血红蛋白测定实验
实验二血红蛋白测定白细胞计数实验
实验二血红蛋白测定白细胞计数实验一、实验目的本实验旨在通过血红蛋白测定方法，对白细胞计数进行实验，并掌握相关的操作技巧和实验原理。
二、实验原理血红蛋白测定是通过草酸亚铁试剂与血红蛋白中的铁离子发生络合反应，形成血红蛋白-草酸亚铁络合物，进而测定出血红蛋白的含量。
通过对样品的均匀悬浮液进行比色测定，得出血红蛋白的浓度，从而实现对白细胞计数的目的。
三、实验仪器和试剂1. 仪器：血常规分析仪2. 试剂：0.2%草酸亚铁溶液、双氯加乙酰胺稀溶液、磷酸盐缓冲液、去离子水、血样四、实验步骤1. 操作前准备：(1) 调节血常规分析仪为透射光测定模式，设置好相应的波长。
(2) 准备好0.2%草酸亚铁溶液、双氯加乙酰胺稀溶液、磷酸盐缓冲液。
(3) 使用去离子水将血常规分析仪的反应池冲洗干净。
2. 样品制备：(1) 取一定量的血样，并避免气泡的产生。
(2) 将血样与双氯加乙酰胺稀溶液按比例混合，使其完全混合均匀。
(3) 用磷酸盐缓冲液稀释血样，制成不同浓度的样品液。
3. 实验操作：(1) 将制备好的不同浓度的样品液分别注入预先准备好的试管中。
(2) 同时，在一组试管中加入适量的去离子水作为空白对照。
(3) 将试管放入血常规分析仪中，按照仪器要求进行测量。
4. 记录结果：(1) 通过血常规分析仪测得各样品的吸光度数值。
(2) 画出吸光度与样品浓度的标准曲线。
(3) 根据标准曲线，计算出待测样品的血红蛋白浓度。
五、实验数据处理根据血红蛋白浓度的计算公式，将实验测得的吸光度数值代入，计算出不同样品的血红蛋白浓度。
通过对标准曲线的拟合，进一步计算出待测样品的白细胞计数。
六、实验注意事项1. 操作过程中避免气泡的产生，以免影响实验结果的准确性。
2. 严格按照实验步骤进行操作，确保实验的可重复性和准确性。
3. 注意安全操作，避免试剂的误食或皮肤接触。
4. 注意保持实验环境的清洁，避免实验样品的污染和交叉污染的发生。
七、实验结果与讨论根据实验数据计算得出的血红蛋白浓度及白细胞计数可以用于评估人体的健康状况。
血红蛋白测定 实验报告
血红蛋白测定实验报告血红蛋白测定实验报告引言：血红蛋白是一种重要的血液成分，它负责运输氧气到我们身体的各个部位。
血红蛋白测定是一项常见的实验，用于评估人体健康状况和诊断一些疾病。
本实验旨在探究血红蛋白测定的原理和方法，并通过实验数据分析来验证其准确性和可靠性。
实验目的：1. 了解血红蛋白的作用和重要性；2. 掌握血红蛋白测定的原理和方法；3. 通过实验数据分析，验证血红蛋白测定的准确性和可靠性。
材料和方法：1. 实验仪器：血红蛋白测定仪；2. 实验材料：血液样本、试剂盒；3. 实验步骤：a. 取一定量的血液样本；b. 使用试剂盒中的试剂与血液样本反应；c. 通过血红蛋白测定仪测量反应产生的颜色强度；d. 根据测量结果计算血红蛋白浓度。
结果和讨论：在本实验中，我们使用了血红蛋白测定仪和试剂盒来测量血液样本中的血红蛋白浓度。
实验结果显示，血液样本的颜色强度与血红蛋白浓度呈正相关。
通过测量结果，我们可以得出以下结论：1. 血红蛋白测定的原理是基于血红蛋白与试剂反应产生的颜色变化。
这种颜色变化可以通过血红蛋白测定仪来测量和定量。
2. 本实验使用的试剂盒中含有特定的化学物质，能够与血红蛋白反应生成一种有色化合物。
这种化合物的颜色强度与血红蛋白浓度成正比。
3. 血红蛋白测定仪通过光学原理，测量反应产生的有色化合物的吸光度。
根据吸光度值，可以计算出血红蛋白浓度。
4. 本实验的测量结果与已知血红蛋白浓度的标准值进行了比较。
结果显示，实验测量值与标准值之间的误差较小，说明血红蛋白测定具有较高的准确性和可靠性。
结论：血红蛋白测定是一种常见且可靠的实验方法，用于评估人体健康状况和诊断一些疾病。
本实验通过实验数据分析，验证了血红蛋白测定的准确性和可靠性。
在今后的临床应用中，血红蛋白测定将继续发挥重要作用，为医生提供准确的诊断依据，帮助患者及时获得有效的治疗。
总结：血红蛋白测定是一项重要的实验，其结果对评估人体健康状况和诊断疾病具有重要意义。
《血红蛋白含量测定》实验综述报告
《血红蛋白含量测定》实验综述报告血红蛋白是由珠蛋白、亚铁血红素等组成，作为红细胞内的一种机能蛋白，在生物体内起到传输氧气、传递电子等功能，与氧和能量代谢有关的重要活动。
在临床上出现各类贫血、白血病及心脏病等症状常与血红蛋白异常有关，因此，人体血液中和尿液的血红蛋白含量的测定是临床检测的一个重要内容。
通常用血红蛋白内的珠蛋白和亚铁血红素在血液中的总浓度来表示。
血红蛋白成分的评价应用范围较广，其涉及动物学、医学、体育学、生物工程学等领域。
目前，随着检验技术的飞速发展和医疗器械的不断改进，目前，血红蛋白含量检测方法主要有比重法、比色法721分光光度仪法、光电比色、电流阻抗法、胶体金法溶血测试条等6个不同方法测定。
1 比重法比重法是血红蛋白测定的最原始的方法，在血库或大量的献血员采血时为了节约时间，看是否贫血，在硫酸铜溶液中加入一滴于溶液中，通过其浮力方法是否大于排开水的重量如果沉入杯底，可以献血，血滴漂浮为贫血。
通过血滴在水中的比重变化来观察人体是否贫血，此方法是基于对血滴重量和在水中浮力进行测量，通过肉眼观察，粗略估计而得出的。
是依据阿基米德原理，血红蛋白是由各种亚铁血红素等构成的，血红蛋白内珠蛋白和亚铁血红素的量多少，直接影响血红蛋白含量多少，因此通过血红蛋白比重法可推算出是否贫血。
该方法不需要特定的设备，操作简单，但准确度低，没有准确的文字描述，不适合推广。
只用于一般体检且对受试者体能状况有一定的要求，故对体质较弱的人群不要采用。
2 血红蛋白目测比色法血红蛋白目测比色法是对比重法的替代，此测定器材包括两个部分，一个是比色管，一个是参照比色槽。
取0.1mol/L稀盐酸溶液2-3滴加于比色管中，再加20ul血液于比色管中，混匀、静置15分钟，不断加蒸馏水于亮光处与比色槽颜色相对照一样，液体的高度即可读取刻度即血红蛋白含量。
由于指定颜色与刻度存在对应关系，进而可以推算出受试者的血红蛋白浓度。
比色法的优点是受试者可以准确知道血红蛋白含量。
血红蛋白实验实训报告单
实验名称：血红蛋白含量测定实验日期：____年__月__日实验地点：____实验室实验者：____一、实验目的1. 掌握血红蛋白含量测定的原理和方法。
2. 学会使用血红蛋白分析仪进行血红蛋白含量的测定。
3. 熟悉血红蛋白分析仪的操作流程和维护方法。
二、实验原理血红蛋白（Hemoglobin，Hb）是红细胞内的一种含铁蛋白质，主要功能是运输氧气和二氧化碳。
血红蛋白含量的测定是临床医学中一项重要的检查项目，可以反映人体贫血的程度。
本实验采用氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白含量。
氰化高铁血红蛋白法：在一定条件下，血红蛋白中的Fe2+被氧化成Fe3+，与氰化钾作用生成稳定的棕红色复合物——氰化高铁血红蛋白，其在540nm处的吸光度与血红蛋白含量成正比。
三、实验器材与试剂1. 实验器材：- 血红蛋白分析仪- 5ml移液管- 吸管- 玻璃比色皿- 离心机- 电子天平- 实验室用纯水2. 实验试剂：- 氰化钾- 稀释液- 血红蛋白标准液- 样本四、实验步骤1. 样本采集与处理：- 按照要求采集血液样本，置于抗凝管中。
- 将血液样本离心，取上层血清或血浆。
- 用5ml移液管准确移取1ml血清或血浆于比色皿中。
2. 标准曲线的绘制：- 按照说明书配置血红蛋白标准液。
- 分别取0、0.5、1.0、1.5、2.0ml标准液于比色皿中，用稀释液定容至2ml。
- 将比色皿放入血红蛋白分析仪中，在540nm波长下测定吸光度。
3. 血红蛋白含量测定：- 将处理好的样本按照步骤2进行测定。
- 记录吸光度值。
4. 数据处理：- 根据标准曲线，计算样本中血红蛋白含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：- 以血红蛋白浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血红蛋白含量测定：- 根据标准曲线，计算样本中血红蛋白含量。
3. 结果分析：- 将实验结果与正常参考值进行比较，判断样本是否存在贫血。
六、实验讨论1. 实验过程中可能出现的误差：- 样本采集和处理过程中可能出现的误差。
血红蛋白测定实验报告
血红蛋白测定实验报告实验目的：本实验旨在通过测定血液中的血红蛋白浓度，了解血液的营养状况，评估身体的健康状况。
实验原理：血红蛋白是红细胞内的主要蛋白质，它含有铁元素，能与氧结合形成氧合血红蛋白，负责运输氧气到全身各个组织。
测定血红蛋白浓度是评估贫血程度的一种常用方法。
本实验采用西林法测定血红蛋白浓度。
西林法是一种经典的测定血红蛋白浓度的方法，它利用了草酸亚铁与血红蛋白的特异性反应，生成淡紫色的铁蓝衍生物。
通过比色法测定溶液的吸光度，再根据标准曲线计算出血红蛋白浓度。
实验材料和设备：1. 血红蛋白测定试剂盒2. 安全眼镜和手套3. 量筒、试管、移液管等常见实验器具4. 分光光度计实验步骤：1. 将血液样本放置于离心管中，以3000转/分钟的速度离心10分钟，获取上清血浆。
2. 根据试剂盒说明书，将血浆与试剂按比例混合，并搅拌均匀。
3. 将混合液转移至试管中，并在光度计中测量吸光度值，记录下各个浓度的吸光度值。
4. 绘制标准曲线，将吸光度值作为横坐标，血红蛋白浓度作为纵坐标，绘制出吸光度-浓度曲线。
5. 测量待测样本的吸光度，并根据标准曲线计算出血红蛋白浓度。
实验结果：根据实验中测量的吸光度值和标准曲线，计算出待测样本的血红蛋白浓度为X g/L。
实验讨论：通过本实验测定的血红蛋白浓度，可以初步判断一个人的贫血程度。
同时，血红蛋白浓度还可以用于监测治疗效果，评估疾病的恢复情况。
然而，血红蛋白浓度只是评估身体健康的一个指标，综合考虑其他因素，如红细胞计数和红细胞压积等，才能全面了解一个人的血液情况。
实验结论：通过血红蛋白测定实验，测得待测样本的血红蛋白浓度为X g/L，初步判断其贫血程度为（正常/轻/中/重）。
但需要结合其他指标综合判断。
实验报告 血红蛋白
实验报告血红蛋白实验报告：血红蛋白引言：血红蛋白是人体中非常重要的一种蛋白质，它负责携带氧气到身体各个组织和器官，维持正常的生理功能。
本实验旨在探究血红蛋白的结构、功能以及与健康的关系。
一、血红蛋白的结构血红蛋白是由四个亚单位组成的复合蛋白，每个亚单位都含有一个铁离子。
这个结构使得血红蛋白具有高度的亲和力，能够与氧气结合形成氧合血红蛋白。
血红蛋白的结构决定了它的功能，也是它能够在人体内发挥作用的基础。
二、血红蛋白的功能血红蛋白的主要功能是携带氧气。
当我们呼吸时，肺部的氧气会与血液中的血红蛋白结合，形成氧合血红蛋白。
然后，这个氧合血红蛋白会通过血液循环输送到身体的各个部位，释放氧气供组织和器官使用。
同时，血红蛋白还能够携带二氧化碳，将其从组织中带回到肺部，完成呼吸过程。
三、血红蛋白与健康的关系血红蛋白的正常水平对人体健康至关重要。
过低的血红蛋白水平可能导致贫血，使身体无法获得足够的氧气，从而引发疲劳、头晕和心慌等症状。
而过高的血红蛋白水平则可能导致血液黏稠度增加，增加心脏负担，增加心血管疾病的风险。
因此，保持适当的血红蛋白水平对维持健康至关重要。
四、血红蛋白的检测方法为了了解血红蛋白的水平，医生通常会通过血液检测来进行评估。
常见的检测方法包括完全血细胞计数（CBC）和血红蛋白电泳。
完全血细胞计数可以提供血红蛋白的数量和其他相关参数，而血红蛋白电泳则可以检测血红蛋白的类型和异常。
五、影响血红蛋白水平的因素血红蛋白水平受多种因素的影响。
饮食中的铁、维生素B12和叶酸等营养物质是血红蛋白合成的重要组成部分，缺乏这些物质会导致血红蛋白水平下降。
同时，慢性疾病、肾脏问题和骨髓疾病等也可能影响血红蛋白的生成和功能。
结论：血红蛋白在人体中起着至关重要的作用，它负责携带氧气到身体各个组织和器官，维持正常的生理功能。
保持适当的血红蛋白水平对维持健康至关重要。
通过血液检测可以了解血红蛋白的水平，进而评估身体的健康状况。
《血红蛋白含量测定》实验综述报告
血红蛋白含量测定实验综述报告前言血红蛋白（Hb）是人体内比较常见的一种蛋白质，它负责携带氧气和二氧化碳，在维持人的生命活动和健康方面起着重要的作用。
因此，对于血红蛋白含量的测定，具有重要的临床意义。
本文主要介绍了血红蛋白含量测定的一些相关实验方法和步骤。
实验材料1.血糖试剂盒2.血红蛋白含量测定仪器3.暗室4.血液样本（采集自参加实验的志愿者）实验方法步骤1：血液样本处理采集完血液样本后，需要先进行一些必要的处理。
首先，需要将采集到的血液样本与血糖试剂盒中的试剂混合均匀，并置于暗室内培养15分钟。
步骤2：测定吸光度在血液样本和试剂混合物培养完毕后，需要使用血红蛋白含量测定仪器测定样品的吸光度。
这里介绍一下使用光度计进行吸光度测定的具体步骤：1.取出测定仪，并将其插到电源插座上，接通电源后打开电源开关。
2.选择合适的波长。
这里以540 nm为例。
3.利用去离子水调零，将样品装入比色皿并置于光度计中，读取吸光度值。
步骤3：计算血红蛋白含量通过上述步骤，我们可以得到样品的吸光度值，接下来需要根据吸光度值来进行血红蛋白含量的计算。
具体来说，可以使用以下公式进行计算：血红蛋白浓度（g/L）=吸光度值（nm）/系数A总血红蛋白（g/L）=血红蛋白浓度（g/L）×Dilution Ratio×Correction Factor（其中系数A、Dilution Ratio和Correction Factor具体数值因测量仪器不同而异）实验注意事项1.在进行操作时，需要按照正常的实验操作流程进行，比如避免测量过程中的干扰因素。
2.对于各项材料的使用和实验过程中的注意事项等，需要仔细阅读使用说明书。
实验结果我们在实验中使用的是三大健康人群的血液样本。
通过计算，得出他们的血红蛋白浓度如下：志愿者编号血红蛋白浓度（g/L）001 128.4002 146.7003 135.9实验结论通过实验，我们可以得出三名志愿者的血红蛋白含量，对三名志愿者的血红蛋白含量进行比较，发现存在一定差异。
测定血红蛋白含量实训报告
#### 一、实验目的1. 理解血红蛋白在人体中的作用及其与健康状况的关系。
2. 掌握血红蛋白含量测定的原理和方法。
3. 学会使用分光光度计等仪器进行血红蛋白定量分析。
4. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。
#### 二、实验原理血红蛋白（Hemoglobin，Hb）是红细胞内的一种含铁蛋白质，主要负责氧气的运输。
血红蛋白含量是衡量血液携氧能力的重要指标。
本实验采用邻甲联苯胺法测定血红蛋白含量，该方法是利用血红蛋白中的亚铁离子与邻甲联苯胺反应生成蓝色化合物，通过测定该化合物的吸光度来计算血红蛋白含量。
#### 三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血浆样本- 邻甲联苯胺试剂- 盐酸- 水浴锅- 分光光度计- 移液器- 试管2. 实验仪器：- 邻甲联苯胺试剂- 盐酸- 水浴锅- 分光光度计- 移液器- 试管#### 四、实验步骤1. 样本准备：取适量血浆样本，置于试管中，用移液器加入适量的邻甲联苯胺试剂，混匀。
2. 反应：将混合后的样本置于水浴锅中，加热至60℃，反应5分钟。
3. 冷却：将反应后的样本取出，冷却至室温。
4. 测定：使用分光光度计，在540nm波长处测定样本的吸光度。
5. 计算：根据标准曲线，计算血红蛋白含量。
#### 五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：根据不同浓度的血红蛋白标准溶液，绘制标准曲线。
2. 血浆样本的测定：根据实验步骤，测定血浆样本的吸光度。
3. 血红蛋白含量的计算：根据标准曲线，计算血浆样本中血红蛋白的含量。
4. 结果分析：通过比较实验结果与正常值，分析受试者的血红蛋白含量是否在正常范围内。
#### 六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了血红蛋白含量测定的原理和方法。
2. 学会了使用分光光度计等仪器进行血红蛋白定量分析。
3. 提高了实验操作技能和数据分析能力。
4. 认识到血红蛋白含量对人体健康的重要性。
#### 七、实验讨论1. 影响血红蛋白含量的因素有哪些？如何进行预防和治疗？2. 邻甲联苯胺法测定血红蛋白含量的优缺点是什么？3. 如何提高实验结果的准确性和重复性？#### 八、实验反思1. 在实验过程中，应严格按照实验步骤进行操作，确保实验结果的准确性。
血红蛋白测定实验报告
血红蛋白测定实验报告血红蛋白是人体内一种重要的血液蛋白，它能够携带氧气到达身体各个器官和组织。
血红蛋白测定是临床常用的一种检验方法，能够提供有关患者体内氧合情况的重要信息。
本次实验旨在通过测定参与实验的人员的血液样本中的血红蛋白含量，来了解其体内氧合情况及贫血情况。
实验步骤：1. 收集血液样本：准备工作台和所需器材，包括带有一次性安全针头的注射器、耗材等。
选择一个适当的部位，通常是患者的指尖。
在清洁皮肤后，用注射器抽取一定量的血液样本。
2. 采用血红蛋白计测定仪测定血红蛋白含量：将血液样本倒入已经预装了染剂的检测管中，混合均匀。
将检测管放入血红蛋白计测定仪中。
根据血红蛋白计测定仪的说明书，操作仪器进行测定。
实验结果：本次实验中测得参与者A的血红蛋白含量为X克/升，参与者B的血红蛋白含量为Y克/升，参与者C的血红蛋白含量为Z克/升。
讨论与分析：通过本次实验，我们发现不同参与者的血红蛋白含量存在一定的差异。
血红蛋白含量的正常范围可能因个人的年龄、性别、健康状况和生活习惯等因素而有所不同。
血红蛋白在人体中起着至关重要的作用，它能够与氧气结合形成氧合血红蛋白，并将氧输送到身体各个组织和器官中。
因此，血红蛋白含量的变化往往与身体的氧合情况有关。
根据世界卫生组织的建议，成年男性的正常血红蛋白范围为130-170克/升，成年女性的正常血红蛋白范围为120-150克/升。
如果血红蛋白低于这个范围，就可能存在贫血的情况。
贫血是一种常见的疾病，其主要特征是机体内的红细胞数量或质量的减少，导致无法满足身体对氧气的需求。
贫血可以由多种原因引起，例如缺铁、缺维生素B12或叶酸、慢性疾病等。
血红蛋白测定不仅在临床中广泛应用，而且在科研领域也扮演着重要角色。
通过测定血红蛋白的含量，可以了解机体的氧合情况，为临床诊断和治疗提供重要依据。
总结：通过本次血红蛋白测定实验，我们了解到血红蛋白是人体中不可或缺的重要物质。
血红蛋白含量的测定可以为医生提供诊断和治疗贫血等疾病的依据，也为科研人员提供了重要的实验数据。
运动生物化学(9.5.1)--血红蛋白的测定
540nm 比色 , 空白调零读取测定管光密度值
移液管的使用
1. 选管原则： (0.5ml,1ml,2ml,5ml,10ml) 选择与所需量相等的或大于并与所需量最接近的移液 管 2. 持管手势：一手的拇指和中指拿移液管的上端， 使食指能灵活捂住管口，其它手指能轻轻转动。
采血的过程
血红蛋白的定量测定
（氰化高铁血红蛋白法）
实验目的（内容）
1. 了解血红蛋白测定的意义； 2. 学习测定血红蛋白的方法、实验原理
和操作方法； 3. 掌握移液管的使用、指尖采血的技能
并 初步掌握 S22PC 分光光度计的使用； 4. 根据实验结果分析讨论写出实验报告 。
1. 血红蛋白测定的意义：
血红蛋白 (Hb) 也称血色素，主要功 能 : 运输氧气和二氧化碳，维持体液酸碱 平衡。 正常参考值：
成年男性 120-160g/L ； 成年女性 110-150g/L ； 14 岁以下儿童的 血红蛋白含量比成人的 低
. 血红蛋白的实验方法、原理
方法：氰化高铁血红蛋白法
原理： Hb 被高铁氰化钾氧化成高 铁血红蛋白（ Hi ）， Hi 与氰离子结合 成氰化高铁血红蛋白（ HiCN ），它在 540nm 处有一吸收峰，测其光密度， 可得 Hb 的含量。
采血时注意清洁消毒，皮肤破损处禁止采 血；皮肤消毒后一定要擦干酒精，否则不易
实验报告书写要求
实验题目
一、实验目的和意义 二、实验原理 三、试剂和器材 四、实验操作步骤 五、结果计算 六、分析讨论
分析讨论要求
正常参考值（男、女）。 血红蛋白的功能、在运训中的作用。 结果分析 结合实验操作、身体机能、运动负荷分析
； Hb 含量过高的原因：稀释过度；取血过
实验一(2)血红蛋白测定
血红蛋白测定及曲线的绘制
三、实验操作：
0.6 吸 0.5 光 度 0.4 值 0.3 (A) 0.2
HicN曲线图
. . .
0.1
0
.
50 100 150 200
血红蛋白浓度（g/L）
血红蛋白测定及曲线的绘制
氢化高铁血红蛋白标准曲线或按下式求出吸光度 血红蛋白换算常数（K值） K=qHb（g/L）/qA=（50+100+150+200）/ （0.13+0.27+0.405+0.54）=371.75 四、计算:血红蛋白（g/L）=测定管吸光度×K 正常参考值： 成年男性：120-160g/L 成年女性：110-150g/L 新生儿： 170-220g/L
祝同学们试验成功！
血红蛋白测定及曲线的绘制
三、实验操作： 1、取指血20ul，加到5ml血红蛋白转化液中， 混匀，静止5分钟。 2、用分光光度计比色，波长540nm，以蒸馏水 或空白转化液调零，测定吸光度。 3、用血红蛋白浓度为50g/L、100g/L、150g/L、 200g/L在721型分光光度计上测定吸光度分别 为0.13，0.27，0.405，0.54.
实验一原理 实验操作 计算及正常参考值
血红蛋白测定及曲线的绘制
一、实验目的： 掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。 二、实验原理： 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外 各种血红蛋白可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋 白，再与CNˉ结合生成稳定的棕红色氰化高铁血 红蛋（HicN）。 HicN最大吸收峰540nm，最小吸收波谷 504nm，在特定的条件下，毫摩尔消光系数为 44L.mmol-1 .cm-1 ，因此根据标本的吸光度，即 求得血红蛋白浓度。
实验报告_血红蛋白
一、实验目的1. 掌握血红蛋白的提取和分离方法。
2. 学习使用分光光度计测定血红蛋白的浓度。
3. 了解血红蛋白在生理和病理过程中的作用。
二、实验原理血红蛋白是一种含铁的蛋白质，是红细胞中携带氧气的主要成分。
血红蛋白的浓度是衡量红细胞携氧能力的重要指标。
本实验采用分光光度法测定血红蛋白含量，其原理是基于血红蛋白在特定波长下具有特定的光吸收特性。
三、实验材料1. 人血清2. 氯化钠溶液3. 氢氧化钠溶液4. 乙酸缓冲液5. 酚酞指示剂6. 高铁氰化钾溶液7. 分光光度计8. 50ml容量瓶9. 1ml移液管10. 10ml量筒四、实验方法1. 血红蛋白提取：取一定量人血清，加入氢氧化钠溶液，充分振荡，使血红蛋白释放出来。
2. 血红蛋白分离：将提取的血红蛋白溶液加入乙酸缓冲液，调节pH至4.6，离心分离血红蛋白。
3. 血红蛋白测定：取一定量的血红蛋白溶液，加入高铁氰化钾溶液，充分振荡，使血红蛋白氧化为高铁血红蛋白。
用分光光度计在540nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算血红蛋白浓度。
五、实验步骤1. 准备标准曲线：取一系列已知浓度的血红蛋白标准溶液，按照实验方法测定吸光度，以吸光度为纵坐标，血红蛋白浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 提取血红蛋白：取2ml人血清，加入10ml氢氧化钠溶液，充分振荡，使血红蛋白释放出来。
3. 分离血红蛋白：将提取的血红蛋白溶液加入10ml乙酸缓冲液，调节pH至4.6，离心分离血红蛋白。
4. 测定血红蛋白：取1ml血红蛋白溶液，加入1ml高铁氰化钾溶液，充分振荡，使血红蛋白氧化为高铁血红蛋白。
用分光光度计在540nm波长下测定吸光度。
5. 计算血红蛋白浓度：根据标准曲线，计算血红蛋白浓度。
六、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线，得到线性方程为y=0.021x+0.004，其中y为吸光度，x为血红蛋白浓度。
2. 血红蛋白浓度测定：根据实验步骤，测定血红蛋白溶液的吸光度为0.60。
血红蛋白的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握血红蛋白测定的原理和方法。
2. 了解血红蛋白在临床医学中的应用。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理血红蛋白（Hemoglobin，Hb）是红细胞内的一种含铁蛋白质，具有携带氧气和二氧化碳的功能。
血红蛋白的测定方法主要包括比色法、直接测定法和血浆游离血红蛋白测定法等。
本实验采用比色法测定血红蛋白含量。
三、实验材料与仪器1. 试剂：血红蛋白标准液、邻甲联苯胺溶液、双氧水、醋酸溶液、蒸馏水、生理盐水等。
2. 仪器：分光光度计、微量移液器、试管、离心机、移液管等。
四、实验方法与步骤1. 标准曲线绘制（1）取一系列试管，分别加入不同浓度的血红蛋白标准液，加入蒸馏水至一定体积。
（2）向各试管中加入适量的邻甲联苯胺溶液和双氧水，混匀。
（3）室温放置10分钟后，用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
（4）以血红蛋白浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血红蛋白含量测定（1）取一定量的待测血液，加入适量的生理盐水，混匀。
（2）离心分离血浆，取上层血浆至试管中。
（3）按照标准曲线绘制方法，测定血浆的吸光度。
（4）根据标准曲线，计算待测血液中的血红蛋白含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据，绘制标准曲线如下：```血红蛋白浓度（g/L）| 吸光度-------------------|--------0.0 | 0.0000.2 | 0.1500.4 | 0.3000.6 | 0.4500.8 | 0.6001.0 | 0.750```2. 血红蛋白含量测定根据标准曲线，计算待测血液中的血红蛋白含量为X g/L。
六、实验讨论1. 本实验采用比色法测定血红蛋白含量，该方法操作简便、快速，准确度较高。
2. 实验过程中，应注意防止血红蛋白污染，确保实验结果的准确性。
3. 血红蛋白含量测定在临床医学中具有重要意义，可用于诊断贫血、溶血性贫血等疾病。
血红蛋白实验实训报告
一、实验目的1. 了解血红蛋白的生理功能和生化特性。
2. 掌握血红蛋白的提取、分离和定量方法。
3. 熟悉实验操作技能，提高实验操作能力。
二、实验原理血红蛋白（Hemoglobin，Hb）是红细胞内的一种含铁蛋白质，主要功能是运输氧气和二氧化碳。
血红蛋白的分子量约为67000，由四个亚基组成，每个亚基包含一个血红素（Heme）基团。
血红素是血红蛋白的主要功能基团，它能够与氧气和二氧化碳结合。
血红蛋白的提取、分离和定量方法主要包括以下几种：1. 离心法：根据血红蛋白的密度不同，通过离心分离血红蛋白。
2. 电泳法：根据血红蛋白的电荷和分子量差异，通过电泳分离血红蛋白。
3. 荧光光谱法：通过荧光光谱分析血红蛋白的浓度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜血液、生理盐水、蒸馏水、0.9%氯化钠溶液、三氯乙酸、碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铵、磷酸盐缓冲液、生理盐水、10%TCA溶液、1%Na2CO3溶液、0.1%氢氧化钠溶液、邻苯二甲酸氢钾、荧光分光光度计等。
2. 实验仪器：离心机、电泳仪、荧光分光光度计、天平、移液器、烧杯、试管、玻璃棒、滴管等。
四、实验步骤1. 血红蛋白的提取（1）取新鲜血液5ml，加入等体积的生理盐水，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
（2）取上层红细胞沉淀，加入等体积的三氯乙酸溶液，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
（3）取上层红细胞沉淀，加入0.9%氯化钠溶液，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
（4）取上层红细胞沉淀，加入10%TCA溶液，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
（5）取上层红细胞沉淀，加入1%Na2CO3溶液，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
（6）取上层红细胞沉淀，加入0.1%氢氧化钠溶液，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
2. 血红蛋白的分离（1）取上述提取的血红蛋白溶液，加入10%硫酸铵溶液，充分混合后离心（3000r/min，10min）。
血红蛋白的测定实验报告
血红蛋白的测定实验报告血红蛋白的测定实验报告引言：血红蛋白是一种重要的血液成分，它负责将氧气输送到身体各个组织和器官中。
因此，准确测定血红蛋白水平对于评估人体健康状况至关重要。
本实验旨在通过一系列实验步骤，测定血液中血红蛋白的含量。
材料与方法：1. 血液样本：从志愿者的指尖采集足够的血液样本。
2. 高氯酸铁法：将血液样本与高氯酸铁溶液混合，并在酸性条件下进行反应。
3. 分光光度计：使用分光光度计测量反应后的溶液的吸光度。
4. 标准曲线：制备一系列已知浓度的血红蛋白溶液，以建立标准曲线。
实验步骤：1. 采集血液样本：使用消毒棉球清洁指尖，然后用无菌针头将足够的血液采集到试管中。
2. 加入高氯酸铁溶液：将已采集的血液样本与高氯酸铁溶液按比例混合，确保完全混合。
3. 反应：将混合溶液置于酸性条件下反应一段时间，通常为15分钟。
4. 测量吸光度：使用分光光度计，将反应后的溶液吸入比色皿中，并将其放入光度计中，记录吸光度值。
5. 制备标准曲线：分别测量不同浓度的血红蛋白溶液的吸光度，并绘制标准曲线。
结果与讨论：通过上述实验步骤，我们得到了一系列已知浓度的血红蛋白溶液的吸光度值，并绘制了标准曲线。
根据待测血液样本的吸光度值，我们可以通过标准曲线找到相应的血红蛋白浓度。
然而，在实际操作中，我们可能会遇到一些问题。
首先，血液样本的采集过程需要小心，以避免污染或损坏样本。
其次，高氯酸铁溶液的配制和使用需要准确控制比例和反应时间，以确保反应的准确性和可重复性。
最后，分光光度计的使用也需要注意，确保正确操作和准确读数。
此外，本实验中使用的高氯酸铁法是一种常用的测定血红蛋白的方法之一。
然而，还有其他方法可以测定血红蛋白，如比色法、电泳法等。
不同的方法有各自的优缺点，选择适合的方法取决于实验目的和条件。
结论：通过本次实验，我们成功地测定了血液样本中的血红蛋白含量。
血红蛋白作为血液中的重要成分，对于评估人体健康状况具有重要意义。
实验一血红蛋白的测定（氰化法）
实验一血红蛋白的测定（氰化法）1．实验特点实验类型：验证实验类别：专业基础计划学时：3 每组人数：22．实验目的要求：了解氰化法测定血红蛋白的原理，掌握人体血液样本的采集方法，分光光度法测定原理和技术。
3．实验原理：血红蛋白在铁氰化钾和氰化钾的作用下，生成极为稳定的氰化高铁血红蛋白（红色），其颜色深浅与血红蛋白的含量成正比。
氰化高铁血红蛋白在540nm波长下，毫克分子消光系数为44，据此，用分光光度法测其光密度，运用消光系数作血红蛋白的定量测定。
其化学反应式如下：- 1 -- 2 -氰化高铁血红蛋白高铁血红蛋白血红蛋白氰化钾铁氰化钾⎯⎯→⎯⎯⎯⎯→⎯4．实验仪器设备：10μL 血色素吸管（或定量毛细管）5mL 或10mL 带盖试管721分光光度计称取碳酸氢钠140mg 、铁氰化钾200mg 、氰化钾50mg ，用蒸馏水溶解并稀释到1000mL 。
贮存于棕色试剂瓶内，在4°C 冰箱保存，至少可稳定数月到一年。
5．材料消耗费：10元6．实验内容步骤：吸取2.5mL试剂于5mL带盖试管中，加入10μL血液，混匀后放置15min。
选用0.5cm光径比色杯，与540nm波长下，以试剂调节仪器零点，测定各样品管的光密度。
7．注意事项：本法为国际血液学标准化委员会（ICSH）所推荐，具有操作简便、不需要标准、结果准确可靠等优点。
应用本法进行血红蛋白的测定，所用分光光度计的波长必需事先经过校正。
实验条件改变，如更换了光电池或灯泡、电压不稳、试剂换了批号等等均会引起光密度的改变。
为了获得正确结果，可用标准液校正或采用色泽近似的无机盐人工永久标准液来核对，这也是一种行之有效的方法。
如以上两点难以实现，宜采用标准曲线法或直接比较法进行。
血样放入试剂后形成的氰化高铁血红蛋白极为稳定，经试验，在4°C冰箱存放70天之久前后结果仍能保持一致。
为此，可将各地采集的样品在加入试剂后，在2-10°C环境中，集中到中心实验室进行比色测定。
血红蛋白的测定实验报告
血红蛋白的测定实验报告
实验目的：了解血红蛋白的生物学意义及其测定方法，掌握血红蛋白的测定实验技术。
实验原理：血红蛋白是一种四聚体蛋白质，在其全部载氧的状态下，氧气与每个血红蛋白四聚体中的四个铁原子结合。
血红蛋白含有的铁离子可以通过一种称为法因林反应的化学方法来测定。
在这个反应中，铁离子和一种叫做二异丙基联苯胺（DIP）的试剂可以形成一种可见的蓝色化合物。
由于每个血红蛋白分子中含有四个铁原子，因此法因林反应是一种比色的方法，用以估算血中的血红蛋白浓度。
实验步骤：
1. 收集标本：收集血液标本并放入一根带有抗凝剂的试管中。
2. 离心：把试管放入离心机中离心，离心速度为2000r/min，持续时间为5分钟。
3. 液面读数：观察离心后的血液，看到血清在上面，血细胞在下面，用经过充气气压法标定后的血球比重做血红蛋白浓度计算的前提，因此需要记录液面高度。
4. 定比加水：将10ml蒸馏水加入试管中，然后快速倒入附带标有“定比加水”标记的化学试剂，使试管中的液体达到刻度线，现场观察是否达到刻度线即可。
5. 震荡：轻轻地摇动试管，使加入的化学试剂充分与血红蛋白结合。
6. 放置：让试管静置10分钟，使检验结果稳定。
7. 比色：用比色卡将试管中的液体与一系列已知浓度的标准溶液进行比色，并根据比色卡上的颜色计算血中的血红蛋白浓度。
实验结果：实验结果表明，血液样本的血红蛋白浓度为135g/L。
实验结论：通过血红蛋白浓度的测定，可以了解一个人的健康状况，尤其是贫血等疾病。
而这种测定方法简单、快捷、准确，因此在医疗保健行业具有广泛应用。
血红总蛋白实验报告
血红总蛋白实验报告本实验旨在进一步了解血红蛋白的结构和功能，并通过实验方法来测定血红蛋白的浓度。
实验原理：血红蛋白是一种含有铁离子的蛋白质，通过与氧气结合和释放来完成氧气在人体内的运输。
实验中我们使用的是反射光度法来测定血红蛋白的浓度。
在测定前，需要将血红蛋白与一种试剂反应，形成一种具有特定颜色的化合物，然后通过测定该化合物的光吸收值来计算血红蛋白的浓度。
实验步骤：1. 首先将一定量的血红蛋白溶液与试剂混合均匀，并将混合液离心，以除去悬浮的杂质。
2. 将离心后的混合液取出一部分，放入分光光度计中，设置波长为特定值，测定光吸收值。
3. 观察吸光度与血红蛋白浓度之间的关系，并通过标准曲线法来计算未知血红蛋白溶液的浓度。
实验结果：我们首先根据实验操作步骤依次进行了实验，并测定了不同浓度的血红蛋白溶液的吸光度。
通过实验数据，我们绘制出了一个标准曲线，该曲线反映了血红蛋白溶液浓度与吸光度之间的线性关系。
然后，我们通过该标准曲线来计算了未知血红蛋白溶液的浓度，得到了一个相对准确的结果。
讨论与分析：在该实验中，我们使用了反射光度法来测定血红蛋白的浓度。
通过与试剂的反应，我们得到了一种具有特定颜色的化合物，并通过测定其光吸收值来计算血红蛋白的浓度。
在实验过程中，我们需要注意实验条件的控制，以获得准确可靠的结果。
实验中的误差主要来自以下几个因素：首先，实验操作中可能存在的人为误差，例如在混合血红蛋白和试剂时没有完全均匀混合，或者在离心过程中没有完全除去杂质。
其次，仪器仪表的误差也会对实验结果造成影响，例如分光光度计的波长精度和光路的校准等。
此外，血红蛋白溶液的质量也会对实验结果产生影响，例如血红蛋白的纯度和保存条件等。
为了减小误差，我们需要注意以下几个方面：首先，实验操作时要仔细并按照操作步骤进行，确保血红蛋白和试剂完全混合，并通过离心去除杂质。
其次，在测定光吸收值时要保持仪器的稳定，并在使用前进行校准，以保证测量结果的准确性。
血红蛋白的测定
实验四血红蛋白的测定1．本次实验的目的和要求了解和练习沙利氏比色法测定血红蛋白含量。
2．实验内容或原理血液加入稀盐酸后，血红蛋白转化成不易变色的棕色的高铁血红蛋白，可与标准比色板进行比色，从而测得血红蛋白含量。
3．需用的仪器或试剂等人或动物。
沙利氏血红蛋白计、酒精棉球、０.１mol/L盐酸、蒸馏水等。
4．实验步骤（1）先检查血红蛋白计的测定管和吸血管是否清洁，如不清洁则依次用自来水、蒸馏水(３次)、９５％酒精(２次)和乙醚(１～２次)清洗。
（2）将０.１mol/L盐酸加入测定管中至刻度“２”或“１０％”处。
（3）用酒精棉球消毒采血部位，以采血针采血，用吸血管插入流出的血滴深处，吸血至刻度２０ul处，拭净外壁，将血液立即吹入测定管的盐酸中。
反复吸吹，使吸血管中血液全部进入盐酸液中(避免起气泡)。
混匀，１０min后，逐滴加入蒸馏水使液体颜色变浅，边加边混匀并与标准比色板比较，至二者颜色相同止。
（4）读出测定管内液体凹面最低处的刻度，即为每１００mL血液中血红蛋白的克数。
另一方面刻度表示百分率，可参照血红蛋白计的说明换成克数以核对读数。
实验五红细胞脆性的测定、1．本次实验的目的和要求测定红细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力．亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。
了解红细胞沉降率并掌握其测定方法。
了解红细胞凝集现象，并掌握测定血型的方法。
2．实验内容或原理内容：实验室可完成红细胞脆性实验，血红蛋白含量检测的实验内容。
做到改变某些因素时的检测内容，结合实验理解红细胞脆性的概念，分析论证产生的结果。
原理：（1）通过实验了解正常的红细胞悬于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞失去内部液体而皱缩，反之，置于低渗溶液内则水分进入红细胞，使红细胞两面凹陷的圆盘型变为球型，如继续膨大，即发生破裂溶解，形成溶血。
（2）红细胞膜含有凝集原，血浆内含有凝集素。
当相应的凝集原和凝集寨相互作用时，就产生红细胞的凝集现象。
3．需用的仪器或试剂等电子天平、水浴箱、电子称、低速离心机、微量移液器、标准枪架等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血红蛋白测定实验
一、实验目的与任务
了解XF—1B型（或Hb—2000型）血红蛋白仪的使用方法，掌握血红蛋白的测定技术。
有训练运动员在较好训练效果的影响下血红蛋白正常值高于正常成年人，因此，血红蛋白的测定是评定训练效果的重要指标。
二、原理
测定血红蛋白的方法很多，常见的有直接比色，光电比色法，沙利氏比色法（间接比色法）。
我们现在实验室用的是XF—1B型和Hb—2000型血红蛋白仪。
此仪器是采用氰化高铁法，应用光电比色的原理测定血红蛋白值的，其原理是：将全血样品20ul注入5ml氰化高铁血红蛋白稀释液内（亦称文—齐氏液），作251倍稀释，溶化红细胞释出血红蛋白。
稀释剂将血红蛋白先转变成高铁血红蛋白，再转化为氰化高铁血红蛋白。
然后，再用XF—1B 型（或Hb—2000型）Hb仪比色法直接测定显示浓度数，不需任何换算（每次测定只需5秒钟）。
三、实验器材
XF—1B型和Hb—2000型血红蛋白仪、一次性血细胞吸管（刻度10～20ul）、采血针、75%酒精、消毒棉球、培养皿、烧杯、可调加液器、试管架、血红蛋白测定试剂（文—齐氏液）、氰化高铁血红蛋白标准液。
四、实验步骤
1、插上电源，打开血红蛋白仪电源开关，按动进样开关，重复三次吸入蒸馏水，并通电预热20～30分钟。
观察显示是否为“零”。
（按出Hb仪器左下角“测试—定标”按键，使之处于“测试”状态。
）
2、取试管一支，加入Hb测定试剂（文—齐氏液）5ml，放在试管架上备用。
3、采血、比色：先消毒，再用采血针在耳垂或无名指尖处采血，用干棉球擦去第一滴血，待第二滴血自然流出一大滴时，用血细胞吸管取血液20ul（注意：吸管内不可有气泡，否则需重新采血）。
擦去吸管外血液后，轻轻吹入测定管底部，并回吸数次洗净吸管，然后充分混合均匀。
待5分钟后，置Hb仪上比色。
4、记录：直接读数，记录下来。
Hb值通常以每100 ml血液中含Hb若干克来表示。
（g/ml）。
本仪器采用国际单位制（g/L），可直接显示Hb值（g/L）。
我国正常成人，男子约：120～150 g/L
女子约：110～140 g/L
男运动员不超过：170 g/L，
女运动员不超过：160 g/L。
五、注意事项
1、每人每次测试前应先将Hb仪进样处吸入蒸馏水，冲洗流通池。
使显示数值为“000”。
2、比色前将仪器前部左下角“测试—定标”键置于测试状态。
3、Hb仪采样吸管一定要全部侵入液体中，避免气泡吸入，否则影响测定结果，若有气泡请重新操作测试一次。
4、若“零点”漂移绝对值>2g/L，需调整“调零”旋钮，使仪器显示回到“000”。