白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)
溴甲酚紫法检测血清白蛋白方法学评价
仪检测 。分析仪 器经 校准 后每 天用 质控 物进行 室 内质 控监
测 ， 在控 。 均
收稿 日期 ：０ １１ —８ 修 回 日期 ：０ ２０ —２ ２ １ －１２ ； ２ １—３ ０
作者简介 ： 王北 宁（９ ３ ） 主任技师 ， １５ 一 ， 教授 ， 主要从 事检验科 管理和临床免疫学 检验 等研 究。Ｅ ｍ ｉ ｗ ｎｂｉｉｇｉａｔｍ － ａ ： ａｇｅｎｎｓ ．ｏ ｌ ｎ
料结合法测定 Ａ Ｂ广泛应用于临床 ， Ｌ 国内大多数 医院 目前仍 然沿用这一方法 。但 近年来 ， 已有 国外 公司推 出 了溴 甲酚 紫 （ ｒｍ ｒｓｌ ｕｐｅ Ｂ Ｐ 法 测定 血清 Ａ Ｂ的商 品试 剂 ， 了 ｂｏ ｃｅｏ ｐ ｒｌ， Ｃ ） Ｌ 为
由德 国罗 氏公 司提供 ， 使用罗 氏 ＭＯ Ｕ Ａ Ｄ Ｌ Ｒ全 自动 生化分析
疲劳 的发生 ］ 。因此 ， 对于参加训练期 的新兵而言 ，ｋ ５ ｍ最大 程度 的跑步 ， 能够对身体形 成较 大强度 的刺激。在训 练时 可 以适 度调整 ， 训练安排 上每周次 数不应过 多 ， 同时 ， 在跑 完 应 ５ ｍ越野后安排适 当歇息 ， ｋ 避免对机体刺激过强的训 练。
应量 ， 但仍不足 以满足 机体供 能需 要 ， 肉处 于缺氧状 态 ， 肌 糖 酵解 因之 加强 ， 以补充所需 的能量 ， 肌细胞 可生成高出安静状
态 数 倍 的 Ｌ Ｃ 生 产 的 Ｌ Ｃ进 入 血 液 引 起 血 Ｌ Ｃ升 高 。 Ａ ， Ａ Ａ
（ 陈泮 藻编辑 ）
溴 甲酚紫 法检 测 血 清 白蛋 白方 法 学 评 价
ｌ８ ８
Ｌａ ｅｅ ｍｍｕ ｏｓａ ｓ＆ Ｃｌ Ｍｅ Ｊ ｎ ２ ２， １１ Ｎｏ ３ ｎ
血清白蛋白测定及紫外分光光度计的使用
一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、方法学评价 六、注意事项
一、原理
在pH4.2缓冲液中，溴甲酚绿（BCG） 与白蛋白结合形成蓝色复合物（血清白蛋 白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在非离 子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的 染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物）， 在波长620nm处有最大吸收峰，其颜色深 浅与白蛋白浓度成正比。与经过同样处理 的白蛋白校准液进行比较，即可计算出样 品中白蛋白含量。
10 10
于空白管中加入蒸馏水10 μl，各管充分混匀。
2、分光光度计测定方法：波长620nm， 空白管调零，测定标准管和测定管吸光度 值，按公式计算测定结果。
计算公式：
A样 C样 C标 A标
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（40g/L）
三、参考值：
总蛋白：62~82 g/L 白蛋白：35~55g/L 球蛋白：20~30 g/L 白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1
溴甲酚绿（BCG）与血清蛋白呈非特异性反 应，但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿（BCG）与 白蛋白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此 反应结束后应立刻比色测取吸光度。
二、测定方法
1、加样： 试管三只
试剂
空白管（B） 标准管（C） 测定管（U） 工作试剂（ml） 2 2 2
标 准 液（μl） 样 品（μl）
四、临床意义：
• 1、白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1，通过
计算其比值可以判定肝脏的功能情况； • 2、白蛋白降低，其比值降低或倒置： 慢性肝炎（肝细胞功能降低）、肝硬 化（肝细胞坏死、肝腹水）； • 3、球蛋白大量降低：机体免疫功能降 低。
血清白蛋白测定标准操作规程
血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清白蛋白测定（缩写ALB）;组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2。
1标本采集2。
1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2。
1。
2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2。
1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2。
1。
5下列标本为不合格标本2。
1。
5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本,或少于0。
1ml的血清或血浆。
2。
1。
5。
2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2。
1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的.2。
1。
5。
4其他如标识涂改、标本试管破裂等.2。
2标本保存2.2。
1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清.2.2.2标本保存时间：室温(15～25℃)下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.3标本采集的注意事项2.3。
1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2。
3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。
PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿—-—-—-------———绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品.4。
2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。
开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天.开盖后避免污染。
变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染，不能继续使用.4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备4.4试剂盒主要成分:缓冲液（pH 4.2）50 mmol/L，溴甲酚绿0.25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂＜0.1%。
参考区间确定资料
第二类体外诊断试剂产品注册资料白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）参考区间确定资料XXXXXX有限公司一、参考依据依据NCCLS C28-A2 如何确定临床检验的参考区间：批准指南（2000）文件。
该文件是确定定量临床检验项目的参考区间的指南。
二、材料与方法1．标本来源按健康人群要求选择XXXXXXXXX医院健康体检者，收取该医院检验科检测已完成的临床样本。
样本采集/检验时间：XXXX.XX。
对象：在XX地区居住的性别不限、年龄不限的健康人。
健康人的要求：（1）一月内无急性感染史；（2）发育正常，无心血管、肺、肾和肝、胆、胰等器质性疾患；（3）半年内无输血和大手术史；（4）3月内未服用影响凝血功能的药物，2周内无中毒史，未接触毒物及其他有害物质；（5）妇女不在妊娠或哺乳期。
2．使用仪器HITACHI 7020全自动生化仪。
3．检测试剂XXXXXX有限公司生产的白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）。
规格：XXmL；批号：XXXXXX；生产日期：XXXXXXXX；有效期XXXXXXXX。
4. 质量控制按照技术要求3.1、3.3~3.6.1、3.7进行产品性能的测定，结果应符合要求。
5. 参考值确定根据项目制定双侧界限或单测界限，采用95％参考区间范围。
6．统计方法应用SPSS20进行数据统计分析。
正态性检验采用Kolmogorov–Smirnov(K-S) 检验。
结果属于正态分布的，用正态分布法计算参考区间范围，其95％参考区间范围分别用下式计算：双侧：SD.1X96单测下限：SD.1＋X64－单测上限：SD.1X64结果属于偏态分布的，用百分位法计算参考区间范围，其95％参考区间范围分别用下式计算：双侧：P2.5～P97.5单测下限：P5单侧上限：P95三、试验结果用白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）对收集到的标本进行测定，测定结果呈正态分布（见图1）。
95%参考区间用公式求出，得出了本试剂盒测定ALB的参考值范围上下限，见表1。
白蛋白测定试剂(盒)技术审评要点
白蛋白测定试剂(盒)技术审评要点吴丹;李平;匡佩琳;帅明珠;鄢峰【摘要】本文概述了白蛋白测定试剂(盒)技术审评要点,包括原材料研究、生产工艺及反应体系研究、分析性能评估、临床评价、产品技术要求、使用说明书六个方面的要求.为规范白蛋白测定试剂(盒)注册申报和技术审评工作提供指导.【期刊名称】《中国医疗器械信息》【年(卷),期】2017(023)013【总页数】4页(P55-57,60)【关键词】白蛋白测定试剂(盒);技术审评【作者】吴丹;李平;匡佩琳;帅明珠;鄢峰【作者单位】江西省药品审评中心江西南昌 330008;江西省药品审评中心江西南昌 330008;江西省药品审评中心江西南昌 330008;江西省药品审评中心江西南昌330008;江西省药品审评中心江西南昌 330008【正文语种】中文【中图分类】R446.6血清白蛋白在肝脏合成，血清白蛋白浓度升高常由于严重失水，血浆浓缩所致，并非蛋白质绝对量的增加。
临床上尚未发现单纯白蛋白浓度增高的疾病。
白蛋白浓度降低的原因与血清总蛋白浓度降低原因相同。
但有时总蛋白的浓度接近正常，而白蛋白的浓度降低，同时伴有球蛋白浓度的增高。
急性白蛋白浓度降低，主要由于急性大量出血或严重烫伤时血浆大量丢失。
慢性白蛋白浓度降低主要由于肝脏合成白蛋白功能障碍、腹水时白蛋白的丢失和肾病时白蛋白从尿液中的丢失。
严重时，白蛋白浓度可低于10g/L。
白蛋白浓度低于20g/L时，由于血浆胶体渗透压的下降，常可见到水肿等现象。
另外存在极少数先天性白蛋白缺乏症患者，由于白蛋白合成障碍，血清中几乎没有白蛋白，但患者并不出现水肿[1]。
白蛋白测定试剂（盒）使用溴甲酚绿法（BCG）、溴甲酚紫法（BCP）对血清、血浆中白蛋白进行定量检测。
包括手工试剂和在半自动、全自动生化分析仪上使用的试剂。
截止2015年底，全国已获证产品约70个（含国产和进口）。
为了规范该类产品的注册申报和技术审评工作，2015年本单位承担了国家食品药品监督管理总局关于白蛋白测定试剂（盒）注册技术审查指导原则的课题研究。
溴甲酚绿法测定血清白蛋白
溴甲酚绿法测定血清白蛋白溴甲酚绿法是一种常用的测定血清白蛋白含量的方法，其原理是利用溴甲酚绿与白蛋白混合后的光度变化来测定血清白蛋白的含量。
下面将详细介绍溴甲酚绿法测定血清白蛋白的具体操作过程。
实验原理血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成复合物，形成的复合物的光学密度与白蛋白的含量呈正相关。
测定方法如下：步骤一：准备溴甲酚绿溶液将溴甲酚绿加入缓冲液中，制备浓度为0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液。
步骤二：制备标准工作液将0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液和1%的牛血清白蛋白溶液以1:5的比例混合，制备出浓度为0.002mg/mL的标准工作液。
步骤三：制备比色管取6mm x 100mm的试管，标出标准液和待测液的填充线，分别用吸管将标准液和待测液分别加入比色管中。
步骤四：光度测定将加入标准液和待测液的比色管分别放入分光光度计中，设置波长为628nm，测定各试管的吸光度值（OD值）。
步骤五：计算白蛋白含量比较标准工作液和待测液的吸光度值，根据标准曲线计算出待测液中白蛋白的含量。
实验要点1、比色管的选择：使用6mm x 100mm的试管即可。
3、比色管中待测液的加入：待测液的加入应加到标记线上方。
4、比色管中标准液和待测液的混合：比色管中标准液和待测液的混合应该彻底，避免混合不均导致误差。
5、波长的设置：溴甲酚绿法测定血清白蛋白的波长一般定在628nm。
实验注意事项1、实验过程中要保持实验环境的清洁和卫生，保证实验的准确性。
2、所有实验仪器和试剂必须在实验前检查是否正常。
3、实验过程中要严格按照实验步骤进行，保证结果的准确性。
4、实验结束后要保持实验环境整洁，清洁仪器和试管。
总结溴甲酚绿法是一种简单、快速、准确的血清白蛋白含量测定方法。
通过以上步骤，我们可以很容易地进行血清白蛋白含量的测定。
在实验过程中，需要注意实验细节和准确性，保障实验结果的准确性。
ALB溯源文件
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚绿法）溯源性说明
白蛋白(ALB ）检测试剂盒（溴甲酚绿法）使用ALB 专用校准液校准，可以溯源至国际二级参考物质(ERM
—DA470K/IFCC ）。
常规样品测量结果的溯源性程序如下图所示。
一、 溯源链示意图
注:第一条虚线以上的操作由权威机构完成;
两条虚线之间操作由生产企业操作完成； 第二条虚线以下的操作由终端客户完成； 二级参考物质：ERM-DA470K/IFCC ；
溯源链中企业标准测量程序即：重庆中元生物技术有限公司白蛋白检测试剂盒（溴甲酚绿法）.
校准
定值
二、溯源性说明
关于ALB校准品定值的不确定度如下所述：
注:溯源选定仪器：贝克曼库尔特AU480全自动生化分析仪;
不同批号的校准品和质控品的值会稍有差异；
当制造工序及检验工序变更的时候，不确定度的计算方法也可能变更。
白蛋白检测操作程序
白蛋白检测操作程序白蛋白（albumin ，ALB ）是一种仅含有氨基酸的单纯蛋白质,在血浆中发挥多种生理功能。
溶于水和中性盐，易与阴离子染料结合，故本试验采用溴甲酚绿（阴离子染料）法测定,在反应中加入丁二酸缓冲液能够避免溶液混浊，降低空白吸光度。
主要用于肝、肾等疾病的诊断。
实验原理在pH4.2条件下，白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色结合物,蓝绿色结合物与样本中白蛋白浓度成正比,在630nm 处测定吸光度值，即可求得样本中白蛋白的浓度。
试剂与仪器1. 试剂1.1. 白蛋白试剂盒（由上海复兴长征医学科学有限公司提供）化学组成：溴甲酚绿0.35mmol/L 丁二酸缓冲液50mmol/L工作参数：在开展项目之前或更换试剂品牌时，将以上工作参数输入到仪器内，并按要求进行调整后，方可进行实验。
技术性能指标:试剂空白起始吸光度（630nm37℃）≤0.20A 。
线性范围：50g/L ±10%。
准确度：相对偏差(RE%)≤±10%。
精密度：批内精密度变异系数(CV%)≤5%；批间精密度相对极差(%)≤5%。
储存条件、有效期：储存于2～25℃，避光可稳定18个月。
以蒸馏水为空白在630nm 处光吸收值高于0.3A时，则不能使用。
计算公式： 白蛋白深度(g/L )= ×校准液浓度(g/L )样品管吸光度校准管吸光度以上是依据化学实验计算测试结果的公式，全自动分析时将校准液浓度值（Conc值）输入仪器即可。
1.2. 英国郎道（RANDOX）质控品，每次采用正常和异常两个水平，并参照质控品测试要求进行。
1.3. 校准液2. 仪器采用日立（HITACHI）7060型全自动生化分析仪。
选择波长340-800nm之间，能对终点、速率、两点、免疫比浊等方法的实验进行测定。
标本测定程序1. 开机：开机前要加清洗液、上打印纸、接蒸馏水等。
然后打开电源及中文计算机信息管理系统。
2. 试剂准备：开机后将所需试剂置于试剂盘相应位置。
白蛋白测定试剂盒(溴甲酚紫法)产品技术要求jiuqiang
白蛋白测定试剂盒（溴甲酚紫法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆中白蛋白的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为棕黄色到紫色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为淡黄色或黄色冻干品，复溶后为淡黄色到黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为淡黄色或黄色冻干品，复溶后为淡黄色到黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白：A600nm下测定空白吸光度应≤ 0.7000。
2.4 准确度测定国际参考物质ERM®-DA470k/IFCC相对偏差不大于6.0%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为40 g/L时，其吸光度变化在0.1000～0.6000之间。
2.6 线性区间测试血清样本，试剂线性在[2.0，65.0]g/L区间内：a）线性相关系数| r |应不小于0.990；b） [2.0，20.0]g/L区间内，线性偏差应在±4.0 g/L范围内；(20.0，65.0] g/L区间内，线性偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性重复测试浓度在(40.0±5.0）g/L的血清样本或质控品，所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于2.0%。
2.7.2 批间差测试浓度在(40.0±5.0）g/L的血清样本或质控品，批间相对极差（R）应不大于5.0%。
2.8 瓶间差校准品、质控品的瓶间差应≤10%。
2.9 质控品赋值有效性使用质控品进行测定，所得结果应在靶值范围内。
2.10 稳定性2.10.1 试剂稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
血清白蛋白溴甲酚绿法测定
血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿（BCG）法测定1.实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。
在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定一个月，-20℃保存至少可以稳定3个月。
4. 标本运输室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料:6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒（货号：11202271701，8×70ml）6.1.1 试剂组成柠檬酸盐缓冲液pH 4.2 30mmol/L溴甲酚绿(BCG) 0.26mmol/L表面活性剂适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
临床生化检验：3-血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)
2012春季学期
实验目的
掌握溴甲酚绿法测定血清白蛋白原理和方法及影 响因素、条件控制； 了解血清白蛋白各种测定方法的优缺点。
2012春季学期
实验原理
血清白蛋白在ｐH4.2的缓冲液中带正电荷，在有 非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染 料溴甲酚绿（BCG）结合形成蓝绿色复合物，在 波长630nm处有光吸收峰，其颜色的深浅与白蛋 白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较， 可求得血清白蛋白含量。
取3支试管做好标记，按下表操作：
加入物
血清 蛋白标准液 蒸馏水 R试剂
B
21μl 3ml
S
21μl
3ml
U
21μl 3ml
混匀，37℃孵育1分钟后，在波长630nm处，以B管调零，读取各 管吸光度A。
2012春季学期
数据处理计算
管号 S U
测定次数
1
2
3
ALB g / L 28 A u As
平均A值
2012春季学期
血清白蛋白测定（溴甲 酚绿法）
医学检验系临床生化检验教研室
白蛋白生化特性
血清白蛋白（Albumin,Alb） pI4.7 正常人血清Alb含量为35～55g/L,占血浆蛋白的 50%～60%。 生理功能：营养价值
维持血浆胶体渗透压 运输作用
2012春季学期
Alb测定方法
血清Alb具有两个不同于其他血清蛋白的显著特点 ：一是其分子中色氨酸含量低下（0.2%）； 二是在pH7.4环境中，Alb分子以阴离子形式存在。
2012春季学期
参考值 参考范围：35～55g/L
2012春季学期
白蛋白(Alb) 溴甲酚绿终点法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。
PH = 4.2白蛋白+ 溴甲酚绿--------------- 绿色复合物2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用EDTA-Na2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司ALB试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：白蛋白校准液40.0g/L3.2 校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
白蛋白测定实验报告
一、实验目的1. 掌握白蛋白测定原理和方法。
2. 了解白蛋白在临床医学中的重要性。
3. 熟悉白蛋白测定实验操作步骤。
二、实验原理白蛋白（Albumin）是血清中含量最高的蛋白质，占血清总蛋白的50%以上。
白蛋白具有维持血浆胶体渗透压、运输多种物质、调节pH值等功能。
本实验采用溴甲酚绿法测定血清白蛋白含量。
溴甲酚绿法：在酸性条件下，溴甲酚绿与白蛋白结合形成蓝绿色复合物，复合物的颜色深浅与白蛋白含量成正比。
通过比色法测定吸光度，计算白蛋白含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 血清标本- 标准白蛋白溶液- 溴甲酚绿试剂- 醋酸缓冲液- 0.4%氢氧化钠溶液- 吸管- 移液器- 50ml容量瓶- 10ml量筒- 721型分光光度计2. 仪器- 电子天平- 磁力搅拌器- 移液器四、实验步骤1. 标准曲线绘制- 将标准白蛋白溶液用醋酸缓冲液稀释成不同浓度（例如：0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml）。
- 每个浓度取1ml，加入溴甲酚绿试剂1ml，混匀。
- 60℃水浴15分钟，取出冷却至室温。
- 在540nm波长下，测定吸光度。
- 以吸光度为纵坐标，白蛋白浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 血清白蛋白测定- 将血清标本用醋酸缓冲液稀释成适宜浓度。
- 每个样品取1ml，加入溴甲酚绿试剂1ml，混匀。
- 60℃水浴15分钟，取出冷却至室温。
- 在540nm波长下，测定吸光度。
- 根据标准曲线，计算样品中白蛋白含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制- 标准曲线呈线性关系，相关系数R²大于0.99。
2. 血清白蛋白测定- 样品中白蛋白含量为X mg/ml。
六、讨论与心得1. 白蛋白测定在临床医学中具有重要意义，可用于评估患者营养状况、肝功能、肾功能等。
2. 溴甲酚绿法操作简便，结果准确可靠，是临床常用的白蛋白测定方法。
3. 在实验过程中，应注意以下事项：- 标准曲线绘制时，需严格控制温度和时间。
糖化白蛋白(GA)测定试剂盒(酶法)产品技术要求st
1.性能指标1.1外观外观应符合以下要求：a）试剂盒应组分齐全，完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应清晰。
b）GA试剂1（R1）：无色至淡黄色液体。
c）GA试剂2（R2）：淡黄色至棕黄色液体。
d）ALB试剂1（R1）：无色至淡黄色液体。
e）ALB试剂2（R2）：棕绿色至淡绿色液体。
f）校准品/质控品：白色至淡黄色冻干粉。
1.2装量液体试剂装量要求不低于标示量。
1.3试剂空白吸光度糖化白蛋白试剂在主波长处的空白吸光度（A）≤0.1。
白蛋白试剂在主波长处的空白吸光度（A）≤0.35。
1.4分析灵敏度糖化白蛋白样本浓度在650μmol/L 时，吸光度变化在0.08~0.19。
白蛋白样本浓度在4.0g/dL 时，吸光度变化在0.2~0.6。
1.5线性范围1.5.1糖化白蛋白1.5.1.1糖化白蛋白浓度在[38，1300] μmol/L范围内，线性相关系数r≥0.990。
1.5.1.2在[38，620] μmol/L范围内，线性绝对偏差应不大于±30μmol/L；在（620，1300] μmol/L范围内，线性相对偏差应不大于±10%。
1.5.2白蛋白1.5.2.1试剂盒在[1.0，6.0] g/dL 范围内，线性相关系数r≥0.990。
1.5.2.2 在[1.0，2.0] g/dL 范围内，线性绝对偏差应不大于±0.4g/dL；在（2.0，6.0] g/dL 范围内，线性相对偏差应不大于±10%。
1.6精密度1.6.1重复性糖化白蛋白批内精密度(CV)≤5%；白蛋白批内精密度(CV)≤2%。
1.6.2批间差糖化白蛋白批间相对极差(R) ≤8%；白蛋白批间相对极差（R）≤5%。
1.7准确度糖化白蛋白：相对偏差应不大于±10%。
白蛋白准确度：相对偏差应不大于±6.0%。
1.8分析特异性当胆红素≤7.5mg/dL、结合胆红素≤5mg/dL、葡萄糖≤2400mg/dL、抗坏血酸≤5mg/dL、血红蛋白≤200mg/dL、尿酸≤35mg/dL、脂肪乳≤0.2%时，对GA 试剂检测结果的偏差影响在±10%以内。
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白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)
简介：
总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。
检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。
Leagene 白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple ，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm 处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。
本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比BCG 法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 离心管、小试管
2、 比色杯
3、 分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、 取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中，充分溶解后配制成40mg/ml 的白
蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。
亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解白蛋白标准品的稀释液。
2、 样本处理：血清、血浆样本直接取检测。
对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比
例，加入生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。
编号 名称
TC0567 100T Storage
试剂(A): BCP 试剂 200ml 4℃ 避光
试剂(B): 白蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 白蛋白标准配制液 100ml
RT
使用说明书
1份
3、白蛋白加样操作，按下表依次加入试剂：
加入物(ml) 空白管标准管待测管
白蛋白标准配制液0.01 −−
白蛋白标准溶液(40mg/ml) −0.01 −
待检样品(血清、血浆、组织匀浆液) −−0.01
BCP试剂 2.0 2.0 2.0
4、比色杯光径，先在分光光度计以空白管调零，逐管加入BCP试剂，并立即混匀。
5、放置(30±3)s，读取标准管和各待测管的吸光度。
6、当遇到脂血混浊，可设”样本空白管”：取待测样品加入白蛋白标准配制液，予以校正。
计算：
白蛋白(g/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×白蛋白标准液浓度(g/L)
参考区间：
健康成年人36～46g/L
注意事项：
1、白蛋白标准粉末溶解于白蛋白标准配制液后，即获得白蛋白标准原液，该原液中含有
防腐剂，不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2、如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
使用酶标仪测定蛋白浓度时，每个试
剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
3、本法线性范围是10～50g/L，在10～40g/L呈良好线性范围。
4、CV可达0.45%，回收率可达99.3%～102%，平均回收率达100.5%。
5、该法测定正常样本的批间变异系数为6.3%。
有效期：6个月有效。
白蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。