血型鉴定方法及报告错误原因分析方案
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溶解后能产生很多阳离子,可以中和红细 胞表面的负电荷,使红细胞间距缩小,发 生可逆性的非特异性凝集;低离子强度溶 液可降低红细胞的Zate电位,可进一步增 强抗原抗体间的引力。
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Rh血型鉴定
四、抗人球蛋白法
不完全IgG类抗D抗体结合了含有相应抗原 的红细胞后,因其分子量小,在盐水介质 中只能与红细胞结合,使红细胞致敏,即 在D红细胞包被一层IgG抗体,而不能使其 连接起来发生凝集。加入经一定稀释的抗 人球蛋白血清后,抗人球蛋白可与红细胞 上结合的不完全抗体结合,将致敏红细胞 连接,发生肉眼可见的凝集。
➢ 忽略溶血现象,不能正确识别和解释结果。
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5.临床血型报错常见原因分析
检验人员责任性错误
➢ 在工作中,由于精力不集中,比如要鉴定一号 标本时, 错拿2号或者3号的标本,或者发报 告时,将鉴定的血型结果输入电脑时,由于鼠 标点击错误而造成血型输入错误。
➢ 鉴定血型时,抗a、抗b试剂对调,结果a型跟 b型结果也对调,造成错误。
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Rh血型鉴定
二、盐水法 又称为人源盐水介质抗D试验,是采用二 硫苏糖醇等物质作为免疫球蛋白化学变性 剂,处理采自人源的IgG 抗D血清,使小分 子的IgG 抗体“转变”成类似大分子的 “IgM”抗体的作用。这种IgM型抗D血清 可用于Rh血型系统D血型的快速检测。
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Rh血型鉴定
三、聚凝胺法 聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物,
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Rh血型鉴定方法
一、酶介质法 二、盐水法 三、聚凝胺法 四、抗人球蛋白法
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Rh血型鉴定
一、酶介质法 Rh血型抗体因其分子量小,在结合了具有相应抗 原的红细胞后,并不能将相邻的红细胞彼此连接 起来,使红细胞发生凝集。酶(木瓜酶、菠萝酶 等)可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸,降低 红细胞表面负电荷,使红细胞之间排斥力减小, 红细胞间距缩小,在不完全抗体的作用下发生凝 集。
常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞 上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清 中未知的抗体。
结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性
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ABO血型鉴定
生理盐水凝集法:
①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间 长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞 凝集,因此,不适于反向定型。 ②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应 时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密, 促进凝集作用,适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱, 如抗A抗B标准血清效价低时,易造成漏检或误定。如 加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此类错 误。
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2 . Rh血型系统概述
Rh血型系统内有45种不同的抗原,主要 以 D、E、C、c、e为主要,其中D抗原 最重要,根据红细胞上D抗原的有无, 可分类红细胞为Rh阳性或Rh阴性。
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3. ABO血型鉴定方法
鉴定原理:常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及 血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。
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ABO血型鉴定
凝胶微柱法
是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生 凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗 体,加入试剂、标本,用专用离心机离心后可 直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操 作标准化,定量加样,确保结果准确性
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4. Rh血型鉴定
Rh血型血清不含天然抗体, Rh血型的 抗体是通过免疫产生的免疫抗体,根据免 疫抗体的特性,在鉴定Rh 血型时,要用 检测免疫抗体的方法进行测定,用酶法、 聚凝胺法等,如有单克隆的IgM型的抗D, 才可用盐水法。
➢ 在滴定血型试剂的时候,少量滴到相邻试管, 造成污染等。
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5.临床血型报错常见原因分析
护理人员采集标本错误
住院患者血液标本由护士采集,若 果其责任心不强,精力不集中,极容易 将患者标本张冠李戴,或者多人抽血未 及时贴标签,或者贴标签时贴错化验单, 导致标本错混现象等
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血型鉴定注意事项
④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好采用 试管法鉴定血型。
1.
⑤玻片法反应时间不能少于10min,否则较弱凝集不能出现,造成假 阴性。
⑥正、反定型结果一致才可发报告。
⑦反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制,血 型抗体可减弱或消失;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价 增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难;新生 儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因 而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅 度下降或被检者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗体,可引起假阴性或 血型鉴定错误。
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5.临床血型报错常见原因分析
操作错误
➢ 用试管法检测血型时,红细胞浓度与抗原抗体比例不 适,如红细胞悬液过浓,标准血清中抗体全部被吸收, 呈后带现象不明显凝集或者凝集;红细胞悬液太浅, 抗体浓度过高,呈前带现象而不易凝集或凝集很弱, 若未经显微镜检测很难发现,造成定型报告错误。
➢ 用玻片法检测时,玻片清洗不彻底,或者反应时间不 够(反应时间不得少于10分钟),造成假阴性或者假 阳性。
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血型鉴定注意事项
①所1. 用器材必须干燥清洁、防止溶血,凝集,避免交叉污染,标 准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室温后再用,用毕后应尽快 放回冰箱保存。
②加试剂顺序ห้องสมุดไป่ตู้一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实 是否漏加血清。
③虽然,IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强,但 为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温20℃~24℃内进行试验, 而37℃条件,可使反应减弱。
血型鉴定方法及报告错误原 因分析
十堰市妇幼保健院检验科 杨业伟
主要内容
一.血型系统概述 二.ABO血型及Rh血型鉴定方法 三.血型鉴定注意事项 四.血型报告错误原因分析
1 . ABO血型系统概述
血型是指一个人红细胞上带有或者缺乏一些特 异性的物质。这些特异性的物质称为抗原。
ABO血型分类原则:红细胞上有A抗原、血清中 有抗B者称为A型;红细胞上有B抗原、血清中 有抗A者称为B型 ;红细胞上有A和B抗原、血 清中无抗A和抗B者称为AB型;红细胞上无A和B 抗原、血清中有抗A和抗B者称为O型。
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Rh血型鉴定
四、抗人球蛋白法
不完全IgG类抗D抗体结合了含有相应抗原 的红细胞后,因其分子量小,在盐水介质 中只能与红细胞结合,使红细胞致敏,即 在D红细胞包被一层IgG抗体,而不能使其 连接起来发生凝集。加入经一定稀释的抗 人球蛋白血清后,抗人球蛋白可与红细胞 上结合的不完全抗体结合,将致敏红细胞 连接,发生肉眼可见的凝集。
➢ 忽略溶血现象,不能正确识别和解释结果。
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5.临床血型报错常见原因分析
检验人员责任性错误
➢ 在工作中,由于精力不集中,比如要鉴定一号 标本时, 错拿2号或者3号的标本,或者发报 告时,将鉴定的血型结果输入电脑时,由于鼠 标点击错误而造成血型输入错误。
➢ 鉴定血型时,抗a、抗b试剂对调,结果a型跟 b型结果也对调,造成错误。
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Rh血型鉴定
二、盐水法 又称为人源盐水介质抗D试验,是采用二 硫苏糖醇等物质作为免疫球蛋白化学变性 剂,处理采自人源的IgG 抗D血清,使小分 子的IgG 抗体“转变”成类似大分子的 “IgM”抗体的作用。这种IgM型抗D血清 可用于Rh血型系统D血型的快速检测。
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Rh血型鉴定
三、聚凝胺法 聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物,
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Rh血型鉴定方法
一、酶介质法 二、盐水法 三、聚凝胺法 四、抗人球蛋白法
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Rh血型鉴定
一、酶介质法 Rh血型抗体因其分子量小,在结合了具有相应抗 原的红细胞后,并不能将相邻的红细胞彼此连接 起来,使红细胞发生凝集。酶(木瓜酶、菠萝酶 等)可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸,降低 红细胞表面负电荷,使红细胞之间排斥力减小, 红细胞间距缩小,在不完全抗体的作用下发生凝 集。
常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞 上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清 中未知的抗体。
结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性
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ABO血型鉴定
生理盐水凝集法:
①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间 长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞 凝集,因此,不适于反向定型。 ②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应 时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密, 促进凝集作用,适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱, 如抗A抗B标准血清效价低时,易造成漏检或误定。如 加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此类错 误。
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2 . Rh血型系统概述
Rh血型系统内有45种不同的抗原,主要 以 D、E、C、c、e为主要,其中D抗原 最重要,根据红细胞上D抗原的有无, 可分类红细胞为Rh阳性或Rh阴性。
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3. ABO血型鉴定方法
鉴定原理:常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及 血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。
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ABO血型鉴定
凝胶微柱法
是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生 凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗 体,加入试剂、标本,用专用离心机离心后可 直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操 作标准化,定量加样,确保结果准确性
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4. Rh血型鉴定
Rh血型血清不含天然抗体, Rh血型的 抗体是通过免疫产生的免疫抗体,根据免 疫抗体的特性,在鉴定Rh 血型时,要用 检测免疫抗体的方法进行测定,用酶法、 聚凝胺法等,如有单克隆的IgM型的抗D, 才可用盐水法。
➢ 在滴定血型试剂的时候,少量滴到相邻试管, 造成污染等。
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5.临床血型报错常见原因分析
护理人员采集标本错误
住院患者血液标本由护士采集,若 果其责任心不强,精力不集中,极容易 将患者标本张冠李戴,或者多人抽血未 及时贴标签,或者贴标签时贴错化验单, 导致标本错混现象等
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血型鉴定注意事项
④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好采用 试管法鉴定血型。
1.
⑤玻片法反应时间不能少于10min,否则较弱凝集不能出现,造成假 阴性。
⑥正、反定型结果一致才可发报告。
⑦反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制,血 型抗体可减弱或消失;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价 增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难;新生 儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因 而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅 度下降或被检者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗体,可引起假阴性或 血型鉴定错误。
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5.临床血型报错常见原因分析
操作错误
➢ 用试管法检测血型时,红细胞浓度与抗原抗体比例不 适,如红细胞悬液过浓,标准血清中抗体全部被吸收, 呈后带现象不明显凝集或者凝集;红细胞悬液太浅, 抗体浓度过高,呈前带现象而不易凝集或凝集很弱, 若未经显微镜检测很难发现,造成定型报告错误。
➢ 用玻片法检测时,玻片清洗不彻底,或者反应时间不 够(反应时间不得少于10分钟),造成假阴性或者假 阳性。
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血型鉴定注意事项
①所1. 用器材必须干燥清洁、防止溶血,凝集,避免交叉污染,标 准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室温后再用,用毕后应尽快 放回冰箱保存。
②加试剂顺序ห้องสมุดไป่ตู้一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实 是否漏加血清。
③虽然,IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强,但 为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温20℃~24℃内进行试验, 而37℃条件,可使反应减弱。
血型鉴定方法及报告错误原 因分析
十堰市妇幼保健院检验科 杨业伟
主要内容
一.血型系统概述 二.ABO血型及Rh血型鉴定方法 三.血型鉴定注意事项 四.血型报告错误原因分析
1 . ABO血型系统概述
血型是指一个人红细胞上带有或者缺乏一些特 异性的物质。这些特异性的物质称为抗原。
ABO血型分类原则:红细胞上有A抗原、血清中 有抗B者称为A型;红细胞上有B抗原、血清中 有抗A者称为B型 ;红细胞上有A和B抗原、血 清中无抗A和抗B者称为AB型;红细胞上无A和B 抗原、血清中有抗A和抗B者称为O型。