福尔马林固定液
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求摘要:1.福尔马林固定液的概述2.10% 标本福尔马林固定液的成分要求3.福尔马林固定液在标本制作中的应用4.使用福尔马林固定液的注意事项正文:一、福尔马林固定液的概述福尔马林固定液是一种用于生物标本制作的化学液体,其主要成分是甲醛(Formalin),也称作福尔马林(Formalin solution)。
福尔马林固定液具有较强的杀菌、防腐作用,因此在生物学、医学等领域的标本制作过程中有着广泛的应用。
二、10% 标本福尔马林固定液的成分要求10% 标本福尔马林固定液是指福尔马林溶液中甲醛的质量分数为10%。
这种浓度的福尔马林固定液适用于大多数生物标本的制作和保存,能够有效地杀死细菌、真菌等微生物,防止标本腐烂变质。
三、福尔马林固定液在标本制作中的应用1.组织切片的固定:在制作组织切片时,需要将切下的组织立即放入10% 的福尔马林固定液中,固定24-48 小时,以充分杀死组织中的微生物,同时使组织细胞结构固定,方便后续的染色和观察。
2.尸体防腐:在法医病理学和动物实验中,10% 的福尔马林固定液可用于尸体防腐。
将尸体浸泡在福尔马林固定液中,可以防止尸体腐烂,有利于进行尸检和研究。
3.细菌、真菌标本的制作:将待观察的细菌、真菌涂抹在载玻片上,滴上10% 的福尔马林固定液,盖上盖玻片,固定一段时间,便于在显微镜下观察其形态和结构。
四、使用福尔马林固定液的注意事项1.福尔马林具有较强的刺激性和毒性,使用时应佩戴口罩、眼镜和橡胶手套,避免直接接触皮肤和眼睛。
2.福尔马林对呼吸道和皮肤有刺激作用,一旦误食或误伤,应立即就医。
3.存放福尔马林固定液的地方应保持良好通风,避免长时间吸入福尔马林气体。
4.使用过的福尔马林固定液容器要做好密封,防止福尔马林气体挥发到空气中,污染环境。
常用固定液及其配制
一、常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1.甲醛(formaldehyde)是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formalin)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2.乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3.中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4.AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
二、组织脱水脱水用的乙醇浓度一般从70%~75%开始,然后依次80%→95%→100%,即由低浓度逐步到高浓度。
脱水的时间与组织大小、厚薄有很大关系、组织厚大,脱水时间要长些;而小薄的组织脱水时间相对的可以短些。
组织脱水时间在低浓度乙醇中可以长些(如70%~80%),而在高浓度乙醇中要短些,这是因为高浓度的乙醇渗透力不强,延长脱水时间无益,相反高浓度乙易使组织收缩、变脆,致使以后切片和观察困难。
⑴70%乙醇1h。
⑵80%乙醇1h。
⑶95%乙醇Ⅰ1h。
⑷95%乙醇Ⅱ1h。
⑸95%乙醇Ⅲ1h。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为。
1h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至12~24h数小时,最长可固定中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。
组织固定液说明书
组织固定液说明书【产品名称】通用名称:组织固定液商品名称:10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。
【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂,使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置,并尽量保存组织中的抗原,使其不被破坏或扩散。
醛类固定液是一种交联性组织固定剂,主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用,中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性,能最大限度地保护组织抗原,固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液,是生物组织最常用的固定液。
【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠,磷酸二氢钾组成。
【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存,储存条件下有效期24个月。
【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。
【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等;2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1:4,将离体组织及时浸入组织固定液中,一般不超过5分钟,固定时间为2至12小时。
【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。
2、不能固定尿酸和糖类物质。
3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。
【产品性能指标】1、PH值:6.8~7.5,且瓶间差异不大于0.2,批间差异不大于0.2。
2、甲醛含量:4%~4.2%。
3、常温下,经固定液固定3h后的组织,经切片后在显微镜下观察,应细胞核清晰,无收缩现象。
【注意事项】1、注意使用时通风;2、忌新旧液混合使用;3、避免使用时接触皮肤、粘膜;4、本品仅用于体外诊断。
固定液
1.经过固定的组织可保持在10%福尔马林或70%乙醇中。
2.染色前脱掉组织中的苦味酸①自来水冲洗②50%乙醇③或70%乙醇饱和碳酸锂
乙醇BOUIN’S液(DUBOSCQ-BRAZIL FLUID)
用途:用于固定肾活检,组织学制备固定液。
试剂:
乙醇Bouin’s贮存液:
80%乙醇750.0ml
甲醛300.0ml
步骤:
1.活检标本要立即放入Hollande’s固定剂中,标本容器上注明时间。
2.标本完成固定后保持在70%乙醇中。
3.不能让Hollande’s液固定的标本与磷酸缓冲福尔马林接触,否则会出现蓝色沉淀。
ORTH’S液
用途:用于证实肾上腺胞浆中嗜络微粒,这种证明可能对嗜络细胞瘤的诊断很重要。不是一种好的多用途的固定剂。
苦味酸5.0g
充分混合,液体稳定性2年,标明配制日期。
工作液:
贮存液70.0ml14.0ml
醋酸5.0ml10.0ml
使用前加醋酸。
固定时间:1~4小时。
步骤:
1.把新鲜组织标本放进乙醇Bouin’s工作液中。
2.充分固定后把组织移到70%的乙醇中。
HOLLANDE’S固定液
用途:作为胃肠和前列腺活检基本固定剂,这种固定剂让H.E染色更清晰,它“软化”组织避免切片脆裂。苦味酸会溶解掉红细胞。
ZENKER’S液
用途:Zenker’s液是一种核固定剂。该液是细胞学及病理学常用的固定剂,对细胞核固定最好,最适合于造血和网状内皮组织的固定。也常作为三色染色的组织固定剂,在三色染色中还作为媒染剂使用。但对于含血量较多的组织标本尽量不要选Zenker’s液固定。
试剂:
Zenker’s贮备液:
10中性福尔马林
产品名称:10%中性福尔马林组织固定液简介:10%中性福尔马林组织固定剂,是由10%中性福尔马林溶液(即4%甲醛)、磷酸盐缓冲液等组成。
用作固定的浓度为10%的福尔马林,实际含甲醛4%,10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
配制方法:在病理科、手术室中运用,10%福尔马林固定液具备两个条件。
条件一:福尔马林在溶液中的含量浓度为10%(即甲醛含量为4%),甲醛在水中最高浓度为40%,即10%的中性福尔马林溶液,其中甲醛含量即是10%的40%甲醛。
10%中性福尔马林固定剂条件二:10%中性福尔马林溶液的酸碱度为PH值7.2~7.4之间。
调配标准符合国家标准,具有完善的标准体系。
配制过程中特别注意事项:原料很重要,水、甲醛、磷酸二氢钠,磷酸氢二钠。
一般厂家很不注重水,自来水,蒸馏水、去离子水都不太标准。
康乃欣公司用的水是这样一个流程:自来水经过四次中性树脂过滤,目的是去除水中杂质和离子,接着经过紫外线灭菌,经过微纳米中性树脂过滤去菌体尸体,最后经过双重蒸馏后得到的水,才用于调配10%中性福尔马林固定剂。
康乃欣用的40%浓度甲醛,磷酸二氢钠、磷酸氢二钠都是分析醇。
在配制10%中性福尔马林固定液使用车间,都是三十万级车间、机械流水线灌装。
康乃欣质量标准高于国家标准,采用国际通用标准。
产品用途:维持保存、固定细胞和组织固原有的形态和结构。
适用范围:用于人体、动物组织标本的固定。
产品成分:10%中性福尔马林溶液(即4%甲醛)、磷酸盐缓冲液等。
产品特点:渗透力强、固定均匀;对组织收缩少,尤其对神经及髓鞘、脂肪、糖等固定效果最佳。
操作步骤:1、先在组织固定剂上编号及写上相关信息;2、将离体组织及时浸入固定剂中,离体时间一般不超多5分钟,固定时间为2—12小时。
产品说明:1、组织标本的体积与液体的比例为1:4,此值效果最佳;不大于1:3.2、小块组织标本﹙小于1.2cm×1.2cm×0.6cm)及各种活检验组织标本,固定2—12小时即可,可直接进行切片、脱水、染色、镜检等操作。
酒精-福尔马林-甘油固定液
北京雷根生物技术有限公司
酒精-福尔马林-甘油固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene 酒精-福尔马林-甘油固定液主要由乙醇、福尔马林、甘油组成,该固定液属于脱水-交联固定剂,在辨认特定抗体的免疫组化反应中能产生极好的结果,尤其适用于长期保存材料。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
2、 一般标本固定时间控制1~4h/mm ,大标本应适当延长固定时间。
注意事项:
1、 Leagene 酒精-福尔马林-甘油固定液有一定刺激性和腐蚀性,请在通风环境下小心操作。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 固定液的容量应足够。
如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 24个月有效。
编号 名称 DF0172 Storage 酒精-福尔马林-甘油固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求摘要:一、福尔马林固定液的作用二、10% 标本福尔马林固定液的成分要求1.福尔马林2.缓冲液3.防腐剂三、固定液的配制方法四、固定液的注意事项正文:福尔马林固定液是一种广泛应用于生物学、医学和化学实验室的固定剂,主要用于标本的防腐、固定和保存。
在病理学、细胞学、遗传学等生物医学领域,福尔马林固定液对于标本的保存具有至关重要的作用。
本文将重点介绍10% 标本福尔马林固定液的成分要求及配制方法。
首先,我们来了解10% 标本福尔马林固定液的成分要求。
福尔马林即甲醛溶液,是固定液的主要成分,通常浓度为37%~40%。
甲醛具有强烈的固定作用,能够使蛋白质发生变性,从而固定标本中的组织结构和细胞形态。
在配制10% 标本福尔马林固定液时,需要将福尔马林与适量的缓冲液和防腐剂混合。
缓冲液可以中和福尔马林的酸性,稳定pH 值,防止福尔马林挥发。
防腐剂则能抑制微生物的生长,延长固定液的使用寿命。
接下来,我们来学习10% 标本福尔马林固定液的配制方法。
首先,将一定量的福尔马林倒入容器中,然后加入适量的缓冲液,搅拌均匀。
接着,再加入适量的防腐剂,再次搅拌均匀,直至防腐剂完全溶解。
最后,将10% 标本福尔马林固定液倒入密封容器中,妥善保存。
在使用10% 标本福尔马林固定液时,需要注意以下几点:1.佩戴防护设备,如口罩、眼镜和手套,避免直接接触福尔马林,因其具有较强的刺激性和毒性。
2.严格遵循配制比例,确保固定液的浓度准确。
3.使用过程中,避免阳光直射和高温环境,防止福尔马林挥发。
4.固定液具有一定的保质期,注意观察其颜色和气味,如有异常,应及时更换。
总之,10% 标本福尔马林固定液在生物医学领域具有广泛的应用,掌握其成分要求和配制方法对于实验室工作具有重要意义。
常用固定液的配制
常用固定液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
福尔马林固定液
磷酸缓冲中性福尔马林固定液济南百博生物技术股份有限公司【预期用途】磷酸缓冲中性福尔马林固定液主要用于适用于常规标本的组织固定。
福尔马林固定液作为一种样本处理液,主要是通过对组织标本的固定,以方便医院检验人员进行后续的染色、免疫组化等操作。
该固定液主要是用于对病人进行治疗的初步阶段,用于固定组织切片标本。
由于该种固定液是用于固定病理组织标本使用的,所以该种固定液的目标用户是各医院的手术室、病理科以及肿瘤医院等。
【检验原理】甲醛能与蛋白质的氨基结合,使蛋白质凝固,因此可做为检验时的组织固定剂。
【主要组成成份】甲醛、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。
【适用范围】用于大多数组织标本的固定,能较好地保存组织的抗原性和细微结构,具有较强的渗透力和较好的固定效果,能满足常规HE及免疫组化、原位杂交等检测工作。
【使用方法】根据组织类型及试验目的选择合适的固定液浓度,按标本的5—10的用量将组织标本在室温条件下浸泡固定2-72h,(固定时间依组织块大小和实验目的而定),自来水或缓冲液充分漂洗后即可用于组织切片。
【固定的作用】固定的作用,从组织学的角度讲是,使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构,而从免疫组化技术的角度,固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固,尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应;防止细胞的自溶,以免使抗原扩散至组织间质;以保持组织的固有形态和结构;更重要的是保持组织或细胞的抗原性,不但要使抗原不导致失活,而且不使抗原发生弥散的现象,才能在免疫组化染色时,不产生过深的背景,影响对阳性物的判断。
【成分特点】1 .采用优质进口原料配制,确保产品质量优良2 .添加独特增固剂,增强组织固定效果3 .添加复合磷酸盐,形成一个中性缓冲环境(pH:7.0±0.2)4 .添加挥发抑制剂,减少甲醛挥发,气味小且安全5 .添加独特抗聚合反应成分,防止有效成分聚合【固定特点效果】1. 固定效果均匀,穿透力强,完整保存细胞组织形态结构2. 增进组织弹性,利于切片3. 完整保存组织细胞形态结构,特别适用于免疫组化染色的组织,能最大程度保存组织细胞的蛋白抗原和核酸分子,使抗原定位更加清晰,利于特殊染色、免疫组化染色及分子生物学检验4. 有效保存脂肪及脂类物质,使免疫组化的染色与鉴定效果更佳5. 适用于血红素与含铁血红素的固定,抑制福尔马林色素的生成6. 特別适用于黏多糖染色与鉴定。
打造做好的福尔马林固定液
打造最好的中性福尔马林固定液
甲醛是一种无色,有强烈刺激性气味的气体,是室内空气污染的代表物之一,2006年甲醛被WHO确定为Ⅰ类致癌物(即对人体和动物均致癌)。
甲醛通常以水溶液的形式存在,其水溶液又称福尔马林。
福尔马林是人们广为熟知的一种化学试剂,大家了解最多的可能就是它作为黑心商贩保鲜水产品的罪魁祸首。
其实福尔马林固定液是医院必不可少的,多科室使用、用途很多。
市售福尔马林固定液很多都是40%的甲醛水溶液,不能直接用于临床。
康乃欣医疗配置的10%中性福尔马林组织标本固定液完全符合国际配制标准。
福尔马林固定液,在医院用途最多的当然是病理科和手术室固定手术标本用。
新鲜的病理标本必须通过合适的福尔马林固定液固定才能作出合格的组织切片用于病理诊断和进一步的特殊检查,如免疫组织化学染色、DNA提取等。
理想的固定方法既要保持细胞形态和组织结构的完整性又不损害细胞内有效的成分和抗原活性。
统一配制福尔马林固定液有如下优点:①质量可靠:康乃欣实验室各种试剂和检测设备齐全,由专业人员按标准配制出的10%中性福尔马林能保证其浓度和PH值。
②环保:各医院使用康乃欣医疗技术密封塑料瓶装好的中性福尔马林,避免了自己配制过程中甲醛挥发在空气中挥发造成的环境污染,减少对医务人员的身体损害。
③经济:部分用量不大的科室配好中性福尔马林后用剩部分可能因为保存的风险或浓度的降低而选择丢弃,既污染环境又造成浪费。
④方便:有完整的通风系统和防护措施,能有效保存福尔马林固定液,能满足各科室随要随取、要多少取多少的要求。
盛装中性福尔马林的容器采用下排式出口,也方便使用。
(本文由中山市康乃欣生物医疗科技有限公司整理提供)。
福尔马林的配制
甲醛固定液主要包括10%福尔马林(40%甲醛与蒸馏水之比为1:9),传统上我们都采用10%福尔马林固定组织.福尔马林系甲醛液的俗称,是由甲醛(Formaldeny de HCHO )气体饱和于水而成.一般市售的福尔马林含甲醛37%~40%. 配法:取40%甲醛液10ml与蒸馏水90ml混合,即得4%甲醛,亦即10%福尔马林.在配制福尔马林溶液(固定液或保存液)时,应将37~40%的甲醛作为整个溶质来配。
例如配制5%福尔马林是取市售37~40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。
实际上甲醛含量只有1.9~2%,这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
固定液和保存液用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等,能保存组织内细胞的形态、结构及其组成,尽量使它近于生活状态。
固定液一般有防腐和保存的作用,分为单纯固定液和混合固定液。
单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等,前两种固定液是中学生物实验室常用的。
单纯固定液的优点是简便,缺点是有一定的局限性,不易达到理想的固定要求。
混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成,使各自的优缺点相互补充,成为较完美的固定液。
这种固定液的制备虽比较麻烦,但是效果比较好。
常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液、包因氏固定液等。
常用的保存液大致跟固定液相同,主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。
有时按特殊保存的需要,再保存液中增加某些药品(如原生标本的保存液)。
1、福尔马林福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强,所以防腐性强,渗透力大,固定得快。
永福尔马林固定精细的解剖标本时,要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。
固定液常用的浓度是5~10%(根据材料的大小、性质和数量而定)。
保存液常用的浓度是5~10%。
用福尔马林作保存液,效果好且价格低廉。
在配制福尔马林溶液(固定液或保存液)时,应将37~40%的甲醛作为整个溶质来配。
福尔马林固定液
安徽雷根生物技术有限公司 组织固定液说明书【产品名称】组织固定液【包装规格】货号:DF0111包装规格分别为:500ml、5000ml。
【预期用途】用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长,通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成,该固定液适合于绝大多数组织的固定,属于中性福尔马林固定液,pH接近于中性。
【主要组成成分】试剂组成主要成分组织固定液甲醛、磷酸盐【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封固定液的有效期为24个月,在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织尽量新鲜。
【检验方法】l、一般标本固定时间控制在1~4小时/mm,大标本应适当延长固定时间;2、固定好的组织,可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】l、避免过度延长固定时间,否则引起生物大分子过度交联,取材厚度不同,固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
组织固定液说明书
组织固定液说明书【产品名称】通用名称:组织固定液商品名称:10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。
【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂,使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置,并尽量保存组织中的抗原,使其不被破坏或扩散。
醛类固定液是一种交联性组织固定剂,主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用,中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性,能最大限度地保护组织抗原,固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液,是生物组织最常用的固定液。
【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠,磷酸二氢钾组成。
【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存,储存条件下有效期24个月。
【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。
【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等;2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1:4,将离体组织及时浸入组织固定液中,一般不超过5分钟,固定时间为2至12小时。
【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。
2、不能固定尿酸和糖类物质。
3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。
【产品性能指标】1、PH值:6.8~7.5,且瓶间差异不大于0.2,批间差异不大于0.2。
2、甲醛含量:4%~4.2%。
3、常温下,经固定液固定3h后的组织,经切片后在显微镜下观察,应细胞核清晰,无收缩现象。
【注意事项】1、注意使用时通风;2、忌新旧液混合使用;3、避免使用时接触皮肤、粘膜;4、本品仅用于体外诊断。
大体标本常用的固定液
大体标本常用的固定液
固定液是生物组织或细胞学研究中不可或缺的一部分,它可以帮助保存和稳定组织和细胞,使它们能够在后续的样品处理和分析中保持完整。
一般来说,固定液包括多种化学成分,不同的固定液适用于不同的组织和细胞类型。
以下是最常用的固定液:
1. 10% 福尔马林(Formaldehyde)
福尔马林是最常用的固定液之一,它可以作为一种信标分子,标记细胞蛋白。
福尔马林具有良好的渗透性,能够迅速渗透到组织中,提供良好的固定效果。
2. 十二烷基硫酸钠-10%EDTA浸液(SDS-EDTA Buffer)
SDS-EDTA浸液是常用的细胞质微管结构和线粒体固定液。
该固定液是一种离子池化学固定液,能够特异性地固定蛋白质,适用于研究细胞骨架和线粒体。
3. Bouin液
Bouin液是一种精细的组织学固定液,不过使用比较少。
该固定液包括福尔马林、酯化醛和乙酸,可以用于特异性地固定肝脏和其他含脂肪的组织。
4. Carnoy液
Carnoy液是一种比较强的组织学固定液,由95%的乙醇、氯仿和冰醋酸组成。
该固定液可以用于稳定核质和细胞膜,适用于肝脏和小肠等组织。
5. 4%多聚甲醛(Paraformaldehyde)
4%多聚甲醛是一种可以在室温下固定细胞和组织的固定液,可以优先固定蛋白质和核酸。
多聚甲醛很便宜,但其固定效果不及福尔马林。
需要注意的是,不同的固定液会对研究结果产生不同的影响。
因此,选择固定液前需考虑组织或细胞类型、后续的实验目的和预期结果等因素,才能选择最合适的固定液。
同时,固定液使用时需要注意安全,防止吸入和接触固定液。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛(formal dehyd e)是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formal in)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
常用固定液的配制
钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
配方Ⅲ:爱氏苏木精(Ehrlich’s haematoxylin)苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾(钾矾)3~5g。
配制时,先将苏木精溶于酒精中,然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸,最后加入研细的钾矾,边加边搅拌,直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色,放入广口瓶中,用纱布封口,自然氧化1~2月,至颜色变为深红色时即可过滤备用,可长期保存。
13.席夫试剂(Schiff’s regent)将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右,加入1g偏亚硫酸钾或钠(Na2S2O5或K2S2O5),振荡使其溶解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。
次日检查,若染色液透明无色或呈淡茶色,即可使用。
若染色较深,可加入少量优质活性炭(0.5~2g),振荡1min,置于4℃冰箱中过夜,过滤使用。
此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液将0.25g硫堇粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能产生多色反应。
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磷酸缓冲中性福尔马林固定液
济南百博生物技术股份有限公司
【预期用途】磷酸缓冲中性福尔马林固定液主要用于适用于常规标本的组织固定。
福尔马林固定液作为一种样本处理液,主要是通过对组织标本的固定,以方便医院检验人员进行后续的染色、免疫组化等操作。
该固定液主要是用于对病人进行治疗的初步阶段,用于固定组织切片标本。
由于该种固定液是用于固定病理组织标本使用的,所以该种固定液的目标用户是各医院的手术室、病理科以及肿瘤医院等。
【检验原理】甲醛能与蛋白质的氨基结合,使蛋白质凝固,因此可做为检验时的组织固定剂。
【主要组成成份】甲醛、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。
【适用范围】用于大多数组织标本的固定,能较好地保存组织的抗原性和细微结构,具有较强的渗透力和较好的固定效果,能满足常规HE及免疫组化、原位杂交等检测工作。
【使用方法】
根据组织类型及试验目的选择合适的固定液浓度,按标本的5—10的用量将组织标本在室温条件下浸泡固定2-72h,(固定时间依组织块大小和实验目的而定),自来水或缓冲液充分漂洗后即可用于组织切片。
【固定的作用】
固定的作用,从组织学的角度讲是,使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构,而从免疫组化技术的角度,固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固,尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应;防止细胞的自溶,以免使抗原扩散至组
织间质;以保持组织的固有形态和结构;更重要的是保持组织或细胞的抗原性,不但要使抗原不导致失活,而且不使抗原发生弥散的现象,才能在免疫组化染色时,不产生过深的背景,影响对阳性物的判断。
【成分特点】
1 .采用优质进口原料配制,确保产品质量优良
2 .添加独特增固剂,增强组织固定效果
3 .添加复合磷酸盐,形成一个中性缓冲环境
(pH:7.0±0.2)
4 .添加挥发抑制剂,减少甲醛挥发,气味小且安全
5 .添加独特抗聚合反应成分,防止有效成分聚合
【固定特点效果】
1. 固定效果均匀,穿透力强,完整保存细胞组织形态结构
2. 增进组织弹性,利于切片
3. 完整保存组织细胞形态结构,特别适用于免疫组化染色的组织,能最大程度保存组织细胞的蛋白抗原和核酸分子,使抗原定位更加清晰,利于特殊染色、免疫组化染色及分子生物学检验
4. 有效保存脂肪及脂类物质,使免疫组化的染色与鉴定效果更佳
5. 适用于血红素与含铁血红素的固定,抑制福尔马林色素的生成
6. 特別适用于黏多糖染色与鉴定。