急性白血病免疫分型
白血病免疫分型的诊断标准
9．白血病免疫分型的诊断标准9．1 急性淋巴系白血病（ALL）9．1．1急性B淋巴系白血病（B-ALL）9．1．1．1MIC 标准:B 祖细胞ALL: CD19+,TdT+,CD10-,CIg-.sIg-Common ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg-,sIg-Pre-B- ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg+,sIg-B-ALL : CD19+,TdT-,CD10-,cIg-,sIg+9．1．1．2 欧洲白血免疫学特征研究组标准:Pro-B-ALL: (BⅠ型):CD19+,CD22+Common ALL:(BⅡ型):CD19+,CD22+,CD10+Pre-B-ALL: (BⅢ型):CD19+,CD22+,CyIgM+，成熟B-ALL:(BⅣ型)：CD19+，CD22+，Kappa/Lambda+9．1．2急性T淋巴系白血病（T-ALL）9．1．2．1MIC 标准:T祖细胞型: CD2-T成熟细胞型: CD2+9．1．2．2 Reinheiz 标准:早期胸腺细胞Ⅰ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71+普通胸腺细胞Ⅱ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71-,CD4+,CD8+,CD1+ 胸腺髓质细胞Ⅲ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD3+,CD4+,CD8+,CD1- 9．1．2．3欧洲白血免疫学特征研究组标准:Pro-ALL:(TⅠ型):CD3+,CD7+Pre-T-ALL(TⅡ型):CD3+,CD2+,CD5+,CD8+皮质-T-ALL(TⅢ型):CD3+,CD1a+成熟-T-ALL(TⅣ型):CD3+,CD1a+,anti-TCRα/β+ 或γ/δ+9．3．急性髓性白血病(AML)能亚型常表达抗原M0 CD11b,CD13或CD33M1 CD13 CD15 CD33 CD34 HLA-DRM2 CD11b CD13 CD15 CD33 •CD34 •HLA-•DR •CD56 CD19M3 CD11b CD13 CD15 CD33 CD34M4 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34M5 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34M6 血型糖蛋白A CD13 CD33 CD34M7 CD41 CD61 CD13 CD33 CD34 因子Ⅷ相关抗原10．各型白血病及淋巴瘤免疫分型特点10．1 急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）10．1．1 M0：有低的(Side scatter ,SSC)和Forward scatter（FSC)。
急性白血病免疫学分型
（一）急性淋巴细胞白血病按免疫标志分为非T细胞型和T细胞型。
前者又可分为无标志性急淋（Null-ALL）普通型急淋（Common-ALL）、前B细胞型急淋（Pre-B-ALL）和B细胞型急淋（B－ALL）4个亚型；T细胞型又分为不成熟胸腺细胞型（immature T-ALL），普通的胸腺细胞型（eommon T-ALL）和成熟胸腺细胞型（mature T-ALL）。
见表5－3－1 和表5－3－2. 表5－3－1 急性T淋巴细胞白血病（T－ALL）细胞表型组别免疫亚型表型特征CD7CD5CD2CD1CyCD3SmCD3CD4CD8Ⅰ幼稚胸腺细胞型immature T-ALL+-/+-/+--/+---Ⅱ普通胸腺细胞型common T-ALL+++++-/+++Ⅲ成熟胸腺细胞型 mature T-ALL+++-+/-++/--/+表5－3－2 急性非T淋巴细胞白血病（non-T-ALL）细胞表型组别免疫亚型表型特征HLA-DRCD19CD10CD22CD20CyIgMSmIgⅠ无标志型急淋Null-ALL+-/+-----Ⅱ普通型急淋common-ALL+++-/+-/+--Ⅲ前B细胞型急淋pre-B-ALL++++++-ⅣB细胞型急淋B－ALL＋＋+/-++-+ （二）急性非淋巴细胞白血病应用免疫学标志进行分型尚正在探索中，髓细胞系的免疫膜标志；粒细胞系为过氧化物酶＋、CD34＋、CD13＋；单核细胞系为α－萘酚醋酸酯酶＋，可被氟化钠抑制，CD34＋、CD13＋、CD14＋；红细胞系为血型糖蛋白（Gl ycophorin）及红细胞膜收缩蛋白（Spectrin）＋；巨核细胞系为血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa+、Ⅰb/Ⅲa＋。
急非淋膜标志与FAB分型的关系见表5－3－3. 表5－3－3 急性非淋巴细胞白血病FAB 分型与膜标志抗体M1M2M3M4M5M6M7 HLA－DR++-+++/-+/-CD34++/--+/-+/--+/-CD33+++ +++/-+/-CD13+/-++ + +- CD14-+/--++- CD15-++/-+++/- 血型糖蛋白-----+-Ⅱb/Ⅲa/Ⅰb------+。
血液病免疫分型
血液病免疫分型血液病的免疫分型主要根据免疫表型和免疫遗传学特征进行分类。
以下是一些常见的血液病免疫分型：1. 急性淋巴细胞性白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）的免疫分型：- B-ALL：由B淋巴细胞系发展而来。
- T-ALL：由T淋巴细胞系发展而来。
2. 慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（Chronic Lymphocytic Leukemia/Small Lymphocytic Lymphoma，CLL/SLL）的免疫分型：- CD5+/CD23+/CD20+：典型的B淋巴细胞来源。
- CD5-/CD23+/CD20+：非典型的B淋巴细胞来源。
- CD5+/CD23-/CD20+：突变的B淋巴细胞来源。
3. 急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia，AML）的免疫分型：- 标准化治疗亚组（NCCN标准化治疗亚组）：包括核准的AML-M0至AML-M7亚型。
- 非标准化治疗亚组：包括AML-M0、AML-M6和AML-M7亚型以外的亚型。
4. 慢性髓性白血病（Chronic Myeloid Leukemia，CML）的免疫分型：- Ph染色体阳性（Ph+）：含有Ph染色体（Philadelphia染色体）。
5. 骨髓增殖性肿瘤（Myeloproliferative Neoplasm，MPN）的免疫分型：- 慢性骨髓性白血病（Chronic Myeloid Leukemia，CML）：Ph染色体阳性。
- 原发性骨髓纤维化（Primary Myelofibrosis，PMF）：包括JAK2V617F突变和CALR基因突变。
- 骨髓增殖性肿瘤不分类型（Myeloproliferative Neoplasm，NOS）：不符合上述分类的其他骨髓增殖性肿瘤。
这些免疫分型对于血液病的诊断、预后评估和治疗选择具有重要意义。
注意，具体的免疫分型细节可能因研究、疾病进展和新兴的治疗手段而不断改变。
急性白血病的诊断分型
急性白血病的诊断分型
急性白血病是一种白血病的类型，我们将在本次演示中介绍其诊断分型和相 关实验室检查。
I. 前言
急性白血病是一种恶性血液病，其特点是白细胞在骨髓中异常增生，导致血 液功能受损。以下是关于急性白血病的基本病理生理。
II. 诊断急性白血病
临床表现
急性白血病的临床表现包括乏力、贫血、发热、感 染、出血等症状。
VIII. 附录
相关术语解释
本附录包含对急性白血病相关术语的详细解释， 以帮助读者更好地理解演示内容。
典型表现图示
本附录提供了一些典型急性白血病病例的图示， 以便读者更直观地了解该疾病。
美国癌症学会标准
美国癌症学会也制定了一套诊断标准，以供医生参 考和诊断使用。
VI. 总结
急性白血病的诊断分型是基于细胞学特征和免疫学标志物的检测，对于准确诊断和治疗非常重要。
VII. 参考文献
1. Lohr JG, et al. Discovery and prioritization of somatic mutations in diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) by whole-exome sequencing. PNAS. 2012; 109(10)室检查
血象检查
急性白血病患者的血象常常显 示出白细胞增多、贫血、血小 板减少等异常。
急性白血病免疫分型
T-ALL旳免疫表型特点：
T-ALL分类
免疫表记
TdT+ 、CyCD3+ 、CD7+
Pro/Pre-T-ALL
CD2-、sCD3- 、CD1a-
T-ALL
CD2+、 sCD3+ 、 CD5+/- 、CD8+/- 、CD4+/- 、 CD1a+/-
-
+
+
-
T-ALL
+
-
-
+
-
-
+
AML
-
+/-
+
-
-
-/+
-/+
R1 门为成熟淋巴细胞 R2 门为正常单核细胞位置 R3 门正常粒细胞位置 R4 门为幼稚淋巴细胞出现位置 R5 门为有核红细胞或细胞碎片位置 R6 门为幼稚髓细胞出现位置 白血病细胞一般会在R4 R6 两门位置处出现
正常骨髓经CD45/SSC射门旳散点图
CD45/SSC 图中可见 CD45 强阳性SSC 低信号旳细胞群为淋巴细胞褐色细胞群体 中档强度旳CD45 体现SSC 信号最强旳细胞群体为粒细胞蓝色及红色细胞群体 CD45 体现与SSC 信号介于淋巴细胞与粒细胞之间旳是单核细胞群体绿色细胞群体 CD45 阴性SSC 信号最低旳有核红细胞和细胞碎片
ANLL旳免疫分型特点
FAB-M1/M2旳免疫表型特点：CDl3+、CD15+、CD33+、 HLA-DR+、CD34+，其中CD34在M1中旳体现强于M2，而CD15在M2旳体现较强。
ANLL旳免疫分型特点
我国急性白血病免疫分型的四色方案
我国急性⽩⾎病免疫分型的四⾊⽅案中国流式细胞术急性⽩⾎病免疫分型四⾊⽅案由于多参数流式细胞术(MFC)免疫分型具有客观、敏感、准确等特点，免疫表型已成为诊断急性⽩⾎病的重要依据之⼀。
因准确的诊断需要选择⼀定数量的抗体，涉及多个造⾎系列的抗原。
但⽬前国内甚⾄国际上没有规范化的⽅案可以借鉴。
⽽国内不同的医疗单位所⽤的抗体数量和种类均有较⼤的异质性，有些单位由于应⽤的抗体数量较少或抗体选择不当，影响对疾病的诊断、分期和预后的判断。
鉴于国内的实际情况，中国免疫学会⾎液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次的讨论，提出以CD45/SSC为基础的中国流式细胞术急性⽩⾎病免疫分型四⾊⽅案，供参考。
本⽅案不包括标本的采集、保存、制备、试剂和仪器的调整及急性⽩⾎病的诊断标准，这些对免疫分型同样重要，可参考相应的指南。
1．适应范围：1.1急性淋巴细胞⽩⾎病(ALL):z B系：早B前体-ALL(Pro-B), 普通-B-ALL(Common-B),前体B-ALL(Pre-B),及与Burkitt淋巴瘤进⾏鉴别z T系：早T前体-ALL (Pro-T), 前体T-ALL(Pre-T),⽪质-T-ALL和髓质-T-ALL.1.2急性早幼粒细胞⽩⾎病（APL）1.3急性髓细胞⽩⾎病（AML）z AML微分化型（AML-M0）z AML伴粒系和单核细胞分化型（AML-M1/2和AML-M4/5）z急性红⽩⾎病（AML-M6）z急性巨核细胞⽩⾎病（AML-M7）1.4前体树突细胞肿瘤1.5急性嗜碱性粒细胞和肥⼤细胞⽩⾎病1.6 混合表型⽩⾎病1.7 对上诉急性⽩⾎病治疗后检测MRD的标志进⾏筛查2.抗体的选择：根据检测的⽬的，需要检测不同的抗体：2.1 鉴别急性、慢性⽩⾎病:对于急性髓细胞⽩⾎病，可以根据CD45/SSC图型进⾏初步判断。
髓系⽩⾎病细胞CD45的表达较弱，往往位于正常淋巴细胞下⽅，且多数⽩⾎病细胞SSC较低（除去⼤颗粒APL 患者）。
四色流式细胞术用于急性白血病免疫分型的中国专家共识(完整版)
四色流式细胞术用于急性白血病免疫分型的中国专家共识（完整版）白血病免疫分型是利用不同单克隆抗体检测白血病细胞胞膜和胞质抗原，通过流式细胞术(FCM）分析其表型，实现对白血病细胞系列来源及其分化程度的诊断。
白血病免疫分型已成为诊断白血病的必要依据，同时也可为微小残留病（MRD)的检测以及白血病的治疗和预后提供重要信息。
白血病免疫分型是细胞形态学分型的重要补充和进一步深化，以荧光标记技术联合FCM检测并判定白血病免疫表型，具有准确、快速、客观、重复性好、特异性强等特点，提高了白血病诊断的准确性[1, 2]。
采用不同数量及组合的荧光标记免疫抗体处理白血病细胞并进行荧光检测及分型是免疫分型的关键环节。
准确诊断需要选择一定数量的抗体，白血病免疫分型涉及多个造血系列的抗原，但目前国内甚至国际上均无规范化的方案可以借鉴；国内不同的医疗单位所用的抗体数量和种类均有较大的异质性，有些单位由于应用的抗体数量较少或抗体选择不当，影响对疾病的诊断、分期和预后的判断。
鉴于国内的实际情况，中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次讨论，提出以CD45/侧向散射光（SSC）为基础的中国FCM急性白血病免疫分型四色方案，本方案以2组表面抗原作为筛查抗原，试图利用相对少的抗体，达到对各个类型白血病进行较全面的检测，具有快速、客观、准确的特点。
已在国内的多家医疗单位试用，证明此方案能够满足临床的需要[3, 4]。
目前，虽然国际上有八色甚至十色方案[5, 6, 7]，但对仪器及操作人员的技术要求较高。
鉴于国内的实际情况，我们首先提出中国FCM急性白血病免疫分型四色方案，供从事急性白血病免疫分型的实验室参考，以期促进我国急性白血病免疫分型诊断的规范化及整体水平的提高。
一、四色方案的基本要求理想的急性白血病免疫分型方案应满足以下几点要求：①识别白血病细胞，能将其与正常细胞或反应性细胞相区别；②鉴别白血病细胞的系列来源；③根据细胞的分化程度对疾病进行亚型分型；④鉴别用于检测MRD 的白血病相关免疫表型(LAIP) ;⑤帮助判断某些特异分子改变，即基因型检测；⑥提供预后相关及治疗靶点的免疫标志检测结果。
急性白血病的分型-精品医学课件
CD117。 ④巨和核系：CD41、CD42。 ⑤ RBC系：CD36、血型糖蛋白A、H。
⑥造血干祖C：CD34、CD90、CD38、Lin。
③伴t（1；19）的儿童型ALL预后较差。 ④伴 t（1；22）儿童型AML预后很差。
缺陷：
①报结果时间长、代价高。 ②分裂相少、造成分析困难。 ③不够特异，往往几种AL同时出现一种染色体异常。
大约40～70%的MDS患者有克隆性染色体畸变，其 对疾病的预后有着重要的价值。MDS国际预后计分系 统（IPSS）将核型和细胞减少的细胞系列的数目、原 始细胞百分比一起列为MDS预后的主要危险因素。根 据核型可将MDS分为3种不同的预后类型：①低危：正 常核型、-Y、5q-或20q-；②高危：-7/7q-、复杂异常 或核型演变；③中危：其它异常，如+8等。
融合基因
TTG1-TCR TAL1-TCR MYC-TCR MLL-AF4 BCR-ABL BCR-ABL BCR-ABL E2A-PBX1 TEL-AML1 MLL-ENL MYC-IgH MYC-Ig MYC-Ig
AML常见染色体移位及融合基因
FAB
核型
融合基因
M1
t(9;22)(q34;q11)
AML 遗 传 学 分 型
分 型
ALL
意义
1、克隆性染色体异常的检出有助于急性白血病 的诊断和分型
2、染色体异常可作为监测病情缓解或复发的重 要指标，最初核型异常完全消失提示病情缓解， 而重新出现则预示复发。
3、性染色体标志可用来验证异基因骨髓移植成 功与否或确定白血病的复发及其来源。
我国急性白血病免疫分型的四色方案
中国流式细胞术急性白血病免疫分型四色方案由于多参数流式细胞术(MFC)免疫分型具有客观、敏感、准确等特点，免疫表型已成为诊断急性白血病的重要依据之一。
因准确的诊断需要选择一定数量的抗体，涉及多个造血系列的抗原。
但目前国内甚至国际上没有规范化的方案可以借鉴。
而国内不同的医疗单位所用的抗体数量和种类均有较大的异质性，有些单位由于应用的抗体数量较少或抗体选择不当，影响对疾病的诊断、分期和预后的判断。
鉴于国内的实际情况，中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次的讨论，提出以CD45/SSC为基础的中国流式细胞术急性白血病免疫分型四色方案，供参考。
本方案不包括标本的采集、保存、制备、试剂和仪器的调整及急性白血病的诊断标准，这些对免疫分型同样重要，可参考相应的指南。
1．适应范围：1.1急性淋巴细胞白血病(ALL):z B系：早B前体-ALL(Pro-B), 普通-B-ALL(Common-B),前体B-ALL(Pre-B),及与Burkitt淋巴瘤进行鉴别z T系：早T前体-ALL (Pro-T), 前体T-ALL(Pre-T),皮质-T-ALL和髓质-T-ALL.1.2急性早幼粒细胞白血病（APL）1.3急性髓细胞白血病（AML）z AML微分化型（AML-M0）z AML伴粒系和单核细胞分化型（AML-M1/2和AML-M4/5）z急性红白血病（AML-M6）z急性巨核细胞白血病（AML-M7）1.4前体树突细胞肿瘤1.5急性嗜碱性粒细胞和肥大细胞白血病1.6 混合表型白血病1.7 对上诉急性白血病治疗后检测MRD的标志进行筛查2.抗体的选择：根据检测的目的，需要检测不同的抗体：2.1 鉴别急性、慢性白血病:对于急性髓细胞白血病，可以根据CD45/SSC图型进行初步判断。
髓系白血病细胞CD45的表达较弱，往往位于正常淋巴细胞下方，且多数白血病细胞SSC较低（除去大颗粒APL患者）。
再根据CD34、CD117、CD38、HLA-DR、CD123的表达进行判断。
急性白血病MICM分型
急性白血病MICM分型：白血病MICM分型，是指形态学（morphology）、免疫学（immunology）、细胞遗传学（cytogenetics）、分子特征（molecular）分型形态学分型（FAB）分型1.急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）或急性髓系白血病（AML）：Ｍ１型：急性原粒细胞性白血病未分化型，骨髓中原粒细胞≥90％，POX染色阳性率＞3％。
Ｍ２型：急性原粒细胞性白血病部分分化型，以原幼粒细胞为主，早幼粒细胞＞3％，中、晚幼及成熟粒细胞＞10％为Ｍ２a型。
Ｍ３型：急怀多颗粒早幼粒细胞性白血病，以颗粒增多的异常早幼粒细胞为主，＞30％。
其又分为粗颗粒型（Ｍ３a）和细颗粒型（Ｍ３b）。
Ｍ4型：急性粒－单核细胞性白病，粒系及单核细胞均增生。
Ｍ５型：急性单核细胞性白血病，Ｍ5a为原单核细胞型，原单核＞80％；Ｍ5b为部分分化型，以幼单核细胞为主，原单核＜80％。
Ｍ6型：急性红白血病，原幼红细胞≥50％，非红系细胞中原始细胞＞30％。
Ｍ7型：急性巨核细胞性白血病，原巨核细胞＞30％，并经电镜、血小板过氧化物酶检查、血小板免疫标志物或血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa检查等证实。
Ｍ0型：近年确定，为髓系最早阶段的白血病，形态学上极少髓系分化，不能鉴别，必须用免疫标志物确定。
2.急性淋巴细胞性白血病(ALL)：L1：以小原淋巴细胞为主，大小较一致。
L2：以大原淋巴细胞为主，大小不一致。
L3：以大原淋巴细胞为主，胞质内含大量空泡。
3.急性白血病的主要化学染色特点：免疫学分型－基本免疫表型1.急性非淋巴细胞白血病（ANLL）FAB分型与免疫标志：2.急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)FAB分型与免疫学标志：3.急性非T淋巴细胞白血病(non-T-ALL)FAB分型与免疫学标志：4. 混合细胞性白血病：有极少部分病人白血病细胞为淋巴系和髓系细胞双克隆或同一细胞系免疫标志双表型，即混合细胞性白血病。
此型白血病用形态方法极难诊断，必须结合多参数流式细胞术分析才能确诊。
急性白血病系别判断的流式细胞免疫分型
三、急性白血病系别诊断标准
• EGIL诊断标准缺点： • （1）关于阳性定义，因为影响因素众多，有时存在歧义； • （2）对于某些覆盖率低、特异性高的标志，给予分值低或者未纳入，如CD64、CD14； • （3）对某些常见伴系表达标志予以极低分值，如CD7，未考虑荧光强度的差异； • （4）对于相对特异、在某系别易于伴发的标志，未考虑差异对待，如cCD79a、CD10
三、急性白血病系别诊断标准
• 鉴于几乎没有任何标志是绝对敏感和特异的，做全标志有助于降低误诊风险，因此 在系别筛查时如果出现系别标志表达过多或者过少，或者伴系表达标志的强度超过 标本中残留的正常细胞时，首先应该做全两个诊断标准涉及的相关系别标志，必要 时甚至需要增加CD371等新的髓系标志。
• 在此过程中可以选择一步法或者两步法。选择一步法的实验室，以目前常用3激光8 色机型为例，可供参考的5管法见表3；选择两步法的实验室，第一步进行系别筛查， 包括髓系MPO（或者CD33）和CD117，T系CD7和cCD3、B系CD19和CD22，根据 采用仪器型号不同可能有差异，4色方案可以参考2015年4色流式细胞术中国专家共 识，3激光8色推荐方案见表3。
三、急性白血病系别诊断标准
三、急性白血病系别诊断标准
• 注意几个标志的FCM检测： • （1）MPO：使用克隆号8E6、MPO-7的抗体需要小心，因为均有在B-ALL表达的
报道；阳性阈值虽然大多数沿用10%，但是建议结合荧光强度，并且不典型病例应 该做全其他髓系标志，并结合细胞化学和免疫组化MPO检测结果；FCM破膜处理 可能会使粒细胞的侧向角光散射（side scatter，SSC）降低，从而影响CD45/SSC设 原始细胞门的精确度，导致假阳性结果，正确的方法应结合原始细胞标志修订设门。
白血病形态分型
T淋巴细胞系 B淋巴细胞系
MPO+
抗血型糖
CD13+、CD33+ 蛋白H、C
CD15+(M2、M4)
(M6)
CD14+(M4、M5)
CD34+(M0、M1)
CD41a+、CD41b+ CD7+、CD5+
CD61+
CD2+、CD3+
CD42b+、CD42c+ CD4+、CD8+
(M7)
CD1a+
(ALL)
随着血液病在发病机理、 诊断方法以及治疗手段等方面 的进展，急性白血病的诊断技 术也有很大发展，急性白血病 的分型基本上分三个阶段。
FAB分型 1976（M）
MIC分型 1986（MIC）
WHO分型 2001（MICM）
表1 急性白血病分型的三个发展阶段
（一）急性白血病 FAB分型
FAB分型法依据白血病
白血病临床特征
发热 贫血 出血 浸润
由于白血病细胞起源、分化 和生物学行为不同，构成了白 血病的异质性，因此急性白血 病的全面、正确分型是准确、 及时治疗的前提。
传统的白血病诊断和分型 主要依据骨髓涂片中血细胞形 态和分类及化学染色检查来确 定的。根据白血病自然病程长 短将白血病分为急性和慢性两 大类；按细胞起源不同又可分 为髓细胞系、淋巴细胞系以及 特殊类型等不同类型白血病。
❖ M7 巨核细胞白血病 未分化型（M7a）：外周血有原 巨核（小巨核）细胞；骨髓中原巨核细胞>0.30非红系， 须有组化电镜或单克隆抗体证实。骨髓细胞少，往往干 抽。活检有原始和巨核细胞增多，网状纤维增多。分化 型（M7b）：骨髓及外周血中以单圆核和多圆核病态巨 核细胞为主。
白血病流式免疫分型
白血病流式免疫分型白血病是一种造血系统恶性肿瘤，由于白细胞数量和质量的异常增加，导致机体免疫功能下降，造成多种系统和器官功能异常。
白血病的治疗首先需要确定其类型和分型，以便制定有效的治疗方案。
流式免疫分型作为一种先进的白血病诊断技术，已被广泛应用于临床实践中。
白血病流式免疫分型是将细胞标记物与荧光标记结合，通过流式细胞术对细胞进行定量、定性的分析，进而确定白血病的类型、分型。
它可以快速、灵敏地检测单个细胞，检测出极低浓度的异常白细胞，并对相关疾病进行准确的诊断和分类，特别是对淋巴瘤和白血病的鉴别诊断。
流式免疫分型在白血病治疗诊断中的应用既可以确定疾病的类型，也可以指导治疗方案的制定。
对于急性白血病的治疗而言，流式免疫分型可以评估化疗药物敏感性、预测预后，以及指导骨髓移植的实施，从而提高治疗的效果和疗效。
对化疗失败的慢性淋巴细胞白血病患者进行流式免疫分型，可以确定其恶性程度、预测预后及制定诊断治疗方案，如靶向药物治疗等新的治疗手段。
不过，需要指出的是，流式免疫分型虽然是一种有效的白血病诊断技术，但其存在一定的局限性。
例如，对于某些罕见的白血病类型，目前流式免疫分型无法完成准确的分类，需要结合其他诊断手段进行综合判断。
同时，由于流式免疫分型涉及大量的细胞学和生化实验，其实验成本也比较高，还需要一定的技术开销和专业操作的知识。
综上所述，白血病流式免疫分型作为一种先进的白血病诊断技术，已经逐步成为临床实践中的标准操作。
它可以对白血病患者进行准确的分类和疾病诊断，指导治疗方案的制定，同时也为临床科研提供了有力的手段和工具。
但需要注意的是，流式免疫分型还需要不断探索和深入，结合其他先进技术和诊疗方法，共同提高白血病治疗的水平和效果。
急性白血病——免疫分型
细胞系列抗原的表达 ---B细胞系抗原
HLA-DR意义 在白血病分型中，HLA-DR特异性较差， 除B系外，HLA-DR在急非淋、成人T细胞白血
病亦表达，
但如DR+，加上CD5-、CD7-则99%为B系。90%B 系ALL表达CD10。
与AL预后有的抗原
1。CD34：
强表达者预后差，特别是复发时CD34增强是最有意义 的免疫学表型改变，CD34常与一些预后差的因素共存 时有相加的作用，与CD34与Pgp或DR共存的患者，比单 表达其中一个抗原的患者完全缓解率明显降低。
Pre-B4,B,T1,T2,T3 第三型：变异型-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-
4/CD15+, PRE-B1-4/T+,T1-4/My+, T1-4/CD15+,T1-4/B+
第四型：多表型-Pre-B1-4/M+,T1-4/M, Pre-B+T,Pre-B+T+M.
ALL免疫分型
免疫学分型对ALL更重要。 免疫学与FAB分型可不一致。
细胞系列抗原的表达 ---B细胞系抗原
B细胞根据发育阶段可分为： B祖细胞 TdT、CD34、HLA-DR
前B细胞（可再分为前前B、前B）TdT、CD34、CD10、CD19、 CD24
未成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22
急性白血病的免疫分型急性白血病的免疫分型micmicmm分型细胞形态学细胞形态学包括细胞组化包括细胞组化为基础为基础细胞免疫学细胞免疫学免疫表型免疫表型为主体为主体细胞遗传学为辅助细胞遗传学为辅助分子生物学为补充的原则
急性白血病
免疫学分型
急性白血病的免疫分型
白血病免疫分型
白血病免疫分型
白血病免疫分型：
1、胸腺移植
胸腺移植是一种利用病人的免疫系统抗白血病的新方式。
病人将在手术当中收集胸腺，将其根据个人情况调节，再移植回病人体内，可以促进病人免疫力对抗白血病，从而获得疗效。
2、肿瘤抑制剂治疗
肿瘤抑制剂治疗是通过治疗肿瘤细胞阻断细胞的生长，从而达到抗白血病的目的，一般与化疗联合使用，可以获得较好的疗效。
3、血液干细胞移植
血液干细胞移植是指把病人本身或从其他捐助者那里获取的血液干细胞，通过放射线、化疗等手段，灭活病人体内的血细胞，然后再将血液干细胞移植回体内，由其自动重建新的血系给病人，使其免疫力能抗白血病，从而获得疗效。
4、免疫疗法
免疫疗法是指对病人的免疫体系开展抗白血病的改造，例如，将病人的有效抗体、转基因细胞等植入体内，用以增强病人的抗白血病免疫力，以实现抗病毒和抗炎，达到治疗目的。
5、免疫抑制剂
免疫抑制剂是指利用特定药物来抑制人体免疫系统，也就是进行免疫抑制，从而实现抗病毒的目的。
免疫抑制剂对抗白血病的疗效可以通过阻断病毒的复制，抑制炎症状态，减少体内抗病毒抗体的数量来达到。
白血病细胞的免疫分型
白血病细胞的免疫分型正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特异性。
因此，这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。
白血病是造血系统的恶性肿瘤，在形态上变化虽相当大，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行免疫分型。
由于白血病细胞具有肿瘤细胞的特征，其抗原表达又不完全同于正常血细胞，常可出现某些抗原缺乏、过度表达、系列交叉表达某一系列或阶段不应有的抗原，这又增加了白血病免疫分型的复杂性。
近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。
国际上公认的通用的方法是流式细胞术（FCM），此外还有免疫组化法，电镜和荧光显微镜也可以帮助诊断。
其中流式细胞术（F CM）和免疫组化法较为常用。
流式细胞术中，白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体（McAb）作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。
因为FCM能快速，多参数，客观的定性又定量测定细胞膜，浆，核的抗原表达。
另一个重要理由是至今尚未发现白血病的特异抗原。
所以能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说即白血病细胞基因异常，分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。
这群细胞充盈于骨髓。
抗原表达与其相应系列/阶段的血细胞无明显差异。
与形态学检查相似仅能根据数量的差异来判断病变细胞的属性。
单参数免疫标志测定易将正常细胞包括在内。
因此，近年来主张用设门（gating）方法。
即用CD45与侧向角（side scatter,SSC），对数取样后可将骨髓细胞清晰地分出淋巴细胞，单核细胞，成熟粒细胞，幼稚细胞和红细胞群，其理论依据是CD45是所有白细胞的抗原。
其表达量在淋巴细胞最高，单核细胞，成熟粒细胞，早期造血细胞（blasts）依次减弱。
白血病免疫分型
白血病免疫分型白血病的免疫分型主要是根据造血干细胞再分化发育过程中，不同的阶段，细胞表面的分子标记也不同这一规律，反推出细胞是处于哪个阶段以及细胞属于哪个系别来源。
一般使用流式细胞仪去检测细胞上面表达的抗原，通过检测，我们可以判断出白血病细胞属于哪个系列来源以及处于分化的哪个阶段，最终来确诊白血病的类型。
此种白血病的分型即为免疫分型。
白血病免疫分型是诊断白血病的重要标准，对于白血病选择化疗药物以及估计预后是非常重要的。
白血病的免疫分型最早由欧洲提出来，它主要是根据造血干细胞再分化发育过程中，不同的阶段，细胞表面的分子标记也不同这一规律，反推出细胞是处于哪个阶段以及细胞属于哪个系别来源。
一般使用流式细胞仪去检测细胞上面表达的抗原，通过检测从而判断出，白血病细胞属于哪个系列来源以及处于分化的哪个阶段，最终来确诊白血病的类型。
此种白血病的分型即为免疫分型。
白血病免疫分型一般是对白血病细胞表面表达的分子进行相关检测。
1、白血病的诊断需要骨髓穿刺、骨髓液免疫分型、染色体和基因检查以进一步诊断，骨髓细胞学诊断白血病的准确性仅为70%左右。
如果同时增加白血病的免疫分型，白血病的明确诊断准确率可以接近100%。
2、白血病免疫分型是指对白血病细胞表面表达的分子进行相关检测，可以进一步区分急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病和慢性髓系白血病等类型。
同时还需要检查融合基因的染色体，以便对白血病诊断后的预后进行分层，并制定个性化的化疗方案。
建议平时多进行体育锻炼，增强自身免疫力。
急性白血病是造血干细胞的克隆性恶性疾病，发病时骨髓中异常的原始细胞大量增殖并浸润各种器官组织，正常造血受到抑制。
急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病，这两类还可分成多种亚型。
白血病的分型采用MIC分型，即形态学、免疫学和细胞遗传学结合的分型。
根据白血病细胞免疫学标志，不仅可将急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病进行区别，而且还可将T细胞和B细胞急性淋巴细胞白血病加以区别。
白血病免疫分型的基础
白血病免疫分型的基础白血病是一类以恶性克隆性造血干细胞增殖为特征的血液系统恶性肿瘤。
根据白血病患者免疫系统的表现和特征，可以将白血病分为多种免疫分型。
免疫分型对于指导白血病的治疗和预后评估具有重要意义。
白血病的免疫分型主要基于白血病细胞表面标志物的检测结果，通过免疫学方法对白血病细胞进行分类。
根据不同的免疫分型，可以更好地了解白血病的发展过程和预后情况，为临床治疗提供指导。
一、急性淋巴细胞白血病（ALL）的免疫分型急性淋巴细胞白血病是一种起源于淋巴细胞前体的恶性肿瘤。
根据ALL细胞表面的免疫表型，可以将ALL分为常见型、T-ALL、B-ALL 和非T非B淋巴细胞白血病。
1. 常见型ALL：常见型ALL细胞表面表达CD10、CD19、CD20等B 细胞标志物，具有较好的预后。
2. T-ALL：T-ALL细胞表面表达CD2、CD3、CD4、CD5等T细胞标志物，预后较差，易发生中枢神经系统浸润。
3. B-ALL：B-ALL细胞表面表达CD19、CD20等B细胞标志物，预后因不同的表型差异而有所不同。
4. 非T非B淋巴细胞白血病：非T非B淋巴细胞白血病细胞表面不表达典型的T细胞或B细胞标志物，预后较差。
二、慢性淋巴细胞白血病（CLL）的免疫分型慢性淋巴细胞白血病是一种起源于成熟淋巴细胞的恶性肿瘤。
根据CLL细胞表面的免疫表型，可以将CLL分为ZAP-70阳性型和ZAP-70阴性型。
1. ZAP-70阳性型：ZAP-70阳性型CLL预后较差，易发生淋巴结肿大和外周血细胞减少。
2. ZAP-70阴性型：ZAP-70阴性型CLL预后相对较好，疾病进展较慢。
三、急性髓系白血病（AML）的免疫分型急性髓系白血病是一种起源于骨髓干细胞的恶性肿瘤。
根据AML细胞表面的免疫表型，可以将AML分为M0-M7七个亚型。
1. M0亚型：M0亚型AML细胞表面不表达常见的髓系标志物，预后差。
2. M1亚型：M1亚型AML细胞表面表达CD13、CD33等髓系标志物，预后相对较好。
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最次
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成人 次之 次
再次
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最
ＡＬＬ免疫分型 －－两类九型法:
非T亚型 HLA-DR CD9 CD10 CD20 μ链 SmIg
I
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VI
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发生率% 5
15 30 50 <5 <2
ＡＬＬ免疫分型 －－两类九型法
T亚型 CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8 CD1a 发生率
I
+++- -- -
55
II
+ + + +25% +90% +90% +
25
III + + + + + # + # -
20
#:二者之一阳性
ALL免疫分型 --四型21类法
第一型：裸型- 未分化型,干细胞型 第二型：纯型- Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3,
ＡＬＬ免疫分型 －－五分法：
五分法： Common型 未分化型 型
T细胞型
前B细胞型 B细胞
表型 SmIg+
DR/CD9/CD10+ 复杂
CD2/CD5+
CyIg
发生率：国外 60-70%
30%
3%
15-25%
2--3%
2--
国内
50%
1.5%
30%
20%
0.5%
预后： 儿童 次
最好
次之
再次
T细胞系抗原
T 细胞进入胸腺后：
（早） CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-
（中）CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-
（晚）CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+，
CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+ CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+
进入血液及淋巴结
T细胞系抗原 ---外周血T细胞
血液中T细胞主要有以下亚型： 1.CD3+、CD4+、CD8-
—辅助性T细胞/诱导性T细胞，TH/TI 占T细胞总数的60-70% 2.CD3+、CD4-、CD8+ —抑制性T细胞/细胞毒性T细胞，TS/TC， 占T细胞总数的20-30% 3.CD3+、CD4+、CD8+ — 占T细胞总数的1-3% 4.CD3+、CD4-、CD8- — 占T细胞总数的1-10%
细胞系列抗原的表达 ---B细胞系抗原
B细胞根据发育阶段可分为： B祖细胞 TdT、CD34、HLA-DR
前B细胞（可再分为前前B、前B）TdT、CD34、CD10、CD19、 CD24
未成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22
成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22
--FAB的MIC分型
B-ALL CD19 TdT DR CD10 CyIg SmIg
早期前B +
t(4;11)
t(9;22)
普通-ALL +
6q-
近单倍体
t/del(12p)
t(9;22)
前B-ALL +
t(1;19)
t(9;22)
B-ALL
+
t(8;14)
t(2;8)
t(8;22)
6q-
++
-
-
活化B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22
浆细胞 CD38
细胞系列抗原的表达 ---T细胞系抗原
T细胞发育的路径为： 骨髓（骨髓祖细胞→前胸腺细胞，亦称T祖细胞） --→胸腺（早→中→晚） --→外周血（成熟）
骨髓T祖细胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+ CD7出现最早并贯穿于T细胞发育全程
M1：CD34+、MPO+、DR+、TdT+、CD33+、CD13+、CD15-、CD11b-、 无 淋、红、巨核系抗原
M2：CD34+、CD33+、CD13+、DR+、CD15+ M3：CD33+、CD13+、DR-、CD34M4：CD34+ 、CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M5：CD34+ CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M6：血型糖蛋白+、CD34-，DR-、CD33-、CD13-、CD15M7：CD34+、CD33+、DR+、CD41+、CD42+、CD61+ M0：FAB：形态学为L2型，MPO、SBB组化阴性，淋系抗原阴性，CD33、CD11、CD15 及 antiMPO单抗阳性。
Pre-B4,B,T1,T2,T3 第三型：变异型-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-
4/CD15+, PRE-B1-4/T+,T1-4/My+, T1-4/CD15+,T1-4/B+
第四型：多表型-Pre-B1-4/M+,T1-4/M, Pre-B+T,Pre-B+T+M.
ALL免疫分型
T细胞系抗原 ---CD4+T细胞亚群
1．根据产生淋巴因子的差异分为： TH1—产生 IL-2、IFN-γ、TNF-β TH2—产生 IL-4、IL-5、IL-6、IL-10
2．根据功能分为： TSI（suppressor inducer T-cell） —诱导TS功能，CD31+、CD45RA+ THI（helper inducer T-cell） —辅助B细胞产生抗体，CD31-、CD45RO+
髓系抗原
3．基本只表达在单核细胞上的抗原： CD16、CD64、CD68、CD91、CDw136、CD155。 基本只表达在粒细胞上的抗原：CD16b、CD66。
4．造血干、祖细胞抗原：CD34、CD90。 5．其他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上，
髓系细胞上也有表达：CD4、CD7、CD9、CD10、 CD11b、CD11c、CD31、CD36、CD38 6．血小板相关抗原：CD36、CD41、CD42、CD61、 CD62。 7.. 红细胞抗原： CD36、GPA
3．分为记忆T细胞、天然T细胞、活化T细胞
天然T细胞 记忆T细胞 活化T细胞
表型
CD4 CD8 CD45RA CD45RO
CD25 CD54 CD58
天然T细胞 记忆T细胞 活化T细胞
+
+
+
-
-
-
+
-
-
-
+
+
-/+
+/++
+++
髓系抗原
根据髓系抗原表达大致分为7类： 1．粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原： CD13、CDw17、CD32、CD87、 CD88、CD89、CDw92、CD93、 CD156、CD157、CD163。 2．以粒细胞为主，也存在于单核细胞上的抗原： CD15、CD65。 3. 以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原： CD14、CD33。
-
++
+
-
-
++ +- +/- +/- +
FAB亚型
L1,L2 L1,L2
L1 L3
ALL免疫分型
--FAB的MIC分型
T-ALL
CD7 CD2
TdT
FAB亚型
早期前T
+
-
+
L1,L2
t/del(9q-)
T-ALL
+
+
+
L1,L2
t(11;14)
6q-
免疫学分型 与FAB AML分型的相关性