌培养、痰液细菌涂片检查、支气管肺泡灌洗术（BAL）
*一、检查
血常规：嗜酸性细胞升高。
IgG沉淀素90%以上阳性。
血清总IgE明显升高。
胸部X线表现为不同形态的肺浸润，以支气管肺炎最常见。
多发性局灶性浸润常分布在周围肺野。
部分病例表现类似肺栓塞或梗死。
大叶肺实变和粟粒状病变亦有所见。
随着病变进展，常常出现肺空洞，其中亦可形成急性曲霉球。
并发胸腔积液时则见相应X线征象。
*以上是对于急性侵袭型肺曲霉病应该做哪些检查方面内容的相关叙述，下面再来看看急性侵袭型肺曲霉病应该如何鉴别诊
断，急性侵袭型肺曲霉病易混淆疾病。
*急性侵袭型肺曲霉病如何鉴别？：
*一、鉴别
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曲霉菌检测的新方法——GM试验
曲霉菌检测的新方法——GM试验半乳甘露聚糖（glactomannan，GM）是曲霉和青霉细胞壁多糖，当菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的真菌抗原。
检测血清、肺泡灌洗液、胸腹水等标本中GM含量（即GM试验）可以早期诊断侵袭性曲霉菌感染。
血清GM试验的临床价值1.鉴别侵袭与定植：曲菌感染时持续释放入血，定植时仅间断、极少释放入血；2.早期诊断曲霉菌感染：可早于临床症状和影像学异常1周；3.反映感染程度：GM释放量与菌量成正比，可以反映炎症反应严重性；4.指导临床治疗：血液等标本GM试验连续2次阳性，常提示需抗曲霉菌治疗；5.疗效监测：如检测值连续2次低于诊断界值，可认为病情缓解。
监测人群：血液系统恶性肿瘤、中性粒细胞减少、同种异体干细胞移植、COPD、不明原因发热尤其伴肺部不规则浸润影等。
监测频率：建议连续动态监测（≥2次/周）。
试验结果判断：连续两次检测≥0.5，或单次≥1.0考虑阳性，可提示或诊断曲霉菌感染。
标本采集：静脉采血2-4ml（专用无热原采血管）。
标本送检：蚌埠医学院第一附属医院安徽呼吸系病临床基础省级实验室（）检测及报告时间：每周二、五上午检测，下午报告检测及结果解读：徐亮（）；张永（、3086405）附件1：GM试验联合G试验种属G试验GM试验念珠菌属＋－镰刀菌属＋－隐球菌属－＋曲霉菌属＋＋青霉/拟青霉＋＋接合菌纲－－附件2：《侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则》专家共识之微生物学标准a)合格痰液经直接镜检发现菌丝，真菌培养2次阳性（包括曲霉属、镰刀霉属、接合菌）；b)支气管肺泡灌洗液经直接镜检发现菌丝，真菌培养阳性；c)合格痰液或支气管肺泡灌洗液直接镜检或培养新生隐球菌阳性；d)支气管肺泡灌洗液或痰液中发现肺孢子菌包囊、滋养体或囊内小体；e)血液等标本曲霉菌半乳甘露聚糖抗原（简称GM）检测连续2次阳性；f)血液标本真菌细胞壁成分1,3-β-D葡聚糖（G试验）连续2次阳性；g)血液、胸液标本隐球菌抗原阳性。
侵袭性真菌感染
G试验与GM试验1、G试验（1.3-β-D葡聚糖），G试验检测的是真菌的细胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高（浅部真菌感染无类似现象）。
采用双夹心酶联免疫吸附法检测血清半乳甘露聚糖(GM)抗原。
适用于除隐球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。
2、GM试验（半乳甘露聚糖），GM试验检测的是半乳甘露聚糖，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。
曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。
GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。
1，3-β-D葡聚糖抗原能激活鲎变形细胞溶解物中的G因子,从而旁路活化检测革兰阴性菌内毒素的产色底物法鲎溶解物。
连续检测GM可作为治疗疗效的监测。
3、G试验因为针对真菌表面的3-β-D葡聚糖抗原，而3-β-D葡聚糖抗原为真菌所共有，所以G试验可用于区分真菌和细菌感染，但却无法用于具体种属的鉴定。
GM试验针对的是曲霉菌特异性抗原，且可用于曲霉菌感染的早期诊断，国外报道GM试验的敏感性和特异性都很高。
GM试验：GM试验检测的是半乳甘露聚糖，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。
曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。
GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。
连续检测GM可作为治疗疗效的监测。
在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。
值得注意的是，以下情况可出现假阳性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。
以下情况可出现假阴性：（1）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。
曲霉检测方法
曲霉检测方法曲霉是一种条件致病菌，人体对曲霉有极强免疫力，只有在人体免疫功能降低时才能致病，曲霉可侵犯机体许多部位，尤其是呼吸系统为主，除此之外还可感染眼部、外耳道、皮肤等部位。
除直接感染和变态反应引起曲霉病外，曲霉可产生毒素引起食物中毒，有些曲霉毒素还具有致癌作用，如黄曲霉素、杂色曲霉素。
一、曲霉致病性曲霉感染是一种免疫相关性疾病，吸入曲霉孢子导致疾病是常见的感染途径，曲霉感染主要包括3种形式：侵袭性曲霉病、慢性曲霉病、过敏性曲霉病。
侵袭性曲霉病多发生在免疫缺陷患者中，是一种较为严重的深部真菌感染性疾病。
引起侵袭性曲霉病的致病菌主要包括烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉和土曲霉。
近年来，随着免疫抑制剂、广谱抗菌药的广泛使用，器官移植等侵入性诊疗技术的普遍开展，以及恶性肿瘤、获得性免疫缺陷综合征患者人数的不断增加，侵袭性曲霉病的发病率呈逐年上升趋势。
侵袭性曲霉病在常见的医院获得性真菌感染中排名第2位，仅次于侵袭性念珠病，其预后往往较差，死亡率高达50%以上，曲霉感染后是否发病及病情轻重与宿主的基础疾病和免疫功能密切相关。
1/ 9慢性曲霉病一般指慢性肺曲霉病，是一种复杂且无临床特异性病症的肺部疾病，常伴有肺结核感染、非结核分枝杆菌感染、结节或肺癌手术等，因此易造成误诊、漏诊，导致发病率较高。
慢性肺曲霉病主要由烟曲霉引起，是以肺实质缓慢进行性破坏为特征的疾病，其形式表现为单发或多发空洞、结节、浸润或纤维化，伴或不伴曲霉菌球。
过敏性曲霉病以过敏性支气管肺曲霉病为代表，其致病曲霉以烟曲霉最常见，黄曲霉、稻曲霉、土曲霉偶可见到。
过敏性支气管肺曲霉病较常发生于哮喘患者，与其他过敏性疾病常见于儿童不同，其发病率在成年人最高。
由于临床对该病认识不足，常会被漏诊，往往发展至疾病晚期出现不可逆结构改变才被确诊。
二、曲霉检测方法近年来，随着曲霉病诊疗技术的发展，抗真菌药物和辅助药物为临床治疗曲霉病提供了有力的武器。
然而，由于曲霉病患者往往同时患有其他疾病或者不具有特异性病症，因此难以早期得到诊断而延误病情。
侵袭性真菌感染血清学检测
不同的检测方法联合检测 有助于诊断不同类型的曲霉病
第十五页，共23页。
抗原与抗体联合检测的意义
G实验 筛查
真菌感染
抗原检 抗原检测 抗体检测
测
+
+
结果判定 深部感染
+
-
早期感染，未产生抗体或 免疫力低下，无抗体产生
抗体
-
检测
感染一段时间，抗原可能
+
分解，或者抗原被抗体中
和
-
-
陈第玲十一，页，王共23红页。，张淑文等.中国真菌学杂志，2014,9(6):325-330
念珠菌抗原抗体联合检测的研究
敏感度 特异度 阴性预测值 阳性预测值
Mn抗原 41.7% 98.8% 92.4% 100%
Mn-IgG抗体 91.7% 52.8% 100% 27.5%
3、结论
① 甘露聚糖抗原在诊断念珠菌血症时 的特异度较高。
非本检测项感染
针对患者不同的病程，抗原、抗体的定量检测结果提高了阳性检出率
抗原、抗体联合检测有助于防止漏检 抗原、抗体的浓度变化能提示临床确定停药时间提供参考依据
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IFI血清学检测的应用价值
早期检测 联合检测 连续检测
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强调连续2次阳性
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强调连续2次阳性
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G和GM实验联合检测能提高检测的特异性（Specificity） 和阳性预测值（PPV）
GM实验
G实验
联合检测
Munoz P, Guinea J, Bouza E. Update on invasive aspergillosis: clinical and diagnostic aspects[J]. Clinical Microbiology and Infection, 2006, 12(s7): 24-39.
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导语：治疗疾病前身体检查是很关键的，对患者身体检查能够很好的掌握患者病情，这样对疾病治疗有很好帮助，同时也能够避免选择错误的治疗方法，减
治疗疾病前身体检查是很关键的，对患者身体检查能够很好的掌握患者病情，这样对疾病治疗有很好帮助，同时也能够避免选择错误的治疗方法，减少对患者身体损害，侵袭性曲霉菌感染检查方法都有什么呢，这类疾病在检查上，也是有很多方式，下面就详细的介绍下。
侵袭性曲霉菌感染检查方法：
曲霉菌属是一种丝状真菌，通过孢子形式进行繁殖。
自然界中分布广泛，如土壤，水，食物，腐烂的植被等，主要经空气传播。
大多数健康人群的免疫系统能够抵抗曲霉菌的侵袭，而免疫受损或接受免疫抑制药物治疗的个体则易致病。
侵袭性曲霉菌病(InvasiveAspergillosis，简称IA)是致病的最严重的一种形式：曲霉菌孢子通过呼吸道入侵体内，随血液循环侵犯其它器官和部位，如鼻窦，眼睛，皮肤，肾脏和中枢神经系统等。
然而IA的早期诊断仍是当前较难攻克的医学难题之一。
近些年的一份研究报告数据显示，IA的发病率和死亡率逐年上升，整体死亡率达到58%.①主要发生于临床化疗，移植后免疫抑制和高剂量激素治疗患者，如：恶性血液病，骨髓移植，实体器官移植和移植物抗宿主疾病等。
涉及临床科室有血液科，移植科(中心)，呼吸科，风湿免疫科，ICU，皮肤科等。
目前的诊断仍主要是一些传统的方法，即X-射线或CT扫描，组织培养，组织活检等，这些方法或特异性不高或检测周期较长，尤其组织活检时样本的采集无疑使病患雪上加霜，且很难早期诊断侵袭性曲霉病。
导致患者长期的抗真菌药物治疗，这样不仅增加了治疗成本，而且增加了药物毒性作用，对患者造成进一步
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