胚胎培养 胚胎培养

第4章 胚胎培养
第三节 胚珠和子房培养
一、胚珠培养 定义：是指将胚珠从母体上分
离出来，在无菌的人工环境 条件下培养，使其生长发育 形成幼苗的过程。
倒生胚珠
第三节 胚珠和子房培养
胚珠培养类型：
1、受精胚珠的培养 2、未受精胚珠的培养
示胚珠的位置
第三节 胚珠和子房培养
（一）、胚珠培养的基本过程：
（二）、培养基：White,Nitsch,MS （三）、胚珠的发育：
第4章 胚胎培养
本章小结：
(1)胚胎培养包括：幼胚培养、成熟胚培养、胚珠培养、 子房培养和胚乳培养等。
(2)胚胎培养的意义。 (3)离体胚培养方法：成熟胚和幼胚培养。 (4)未成熟胚培养，三种不同的生长方式，胚性发育；早
熟萌发；形成愈伤组织。 (5)胚培养的作用。 (6)检查胚珠植株的染色体数目的方法。 (7)分析胚珠培养和子房培养的发育途径。
第三节 胚珠和子房培养
三、胚珠和子房培养的应用
（一）胚珠培养的应用 1、受精胚珠培养目的：
一是打破种子的休眠； 二是挽救胚的发育，以获得杂交种。 2、未受精胚珠培养目的：获得单倍体植株。 （二）子房培养的应用 1、授粉子房培养目的：挽救杂种胚 2、未授粉子房培养目的：获得单倍体植株。
第一节、胚培养
2、成熟胚培养过程---以玉米成熟胚培养为例
1）玉米种子消毒 2）在黑暗条件下，将种子放在无菌湿润的含滤纸的
培养皿中培育6hr。 3）将吸涨的种子在无菌培养皿内将胚分离出来 4）无菌水冲洗3次 5）在MS培养基中暗培养。 6）观察：2d出现胚根，3-4 d出现胚芽，10d长成
幼苗。
玉米成熟胚的培养
一、培养类型
1、幼胚培养
2、成熟胚培养
第4章 胚胎培养
1、幼胚培养
幼胚是指子叶期以前的幼小胚 远缘杂交育种 现在可使心形期胚或更早期的长度仅0.1～0.2mm的
胚生长发育成植株 由于胚越小就越难培养。所以，尽可能采用较大的胚
进行胚养 现在幼胚培养成功的有大麦、荠莱、甘蔗、甜菜、胡
萝卜等。
第4章 胚胎培养
2、成熟胚培养
成熟胚一般指子叶期后至发育完全的胚,培养较易成功 将成熟或未成熟种子用70％酒精进行几秒钟的表面消
毒，再用无菌水冲洗3-4次，然后在无菌条件下进行 解剖，取出胚并接种在适当的培养基上培养。
第一节、胚培养
二、培养过程：
1、幼胚培养过程：
取子房 常规表面消毒 解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。 固体培养 幼胚的发育方式： 1）胚性发育； 2）早熟发育； 3）产生愈伤组织
30年代成功地把兰科植物的胚培养成小植株。 40年代在苹果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、
马铃薯、甘蓝与大白菜的种间杂种的胚胎培养、 胚乳培养及子房与胚珠培养均取得了不同程度 的进展。
第4章 胚胎培养
本章教学目的与要求
(1)掌握胚培养和胚乳培养的操作步骤； (2)了解胚珠培养和子房培养的操作步骤。
第一节、胚培养
三、培养基与培养条件
1、培养基 常用的培养基有Tukey，MS，B5，Nitsch培养基，其中前
者适于成熟胚培养，其他适于未成熟胚和幼胚培养
2、培养条件：
1）糖类：幼胚需求较多
2）附加成分：椰乳
3）光照：光照可以促进某些植物胚的转绿，利于胚芽生长，而黑暗
则利于胚根生长。因此以光暗交替培养较为有利。
第4章 胚胎培养
胚胎培养的意义：
①克服远缘杂种的不育性， ②使胚胎发育不完全的植株获得后代， (兰天麻) ③缩短育种年限，提高育种效率。
第4章 胚胎培养
胚的发育
种子的结构
第4章 胚胎培养
第一节、胚培养
胚培养：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠 中分离出来，再放在无菌的条件下，让其进一步 生长发育，以至形成幼苗的过程。
可用MS、White等，加入2，4-D或NAA0.5～2.0mg/L， BA 0.1～1.0mg／L。
在25～27℃和黑暗条件或散射光下培养，约6～l0d胚 乳开始膨大，再培养形成愈伤组织．这时来自百度文库转到分化培 养基上培养，分化培养基可加入0.5～3.0mg／L的BA 及少量的NAA。待愈伤组织长出芽后，切下不定芽， 插人生根培养基中，光下培养10～15d，切口处可长出 白色的不定根。
第二节、胚乳培养
三、胚乳再生植株的染色体倍数
稳定型：三倍体 畸变型：除少数是三倍体，多数是由多种倍性
细胞组成的嵌合体
第二节、胚乳培养
四、胚乳培养的应用
➢ 1、胚乳培养可得到三倍体植株，产生无籽果 实。或加倍形成六倍体植株进行育种。
➢ 2、胚乳培养可得到倍性不同的愈伤组织，可 分离和筛选各种类型的非整倍体植株。
（一）子房培养的培养过程
1、制备外植体：在开花前后适宜时期取子房 或幼花，消毒
2、子房培养：固体或液体培养均可
（二）培养基:N6,MS
第三节 胚珠和子房培养
（三）培养子房的发育：
性细胞（卵细胞、助细胞、极核、反足细 胞）----胚状体或愈伤组织----单倍体植株；
体细胞（珠被、子房壁）---胚状体或愈伤 组织----二倍体植株；
植物组织培养
第4章 胚胎培养
大 家 好 ！
第4章 胚胎培养
第4章 胚胎培养
胚胎培养是指将植物的胚胎与母体分离，培 养在人工的培养基上形成幼苗的过程，包括 幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培 养以及子房培养。
胚培养
本章内容
胚乳培养
胚珠和子房培养
第4章 胚胎培养
1904年的Haning最早成功地培养了萝卜和辣 椒的胚，并萌发形成小苗
4）培养方式：

幼胚培养适于液体培养，

成熟胚适于固体培养
第一节、胚培养
四、胚培养的应用
1)在远缘杂交育种中:克服杂种胚不能正常发育 2)克服珠心胚的干扰,提高育种效率 3)缩短育种周期 4)测定休眠种子的萌发率 5)理论研究中的应用
第4章 胚胎培养
第二节、胚乳培养
胚乳培养是指将胚乳从母体上 分离出来，在无菌的环境条件 下培养，使其生长发育形成幼 苗的过程。
第4章 胚胎培养
第二节、胚乳培养
一、胚乳培养过程
胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳 培养:White或MS诱导培养基---25-27℃--暗或弱
光 发育:诱导形成愈伤组织----再分化形成胚状体或
不定芽---生根培养----植株。
第二节、胚乳培养
胚乳培养过程
胚乳
愈伤组织
形态发生
胚状体发育成苗
不定芽苗
A 受精胚珠：一是形成种子；二是形成愈伤组织 B 未受精胚珠：形成单倍体植株。
第三节 胚珠和子房培养
雌蕊与子房的类型
第三节 胚珠和子房培养
二、子房培养
定义：子房培养是指将子房从 母体上分离出来，在无菌的 人工环境条件下培养，使其 生长发育形成幼苗的过程。
类型
授粉子房的培养 未授粉子房的培养
第三节 胚珠和子房培养
第二节、胚乳培养
胚乳植株染色体数目的检查
取根尖、幼叶或愈伤组织 0.2%-0.5%秋水仙素碱溶液在25℃浸泡4-8hr 流水冲洗5-10min 卡诺氏液或FAA液固定 1mol/L盐酸，60 ℃水浴8-10min 染色、压片、镜检、计数
第二节、胚乳培养
二、培养基与培养条件