第四章+原核基因表达调控_PPT幻灯片

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第4章原核生物基因表达调控的应用

第4章原核生物基因表达调控的应用
Lac启动子的转录也受CAP的正调控。
葡萄糖浓度低,乳糖浓度高,转录水平高。
Trp启动子通过色氨酸-trp阻遏蛋白复合物 进行负调控,复合物与trp操纵基因结合从 而阻遏操纵子的转录。
在培养基中去掉色氨酸或者加入吲哚丙烯 酸,就能去除阻遏。
பைடு நூலகம்
常用的杂合型启动子是tac和trc,它们彼此 相似,只相差一个碱基,这两个启动子都含 有来自于trp启动子的-35区和来自于lac的10区,这两个区域之间分别相差16bp(tac) 或17bp(trc) 。这两个启动子都可以通过在 培养基中加入IPTG诱导(和lac启动子一 样)。
从T7 RNA聚合酶基因的诱导克隆到目的基因的转 录,通常会延迟1h或更多的时间,现在已经发展了 一系列T7启动子的pET质粒载体。
阻遏蛋白失活导致转录激活的效率取决于阻遏蛋白分 子数与启动子序列拷贝数的比值。
如果阻遏蛋白分子过多,转录就很维诱导;反之,阻 遏蛋白分子很少(尽管阻遏分子比启动子拷贝数 多),在没有诱导时转录也能进行。这种情况称为启 动子“渗漏”。
pL启动子受到λ噬菌体的cI阻遏蛋白控制。
一种cI阻遏蛋白温度敏感型的突变体cI857 常常用于调节pL启动子引导的转录。带有温 度敏感型cI阻遏物的细胞先在28~30 oC进行 培养,此时,cI阻遏物阻止pL启动子引导的 转录。当细胞培养达到理想的生长阶段,一 般为对数中期时,将温度调整到42 oC。此 时,热敏感的cI阻遏物失活,转录开始。
Tac启动子,是一个包括lac启动子-10区和 trp启动子-35区的体外构建物。
启动子pL,是从λ噬菌体中获得的。 基因10启动子是从T7噬菌体获得的。
在不含乳糖的培养基中,大肠杆菌的lac启 动子受到lac阻遏蛋白的抑制,阴止lac操纵 子的转录。

基因表达调控PPT课件

基因表达调控PPT课件
全球第一例中国人标准基因组序列图谱的一部分
基因表达
是基因转录及翻译的过程,即:生成具有生物学 功能产物的过程。
(激活)
基因表达调控
(功能及形态表型)
控制基因表达的调节机制,细胞或生物体在接受 内外环境信号刺激时或适应环境变化的过程中在
基因表达水平做出应答的分子机制。
例如:人类基因组含2-2.5万个编码基因,在某一特定时 期或生长阶段,只有一小部分基因处于表达状态。
① 真核基因组比原核基因组大得多 ② 原核基因组的大部分序列都为编码基因,而哺
乳 类 基 因 组 中 只 有 10% 的 序 列 编 码 蛋 白 质 、 rRNA、tRNA等,其余90%的序列,包括大量 的重复序列功能至今还不清楚,可能参与调控 ③ 真核生物编码蛋白质的基因是不连续的,转录 后需要剪接去除内含子,这就增加了基因表达 调控的层次
④ 原核生物的基因编码序列在操纵子中,多顺反子 mRNA使得几个功能相关的基因自然协调控制; 而真核生物则是一个结构基因转录生成一条 mRNA , 即 mRNA 是 单 顺 反 子 ( monocistron ) ,许多功能相关的蛋白、即使是一种蛋白的不同 亚基也将涉及到多个基因的协调表达
⑤ 真核生物DNA在细胞核内与多种蛋白质结合构 成染色质,这种复杂的结构直接影响着基因表 达;
整理
❖ 掌握操纵子的概念。 ❖ 掌握乳糖操纵子的结构,阻遏蛋白的负性调
节,CAP的正性调节,协调调节。 ❖ 了解原核基因表达转录终止阶段的调控机制。 ❖ 了解原核基因表达翻译水平的调控。
第四节
真核基因表达调节
Regulation of Gene Expression in Eukaryote
一、真核细胞基因表达的特点

基因表达调控PPT课件

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基因表达的调节与基因的结构、性质, 生物个体或细胞所处的内、外环境,以及细 胞内所存在的转录调节蛋白有关。
1. 顺式作用元件:特异DNA序列 2. 反式作用因子:特定调节蛋白质
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原核生物
—— 操纵子(operon) 机制
启动序列 (promoter)
编码序列
其他调节序列
蛋白质因子
操纵序列 (operator)
• 可诱导调节:指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作 用下,由原来关闭的状态转变为工作状态,即在某些物 质的诱导下使基因活化。 例:大肠杆菌的乳糖操纵子 分解代谢蛋白的基因
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酶合成的诱导操纵子模型
调节基因
操纵基因
结构基因
阻遏蛋白
诱导物
如果某种物质 能够促使细菌产生 酶来分解它,这种 物质就是诱导物。
合时,结构基因不转录。
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在正转录调控系统中,调节基因的产物是激活蛋白 根据激活蛋白的作用性质分为正控诱导和正控阻遏 • 在正控诱导系统中,效应物分子(诱导物)的存在使激 活蛋白处于活性状态; • 在正控阻遏系统中,效应物分子(辅阻遏物)的存在使 激活蛋白处于非活性状态。
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三、乳糖操纵子(lac operon)
能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。 • A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶:乙酰辅酶A上的乙酰基
转到β-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。
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2. 乳糖操纵子的阻遏调控---可诱导调控
无乳糖存在时
阻遏物结合在操纵基因上→阻 止转录过程→基因关闭
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2. 乳糖操纵子的阻遏调控---可诱导调控
有乳糖存在时
调节基因
操纵基因
结构基因
阻遏蛋白

第6讲 原核基因表达调控PPT幻灯片

第6讲 原核基因表达调控PPT幻灯片
• 绪论 • 一、 乳糖操纵子的调控模式 • 二、 色氨酸操纵子的调控模式 • 三、 其他操纵子的调控机制 • 四、 原核生物种的转录后调控
绪论
• 原核生物和单细胞真核生物直接暴露在变幻莫 测的环境中,食物供应毫无保障,只有能根据 环境条件的改变合成各种不同的蛋白质,使代 谢过程适应环境的变化,才能维持自身的生存 和繁衍。自然选择倾向于保留高效率的生命过 程。在一个每30min增殖一倍的109细菌群体中, 若有一个细菌变成了29.5min增殖一倍,大约 经过80天的连续生长后,这个群体中的99.9% 都将具有29.5min增殖一倍的生长速度。
• 1. 酶的诱导-lac体系受调控的证据在 不含乳糖及β-半乳糖苷的培养基中, lac+基因型每个大肠杆功细胞内大约只 有1-2个酶分子。如果在培养基中加入乳
糖,酶的浓度很快达到细胞总蛋白量的 6%或7%,每个细胞中可有超过105个 酶分子。
• 科学家把大肠杆菌细胞放在加有放射性 35S标记的氨基酸但没有任何半乳糖诱导
2. 操纵子模型
Jacob和Monod认为 诱导酶(他们当时称 为适应酶)现象是个 基因调控问题,可以 用实验方法进行研究, 因此选为突破口,终 于通过大量实验及分 析,建立了该操纵子 的控制模型。
① Z、Y、A基因的子紧接着O区,而位于I 与O之间的启动子区(P),不能单独起动合成β半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。
会很低;如果将细菌置于甘油或乳糖等不
进行糖酵解的碳源培养基中,细菌中 cAMP的浓度也会很高。
• 研究证实,葡萄糖所引起的代谢物抑制 (Catabolite repression)现象的实质是该代谢物 降低了细胞中cAMP的含量.事实上,cAMP-CAP复合 物是lac体系的positive regulator,它们不能代 替lacI和lacO的功能(negative regulator)。

最新原核基因表达调控1分子生物学_图文PPT课件

最新原核基因表达调控1分子生物学_图文PPT课件


活化子以其一个表面结合到启动子附近的某一DNA位点
;同时以另一表面与RNA聚合酶相互作用,将聚合酶带
到启动子(图16-1c)。

活化子与RNA聚合酶的相互作用,以及活化子与DNA的
相互作用,只起到黏合作用:活化子只是将酶带到启动子
附近。
某些活化子通过变构和调控RNA聚合酶或DNA的 构象改变而起作用
即使室内环境保持稳定的高等哺乳类,也经常 要变动基因的表达来适应环境。例如与适宜温 度下生活相比较,在冷或热环境下适应生活的 动物,其肝脏合成的蛋白质图谱就有明显的不 同。
长期摄取不同的食物,体内合成代谢酶类的情 况也会有所不同。
基因表达调控是生物适应环境生存所必需的。

基因表达调控主要表现在以下几个方面:
终止子(terminator T)是给予RNA聚合酶转录 终止信号的DNA序列。
操纵子中结构基因群最后一个基因的末端 存在一个终止子。
终止子按其作用可分为不依赖ρ因子的强终 止子和依赖ρ因子的弱终止子。
⑤ 调控基因
调控基因(regulatory gene)是编码能与操作子 结合的调控蛋白的基因。
• 在有些情况下,RNA聚合酶不需要协助就可 以结合在DNA上并形成稳定的闭合复合体, 但是这一闭合复合体却不能自动转变为开放复 合体(图16-2a)。在这种启动子上,必须由 活化子刺激闭合复合体转变为开放复合体,因 此,这一转变就是限速步骤。
活化子与稳定的闭合复合体相互 作用诱导构象发生改变,引起闭 合复合体向开发复合体的转变。
参与调控基因转录效率的蛋白质因子,可以直接或间 接识别或者结合顺式作用元件核心序列,可对基因表 达产生激活或阻遏的作用。
结构基因与调控基因

第四章 原核基因表达调控模式(共62张PPT)

第四章 原核基因表达调控模式(共62张PPT)
在负控诱导系统中,阻遏蛋白不与效应物(诱导物)结合时,结构基因不转录;
基因表达(gene expression)是指储存遗传信息的 基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。 典型的基因表达是基因经过转录、翻译,产生有生 物活性的蛋白质的过程。rRNA或tRNA的基因经转 录和转录后加工产生成熟的rRNA或tRNA,也是 rRNA或tRNA的基因表达,因为rRNA或tRNA就具 有在蛋白质翻译方面的功能。
结构基因是编码蛋白质或RNA的任何基因。结构基因编码大量 结构和功能各异的蛋白质,包括结构蛋白、具有催化活性的酶 和调控蛋白。调控基因是参与其它基因表达调控的蛋白质的结 构基因。
调控的关键是调控基因编码的蛋白质通过与 DNA 上的特异位点的结合来调控转录。
这种相互作用可以通过正(Positive)调控的方 式(打开基因的作用)和负(Negative)调控的 形式(关闭基因的作用)来调控一个靶基因 (Target gene)。
其所承载的遗传信息,通过密码子-反密码子 在特定环境信号刺激下,相应的基因被激活,基因表达产物增加,这种基因是可诱导的,称为诱导。
这种相互作用可以通过正(Positive)调控的方式(打开基因的作用)和负(Negative)调控的形式(关闭基因的作用)来调控一个靶基因(Target gene) 。
系统转变成蛋白质,执行各种生理生化功能。 图示: 在正调控中,为了能使RNA 聚合酶在启动子处起始转录,反式作用因子必须与顺式作用元件结合。
阻遏蛋白通过与lacZYA 基因簇开始处的操纵基因结合发挥功能。操纵基因位于启动子和结构基因(lacZYA)
在无葡萄糖有乳糖的培养基中,lac+细菌 中将同时合成β-半乳糖苷酶和透过酶。
用32P标记的mRNA与模板DNA进行定量 分子杂交,表明培养基中加入乳糖1~2分 钟后,编码β-半乳糖苷酶和透过酶的 lacmRNA量就迅速增加,去掉乳糖后, lac mRNA量立即下降。

原核基因表达调控资料讲解62页PPT

原核基因表达调控资料讲解62页PPT
原核基因表达调控资料讲解
16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事18、敢于向黑暗宣战的人,心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前,莽撞的 人只能 引为烧 身,只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
46、我们若已接受最坏的,就再没有什么损失。——卡耐基 47、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游 48、书籍把我们引入最美好的社会,使我们认识各个时代的伟大智者。——史美尔斯 49、熟读唐诗三百首,不会作诗也会吟。——孙洙 50、谁和我一样用功,谁就会和我一样成功。——莫扎特
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• A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶:乙酰辅酶A上的 乙酰基转到β-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。
三,酶的诱导——lac体系受调控的证据
CH2OH
CH3
HO
O S-C-CH3
H
CH3
OH
H
H
H
H
OH
图 16-6 异丙基-β-硫代半乳糖苷的分子结构
• 安慰诱导物:
如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不 被分解,这种物质被称为安慰诱导物,如IPTG (异丙基-β–D-硫代半乳糖苷)。
finished 为什么还要学习表达调控?
基因表达调控基本概念和特征 乳糖操纵子 色氨酸操纵子 半乳糖操纵子 阿拉伯糖操纵元 原核基因调控的其他机制
第一节 基因表达调控的基本概念和特征
1、基因表达调控的概念 基因转录及翻译的过程叫做基因表达,对这个 过程的调节就称为基因表达调控。
rRNA、tRNA编码基因转录合成RNA的过程也属于基因表达
正转录调控 负转录调控
负转录调控 在没有调节蛋白质存在时基因是表达的,加入这种 调节蛋白质后基因表达活性便被关闭,这样的调控 负转录调控。
根据操纵子对某些能调节它们的小分子的应答,可 分为可诱导调节和可阻遏调节两大类:
• 可诱导调节:指一些基因在特殊的代谢物或化合 物的作用下,由原来关闭的状态转变为工作状态, 即在某些物质的诱导下使基因活化。 例:大肠杆菌的乳糖操纵子
细菌的状况
0
营养期细菌

DNA 复制

隔膜形成

孢子内陷

孢子外壳形成

母细胞裂解

孢子释放
图16-33 细菌孢子的形成和释放 (仿B.Lewin:《GENES》Ⅵ,1997, Fig .11.23)
2、操纵子的定义
操纵子:是基因表达的协调单位,由调节基因、启 动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结 构基因所组成。操纵基因受调节基因产物的控制。
酶合成的诱导操纵子模型
调节基因
操纵基因
结构基因
阻遏蛋白
调节基因
操纵基因
结构基因
诱导物
如果某种物质能够促使 细菌产生酶来分解它, 这种物质就是诱导物。
阻遏蛋白 诱导物
mRNA 酶蛋白
• 可阻遏调节:基因平时是开启的,处在产生 蛋白质或酶的工作过程中,由于一些特殊代 谢物或化合物的积累而将其关闭,阻遏了基 因的表达。
多顺反子(polycistron)
原核基因中多个功能相关的结构基因串联在一 起构成一个转录单位。通常依赖同一调控序列对其 转录进行调节,使这些相关基因实现协同表达。
启动子 promoter
终止子 terminator
操纵元件 operator
promoter
terminator
po z
y
at
operator
在特定环境信号刺激下,有些基因的表达 表现为开放或增强。
阻遏表达(repression expression)
在特定环境信号刺激下,有些基因的表达 表现为关闭或下降。
4、基因表达的调控因子:
• 蛋白质 ( 主要 )
• 小分子RNA ( 某些环节 )
5、基因表达的调控水平 中心法则(central dogma)
❖ 基因组 ❖ 转录 ❖ 转录后 ❖ 翻译 ❖ 翻译后
原核生物基因表达的特点
1.只有一种RNA聚合酶。RNA聚合酶用来识别原 核细胞的启动子,催化所有RNA的合成。
2.基因表达以操纵子为基本单位。原核基因一 般不含内含子,基因是连续的。原核基因转录 单位多为多顺反子。
操纵子(operon)
一个多顺反子转录单位与其调控序列即构成操纵子。
管家基因(housekeeping gene)
某些基因在一个个体的几乎所有细胞
中持续表达。
12
Xa21
β-actin
常用的管家基因
中文名称
英文缩写
Beta-肌动蛋白
β-actin
甘油醛3-磷酸脱氢酶 GAPDH
TATA Box结合蛋白 TBP
微管蛋白α
α-Tubulin
诱导和阻遏表达 诱导表达(induction expression)
Structural gene
操纵子结构示意图
3.转录和翻译偶联进行:原核生物裸露的 环形DNA,在拟核内转录成 mRNA 后,直接 在胞浆中与核糖体结合翻译为蛋白质。
4.mRNA翻译起始部位有特殊的碱基序列Байду номын сангаас--SD序列。
5.原核生物基因表达的调控主要在转录水 平,即对RNA合成的调控。
通常有两种方式: (1) 起始调控,即启动子调控; (2) 终止调控,即衰减子调控。
3、基因表达的方式
组成性表达(constitutive expression) 适应性表达(adaptive expression)
组成性表达 (constitutive gene expression)
基因较少受环境因素影响,而是在 个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组 织中持续表达,或变化很小。如管家基因。
根据操纵子对调节蛋白(阻遏蛋白或激活 蛋白)的应答,可分为:正转录调控和 负转录调控
调节基因
操纵基因
结构基因
激活蛋白 阻遏蛋白
正转录调控 负转录调控
正转录调控 如果在没有调节蛋白质存在时基因是关闭的,加入 这种调节蛋白质后基因活性就被开启,这样的调控 正转录调控。
调节基因
操纵基因
结构基因
激活蛋白 阻遏蛋白
例:色氨酸操纵子
酶合成的阻遏操纵子模型
调节基因
结构基因 操纵基因
调节基因 操纵基因 结构基因
mRNA 酶蛋白
辅阻遏物
辐阻遏物 如果某种物质能够阻止细菌产生合成这种物 质的酶,这种物质就是辅阻遏物。(色氨酸)
二、乳糖操纵子的结构
• Z编码β-半乳糖苷酶:将乳糖水解成葡萄糖和半乳 糖
• Y编码β-半乳糖苷透过酶:使外界的β-半乳糖苷 (如乳糖)能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入 细胞内。
四、乳糖操纵子调控模型
主要内容: ① Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA
分子所编码
② 这个mRNA分子的启动子紧接着O区,而位于 I与O之间的启动子区(P),不能单独启动合 成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。
第二节 乳糖操纵子
• 内容提要: • 操纵子学说的基本概念 • 乳糖操纵子的结构 • 酶的诱导——lac体系受调控的证据 • 乳糖操纵子调控模型 • 影响因子 • Lac操纵子中的其他问题
一、基本概念
1、操纵子模型的提出 1961年,Monod和Jacob提出 获1965年诺贝尔生理学和医学奖
阶段
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