PAHs降解菌的分离_鉴定及降解能力测定

第23卷　第3期海洋环境科学V ol.23,N o.3 2004年8月MARI NE E NVIRONME NA L SCIE NCE Aug.2004

PAH s降解菌的分离、鉴定及降解能力测定

徐　虹1,章　军1,刘陈立1,邵宗泽2

(1.厦门大学　生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建厦门　361005;2.国家海洋局

第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室,福建　厦门　361005)

摘　要:以芴、菲、蒽、芘为碳源和能源筛选、分离PAHs降解菌。14株能降解利用PAHs的菌株被分离。通过HP LC分析,在

含芴、菲、蒽、芘的混合培养基质中10号菌的降解能力最强。研究它的降解性能和生长情况,表明该菌在混合反应体系中培

养30d后对芴、菲、蒽、芘的降解率分别为95.27、90.46、28和80%;在只含一种PAH的单反应体系中该菌对芴、菲、蒽的降解

能力提高,降解率分别可达98.91、94.32和52.17%,而对芘的降解能力则降低,降解率仅为62.47%。与混合PAHs培养体系

相比,在单一PAH培养体系中,细菌的对数生长期缩短1/3。经生理生化鉴定和16S rDNA序列对比分析,确定10号菌株属

于假单胞菌,命名为P seudomonas sp FAP10。

关键词:生物降解;多环芳烃;假单胞菌

中图分类号:O625.15;X55 文献标识码:A 文章编号:100726336(2004)0320061204

Isolation and identification of PAH2degradating strains and

their degradation capability

X U H ong1,ZH ANGJun1,LI U Chen2li1,SH AO Z ong2ze2

(1.The K ey Laboratory of M inistry of Education for Cell Bilogy and Tum or Cell Engineering,School of Life Science,X iamen Univer2

sity,X iamen　361005,China;2.The Third Institute of Oceanography,S OA,X iamen　361005,China)

Abstract:Fluorenen,phenathalene,anthracene and pyrene were used as carbon and energey s ource to is olate and screen PAHs2degrading strains.F ourteen strains capable of degrading PAHs were is olated from the petroleum in seawater contaminated.Analyses was done by HP LC,strain N o.10showed the strongest degrading ability in the mixing system of fluorene、phenathalene、anthracene and pyrene.Its degradation performance and growth curve were tested. The degradation rates of fluorenen,phenathalene,anthracene and pyrene were95.27%、90.46%、28%and80%respectively in the mixing system within 30d.Under the condition of single PAH existence,the degradation rates of fluorene、phenathalene and anthracene by strain N o.10increased to98.91%、94.32%、52.17%respectively while the degradation rate of pyrene decreased to62.47%.C om pared to the mixing system,the logarithmic growth phase of strain N o.10was shortened one third in single PAH system..Based on the results of physio-biochemical identification and phylogenetical analyses of 16S rDNA sequence,strain N o.10was belonged to P seudomonas sp,named as P seudomonas sp FAP10.

K ey w ords:biodegradation;polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs);P seudomonas

目前对于海洋油污染的清除方法主要有物理方法、化学方法和生物修复方法。其中生物修复法能利用生物有机体将污染物转化为稳定、无毒的终产物和微生物自身的生物量从根本上消除环境中的油污染,具有成本低、投资少、效率高、原位降解及不易造成二次污染等优点而受到普遍重视[1,2]。因此生物修复方法已经广泛应用于油污染的研究中。对于石油中烷烃、苯、甲苯等组分,大多数种属的微生物都具较强的分解能力,但对于高脂溶性、难挥发、具致畸、致癌及致突变作用的多环芳烃(PAHs)的降解情况则不甚理想,为此,许多研究者也进行了大量研究,取得了不少成果[3～10]。本研究旨在从石油污染的海域初步筛选出对多种PAHs 组分均具较强降解能力的海洋降解菌,为将来研究PAHs生物降解的分子机制,构建能降解PAHs的基因工程菌奠定基础。

1　材料与方法

1.1　培养基

MS M培养基:NaCl24g/L,NH4NO31.0g/L, K Cl0.7g/L,KH2PO42.0g/L,Na2HPO43.0g/L, MgS O4・7H2O0.7g/L,CaCl20.02g/L,FeCl3

收稿日期:2003210217,修改稿收到日期:2003212201

基金项目:国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室开放基金[A97304(021)]

作者简介:徐　虹(19732),女,湖南常德人,在职博士,主要从事基因工程与分子生物学研究。