生物工业分析实验指导

生物工业分析实验指导

张丙云编写

兰州理工大学生命科学与工程学院

学生实验须知

一、认真进行实验预习，了解实验的目的、原理、方法、操作步骤及注意事项，做好记录。

二、严格遵守实验时间，不迟到、不早退、不中途离开，不无故不做实验。

三、实验中要随时注意观察和记录，不得抄袭他人数据，认真做好实验报告。

四、室内不准大声喧哗，严禁吸烟，吃零食。

五、听从老师指导，严守操作规程，不了解仪器性能时不得随意乱动。

六、注意节约水、电及药品。

七、实验完毕将药品、仪器、用具等洗净后放回原处，由班长安排同学轮流值日，值日生负责当天的卫生清理工作。

八、实验室内一切物品未经许可严禁携带室外。

九、因违反实验规则而损坏的物品需按有关规定赔偿。

生物工业分析实验计划（共25学时）

实验一水分的测定（1学时）

实验二旋光法测定味精含量、折光法测定可溶性固形物（2学时）

实验三总灰分的测定（2学时）

实验四啤酒中铁的测定（2学时）

实验五粗脂肪含量的测定（索氏法）（4学时）

实验六淀粉的测定（费林法）（3学时）

实验七粗蛋白质含量的测定（凯氏定氮法）（4学时）

实验八酸度的测定及总氨基酸的测定（2学时）

实验九液化型淀粉酶酶活力的测定（2学时）

实验十新鲜蔬菜中β—胡萝卜素的提取、分离（3学时）

实验一直接干燥法测定水分

（GB5009.3-85 ）

一．目的要求

1.通过本实验掌握水分测定的方法；

2.领会常压干燥法测定水分的原理及操作要点；

3.熟悉烘箱的使用、天平称量、恒重等基本操作。

二．实验原理

水分一般是指在100士5 o C直接干燥的情况下所除去物质的总量。

直接干燥法适用于在95～105℃下，不含或含其他挥发性物质甚微的食品。

三. 实验用品

1. 仪器：称量瓶（矮形）、干燥器、分析天平。

2. 试剂

（1）盐酸(1+1)。

（2）氢氧化钠溶液（240g/L）。

（3）海沙：取用水洗去泥土的海沙或河沙，先用盐酸(1+1）煮沸0.5h,用水洗至中性，再用氢氧化钠（240g/L）溶液煮沸0.5h,用水洗至中性，经100士5℃干燥备用。

四. 操作方法

1. 固体样品：取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶，置于100±150C 干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，加热0.5-1.0h,取出，盖好，置干燥器内冷却0.5h，称量，并重复干燥至恒量。称取

2.00-10.0g切碎或磨细的样品，

放入此称量瓶中，样品厚度约5mm 。加盖，精密称量后，置100士5℃干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，干燥2-4h 后，盖好取出，放入干燥器内冷却0.5h 后称量。然后放入100士5℃干燥箱中干燥1h 左右，取出，放干燥器内冷却0.5h 后再称量。至前后两次质量差不超过2mg,即为恒量。 2. 半固体或液体样品：取洁净的蒸发皿，内加10.0g 海沙及一根小玻棒，置于100士5℃干燥箱中，干燥0.5-1.0h 后取出，放入干燥器内冷却0.5h 后称量，并重复干燥至恒量。然后精密称取5-10g 样品，置于蒸发皿中，用小玻棒搅匀放在沸水浴上蒸干；并随时搅拌，擦去皿底的水滴，置100±50℃干燥箱中干燥4h 后盖好取出，放入干燥器内冷却0.5h 后称量。以下按(1)中自“然后放入100士5℃干燥箱中干燥1h 左右”起依法操作。

五. 实验数据及结果计算 1.实验数据

称量瓶（+海砂+玻

棒）

称量瓶+样品

烘干后

第一次称重 第二次称重 第三次称重 第四次称重

2. 结果计算：

1003

12

11⨯--=m m m m X

式中：X 1—样品中水分的含量，g/100g;

m 1—称量瓶（或蒸发皿加海沙、玻棒）和样品的质量，g;

m2—称量瓶（或蒸发皿加海沙、玻棒）和样品的干燥后的质量，g;

m3—称量瓶（或蒸发皿加海沙、玻棒）的质量，g。

六. 思考题

1. 对采用本法测定水分含量的样品有何要求？

2. 判断样品中水分是否蒸净的依据是什么？

实验二旋光法测定味精含量、折光法测定可

溶性固形物

一、目的要求

1. 了解折光计、旋光仪的工作原理；

2. 熟悉折光计、旋光仪的使用。

3. 学习用旋光法测定味精含量，折光法测定可溶性固形物的方

法

二、实验原理

1.旋光法测定味精含量原理：

2. 折光法测定可溶性固形物原理

折射定律：n2 / n1 = sinα1/sinα2（n1为样品折射率，n2棱镜折射率）

当发生全反射时：α1=90o，则n1= n2sinα临，若n2已知，α临通过折射仪可测得，可求出样液的折射率n1。

液态食品的折光率可反映其可溶性固形物含量，测定折光率即可

确定可溶性固形物含量。虽然含有不溶性固形物的样品不能直接用折光率反映其含量，但通过实验编制的总固形物与可溶性固形物的关系表可查出总固形物含量。

三、测定方法

1 旋光法测定味精含量（使用自动旋光仪）

（1）样品溶液的配制

精确称取味精样品10.0g，加入40~50ml蒸馏水溶解，搅拌下加入分析纯盐酸16ml，使味精全部溶解，冷却至室温，全部转入100ml容量瓶，定容至刻度；

（2）旋光仪零点校正

打开电源开关，经预热10min，使钠光灯发出稳定的光，取16ml分析纯盐酸，用蒸馏水定容至100ml，装满旋光管，放进样品室，调整零点。

（3）样品液的测定

用样品液洗涤旋光管三次，装满，放进样品室，调整并记录旋光度以及测定时该样品的温度。

附：旋光仪操作方法

（1）接通电源：

打开仪器背面左下角处的总开关，钠灯会自动启亮，仪器预热一刻钟左右使之稳定。

（2）清零：

翻开样品室门盖，把已注入蒸馏水或空白的试管放入样品室内v型定位槽中，再关上门盖，按下测量键数字显示窗将出现数字显示，稍待数字趋向稳定即可按下清零键。使数码管示数为零。一般情况下如在不放试管时已示数为零，放入无旋光度蒸馏水或空白试管后，其示数也应为零。但须注意在测试光束的通路上不得有小汽泡或油污等不清洁物，试管护片也不宜旋压得过紧，否则会引起附加旋光度。在取出以上试管时应记下其按放的位置与方向。

（3）测试