紫外检测器定量校正因子的性质与实用性探讨

因此 ，某个组份的峰 面积就是： 长度，Ｆ为流动相的流速，ｆ 为检测器输 出单位。 由于 Ｌ和 ｆ 为检 测器的常数 ，Ｆ由仪器精确 控 制，而 值在 一定的流动相 配比、波长 条件 下 是组份的特性常数，在每个具体的分析中，这些
参数都是确定的和已 知的 ，因此组份的 ｆ就是一 ｉ 个可以 计算 的值，不 一定 要用标 准品校 正得到 。 由 （ 式还 可以看 到，组份的 ｆ 与 值 一样，是 ３ ） ｉ涤 一个与仪器 型号 无关，能在不 同仪器 上 现 重现的定 量参数 。
经有人注 意到了这个 关系 ，并 试图建立一种用吸
收系数Ｅｍ进行含量 （１ 测定的方法［。 ］ １
紫 外检测器的响应基 于 Ｌ ｍｂｒｂｅ 定律， ａ ｅ－ ｅｒ
即：
以 上 中， 是被测组份 的摩 尔吸收 系数 ，Ｃ 式 为 被测 溶液 的摩 尔浓 度，Ｍ 为 被测 组份 的摩 尔
数，Ｍｗ 为被测组份的分子量，Ｌ为检测器光程
重蒸馏；４ 标 准物 ：联苯 、硝基 苯、苯酚 、二苯 ． 甲酮、４ 氯 硝基苯（ － 均为色 谱标准） ． 。５ 标准工作 液 ： 别 用 相 应 的流 动 相 将 各 标准 物 配 成 分
０１ ／ ． ｍｇ ｍＬ的标准工作液。 ０ （ 实验过程： １取各标准工作液在紫外 三） ．
分光光度 计上 测得最大吸收 波长及吸收值 ，计算 得摩尔，吸收系数。２ 采 用不 同的 高效液相色 谱 ． 条件，在各标 准物 的最大吸收波 长处 测得各标准
ｌｅ ｅｈｒ ｔ ｐｂｓｅ ｄｔｏ ｆ ｍ ｋｏ ｎ ａ ｄ ｅｆ ｍ ｕｌ ｄ ａ ｒ ｔ ｎｗ ｔ ｉ ｒ ｈ ｔ ｏ ｅ ｉ ｈ ａ ｒ ｈ ｏ ｅ
ａｓｒｔ ｎ ｆｃ ｎ ． ｂｏｐｉ ｃｅｉｅｔ ｏ ｏ ｆｉ
［］ ２ Ｔ． Ｒｏ ｒ ｄ ． Ｍｃ ｎ ｌ， ＪＡｓｏ ．Ｏｆ Ｒ． ｍｅ ａ ｎ Ｊ Ｌ． Ｄｏ ａｄ ． ｓｃ ｆ ．
Ｚ ｏ Ｆ ｎ，Ｂａ ｊ ｎ．Ｄ ｎ Ｓ ｎ ．Ｆｎ Ｅｌｇ ｎ ｈｕ ｇ ｉ ｉ ｇ ｅｇ ｇ ｅｇ ｉ ．Ｉ－ ａ ｎ ａ ｏ ｒｎ ｓｔ ｅ Ｂｏｎｉ ｅｉ ．Ａ ａｅ ｙ Ｍｉｔ ｙ ｄｃｌ ｔｕ ｏ ｉ ｇ ｅｒ ｇ ｃｄｍ ｏ ｌａ Ｍｅｉ ｉｔ ｆ ｅ ｎ ｎ ｆ ｉｒ ａ Ｓｉ ｃ ，Ｂｉ ｇ ｃｎｅ ｅ ｓ ｉ ｎ Ａ ａ Ｃ ｅ ，６，８ １（ ７）． ｎｌ ｈｍ ． １ ０ １ ６ ９ ［ ３ ］ ＲＦＶ ｓｎｅ ａｄ ．ｉ ｌ ． ｅ ａ， Ａ ｐ ．．ｅｏ ｄｒ ｎ ＡＣｅ ｅ ｇ ｒ ｔ ． ｌ ｐｌ Ａ ｔ ｄ ｓ ｎ ｖｌ ｅ ｆｒ ａａ ｓ ｏ ｍｅ ｏ ｈ ｂｅ ｄ ｅ ｐｄ ｔｅ ｌ ｉ ｆ ｈ ａ ｅ ｅ ｏ ｏ ｈ ｎ ｙ ｓ Ｔ ２ ｉ ｂ ｇｓ ｏ ｔｇａｈ ．ｈ ｓｍ ｌｗ ｓ － ｔｘ ｙ ｃｒｍａ ｒｐｙ ｅ ｐｅ ｅ－ ｏ ｎ ａ ｈ ｏ Ｔ ａ ａ ｘ ｔ ｃｅ ｆ ｍ ｏｌｙ ｒ ａｄ ａ ｓｂ ｃ ｄ ｒｔ ａ ｄ ｏ ｍ ｕ ｒ ｄ ｃ ｎ ｎ ｗ ｓ ｊ ｔ ｔ ｏ ｕ ｅｅ ｏ ｄｒ ａｉ ｔ ｎ ｔ ｓ ｒ ｇｎｓ ｒｏ ｔ ｐ ｒ ｕｅ ｅｉ ｔａｉ ｗ ｈ ｅ ｅｔａ ｏ ｍ ｍ ｅａ ｒ ｏ ｖ ｚ ｏ ｉ ｉ ａ ｘ ｔ ｅ ｔ ｒ ６ ０ ｆｒ ｆｅ ｔ ａｏ ｓＴ ｅ ｂ ｉ ｓ ｔｅ － ｏ ｄｆｒｎ ｄｒｔ ｎ． ｈ ｓ ｉｔ ｏ ｈ ｐｏ ｉｅ ｕ ｉ ｔ ｌｉ ｆ ｒ ａ ｅ
测量值与计算值之间无显著性差异，证明了（式 ３ ）
是成立的 。表 ２ 的结 果进一步说 明了同一化 合物 的 ｆ值可 以 在不 同的 仪器 上重 现。 因此可 以推 ｉ 论 ， 在 色谱 条 件确定 之后 ， 只要 知道 组 份的 值 ，就应可以 由峰 面积计算定量校正因 子，或直 接 计算组 份的 含量 。在 色谱 条件相 同的情 况下 ， 也应可 以采用文 献给出的 ｆ ｉ 值进行定量 分析 ，这 一点为在缺乏标准 品情 况下进行分析 提供了可能 性。
（ 误差因素的考察 二）
在采 用文献或计算 ｆ ｉ 值进 行定量分析时，所 有引起紫外检测 器对响应值变化的 因素都可能在
真值 （ 计算值）与实际测量值之间引入误差，因 此需要对这些因素的影响进行考察。１流量精度 ． Ｂｋｌ ｒ ａａ ｅ等人早就发现当流动相流量减小 １ ｙ ％，
［］林力行，南京药学院学报，１，２（９６。 ｌ ７ ， １８） Ｉ８ ［］ Ｓ ａ ａ ｅ ａｄ ． Ｈ ｎｙ Ｊ Ｃ ｒｍ ｔｇ．１６ ２ ． ｋｌ ｒ ＲＡ．ｅｒ， ． ｈｏ ａｏｒ ２， Ｂ ｙ ｎ ， ３７ １７） ２ （９６． ［］ 各厂家产品样本。 ３
［］ ５ Ｇ ．Ｃｏｌ ｓ ｄ Ｄ． ｓｎ ＪＡｓｏ ． ｆ Ａｎ ｌ Ｊ ｌｎ ａ Ｊ Ｒｏｅ ， ． ｓｃ Ｏｆ． ａ． ． ｉ ｎ ．
Ｃ ｅ ，６ ６ ．１７ （９９ ｈｍ． ２（） ２４ １７）． （ 收稿 日期：１８ 年 １ １ ９９ 月 ６眨）
ｄｃｄ ｉ ｔ ｅ ｈｖ ｂｅ ｃｍｐｒ ． ｕｅ ｄｒ ａｖｓ ｅ ｎ ａｅ ｅｖ ｉ ａ ｅ ｏ ｄ
都优于 ２ ［ ，因此由流量误差引起的定量分 ％ ３ ］
析结果误差不大于 ２ ％。２ 波长 的稳定性： ． 波长 的误差 直接导致 值的改变 ，但 这种影响在吸收 峰的顶 部非常微 小。关 于这一点， 已经有 了直观
（ 收稿 日 期：１８ 年 ２ ７日 ９９ 月 ） Ｔ ｅ ｌ ｌｉｎ Ａ ｐ ｃｔ ｎ Ｃ ｒ ｃｏ Ｆ ｃ ｒ ｏ ｈ Ｃ ｃ ａ ｏ ａｄ ｌａ ｏ ｏ ｏｒ ｔ ｎ ｔ ｓ ａｕ ｔ ｎ ｉ ｉ ｆ ｅ ｉ ａ ｏ ｆ
紫外检测器定量校正因子的性质与实用性探讨
李 聪
（ 浙江进出口商品检验局科技处，杭州，３００） 煅 １０７
现代 高效 液相色谱的紫外检测 器相 当于一 台 紫外分 光光度计，因此组份在紫外 检测器上的定
根据色谱定量校正因子的定义可以得到组份
在紫外检测器上 的定量校正因子为：
最校正因子ｆ ｉ 值就与其摩尔吸收系数 有关。已
Ｄ ｔ ｔ ｓ Ｍａｃｌ ｋｒＩ Ｃ Ｐ ０ １８ ｅ ｃ ｒ” ｒ Ｄ ｋｅ，Ｎ ， ４ ，９３ ｅｏ ， ｅ ｅ ［］Ｊｏ ｓ Ｙｃｒｙ ｔ“ ｉ ｉ Ｃ ｒｍａｏｒｐｙ ５ ｈｍａ Ｍ ． ｉ ｅ ｅｉ Ｌｑ ｄ ｏ ｔｇａｈ ｋ ｄ， ｕ ｈ
Ｄｅｅｔｒ”Ｍ ａｃｌ ｋ ｅ，ＮＣ， ． ，９ ３ ｔｃｏ ｓ， ｒｅ Ｄｅｋ ｒＩ Ｐ３ １８ ． ９
０ｎ ． ｍ。因而可以认为波长误差对定量分析结果 ２
的影 响实际上是极 小的。当然该结论仅适 用于最 大吸 收波长处。 ３ 其它因素： ． 从理论上说 ，单色
器狭缝的宽度、温度、被测组份的量以及检测器 对吸光度测量值的漂移等因素都可能影响定量精 度。但实际上它们的影响比流量精度的影响要低
１ 个数量级，因此是可以忽略的。 －３ 值得说 明的是 ，以上讨论只是说 明各 因素所
参
考 文
献
Ｄ ｔ ｍｎｔ ｎ Ｔｉ ｏｈｃｎｓ ｕ ｙ ｒ ｂ ｅｅ ｉ ｉ ｏ ｒ ｈｔｅｅｅ ｉ Ｍｏｌ Ｃ ｎ ｒ ａ ｏ ｆ ｃ ｎ ｄ ｏ ｙ Ｇ ｓ ｒｍ ｔ ｒｐｙ ａｇ ｎｃｕ， Ｚ ｕ ｏｃｕ ａ Ｃ ｏ ａ ｇａｈ Ｗ ｎ Ｌ ｇｈ ｎ ｈ ｏ ｉ ｈ Ｈ ｕｈ ，
［］ Ｊ ．ａ ｕｇ ＮＶ Ｒｇｓ ｎ ＦＭ．ｔ ｎ ． ｌ ． Ｂｍｂ ｒ， Ｒ ．．ｉ ｇ ａ ｄ ． Ｓｒ ｇ ｏ Ｔ ｔ ｈｄｏ ，２，３２ （９８ ｅｒ ｅｒｎ ４ ３９ １６）． ａ
实
验
部
分
（ ） 器： 岛津 Ｌ － ຫໍສະໝຸດ Baidu 高效液 相色 谱仪 ， 一 仪 Ｃ４ Ｓ Ｄ ２ Ｓ紫 外 检 测 器 （ 出 单 位 １ Ｖ／Ａ ） Ｐ －Ａ 输 ． ０ ｕ，
Ｃ Ｒ Ａ色谱数据处理机；岛津ｕ －６ 紫外分光 －３ Ｖ ２０
光度计 。
工作液的峰面积 进样量 １ ） （ ０ｌ ，并由 此计算校正
上的解释 ［ 。目前大部分紫外检测器的波长控 ４ ］ 制精度都在 ２ｍ以内，而 Ｓ ｖａｏ 认为作 ｎ ｔ ｅｓ ［ ｅ ５ ］
为 一 台 分 光 光 度 计 ，其 波 长 控 制 精 度 可 达
Ｕ Ｄｔ ｔ ． Ｃｏｇ ｅａ Ｉｐｒ ａｄ ｐｒ Ｖ ｅｃ ｒ ｉ ｎ Ｚ ｊｎ ｍ ｏ ｎ Ｅ ｏ ｅｏ Ｌ ｈ ｈ ｉｇ ｔ ｘ ｔ
Ｃ ｍｍ ｄｙ ｐ ｃｏ Ｂ ｒ ｎ ｏ ｏｉ Ｉｓｅｔ ｎ ｅ ． ｔｎ ｉ ｕａ Ａ ｐｅ ａｉ ｗ ｓ ｉ ｄ ｄ ｌｅ ｆｒ ｓ ｌｅｕｔ ｎ ｄｒ ｅ ａ ｕｉｚｄ ｔｅ ｉ ｍ ｑ ｏ ａ ｅ ｖ ｎ ｔｉ ｏ ｈ ｃｌ ｌ ｉ ｏ ｃｒ ｌ ｉ ｆ ｔｒ ｏ ａ ｍｐｎ ｎ ｏ ａ ｕ ｔ ｎ ｏｒａ ｏ ａ ｏ ｆ ｆ ｏ ｏ ｅｔ ｃ ａ ｏ ｆ ｅ ｔ ｎ ｃ ｉ ｃ ｎ Ｕ ｄｔ ｔｒ Ｈ Ｌ ． ｈ ｖｌｉ ｏ ｔｅ ａｉ ｗ ｓ Ｖ ｅ ｏ ｉ Ｐ Ｃ Ｔ ｅ ｉｔ ｆ ｅｕｔ ｎ ｅ ｃ ｎ ａｄ ｙ ｈ ｑ ｏ ａ ｅａ ｎｄ ｅｐｒ ｅｔ ｙ ａ ｖｒ ｕ ｘｍｉ ｅ ｘｅ ｍ ｎａ ｉ ｌ ｔ ａｉ ｓ ｏｅａｉ ｏ ｐｒｔ ｇ ｎ ｃｎｉｏ ｓＩｗ ｓ ｖｄ ｔ ｆｖｌｅ ｂ ｃｌ － ｏｄｔ ｎ．ｔ ｐｏ ｅ ｔａ ｔ ｉ ｕ ｃｎ ａ ｕ ｉ ａ ｒ ｈ ｈ ｅ ａ ａ ｅ ｃ
Ｅｖｏ． ｃ ｂ ｌ １ ２０（ ７ ｎｉ ｎ Ｍｉｏｉ． ， ８ １ ６ ｒ ， ｒ ｏ，３ ９）
［］ ４ Ｉ－ｈ ｎ Ｈ ｕ ｄ ＢＳ ｌｙ ｅ ａ． Ａ ｐ ｈ ｃａｇ ａ Ｅ ． ｌ ， ｔ ， ｐ ｌ ｓ ｎ ． ｍａｅ ｌ ． Ｍｉｏ ｉ ． ４ （） ８ （ ７ ）． ｃ ｂｏ ，２ ５，６４ １ ２ ｒ ｌ ９
峰面积 值就增加１ ２。 ％［ 实际上２ ］ （式已经 组 ） 说明
份的峰 面积 与流动相的流速成 反 比。很明显 ，流 动 相流 量控 制 的精 度 将直 接影 响定 量分 析 的精 度 。目前大 部分高效液相色 谱仪的流量控制精度
［］ ｈｍ ｓ Ｙｃｒ ｅｉ “ｉ ｉ Ｃ ｒ ａ ｇ ｐｙ ４ Ｊｏ ａ Ｍ． ｉ ｅ ｄ，Ｌｑ ｄ ｏ ｔ ｒ ｈ ｋ ｙ ｔ ｕ ｈ ｍ ｏａ
表１ ｔ 中 试验的 结果说明 ，各 标准物的 实际
引起的偶然误差不影 响采 用文献或计算 ｆ值进行 ｉ 定量 分析 的精度 ，但并不 包括 系统误差 的影 响。 因此在 实验 之前对仪器的 实际流量，波长设定以 及吸光度测量值等进行校正还是很有必要的。 （ ｉ 值的获得 三）ｆ 或 原则上 高效液相色谱分析 中流动相的选择 与 紫外吸 收分析正好相反 ，很 难将紫外分析 中的溶 剂直接 作为高效液相色 谱分析的溶剂系统 。由于 溶剂效 应的影响，大 部分紫外 吸收光谱文献 中给 出的 值不能 直接应用于 高效 液相色谱。作者建 议建立 一个适用 于高效液 相色谱分析的 ｆ或 值 ｉ 资料库 。分析工 作者在报 告波长及紫外检测器 的 定量分析时，应 同时给出组份的 ｆ或 值 。 ｉ 参 考 文 献
因子 ｆ ｉ 值。
（ 试剂： １分析纯甲醇，重蒸馏； ． 二） ２分
析纯正 己烷，重蒸馏；３ 去离子水 。用高锰酸钾 ．
表 １
结 果 与 讨 论
不同标准物的测定条件及校正因子的计算值与实际测得值的 比较
表 ２
联 苯工作液在不 同仪器上所得结果（ 校正因子值） 的比较
（ ３ 一）（式的验证结果如表 １ ） 所示。