初始污染菌检验规程

初始污染菌检验规程

1.目的

检测产品、原料、辅料实际带菌（活的微生物群）的数目。

2.适用范围

适用于本公司产品、原料、辅料的初始污染菌的检测。

3.职责

由质检部负责执行实施。

4.技术要求

产品、原料初始污染菌数：≤100cfu/g

5.引用标准

GB 15979-2002_一次性使用卫生用品卫生标准

中华人民共和国药典（2015版）

GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法

6.试剂和培养基

6.1洗脱液0.9%Nacl

称好9gNaCl溶于1000ml蒸馏水中，充分搅拌直至完全溶解，灭菌备用。

6.2胰蛋白胨大豆琼脂培养基

取胰蛋白胨大豆琼脂培养基38g，加入1000ml蒸馏水中，微温溶解后，调节PH 为7.3±0.2，

灭菌分装。

6.3玫瑰红钠琼脂培养基

玫瑰红钠琼脂培养基31.5 g，加入1000ml蒸馏水中，微温溶解后，调节PH为6.0±0.2，

灭菌分装。

7.仪器设备

锥形瓶量筒高压灭菌锅试管灭菌培养皿灭菌刻度吸管超净工作台酒精灯恒温培养箱洗耳球

8.操作方法

8.1样品处理

8.1.1无菌称取10g可以破坏性类供试品,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡，保温于45℃水浴中5～10min，作为1：10供试液。

8.1.2对供试品不能采用破坏性取样可用浸有无菌生理盐水拭子涂抹采样，被采表面积100cm2.加入灭菌生理盐水100ml。保温于45℃水浴中5～10min，不时振摇，作为1：10的供试液。

8.2接种

8.2.1需厌氧菌

取制备好的供试液接种于有胰蛋白胨大豆琼脂培养基的培养皿中，每支平皿接种1ml供试液，接种3支。取一支有培养基的空白平皿做阴性对照。

8.2.1霉菌

取制备好的供试液接种于有玫瑰红钠琼脂培养基的培养皿中，每支平皿接种1ml供试液，接种2支。取一支有培养基的空白平皿做阴性对照。

8.3培养

需厌氧培养基置于37℃培养3d ，霉菌培养置于28℃培养5d

9.观察计数

达到培养时间后，观察阴性对照，若阴性对照有菌，则实验失败，应重新进行；阴性对照无菌，则可取出平皿计数，记录每个平皿菌落数

10.结果计算与报告

10.1公式

污染菌总数＝平均菌落数×稀释倍数/克重

10.2菌落计数基本规则

选取平均菌落数在30～300之间的稀释级作为报告菌落数测定范围。菌

落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告。大于100时，采

用二位有效数字，在两位有效数值后面，应以四舍五入法计算。在报告

菌落数为“不可计”时，应表明样品的稀释度。

如果样品菌落总数超过标准的规定，则按10N逐批稀释

10.3填写试验记录，报告结果