甘露聚糖酶及其应用
甘露聚糖酶作用原理
β-甘露聚糖酶(endo-1,4-β-mannanase)是一种新型的酶制剂,属于一种半纤维素酶类,它除具有一般非淀粉多糖(NSP)酶类的作用——降解NSP,降低肠道粘度,促进营养物质的消化和吸收外;近来很多研究表明,β-甘露聚糖酶还是一种多功能的促生长剂,因为它可以促进类胰岛素生长因子IGF-I的分泌,促进蛋白质的合成,提高瘦肉率;同时,它还可消除豆类中富含的β-甘露聚糖对葡萄糖吸收的干扰,极大提高饼粕尤其是豆粕的能量消化率。
实际使用中还可看出,添加了β-甘露聚糖酶后动物的抵抗力及整齐度都有提高。
NSP的其中一种组分是β-甘露聚糖(半乳甘露聚糖),其在豆粕中的含量高于其它常用的饲料原料。
β-甘露聚糖除了消化率低之外,还对家禽具有多方面负面的生理影响。
研究表明,即使是低浓度的β-甘露聚糖也可通过干扰胰岛素分泌和胰岛素样生长因子(IGF)生成而降低从肠道中吸收葡萄糖的速率和碳水化合物的代谢过程(Nunes和Malmlof,1992)。
其它负面影响包括降低氮存留量、脂肪吸收率和氨基酸摄入量以及减少水的吸收而导致排泄物水分过多(Kratzer等,1967)。
-甘露聚糖在畜禽肠道细胞发育不完全,或在应激环境下,会过度刺激免疫反应,造成对生长性能的的伤害,引起不良免疫反应,摄食量下降,生长更加迟缓,造成体重轻的数量增加,群体均匀度变差。
表1 常见原料的β-甘露聚糖含量β-甘露聚糖酶作用特点:◆β-甘露聚糖酶是一种多功能的促生长剂,可以促进类胰岛素生长因子IGF-I的分泌,促进蛋白质的合成,提高瘦肉率,促进生长。
◆消除饲料中甘露聚糖对葡萄糖吸收的干扰,极大提高豆粕的能量消化率,能给玉米豆粕型日粮提高100-150kcal/kg的代谢能。
甘露聚糖分解产生的甘露寡糖,可被动物肠道中的有益菌吸收,改善菌群组成,减少大肠杆菌、沙门氏菌的感染。
减少肉鸡球虫病的危害,提高肉鸡均匀度。
◆降低肠道粘度,促进能量、蛋白、纤维素的消化和吸收。
甘露聚糖酶的酶学性质研究
甘露聚糖酶的酶学性质研究甘露聚糖酶是一种半纤维素水解酶,以内切方式降解β-1,4糖苷键,降解产物的非还原末端为甘露糖,其作用底物包括葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖及β-甘露聚糖等。
它不仅能够降解肠道粘度,促进营养物质的消化和吸收,而且还可消除豆类中富含的β-甘露聚糖对葡萄糖吸收的干扰,极大提高饼粕尤其是豆粕的能量消化率;同时,添加了甘露聚糖酶后动物的抵抗力及整齐度都有提高。
甘露聚糖类物质作为半纤维素的第二大组分,广泛分布于自然界中。
它是所有豆科植物细胞壁的主要组成成分,在其他植物性饲料原料中含量也很高,如豆粕、小麦、菜籽粕、麸皮中半乳甘露聚糖占非淀粉多糖的含量分别为22.7%,11.9%,19.6%和33.7%。
我国猪、鸡的主要日粮是玉米/豆粕型日粮,尽管猪、鸡等单胃动物对玉米的消化率较高,但对豆粕的能量利用率仅为50%~60%。
单胃动物对豆粕能量的利用率如此低的原因可能是豆粕中含有22.7%左右的半纤维素是不能被单胃动物消化的非淀粉多糖。
饲料中添加甘露聚糖酶可以降解甘露聚糖、降低消化道内容物黏度,破坏植物性饲料细胞壁结构,使营养物质能与消化酶充分接触,提高内源酶的活性,改善肠道微生物菌群和提高肠粘膜的完整性等功能。
本文旨在通过对康地恩甘露聚糖酶的酶学性质研究,掌握有关数据,为实际应用提供理论依据和指导。
1材料与方法1.1 材料与试剂康地恩甘露聚糖酶;甘露聚糖(Sigma公司);3,5—二硝基水杨酸(DNS);甘露糖(Sigma公司)。
1.2 主要实验仪器 722型分光光度计;电子分析天平;可调恒温水浴锅;精密pH计等。
1.3 酶活力测定1.3.1酶活测定方法。
采用还原糖法(DNS)测定。
1.3.2 酶活力单位定义。
在40℃、pH4.5的条件下,每分钟从甘露聚糖(Sigma G0753)溶液中降解释放1 μg还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位U。
1.3.3甘露糖标准曲线的绘制。
配制10mg/mL的甘露糖溶液100mL,吸取上述溶液分别配制成浓度为0.10~0.70 mg/mL的甘露糖标准溶液。
β-甘露聚糖酶的研究进展及其在猪营养中的应用
小猪进行喂饲30d,大猪日增重分别提高6.22%和12.99%,小猪日增重分别提高5.5% 和1l-7%m“]。 3.2促进动物健康 在B一甘露聚糖酶的作用下,饲料中甘露聚糖类物质发生降解形成甘露寡糖。研究表明,甘露寡 糖可调节动物的肠道微生态环境,促进有益菌的生长和繁殖,抑制有害菌的黏附和定植,维持正常的 消化道环境;甘露寡糖具有一定的免疫原性,能刺激机体免疫应答,增加动物体的细胞免疫能力和体 液免疫能力。周红丽等发现添加29/蚝甘露寡糖可显著降低28日龄断奶仔猪大肠中大肠杆菌的浓度, 提高双歧杆菌数…o;杨林等研究发现19/kg甘露寡糖可促进仔猪长度内双歧杆菌、嗜酸乳杆菌的增 殖,显著抑制仔猪肠道内大肠杆菌的生长”“。岳文斌等在猪饲料中添加3%甘露聚糖,可以提高仔 猪血液中T一淋巴细胞总数(CD3)和抗体IgG含量(P<O.01),认为这可能与甘露聚糖可以促进肝 脏分泌甘露糖结合蛋白有关01。 因此,在富含甘露聚糖的饲料中添加B一甘露聚糖酶,可以促进动物的抗病力,改善动物的健康 状况。
消化,改善动物肠道微生物生态,改善动物体的健康状况;降低肠道内容物的黏稠度,减少粪便排
泄,减轻环境污染;提高微量元素的生物利用率等作用。 3.1提高饲料利用率,提高猪的生长性能 B一甘露聚糖酶通过水解高分子中的B一1,4甘露糖苷键,降解饲粮中的甘露聚糖类物质,使之 降解为低分子,失去亲水性和黏性,降低消化道内容物黏度,从而有利于消化酶与营养物质的混合。
B一甘露聚糖酶~般以胞外诱导酶的形式存在于生物体,只有很少的以结构酶形式存在,对于大
部分产B一甘露聚糖酶的微生物,在培养基中添加少量的甘露聚糖,如甘露聚糖、槐豆胶或其水解 物,就能极大提高产酶水平。台湾科研者以脱脂椰子肉作为碳源进行Aspe蟛um niger NcH一189发 酵,产酶活力提高了4倍H】。但有时一些半纤维素类物质或苯酚类化合物也能有效增加p一甘露聚糖
微生物β-甘露聚糖酶的生产及应用
微生物β-甘露聚糖酶的生产及应用作者:郑艳丽,曾千春来源:《湖北农业科学》2011年第17期摘要:β-甘露聚糖酶可应用于造纸、饲料、洗涤、纺织、食品、医药和石油开采等工业领域,特别是在造纸和饲料工业中已得到了广泛的应用。
从β-甘露聚糖酶的水解方式和产物、微生物的来源及其工业应用等方面做了简要介绍。
关键词:β-甘露聚糖酶;微生物;应用中图分类号:Q939.97文献标识码:A文章编号:0439-8114(2011)17-3483-03Microbial β-Mannase: An Overview of Production and ApplicationsZHENGYan-li,ZENGQian-chun(CollegeofAgronomyandBiotechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)Abstract:β-mannaseisappliedintheindustriesofpapermaking,feedprocessing,detergent,textile,food,medicine,oilexploitationandsoon, especially inpapermakingandfeedprocessingindustries.Themeansofhydrolysisandpatternofthehydrolyzatesofβ-mannase,sourcesofβ-mannaseanditsapplicationinindustry were briefly reviewed.Keywords:β-mannase;microorganism;application甘露聚糖(Mannan)和异种甘露聚糖(Heteromannan)在植物细胞壁上是半纤维素的一部分。
结构分析显示双子叶植物的细胞壁包含3个类型的多糖:纤维素、半纤维素和木质素[1]。
甘露聚糖酶和木聚糖酶在纸浆漂白中的应用
甘露聚糖酶和木聚糖酶在纸浆漂白中的应用引言:纸浆漂白是造纸工业中非常重要的一个环节,其目的是去除纸浆中的杂质和色素,提高纸张的白度和质量。
传统的漂白方法使用化学药剂,但由于其对环境的污染和危害,近年来研究人员开始探索更环保的替代方法。
其中,利用酶类来进行纸浆漂白成为了一种热门的研究方向。
本文将重点介绍甘露聚糖酶和木聚糖酶在纸浆漂白中的应用。
一、甘露聚糖酶在纸浆漂白中的应用甘露聚糖酶是一种能够降解甘露聚糖的酶类。
甘露聚糖是一种存在于植物细胞壁中的多糖,其结构复杂且难以降解。
在传统的纸浆漂白过程中,甘露聚糖会成为一个难以去除的障碍物,影响纸张的质量。
而甘露聚糖酶能够有效降解甘露聚糖,将其转化为易于去除的溶解性产物,从而提高纸浆的漂白效果。
具体来说,甘露聚糖酶通过切断甘露聚糖分子中的键,将其降解为较低聚合度的甘露寡糖。
这些甘露寡糖在漂白过程中具有良好的溶解性,可以随着溶液被去除,从而使纸浆中的甘露聚糖含量降低,提高纸浆的漂白效果。
此外,甘露聚糖酶还能够降解纸浆中的其他难降解物质,如木质素,进一步提高纸张的白度和质量。
二、木聚糖酶在纸浆漂白中的应用木聚糖酶是一种能够降解木聚糖的酶类。
木聚糖是存在于植物细胞壁中的主要成分,具有较高的结晶度和难以降解的特点。
在纸浆漂白过程中,木聚糖会成为一个难以去除的障碍物,影响纸张的白度和质量。
而木聚糖酶能够有效降解木聚糖,将其转化为易于去除的溶解性产物,从而提高纸浆的漂白效果。
具体来说,木聚糖酶通过切断木聚糖分子中的键,将其降解为较低聚合度的木聚糖寡糖。
这些木聚糖寡糖在漂白过程中具有良好的溶解性,可以随着溶液被去除,从而使纸浆中的木聚糖含量降低,提高纸浆的漂白效果。
此外,木聚糖酶还能够降解纸浆中的其他难降解物质,如半纤维素,进一步提高纸张的白度和质量。
三、甘露聚糖酶和木聚糖酶在纸浆漂白中的优势相比传统的化学漂白方法,甘露聚糖酶和木聚糖酶在纸浆漂白中具有以下优势:1. 环保性:甘露聚糖酶和木聚糖酶是天然产物,具有较好的生物降解性,不会对环境造成污染。
β-甘露聚糖酶产品规格书
β-甘露聚糖酶产品规格书摘要:1.β-甘露聚糖酶简介2.β-甘露聚糖酶产品规格3.β-甘露聚糖酶应用领域4.β-甘露聚糖酶安全性与储存方法5.总结正文:β-甘露聚糖酶是一种重要的酶制剂,广泛应用于食品、饲料和制药等领域。
本文将为您详细介绍β-甘露聚糖酶的产品规格、应用范围以及安全性等方面的内容。
一、β-甘露聚糖酶简介β-甘露聚糖酶(β-Mannanase)是一种能够水解β-甘露聚糖的酶类。
在自然界中,β-甘露聚糖广泛存在于植物细胞壁中,如燕麦、大麦等谷物以及豆腐渣等食材中。
β-甘露聚糖酶可帮助人体或动物体内分解这类多糖,提高营养吸收利用率。
二、β-甘露聚糖酶产品规格1.活性单位:β-甘露聚糖酶产品通常以国际单位(IU)或毫克(mg)表示活性。
不同品牌和型号的酶活性可能有所不同,请按照实际需求选择合适的产品。
2.外观:β-甘露聚糖酶产品通常为白色粉末,易溶于水。
在选购时,请注意产品的外观和溶解性。
3.保存条件:β-甘露聚糖酶应在阴凉、干燥处密封保存,避免阳光直射。
长时间暴露在高温、潮湿环境中会导致酶活性降低。
4.保质期:在正常保存条件下,β-甘露聚糖酶产品保质期一般为2年。
三、β-甘露聚糖酶应用领域1.食品工业:β-甘露聚糖酶可用于食品加工,如燕麦片、豆腐等,提高食品口感和营养价值。
2.饲料工业:添加β-甘露聚糖酶到饲料中,可提高家畜、家禽对饲料中营养物质的消化吸收率,促进生长。
3.制药领域:β-甘露聚糖酶可用于生产药物,如抗肿瘤药物等。
四、β-甘露聚糖酶安全性与储存方法1.安全性:β-甘露聚糖酶为生物制剂,一般情况下对人体和环境无害。
但过敏体质者请在医生指导下使用,如出现不适,请立即停止使用并寻求医生建议。
2.储存方法:请按照产品说明书储存,避免与有毒、有害物质混放。
如不慎接触皮肤或眼睛,请立即用清水冲洗,如有不适,请就医就诊。
五、总结β-甘露聚糖酶作为一种重要的酶制剂,在食品、饲料和制药等领域具有广泛的应用。
甘露聚糖酶液体发酵及酶解反应
甘露聚糖酶液体发酵及酶解反应
甘露聚糖酶是一种能够水解甘露聚糖的酶类,它在液体发酵和
酶解反应中扮演着重要的角色。
在液体发酵过程中,首先需要选择
合适的微生物菌种,例如酵母菌、霉菌或者细菌,然后将这些微生
物菌种接种到含有适量营养物质的培养基中进行培养。
培养基的成
分需要根据具体的微生物菌种和发酵条件进行调整,以提供充足的
营养物质和适宜的环境条件来促进微生物的生长和产酶。
在培养过
程中,需要控制好发酵温度、pH值、氧气供应等参数,以确保微生
物菌种能够高效地产生甘露聚糖酶。
一旦微生物菌种产生了足够的甘露聚糖酶,接下来就是酶解反
应的过程。
在酶解反应中,液体培养物会被加入到含有甘露聚糖的
基质中,甘露聚糖酶会作用于甘露聚糖分子,将其水解成较小的糖
分子,如葡萄糖和果糖。
这些糖分子可以被进一步利用来生产酒精、乳酸、酢酸等有用的化合物,或者用于食品工业中的糖化反应和生
产功能性食品添加剂等。
总的来说,甘露聚糖酶液体发酵及酶解反应涉及到微生物的培养、发酵条件的控制、酶的生产和酶解反应的进行等多个环节,需
要综合考虑微生物菌种的选择、培养基的配方、发酵条件的优化等
因素,以实现高效的甘露聚糖酶生产和应用。
同时,这一过程也需要严格控制卫生条件,确保产品的质量和安全性。
β-甘露聚糖酶:缓解家禽肠道免疫应激并提高其生产性能
β-甘露聚糖酶:缓解家禽肠道免疫应激并提高其生产性能饲料中β-甘露聚糖酶的影响体现在净能而不是代谢能,它不同于普通的消化酶。
传统的β-甘露聚糖酶的作用机理局限在对底物的消化和营养的释放,与活体试验数据对比,消化和营养释放所带来的好处远小于在生产中所观察到的数据,而消化理论并不能完满地解释β-甘露聚糖酶的作用机理,但从免疫角度可以清楚描述β-甘露聚糖酶解除不必要的饲料诱导型免疫反应所带来的好处和对家禽生产效率的改善。
饲料中的β-甘露聚糖,可诱导机体先天性免疫反应简言之,因饲料中存在非传染性因子而诱发机体产生的免疫反应,被称为饲料诱导型免疫反应(FIIR)。
不同于蛋白质(抗原)引发抗体的获得性免疫反应,由半乳甘露聚糖和脂多糖等这类非传染因子直接引发的免疫反应,在免疫学上被归类为先天性免疫反应。
β-半乳甘露聚糖是一种以β-(1-4)-甘露糖为主链的线性可溶性多糖,β-(1-6)半乳糖和/或葡萄糖连接于β-甘露聚糖的主链上。
它们具有很高的粘性、水溶性,可以耐受大豆加工过程中的干燥/烘烤中的高温。
作为一种非淀粉多糖,β-半乳甘露聚糖广泛存在于饲料原料中,主要包括豆粕、向日葵粕、棕榈粕、椰子粕以及芝麻粕等。
通常,动物体内缺少分解半乳甘露聚糖的内源酶,而β-甘露聚糖可以被机体免疫细胞通过多种模式识别受体(PRR)(包括血清蛋白甘露糖结合凝集素MBL、甘露聚糖受体MR等)识别为病原相关的分子模式(PAMP),诱导机体炎症反应以及细胞吞噬等一系列生物学反应。
改变了能量的分配模式,使更多能量用于生长和维持研究表明,饲料中添加β-甘露聚糖酶水解PAMP-半乳甘露聚糖为小分子物质后,甘露寡糖片段不能被模式识别受体(比如MBL)所识别。
因此,通过阻止饲料诱导型免疫反应,β-甘露聚糖酶可以节约昂贵的能量,用于生长和生产,增进群体整齐度,提高生产性能。
由于家禽饲料中存在的β-半乳甘露聚糖这种病原相关PAMP可诱发免疫反应,而β-半乳甘露聚糖会被先天免疫系统识别,进而产生一系列的生物学反应,浪费能量和营养物质,导致生产效益下降。
甘露聚糖酶应用
甘露聚糖酶在各个行业中的应用查到了甘露聚糖酶在食品,洗涤,纺织和造纸行业的应用。
其中在饲料行业中应用最为广泛,但是饲料行业中的甘露聚糖酶多采用固态发酵,售价低廉。
不适合我们发展,所以没有列举饲料行业中的应用。
以下列举甘露聚糖酶的各项应用以及参考文献,和网址。
1 食品工业b-甘露聚糖酶可用于降解植物胶(如角豆胶、瓜尔豆胶、魔芋粉等)生产功能性低聚糖,其具有降低人体胆固醇水平、减轻便秘、降低血糖、增加肠道有益菌的生理功能;还可用于降低咖啡提取物的粘度和果汁的澄清。
β-甘露聚糖酶的生产及其酶法制备魔芋葡甘露低聚糖的研究/link?url=WuOT33sshlH5DHatppF2SoQ_2vVverYfZNCQvhDcJrHTivqs zUpPPi0oFNrn1QiXxa7pTVH9sw1TC8OPPDLYLPlco1oaBOvvDi-b_WytBe7甘露聚糖酶的发酵生产及其在苎麻脱胶中的应用/p-404566810969.html加工速溶咖啡时,在咖啡豆提取物中添加β-甘露聚糖酶,用于降解提取物中的半乳甘露聚糖,从而降低产品的黏度。
/view/dedb47c75fbfc77da269b133.html甘露聚糖酶还可以用与处理酿酒酵母,酶解酵母的细胞壁,生产挂聚糖和酵母核算蛋白等,为优良的食品添加剂v/link?url=N3N_8BhRgs7HkAjvwZm7t4db90cR9JUPbxACz3RLjNdYk4ifRik DOr8uBubPqkkJy40c7CJ-nEfRIfw9j-pDavmMqIiF-tjgZsymwbdt55S2造纸在造纸工业中,用酶法代替传统碱法处理纸浆,甘露聚糖酶和木聚糖酶协同作用,能有效去除半纤维素,明显改变纸张质量。
同时还有利于纸浆的打浆性以及抗撕裂性。
/link?url=N3N_8BhRgs7HkAjvwZm7t4db90cR9JUPbxACz3RLjNdYk4ifRikD Or8uBubPqkkJy40c7CJ-nEfRIfw9j-pDavmMqIiF-tjgZsymwbdt55S/view/6ae30dd180eb6294dd886cf6.html33纺织在纺织工业中,用作天然纤维中半纤维素的降解,并能有效地取出纺织印染产品粘附的多余燃料,以取代常规的化学处理工艺,降低了能耗和对环境的污染。
β-甘露聚糖酶的制备及其在饲料工业中的应用进展
doae E ... 7 ) 一 种 水 解 甘露 聚糖 、 萄 甘 rl , C 3 1 8 是 s 2. 葡 露聚 糖 、半 乳甘 露 聚糖 和半乳 葡 萄甘露 聚 糖 ( — ) 1 4 B— D甘露 吡 喃糖 的半纤 维 素酶 ,可 以将 自然界 资 源极 为 丰 富 的半 纤 维素 转 化 为 具有 重 要 商业 价 值 的寡 糖 , 有极 大 的应 用潜 力『 B一甘露 聚糖 酶来 具 l I 。
源相 当广泛 , 动物 、 物 、 生 物 中都发 现有该 酶 在 植 微 的存 在 , 在食 品 、 医药 、 纸 、 造 纺织 印染 、 油开 采及 石
生物 研究技 术 等领域 得 到了广 泛 的应 用 。 近年 来 随
着对 自然 界半 纤 维 素 资源 的开 发及 其 在 饲 料工 业
和养 殖 业 中 的应用 , B一甘 露 聚糖 酶 的开 发和 利用
研究 进入 了一个 新 阶段 。
1 B一甘露 聚糖 酶 的结构及 其作 用 方式 、
糖 经 B一甘 露 聚糖 酶 作用 后 ,主要 产 物 是 寡 聚糖 ( 一般 2 1 残基 ) — 0个 ,产 物 聚合 度 的大小 与酶 和底
令 人欣 喜 的是 , 目前 发展 养驼 产业 经 济 已经 开
始起 步 。 内众 多企 业集 团准备 与新 疆开 展骆驼 产 国
品 的加 工 与利 用 合作 , 日前 , 苏创 伟 实业 有 限公 江 司与新 疆畜 牧科 学 院畜牧 研究 所 签订 了“ 驼产 品 骆
8 中 国动 物保 健 C i n l e l 0 0年 1月 2 hn A i a h 2 1 a ma H t
-鱼堕 堡
6  ̄ 最适作 用 p 0G, H为 60 .。魔 芋葡 甘露 聚糖 经酶 降
β-甘露聚糖酶的结构、异源表达及应用
㊀收稿日期:2022-06-26作者简介:李双娇(1995-)ꎬ女ꎬ内蒙古兴安盟人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向:酶工程.㊀∗通讯作者:赵静ꎬE ̄mail:zhaoj@dl ̄opus.comꎻ肖蓉ꎬE ̄mail:xiaorong_lnnu@126.com.㊀㊀辽宁大学学报㊀㊀㊀自然科学版第50卷㊀第3期㊀2023年JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYNaturalSciencesEditionVol.50㊀No.3㊀2023β-甘露聚糖酶的结构㊁异源表达及应用李双娇1ꎬ赵㊀静2∗ꎬ肖㊀蓉1∗(1.辽宁师范大学生命科学学院ꎬ辽宁大连116081ꎻ2.大连知微生物科技有限公司ꎬ辽宁大连116023)摘㊀要:β-甘露聚糖酶(β ̄mannanase)是一种来源较为广泛的半纤维素水解酶类ꎬ能够通过分解β-1ꎬ4-糖苷键从而将甘露聚糖类水解为甘露寡糖ꎬ被广泛应用于饲料加工㊁食品㊁造纸以及石油开采(压裂破胶)等领域.本文对β-甘露聚糖酶的来源㊁性质㊁结构㊁异源表达及应用的研究现状进行了总结与讨论ꎬ以期为今后β-甘露聚糖酶的应用奠定一定的基础.关键词:β-甘露聚糖酶ꎻ来源与性质ꎻ结构ꎻ表达ꎻ应用中图分类号:Q814.9㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:1000-5846(2023)03-0231-08TheStructureꎬHeterologousExpressionandApplicationofβ ̄mannanaseLIShuang ̄jiao1ꎬZHAOJing2∗ꎬXIAORong1∗(1.SchoolofLifeScienceꎬLiaoningNormalUniversityꎬDalian116081ꎬChinaꎻ2.DalianChivyBiotechnologyCo.ꎬLtd.ꎬDalian116023ꎬChina)Abstract:㊀β ̄mannanaseisahemicellulosehydrolyticenzymeidentifiedfromawiderangeofsourcesꎬwhichcanhydrolyzemannanintomannanoligosaccharidethroughβ ̄1ꎬ4 ̄glycosidicbond.Atpresentꎬβ ̄mannanaseiswidelyusedinfeedprocessingꎬfoodꎬpapermakingandpetroleumextraction(fracturingandgluebreaking).Inthispaperꎬthesourceꎬpropertyꎬstructureꎬheterologousexpressionandapplicationofβ ̄mannanaseweresummarizedanddiscussedꎬwhichwouldprovidetheimportantfoundationfortheapplicationofβ ̄mannanaseinthefuture.Keywords:㊀β ̄mannanaseꎻsourceandpropertyꎻstructureꎻexpressionꎻapplication0㊀引言β-甘露聚糖酶(β ̄mannanase)又称Mannanase㊁endo-1ꎬ4-β-mannanaseꎬ广泛分布于动物㊁植㊀㊀物和微生物中.现阶段报道的β-mannanase多数为细菌(如芽孢杆菌(Bacillus)和弧菌(Vibrio))㊁真菌(如曲霉(Aspergillus)和木霉(Trichodermaspp))来源.由于微生物来源的β-mannanase普遍具有活性高㊁产量大㊁易分离纯化等特点ꎬ并且比动物㊁植物来源的β-mannanase具有更好的稳定性及更广泛的pH作用范围ꎬ因此ꎬ微生物来源的β-mannanase已经被广泛应用于基础理论研究和工业生产领域[1].1㊀β-mannanase的来源及性质根据报道[2]ꎬ不同微生物来源的β-mannanase具有不同的性质.不同细菌来源ꎬ如枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和大肠杆菌(Escherichiacoli)的β-mannanaseꎬ其等电点㊁分子量㊁最适反应pH㊁最适反应温度及底物专一性等性质都有所差别.就分子量来说ꎬ不同微生物来源的β-mannanase分子量之间的差异非常大ꎬ如来源于热纤维梭菌(Clostridiumthermocellum)的β-mannanase的分子量只有15kDa[1]ꎬ而来源于多糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumpolysaccharolyticum)的β-mannanase的分子量则为119kDa[3].此外ꎬ真菌来源的β-mannanase通常表现出较强的嗜酸性.如来源于嗜松青霉菌(Penicilliumpinophilum)的β-mannanase的最适反应pH为2.5[4]ꎬ而来源于曲霉菌(Aspergillusniger)的β-mannanase的最适反应pH则为3.5[5].与真菌相比ꎬ细菌来源的β-mannanase通常具有比较宽泛的pH作用范围ꎬ在弱酸性和碱性环境中均具有较强的酶活力.如来源于肠杆菌属[6](Enterobactersp.)N18菌株的β-mannanase可在pH为3~8的条件下保留超过70%的初始酶活力ꎻ来源于短小芽孢杆菌[7](Bacilluspumilus)的β-mannanase在pH为5~11的条件下也具有较强的酶活力.由此可知ꎬ细菌来源的β-mannanase比真菌来源的β-mannanase的pH作用范围更为广泛.研究显示ꎬ多数β-mannanase的最适反应温度约为50ħꎬ少数嗜热的β-mannanase在温度高于70ħ时ꎬ且在一定时间范围内ꎬ酶活力仍具有初始酶活力的60%以上.例如ꎬLiu等[8]从白曲霉IFO4308菌株中分离得到一种嗜热和嗜酸的β-mannanaseꎬ其最适反应温度为80ħꎬ最适pH为2.0.除此之外ꎬβ-mannanase还对多种重金属离子比较敏感.不过ꎬ同一种金属离子对不同来源的β-mannanase的作用效果可能是完全不同的.甚至ꎬ同一金属离子在不同的浓度条件下对同一种β-mannanase的作用结果也可能不同.例如ꎬ2016年杨苗[9]研究发现ꎬBa2+对路氏肠杆菌(Enterobacterludwigii)来源的β-mannanase具有激活作用ꎬ而2011年冯娜[10]研究发现ꎬBa2+对枯草芽孢杆菌DY-14菌株来源的β-mannanase的活性则具有较弱的抑制作用.2㊀β-mannanase的结构根据β-mannanase的三维结构㊁氨基酸序列的一致性以及催化机制等信息ꎬ研究者们将β-mannanase分为4个家族:糖苷水解酶家族5(GlycosidehydrolasefamilyꎬGH5)㊁GH26㊁GH113及GH134[8ꎬ11-12]ꎬ各家族成员代表序列及结构域信息详见表1.真菌源的β-mannanase多数分布在GH5家族ꎬ而在GH26家族中相对较少ꎻ细菌源的β-mannanase则在GH5和GH26家族中均有分布.GH113和GH134家族分别是2008年和2015年新认定的甘露聚糖酶家族.目前来自GH113和GH134家族的β-mannanase较少ꎬ如Xia等[13]和You等[14]分别在嗜酸热脂环酸杆菌(Alicyclobacillusacidocaldarius)和木糖双歧杆菌(Amphibacillusxylanus)中得到了归属于糖苷水解酶GH113家族的β-mannanase.而隶属于GH134家族的β-mannanase主要来源于链霉菌232㊀㊀㊀辽宁大学学报㊀㊀自然科学版2023年㊀㊀㊀㊀(Streptomycessp.)[15]㊁构巢曲霉(Aspergillusnidulans)[16]和米曲霉(Aspergillusoryzae)[17].尽管GH5㊁GH26和GH113家族成员的催化结构域序列具有差异ꎬ但其催化结构域的空间结构均为TIM-(β/α)8桶状结构ꎬ并且保留酸碱催化机制[18].GH5家族成员嗜热β-mannanaseTfMan5A来源于褐热单孢菌(Thermomonosporafusca)ꎬ其空间结构由8个β-折叠和8个α-螺旋交替排列构成[19].8个β-折叠片段排列在一起构成了一个桶状结构ꎬ而8个α-螺旋则围绕在桶状结构的外围ꎬ形成了桶状结构的桶底.在桶状结构的第4和第7个β-折叠片段的C末端分布着两个氨基酸催化活性位点(谷氨酸或天冬氨酸)ꎬ其中一个为酸碱催化位点ꎬ另一个为亲核催化位点.而来自GH134家族的β-mannanase的三维结构和催化机制则与上述3个家族不同.GH134家族的β-mannanase催化机制遵循立体翻转机制ꎬ催化基团为谷氨酸(Glu45)或天冬氨酸(Asp57)ꎬ其结构类似于卵清溶菌酶[17].表1㊀糖苷水解酶家族(GH5㊁GH26㊁GH113和GH134)的氨基酸序列及结构域家族序列及结构域GH5>ChainAꎬGH5endo-beta-1ꎬ4-mannanaseꎻ结构域:TIM桶状结构:135-344ꎻCOG3934:23-350ꎻCellulase:84-322ꎻBglC:45-285ꎻDUF4038:101-212ꎻMGFLPQAQGGGAAASAKVSGTRFVIDGKTGYFAGTNSYWIGFLTNNRDVDTTLDHIASSGLKILRVWGFNDVNNQPSGNTVWFQRLASSGSQINTGPNGLQRLDYLVRSAETRGIKLIIALVNYWDDFGGMKAYVNAFGGTKESWYTNARAQEQYKRYIQAVVSRYVNSPAIFAWELANEPRCKGCNTNVIFNWATQISDYIRSLDKDHLITLGDEGFGLPGQTTYPYQYGEGTDFVKNLQIKNLDFGTFHMYPGHWGVPTSFGPGWIKDHAAACRAAGKPCLLEEYGYESDRCNVQKGWQQASRELSRDGMSGDLFWQWGDQLSTGQTHNDGFTIYYGSSLATCLVTDHVRAINALPAGDEQKLISEEDLNSAVDHHHHHHGH26>ABG76971.1GH26mannanase[RuminiclostridiumcellulolyticumH10]ꎻ结构域:Dockerin_I:514-565ꎻCBM35:37-165ꎻDockerin_likesuperfamily:535-565ꎻMDKNNFLKVFLVLALAALIPLIPAANVPANAMLEEGIKYEFENGVQKNAEIHTDYVGKTDDGLTFDLSGATCSFIGQKGTSTSVNVDIDQTGLYELVVRYAQPYDKTKKVQYLNVNDSNQGEVSFPYTLSWREMSAGIVKLNKGTNNIEFEGYWGYTFFDYLIVKPADESITSLKVEKKLVNPDATKEAKALMSYLVDMYGKHIISGQQELCGSHNYEESEAEFTYIKDKTGKMPALRGFDFMNYRGNGLSWDDLCAERVIDWYKNKGGIPTVCWHWFSPANIGKKADNSFYTESTTFSISKALTPGTAENTALLNDIKTMSEKFKQLQDAGVPVLFRPLHEAEGGWFWWGAEGPENCVKLYRLLFDKFTNEYNLNNIIWVWTSYTYDTSSKWYPGDDVVDILGYDKYNAKDGLPNGSAISSTFYNMVKLTNGKKLVTMSENDTIPQVSNLTNEMAGWLYFCPWYGWHLTGEQNNPVDWLKQMYTSDYCITLDELPDLETYPFPSDGDIPTIMYGDLNEDKLIDAIDLALLKKCILENNQSLKSADVDGNGSVDAIDFVYMKKFLTGEISGFPASGKGH113>CAA0223486.1beta-1ꎬ4-mannanaseꎬfamilyGH113[Tenacibaculummaritimum]ꎻ结构域:PolyA:95-150ꎻAgenet:150-201ꎻBeta-TrCP_D:184-214ꎻTIM桶状结构:98-214㊁132-214ꎻMKAYQYIYFLAVIMLLQGSCKSQIEKINGVSFVASSEAIHRNEIRPLRKASTNYVALMPFGFVKSLTSPEIIYNSNKQWFGETKEGVAQYASVFQKEGVKLMLKPQIWVWRGAFTGAIEMDTEEHWKLLESSYEKFILTYAELAASLKVSIFCIGTELEKFVVNRPLFWKALIRKIKRIYKGKLTYAANWDEFKRVPFWNELHYIGIDAYFPLSSHKSPTILQLKEGWKVHKEEVKKVQQQFNKKILFTEYGYRSIDFMAKEPWNSERIAGNVNLKNQVNALEVIHQQFWEEDWFAGGFLWKWFHNHHEVGGSNNNRFTPQNKPAEVKIKKLYDKGH134>VAX65845.1endo-beta-1ꎬ4-mannanaseGH134[Lyroduspedicellatus]ꎻ结构域:Lysozyme-likedomains:276-433ꎻCBM_10:128-156㊁198-226㊁56-84ꎻCCP:32-82ꎻFN2:192-224ꎻMGANLSCWLFRASTFLGGNTRYSHIHNRSFFMKPIIKVVFMFVIYLLSSQSFAQSQCDWYGTNYPVCQNQSSEWGWENNQSCIGPETCAANGGSSSGGSGGGSSSSSSSSSSSSSSSTGGSGGAAGGQCDWYGSNYPLCSNQNSGWGWENNQSCIGPDTCTSPSGSSGSGSGNSSSSSSSSSSSSSSSSTGGSANGGTCNWYGTNHPMCVNTNSGWGYENNQSCISQAECDTQGGSGSSSSGGNTGGGSNNGGGSTGGGSCGVGTCPDSLNCPGGASCGCYTVSGLGANKRAYQDAGADRRFLASAMMETELMDTNYTYGDGKSGDAFNAGATKQNWGMIRQCHSAWSGYGADDYSVSDEMNSSRSLDVQVYGECRSYFGNNWFAGHRNGSSGLDNPNTDDIQRFREGYDWTYNMLNGHECDDVRFWVDIPA㊀㊀除了具有催化作用的TIM桶状结构外ꎬ大部分β-mannanase还含有非催化结构域ꎬ即无催化活性却具有结合活性的结构域.其中ꎬ碳水化合物结合模块(Carbohydrate-bindingmoduleꎬCBM)是β-mannanase携带的㊁典型的非催化结构域[17].其不仅对糖苷水解酶的稳定性起到积极的作用ꎬ还能够促进酶对特定底物的识别或对底物某个区域的识别ꎬ以提高酶的催化效率ꎬ并增强其对底物的332㊀第3期㊀㊀㊀㊀㊀㊀李双娇ꎬ等:β-甘露聚糖酶的结构㊁异源表达及应用㊀㊀特异性.通常ꎬβ-mannanase催化结构域和非催化结构域之间由一个连接子连在一起[18].2019年Kaira等[19]研究发现ꎬ盐桥可通过固定活性位点保持GH26家族成员ManB-1601(β ̄mannanase)的生物活性以抵抗热变性.这说明盐桥对β-mannanase的动力学稳定性具有促进作用.同年ꎬ雍婕等[20]发现ꎬ色氨酸W196和W199位点突变的β-mannanase几乎完全失活ꎬ由此可知ꎬ色氨酸是维持β-mannanase酶活所必需的氨基酸.3㊀β-mannanase的异源表达由于培养条件和酶产量不同ꎬ微生物来源β-mannanase的活力均有所不同.大量研究显示ꎬ微生物来源的β-mannanase绝大部分为胞外诱导酶ꎬ这有利于该酶的分离和纯化.不过遗憾的是ꎬ在所有细菌来源的β-mannanase中ꎬ原始菌株的表达量和酶活力通常不高.尽管ꎬ有研究报道芽孢杆菌属β-mannanase产量较高ꎬ但是其产量也远远达不到工业用量的标准.因此ꎬ异源表达由于其具有产酶量高㊁且易于纯化等特点而被广泛用于β-mannanase的生产ꎬ是提高β-mannanase产量常用的方法.早在1989年ꎬAkino等[21]将来自嗜碱芽孢杆菌(Alkalophilicbacillussp.)AM-001菌株中的两个β-mannanase基因转化至大肠杆菌中表达ꎬ并获得了具有生物活性的重组β-mannanase.目前ꎬ大多数研究采用原核表达体系来表达β-mannanaseꎬ主要以大肠杆菌和芽孢杆菌为宿主细胞ꎻ而少数研究采用真核表达体系ꎬ多以毕赤酵母为宿主细胞.这主要是因为在流程上原核表达体系比真核表达体系更容易操作ꎬ方法简单且表达量高ꎻ而真核表达体系通常步骤较多ꎬ蛋白表达量低ꎬ大量生产成本高且时间长[22].不过ꎬβ-mannanase在原核表达体系中多以包涵体形式表达ꎬ需经变性及复性手段恢复活性[21]ꎬ这对于重组β-mannanase的活性影响较大ꎻ而β-mannanase经真核表达体系表达后ꎬ重组蛋白虽然含量较低ꎬ但却通常可以分泌到胞外ꎬ这有益于后续的分离和纯化.2018年ꎬTuntrakool等[23]采用Ni-NTA琼脂糖树脂从大肠杆菌中纯化了重组表达的β-mannanaseKMAN-3ꎬ并经变性后复性的方法恢复了KMAN-3的活性ꎬ所得比活为11900U/mg.2018年ꎬUeda等[24]将来源于赤子爱胜蚓(Eiseniafetida)的β-mannanase基因(Eiseniafetidaβ ̄mannanaseꎬEf ̄Man)在毕赤酵母(Pichiapastoris)中进行可溶性表达ꎬ并通过硫酸铵沉淀及亲和层析方法纯化了分子量约为39.5kDa的重组Ef-Man(recombinantEf ̄ManꎬrEf ̄Man).纯化后rEf-Man的比活为2802U/mgꎬ最佳反应温度为60ħ.rEf-Man的结构与GH5家族蛋白相似ꎬ并且其活性位点周围的三级结构在内切1ꎬ4-β-mannanase家族中高度保守.2019年ꎬ胡延祥[25]从枯草芽孢杆菌中克隆出β-mannanase基因并将其分别在大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)中进行表达.其中ꎬ该重组β-mannanase以没有生物学功能的包涵体形式在大肠杆菌中表达ꎬ而在谷氨酸棒杆菌中则以可溶性蛋白形式表达.经亲和层析纯化后ꎬ该可溶性表达的重组β-mannanase分子量约为41kDaꎬ酶活可达1065.02U/mL.4㊀β-mannanase的应用研究进展4.1㊀在饲料中的应用目前ꎬ我国用于饲养家禽家畜的饲料中富含大量的甘露聚糖.但是ꎬ家禽家畜体内却没有降解甘露聚糖的酶类.未经降解的甘露聚糖在家禽家畜的消化道内吸水膨胀ꎬ增强了其自身黏性ꎬ进而导致其不易被消化和吸收ꎬ最终引起家禽家畜的腹泻[26].β-mannanase能够通过降解非淀粉多糖来降低432㊀㊀㊀辽宁大学学报㊀㊀自然科学版2023年㊀㊀㊀㊀肠道黏度ꎬ从而促进营养物质的消化与吸收.其降解产物甘露寡糖可增强家禽家畜的免疫力.同时ꎬ经β-mannanase处理后所得到的甘露寡糖还可被家禽家畜肠道中的有益菌吸收[27].这些有益菌不仅可改善肠道菌群的组成ꎬ还能够减少大肠杆菌和沙门氏菌(Salmonella)等有害菌的感染ꎬ从而促进有益菌的生长ꎬ最终增强动物的生命力.2017年ꎬ郝生燕等[28]研究发现ꎬ在鸡饲料中添加β-mannanase可以改善饲料中因添加小麦对肉仔鸡生长能力产生的负面影响ꎬ从而促进肉仔鸡增重.2018年ꎬ郑允志等[26]发现ꎬ在鸡饲料中添加β-mannanase不仅能够显著提高蛋壳的厚度ꎬ还能够提高蛋鸡的消化代谢能和能量表观消化率.2021年ꎬ张荣春等[29]通过在肉鸡日粮中添加β-mannanase提高了肉鸡养殖的欧益指数.4.2㊀在食品中的应用目前ꎬ关于β-mannanase在食品领域的研究已有很多.其中ꎬβ-mannanase因可在果汁加工过程中不同程度地提高多种果汁的澄清度而广泛应用于果汁加工[30-31].2019年ꎬ陈伟等[32]将来源于嗜热真菌(Neosartoryasp.)HBFH9菌株的嗜热β-mannanase在毕赤酵母中进行重组表达ꎬ并发现该重组β-mannanase可不同程度地提高柿子汁㊁苹果汁㊁桃子汁以及葡萄汁的澄清度.其中ꎬ该酶可将柿子汁的澄清度提高31.8%ꎬ将苹果汁㊁桃子汁以及葡萄汁的澄清度分别提高了7%㊁4%和4%.2020年ꎬZhao等[33]研究了来源于干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)HDS-01菌株的β-mannanase在苹果汁加工中的产汁率和澄清度ꎬ其产汁率为188.20ʃ0.40%ꎬ澄清度为47.55ʃ0.02%ꎬ比商业β-mannanase更有效.这表明β-mannanase可提高果汁的澄清度ꎬ具有应用前景.此外ꎬβ-mannanase还可通过降解多聚糖来降低咖啡豆的黏性ꎬ从而为咖啡豆的深加工提供便利[34].2021年ꎬHaq等[30]发现ꎬ来源于泡盛曲霉(Aspergillusawamori)IIB037菌株的β-mannanase可降低新鲜苹果汁的吸光度并降低含糖量ꎬ可应用于苹果汁加工.4.3㊀在造纸工业的应用在纸张漂白工业中ꎬ所用到的生物酶通常为木聚糖酶(Xylanase).近年有研究发现可利用其他生物酶与Xylanase的协同作用进行纸张漂白.其中ꎬβ-mannanase与Xylanase共同作用时可降解纸浆中的半纤维素ꎬ但不会破坏纤维素ꎬ同时还可以减少对环境的污染ꎬ因此它们被越来越多的研究者关注并应用于工业生产[35-36].2000年ꎬClarke等[37]将木聚糖酶A(XylanaseA)与β-mannanase和半乳糖苷酶(Galactosidase)联用ꎬ并对软木浆进行预处理.结果表明ꎬ单独使用β-mannanase处理软木浆并没有效果ꎬ但是β-mannanase与XylanaseA一起使用时ꎬ能提高还原糖的产量ꎬ降低单级漂白卡帕数ꎬ从而提高纸浆的漂白性能.2004年ꎬKansoh等[36]依次或同时使用Xylanase和β-mannanase对软木牛皮纸浆进行酶促预处理.结果表明ꎬ当Xylanase和β-mannanase同时作用时ꎬ这两种酶都能通过促进还原糖的释放提高纸浆的漂白率.4.4㊀在压裂破胶领域的应用我国各大油田在施工中普遍存在低温油井压裂液破胶难的问题.以前油田常常使用化学试剂进行破胶ꎬ但化学试剂破胶法在破胶后会出现残渣率高㊁返排液黏度大㊁破胶不彻底等生产质量问题ꎬ并且还会带来环境污染[38].为了解决这些难题ꎬ国内外研究者们将研究方向放在了生物酶破胶上.目前ꎬ已有研究证实ꎬ来源于芽孢杆菌(Bacillussp.)[37]㊁肠杆菌(Enterobactersp.)[38]㊁嗜热网球菌(Dictyoglomusthermophilum)[39-40]㊁海栖热袍菌(Thermotogamaritima)[41]等菌株的β-mannanase均具有较好的破胶能力ꎬ并且其中部分β-mannanase已经被应用于石油开采领域.2008年ꎬ李军532㊀第3期㊀㊀㊀㊀㊀㊀李双娇ꎬ等:β-甘露聚糖酶的结构㊁异源表达及应用㊀㊀等[41]研究发现ꎬ来源于海栖热袍菌的β-mannanase在80~90ħ时具有较好的破胶效果.在辽河油田的中低温井中ꎬ该β-mannanase增油效果明显.2010年ꎬ何勇等[42]研究发现ꎬ源于黑曲霉(Aspergillusniger)菌种的酸性β-mannanase在较宽泛温度范围条件下酶活性依旧稳定ꎬ能够耐受较宽的pH环境及极端的地质条件ꎬ并在石油开采中具有较好的破胶效果.5㊀总结与展望随着人类社会的发展与进步ꎬ简便㊁高效㊁环保的生物酶制剂将会在未来的发展中占有更高的优势[12].由于β-mannanase具有来源广泛㊁活性高㊁产量大㊁易分离纯化且应用广泛等特点ꎬ受到众多学者的青睐ꎬ已被广泛应用于饲料加工㊁食品㊁造纸工业及石油开采等领域.相信随着生物技术的不断进步ꎬ会有更多具有独特性质的β-mannanase被发现并用于生产实践.β-mannanase的重组表达体系也将逐步被优化ꎬ重组蛋白可溶性表达可最大限度发挥其活性.此外ꎬ新认定家族的β-mannanase成员也将陆续被发现ꎬ其功能和应用将被深入探索及揭示.参考文献:[1]㊀GhoshAꎬVermaAKꎬTingirikariJRꎬetal.Recoveryandpurificationofoligosaccharidesfromcopramealbyrecombinantendo ̄β ̄mannanaseanddecipheringmolecularmechanisminvolvedanditsroleaspotenttherapeuticagent[J].MolecularBiotechnologyꎬ2015ꎬ57(2):111-127.[2]㊀殷运菊ꎬ闫昭明ꎬ陈清华ꎬ等.β-甘露聚糖酶的结构㊁特性及其在畜禽生产中的应用[J].动物营养学报ꎬ2021ꎬ33(5):2535-2543.[3]㊀CannIKꎬKocherginskayaSꎬKingMRꎬetal.MolecularcloningꎬsequencingꎬandexpressionofanovelmultidomainmannanasegenefromThermoanaerobacteriumpolysaccharolyticum[J].JournalofBacteriologyꎬ1999ꎬ181(5):1643-1651.[4]㊀CaiHYꎬShiPJꎬLuoHYꎬetal.Acidicβ ̄mannanasefromPenicilliumpinophilumC1:Cloningꎬcharacterizationandassessmentofitspotentialforanimalfeedapplication[J].JournalofBioscienceandBioengineeringꎬ2011ꎬ112(6):551-557.[5]㊀PhamTAꎬBerrinJGꎬRecordEꎬetal.HydrolysisofsoftwoodbyAspergillusmannanase:Roleofacarbohydrate ̄bindingmodule[J].JournalofBiotechnologyꎬ2010ꎬ148(4):163-170.[6]㊀YouJꎬLiuJFꎬYangSZꎬetal.Low ̄temperature ̄activeandsalt ̄tolerantβ ̄mannanasefromanewlyisolatedEnterobactersp.strainN18[J].JournalofBioscienceandBioengineeringꎬ2016ꎬ121(2):140-146.[7]㊀ZangHYꎬXieSSꎬWuHJꎬetal.AnovelthermostableGH5_7β ̄mannanasefromBacilluspumilusGBSW19anditsapplicationinmanno ̄oligosaccharides(MOS)production[J].EnzymeandMicrobialTechnologyꎬ2015ꎬ78:1-9.[8]㊀LiuZMꎬNingCꎬYuanMXꎬetal.High ̄levelexpressionofathermophilicandacidophilicβ ̄mannanasefromAspergilluskawachiiIFO4308withsignificantpotentialinmannooligosaccharidepreparation[J].BioresourceTechnologyꎬ2020ꎬ295:122257.[9]㊀杨苗.β-甘露聚糖酶产生菌的筛选鉴定㊁产酶条件优化及酶学特性研究[D].武汉:湖北工业大学ꎬ2016.[10]㊀冯娜.枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的发酵优化㊁纯化及性质的研究[D].哈尔滨:东北林业大学ꎬ2011.[11]㊀ZhangYLꎬJuJSꎬPengHꎬetal.BiochemicalandstructuralcharacterizationoftheintracellularmannanaseAaManAofAlicyclobacillusacidocaldariusrevealsanovelglycosidehydrolasefamilybelongingtoclanGH ̄A632㊀㊀㊀辽宁大学学报㊀㊀自然科学版2023年㊀㊀㊀㊀[J].TheJournalofBiologicalChemistryꎬ2008ꎬ283(46):31551-31558.[12]㊀张蕊ꎬ朱虹ꎬ周峻沛ꎬ等.β-甘露聚糖酶分子生物学研究进展[J].中国农业科技导报ꎬ2018ꎬ20(5):34-46.[13]㊀XiaWꎬLuHQꎬXiaMJꎬetal.Anovelglycosidehydrolasefamily113endo ̄β ̄1ꎬ4 ̄mannanasefromAlicyclobacillussp.strainA4andinsightintothesubstraterecognitionandcatalyticmechanismofthisfamily[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiologyꎬ2016ꎬ82(9):2718-2727.[14]㊀YouXꎬQinZꎬYanQJꎬetal.Structuralinsightsintothecatalyticmechanismofanovelglycosidehydrolasefamily113β ̄1ꎬ4 ̄mannanasefromAmphibacillusxylanus[J].JournalofBiologicalChemistryꎬ2018ꎬ293(30):11746-11757.[15]㊀JinYꎬPetricevicMꎬJohnAꎬetal.Aβ ̄mannanasewithalysozyme ̄likefoldandanovelmolecularcatalyticmechanism[J].ACSCentralScienceꎬ2016ꎬ2(12):896-903.[16]㊀ShimizuMꎬKanekoYꎬIshiharaSꎬetal.Novelβ ̄1ꎬ4 ̄mannanasebelongingtoanewglycosidehydrolasefamilyinAspergillusnidulans[J].TheJournalofBiologicalChemistryꎬ2015ꎬ290(46):27914-27927.[17]㊀SakaiKꎬMochizukiMꎬYamadaMꎬetal.Biochemicalcharacterizationofthermostableβ ̄1ꎬ4 ̄mannanasebelongingtotheglycosidehydrolasefamily134fromAspergillusoryzae[J].AppliedMicrobiologyandBiotechnologyꎬ2017ꎬ101(8):3237-3245.[18]㊀HilgeMꎬGloorSMꎬRypniewskiWꎬetal.High ̄resolutionnativeandcomplexstructuresofthermostableβ ̄mannanasefromThermomonosporafuscasubstratespecificityinglycosylhydrolasefamily5[J].Structureꎬ1998ꎬ6(11):1433-1444.[19]㊀KairaGSꎬUsharaniDꎬKapoorM.SaltbridgesarepivotalforthekineticstabilityofGH26endo ̄mannanase(ManB-1601)[J].InternationalJournalofBiologicalMacromoleculesꎬ2019ꎬ133:1236-1241.[20]㊀雍婕ꎬ高晗ꎬ吴永尧ꎬ等.甘露聚糖酶Man1602中的色氨酸修饰及其突变体性质的研究[J].食品与生物技术学报ꎬ2019ꎬ38(4):45-49.[21]㊀AkinoTꎬKatoCꎬHorikoshiK.TwoBacillusβ ̄mannanaseshavingdifferentCOOHterminiareproducedinEscherichiacolicarryingpMAH5[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiologyꎬ1989ꎬ55(12):3178-3183.[22]㊀ZhangWꎬLiuZMꎬZhouSJꎬetal.Cloningandexpressionofaβ ̄mannanasegenefromBacillussp.MK ̄2anditsdirectedevolutionbyrandommutagenesis[J].EnzymeandMicrobialTechnologyꎬ2019ꎬ124:70-78.[23]㊀TuntrakoolPꎬKeawsompongS.Kineticpropertiesanalysisofbeta ̄mannanasefromKlebsiellaoxytocaKUB ̄CW2 ̄3expressedinEscherichiacoli[J].ProteinExpressionandPurificationꎬ2018ꎬ146:23-26.[24]㊀UedaMꎬHiranoYꎬFukuharaHꎬetal.GenecloningꎬexpressionꎬandX ̄raycrystallographicanalysisofaβ ̄mannanasefromEiseniafetida[J].EnzymeandMicrobialTechnologyꎬ2018ꎬ117:15-22.[25]㊀胡延祥.β-甘露聚糖酶在谷氨酸棒杆菌中的表达及其酶学性质的研究[D].南京:南京大学ꎬ2019.[26]㊀郑允志ꎬ王冰ꎬ王兴刚.β-甘露聚糖酶对夏季高温蛋鸡生产性能㊁蛋品质和养分表观消化率的影响[J].中国饲料ꎬ2018(16):42-45.[27]㊀刘紫征.甘露低聚糖的酶法制备工艺及功能研究[D].武汉:华中农业大学ꎬ2016.[28]㊀郝生燕ꎬ王国栋ꎬ潘发明ꎬ等.日粮类型和β-甘露聚糖酶对肉仔鸡生产性能和养分利用的影响[J].国外畜牧学(猪与禽)ꎬ2017ꎬ37(4):20-24.[29]㊀张荣春ꎬ李光文ꎬ臧兆运ꎬ等.β-甘露聚糖酶在肉鸡饲料中应用[J].山东畜牧兽医ꎬ2021ꎬ42(8):5-8ꎬ12.[30]㊀HaqIUꎬShakoorSꎬNawazAꎬetal.PurificationandcharacterizationofmannanasefromAspergillusawamoriforfruitjuiceclarification[J].ProteinandPeptideLettersꎬ2021ꎬ28(4):459-468.[31]㊀季海蕊ꎬ张鑫ꎬ姜静ꎬ等.乳酸菌β-甘露聚糖酶研究进展[J].食品工业科技ꎬ2021ꎬ42(4):325-329ꎬ336.[32]㊀陈伟ꎬ谷新晰ꎬ黄蕾ꎬ等.嗜热甘露聚糖酶毕赤酵母工程菌的表达及该酶在果汁澄清中的应用[J].食品科学ꎬ732㊀第3期㊀㊀㊀㊀㊀㊀李双娇ꎬ等:β-甘露聚糖酶的结构㊁异源表达及应用832㊀㊀㊀辽宁大学学报㊀㊀自然科学版2023年㊀㊀2019ꎬ40(22):81-87.[33]㊀ZhaoDꎬZhangXꎬWangYꎬetal.Purificationꎬbiochemicalandsecondarystructuralcharacterisationofβ ̄mannanasefromLactobacilluscaseiHDS ̄01andjuiceclarificationpotential[J].InternationalJournalofBiologicalMacromoleculesꎬ2020ꎬ154:826-834.[34]㊀张建新ꎬ宋宜乐ꎬ冯军厂ꎬ等.微生物β-甘露聚糖酶的研究进展[J].中国酿造ꎬ2019ꎬ38(4):7-10.[35]㊀AnguralSꎬKumarAꎬKumarDꎬetal.LignolyticandhemicellulolyticenzymecocktailproductionfromBacillustequilensisLXM55anditsapplicationinpulpbiobleaching[J].BioprocessandBiosystemsEngineeringꎬ2020ꎬ43(12):2219-2229.[36]㊀KansohALꎬNagiebZA.XylanaseandmannanaseenzymesfromStreptomycesgalbusNRandtheiruseinbiobleachingofsoftwoodkraftpulp[J].AntonievanLeeuwenhoekꎬ2004ꎬ85(2):103-114.[37]㊀ClarkeJHꎬDavidsonKꎬRixonJEꎬetal.Acomparisonofenzyme ̄aidedbleachingofsoftwoodpaperpulpusingcombinationsofxylanaseꎬmannanaseandα ̄galactosidase[J].AppliedMicrobiologyandBiotechnologyꎬ2000ꎬ53(6):661-667.[38]㊀尤佳ꎬ刘金峰ꎬ杨世忠ꎬ等.MEMA10耐低温复合酶活性与破胶性能[J].油田化学ꎬ2016ꎬ33(4):612-618. [39]㊀胡可ꎬ潘江ꎬ倪燕ꎬ等.来源于嗜热网球菌的热稳定性甘露聚糖酶:高效的瓜尔胶水基压裂液的破胶催化剂[C]//第九届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.南宁:中国微生物学会酶工程专业委员会ꎬ2013:139. [40]㊀HuKꎬLiCXꎬPanJꎬetal.Performanceofanewthermostablemannanaseinbreakingguar ̄basedfracturingfluidsathightemperatureswithlittleprematuredegradation[J].AppliedBiochemistryandBiotechnologyꎬ2014ꎬ172(3):1215-1226.[41]㊀李军ꎬ王潜ꎬ齐海鹰ꎬ等.新型生物酶破胶剂的研究与应用[J].石油矿场机械ꎬ2008ꎬ37(10):90-92.[42]㊀何勇ꎬ王艳.一种酸性β-甘露聚糖酶作用特性的分析研究[J].饲料工业ꎬ2010ꎬ31(8):16-18.(责任编辑㊀李㊀超)㊀㊀。
甘露聚糖酶的应用
60. 66 b
3.2
甘露聚糖酶
能量(100 kcal)
瘦肉率, 瘦肉率统计分析
生长阶段
肉
一阶段
鸡
二阶段
的
三阶段
降
能
实
验
能量降低幅度 93 96 95
-----梁增成,2003
美国大规模肉鸡实验(减100 kcal/KG +甘露聚糖酶)
收鸡日期 雏鸡数 能量调整 存活率 终 重
3/27/99 849,249 No
148
阿拉伯 聚糖 18 17.6 33 53.1 98 61.5 35 9 20.5 17
28 28.1
4 20
41
半乳 聚糖
5 5.3
3 9.42
7 6.3
3 2 4.2 2
2 4.3
1 43
8
甘露 聚糖 14 13.5
3.31
1 12.6
3 1 5.0 -
2 2.1
10
-
木聚糖
25 25.4 48 79.2 188 108.6 54 12 23.3 21 51 42.0
甘露聚糖酶对肉鸡受到球虫感染时的影响
处理
感染1
药 物2
酶
增重 (g) 8-21d
料重 比 8-21d
病变评分
堆型艾美 巨型艾美 耳球虫 耳球虫
死亡率 8-21d
否 是否
540a 1.446 0.00 c
a
0.00 c
否 是 是 548 a 1.424 0.00 c
a
0.00 c
是 否 否 429 c 1.704 1.38 a
❖ 粘滞性:吸水后粘滞性达3.27-4.14 ❖ 结合力:易与蛋白质、酚类、维生素、离子等
甘露聚糖酶是什么
甘露聚糖酶,固态型产品外观为米白至淡黄色颗粒或粉状,酶活含量为500000U/g;液态型产品外观为淡黄至黄色液体,酶活含量为500000U/mL,为一种多功能的促生长剂,不仅可促进类胰岛素生长因子IGF-I的分泌,蛋白质的合成,提高瘦肉率,同时,还能促进生长。
一、主要成分
β-甘露聚糖酶(endo-1,4-β-mannanase)≥180000U/g,同时含有淀粉酶、木聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶、果胶酶等。
二、性能特点
1、采用基因工程菌经深层液体发酵而成,活性高于国外产品。
2、适作用pH值范围广(4-7.5),能在动物消化道内较好的发挥作用。
3、耐温性能好,采用先进的后处理工艺能耐受90℃的制粒温度,不用额外的后喷设备,混合均匀。
4、效果出众,实践证明,在含豆粕10%以上日粮中使用β-甘露聚糖酶后,能提高100-150 kcal/kg代谢能(相当于每吨料减少10-15kg油脂,每吨饲料
可节省成本10-15元)。
以上就是有关甘露聚糖酶的一些简单介绍,希望对大家进一步的了解有所帮助。
β—甘露聚糖酶的研究及工农业应用
β—甘露聚糖酶的研究及工农业应用β—甘露聚糖酶(β—mannanase EC 3.2.1.78)是一种半纤维素水解酶,以内切方式降解β—1,4糖苷键,降解产物的非还原末端为甘露糖,其作用底物包括葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖及β—甘露聚糖等。
β—甘露聚糖酶的来源非常广泛,包括植物、细菌、真菌、放线菌甚至软体动物。
甘露聚糖是植物性饲料原料中除纤维素、木聚糖之外,分布最广泛、含量最高的一类半纤维素,而且在许多植物中有淀粉样的大量积累。
畜禽和鱼类的消化酶系不含甘露聚糖酶,对这类物质的转化需要添加外源酶。
饲料中添加甘露聚糖酶可消除和降解饲料原料中的抗营养因子,促进畜禽生长,减少养殖污染。
1 β—甘露聚糖酶研究的历史和菌种选育早在二十世纪初就有关于分解植物甘露聚糖的报道,但直到70年代,β—甘露聚糖酶的研究才逐渐深入起来。
尤其是近多年来对半纤维素资源的开发和甘露寡糖益生价值的发现,以及β—甘露聚糖酶诸多用途的发现,大大推动了β—甘露聚糖酶研究的发展。
1958年,Courtios第一次报道了能产生β—甘露聚糖酶的真菌。
1960年,William和Doetsch报道了细菌产生的β—甘露聚糖酶。
1965年,Reese和Shibata提出了β—甘露聚糖酶的概念和定义,为以后的研究打下基础。
70年代后,大量β—甘露聚糖酶的产生菌株被筛选、诱变,研究培养基成分特别是碳源对产酶的影响,进行多糖结构的分析。
同时,许多不同来源的β—甘露聚糖酶被分离纯化,对酶的基本性质的研究取得了较大发展。
国内自80年代开展微生物甘露聚糖酶发酵生产技术研究,进展很快。
1980年我国李欣等首次系统研究甘露聚糖的化学组成。
1985年以后,随着β—甘露聚糖酶和甘露寡糖应用领域的开发,新菌种筛选和诱导育种等相关研究竞争显著加剧。
如杨文博等研究了产β-甘露聚糖酶的地衣芽孢杆菌的分离筛选及发酵条件。
崔福绵等研究了枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的产生及性质,选育菌种的酶产量达到120u/ml。
芽孢杆菌产甘露聚糖酶酶活稳定的提高
目录摘要 0ABSTRACT (1)第一章绪论 (2)1.1β-甘露聚糖酶的研究现状 (2)1.1.1β-甘露聚糖酶的来源 (2)1.1.2β-甘露聚糖酶的性质 (3)1.1.3β-甘露聚糖酶的诱导 (3)1.2β-甘露聚糖酶的纯化 (4)1.2.1 纯化的意义 (4)1.2.2 分离纯化工艺 (5)1.3β-甘露聚糖酶的稳定性及稳定化 (6)1.4β-甘露聚糖酶的应用 (7)1.4.1石油钻采 (7)1.4.2饲料添加剂 (7)1.4.3食品保健 (7)1.4.4造纸工业 (8)1.4.5纺织工业 (8)1.4.6工具酶 (8)1.5研究目的和研究内容 (8)1.5.1研究目的 (8)1.5.2研究内容 (9)第二章枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的产生及性质 (9)2.1实验仪器与材料 (9)2.1.1实验仪器与设备 (9)2.1.2试剂 (10)2.1.3菌种 (10)2.1.4培养基 (11)2.2实验方法 (11)2.2.1粗酶液的制备 (11)2.2.2酶活的测定 (11)2.2.3温度对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (13)2.2.4不同浓缩倍数对β-甘露聚糖酶酶活稳定性影响 (13)2.2.5反复冻融对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (13)2.2.6激活剂对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (14)2.2.7防腐剂对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (14)2.2.8金属离子螯合剂对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (14)2.3实验结果与分析 (14)2.3.1温度对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (14)2.3.2不同浓缩倍数对β-甘露聚糖酶酶活稳定性影响 (15)2.3.3反复冻融对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (16)2.3 反复冻融情况下酶的稳定性 (16)2.3.4保护剂对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (16)2.3.5防腐剂对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (17)2.3.6金属离子螯合剂对β-甘露聚糖酶酶活稳定性的影响 (17)结论 (18)展望 (18)参考文献 (19)致谢 (21)摘要β一甘露聚糖酶是一种重要的半纤维素酶,应用广泛,多采用微生物发酵制备。
甘露聚糖酶的固定化及在酶反应器中的应用
专利名称:甘露聚糖酶的固定化及在酶反应器中的应用
专利类型:发明专利
发明人:刘力强,张伟,谷雅文,曹毅,武建,刘燕静,袁江宏,袁润申请号:CN202111222100.5
申请日:20211020
公开号:CN114058611A
公开日:
20220218
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了甘露聚糖酶的固定化及在酶反应器中的应用。
按照甘露聚糖酶与载体质量比为1:1取料,加入0.1MpH=5的磷酸盐缓冲液,在25℃固定化反应24h制成。
本发明选用树脂固定化载体对甘露聚糖酶进行固定化处理,考察其最佳固定化条件;并利用该固定化酶制备酶反应器,使用该反应器制备甘露寡糖,从而实现了酶重复利用(15批次以上),解决了反应底物粘度大的缺点,为降低甘露寡糖生产成本奠定技术基础。
申请人:承德康尔润食品有限公司,河北科技大学
地址:067201 河北省承德市鹰手营子矿区金扇子村203工业区
国籍:CN
代理机构:北京诚呈知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:杨凌波
更多信息请下载全文后查看。
甘露聚糖酶及其应用
甘露聚糖酶及其应用
张铁鹰;师昆景
【期刊名称】《中国饲料添加剂》
【年(卷),期】2012(000)009
【摘要】甘露聚糖和异甘露聚糖是植物细胞壁中半纤维的一个组成成分,根据主链上的取代基和存在的形式分为甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖,这些甘露聚糖在纺织、食品和饲料等各领域功过不一。
甘露聚糖酶在自然界普遍存在,主要来自于微生物,这些甘露聚糖酶大多为内切型β-甘露聚糖酶。
甘露聚糖酶水解甘露聚糖可产生甘露二糖、甘露三糖及少量的高分子量寡糖。
本文就甘露聚糖的结构、甘露聚糖酶的来源、产生条件以及甘露聚糖酶在饲料工业中的应用进行了概括总结。
【总页数】4页(P6-9)
【作者】张铁鹰;师昆景
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】TQ925
【相关文献】
1.肝细胞肝癌患者血浆中甘露聚糖结合凝集素和甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2的表达水平
2.植酸酶和甘露聚糖酶双功能毕赤酵母工程菌的构建和产酶分析
3.β-甘露聚糖产酶菌株ZMD13的紫外线诱变选育
4.甘露聚糖酶和纤维素酶对
玉米-小麦-豆粕型日粮的体外消化评价5.抗脂阿拉伯甘露聚糖抗体IgG、结核感染T细胞斑点试验及腺苷脱氨酶对活动性肺结核的诊断价值
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
多糖 , 即纤 维 素 、 半纤 维 素 和木质 素 ( ekr , D ke 等
18 ) 95 。半纤维素是不溶于水 , Sl n rn和 0 N i ,9 5 。根 据 v e l1 8 ) l 这 个定 义 , 半纤 维素 包括 甘露 聚糖 、 聚糖 、 木 半乳
它 的酶 , B一葡 萄糖苷 酶 、 一半乳 糖 苷酶 和 乙 如 酰 甘露 聚糖 酯酶 等 来 水 解 掉 与 甘露 聚糖 主链 多 个位 点相 连 的侧链 糖 基 。半 乳 甘 露 聚糖 结 构 糖 苷键 需要 两种 酶来 水 解 , 内切 B一14一甘 露 即 ,
聚糖 酶 和 一 乳糖 苷 酶 。 半 表 l 主 要的甘 露 聚糖酶 及 其分 类
f r n u ci n n a mf lef cs i a o sf l s s c s t xi ,f o n e d Ma n s s ee tf n t sa d h r u f t n v r u ed u h a e t e o d a d fe . o e i i l n a ei
素在初 生细 胞壁 中含量 丰富 , 也存在 于次 生细胞
壁 中( us 19 ) P l,9 7 。
甘露聚 糖 的主要单 体成分 是 D一甘露 糖 , 为 六 碳糖 。甘 露 聚糖 和异 甘露 聚 糖作 为半 纤 维 素 的组成 成分 , 自然界 中广泛 地分 布在硬 木和 软 在
木 组 织 ( ao C p e等 , 0 0) 豆 科 植 物 的 种 子 20 、 ( a dod等 ,0 3) 豆 类 籽 实 中 。甘 露 聚 糖 H nf r 20 和
wi e pr a n n t r d s e d i au e,man y fo mi r og ns ,mo to i h i h n o—b t i l r m c o r a ims s fwh c st e e d ea—ma n s . n a e Ma n s a aa y e t e h d oy i f ma a n a e c n c tl z h y r lss o nn n,t o uc n o is o prd e ma n b o e,ma n tl u a n n i ,s g r a d a o s l a u to i h mo e u a ih lg s c h rd s Th o sr ci n o n a a l a ma l mo n fh g lc lr we g to io a c a i e . e c n tu to f ma n n, s we l s tes uc h o r e,g n r to o d t n a d a p ia in i n u ty o n o e wa u e e ain c n ii n p lc to n i d sr f ma n s s s mma z d i hi o i r e n t s
甘露 二糖 、 甘露 三糖及 少量的 高分子 量寡糖 。本 文就 甘 露聚 糖 的 结构 、 露聚 糖酶 的来 源 、 甘
产 生条件 以及甘 露 聚糖酶 在饲料 工业 中的应 用进 行 了概括 总结 。
关键 词 : 露聚糖 酶 ; 甘 甘露 聚糖 ; 用 应
Ap l ain o a n s pi t fM n a e c o
的相似 性 , 它们 均具 有 主链 结 构 B一14一键 链 ,
张铁鹰 , : 等 甘露 聚 糖 酶 及 其 应 用
— 一 — — 7—
容易 被 降解 。甘 露 聚 糖包 裹 层 通 过 共 价 键 与 木 质 素相连 , 与纤维 素非 共价键 相 连 的方式 可能 对
于维 持纤 维 的形 态 和 保 护纤 维 素 不 被 纤 维 素 酶 降解 具有 重要 意义 ( us Sh si,9 3 。 P l 和 cu e 19 ) l 不 同豆科 植 物 中的半 乳 甘 露 聚 糖 根 据 半 乳
现有许 多 检测 微 生 物 甘 露 聚糖 酶 活 性 的方
中的应 用也 迅 速 增 长 。从 那 时 开始 世 界 范 围 内 的科研 工作 者 的研 究 开 始 集 中在产 甘露 聚糖 酶
微生物的筛选工作, 尽管降解甘露聚糖的微生物 也 有所 报 道 , 关 于 甘露 聚糖 酶 的研 究 较 少 , 但 且 大 多是 关于 甘露 聚糖 酶 的产量 和特 性 的研究 。
链 上 的分 布情 况等 的影 响 。 3 甘 露聚 糖酶 的来 源
甘露 聚糖 酶在 自然 界 中普 遍存 在 , 由一些 微 生 物所 产生 , 些微 生物 大部分 是从 自然 环境 中 这 分 离 获得 。 目前 已知 多 种 细 菌 、 线 菌 、 母 菌 放 酵 和真 菌 可 降解 甘 露 聚糖 ( uhr 等 ,04) Pcat 20 。也 有 的 甘 露 聚 糖 酶 产 自于 高 等 植 物 ( r cii Mar c a n
一
6 一
中国饲 料添加剂
21 0 2年第 9期 ( 总第 13期 ) 2
曩■● 鍪鋈
蠹 蠹 錾 囊 攀
甘露聚糖酶及其应用
张铁 鹰 师 昆景
(. 1 中国农业科学 院北京畜牧兽 医研究所 动物营养学 国家重点实验室 ;. 2 山东思诺拜特生物科技 有限公 司)
摘
要 : 露聚糖 和异甘 露 聚糖是植 物 细胞壁 中半 纤维 的一 个组成 成分 , 据主链 上 的 甘 根
机 水 解半 乳 甘 露 聚糖 、 葡甘 露 聚糖 、 半乳 葡 甘 露 聚糖 和甘露 聚糖 的主链 ¥一14一D一甘 露 聚 糖 , ( Cer Mclay和 Ma eo ,18 ) t sn 96 。除 了具 有 能 水 h
解 不 同甘露 聚糖 的能 力外 , 一些 B一 , 1 4一D一甘 露 聚糖 酶还 能糖 基化 甘露 寡 聚糖 ( ajn a H r p a等 , u 1 9 ;c rd r ,0 4) 9 5 S ho e 等 2 0 。半 乳 甘 露 聚 糖 和 半 乳
取 代基 和存 在 的形式 分为甘 露聚 糖 、 乳甘 露 聚糖 、 半 葡甘露 聚糖 和半 乳 葡甘 露 聚糖 , 些甘 这
露聚糖 在 纺织 、 品和 饲料 等各领 域功 过 不一 。甘 露 聚糖酶在 自然界普遍 存在 , 食 主要 来 自于
微 生物 , 些甘 露聚糖 酶 大 多为 内切 型 B一甘 露聚 糖 酶 。甘 露 聚糖 酶水 解 甘露 聚糖 可产 生 这
集 中木 聚糖 酶 的研 究 , 尽管 甘露 聚糖 在半 纤维 素 中所 占的 比例也 比较 高 , 有关 甘露 聚 糖酶 的研 但
究 工作却 相 对滞后 。 自 G bt 等 ( 9 7 发 现 甘 ui z 19 ) 露 聚糖 酶在 造纸 中的应用 效果 后 , 在 造纸 工业 其
只有 少数 野生 型 菌株 或 重 组 型 菌 株具 有 商 业 开 发 价值 , 中重 要 的是芽孢 杆 菌属 、 霉 菌属 、 其 链 嗜 纤 维 杆 菌 、 解 纤 维 素 菌 属 和 解 糖 热 纤 维 菌 热 ( hn ,06 H td Z ag等 20 ; aaa等 ,05 。 20 ) 4 甘 露聚 糖酶 的检 测
法 。常规微生物甘露 聚糖降解酶检测方法有平 板 检 测法 , 方 法 的基础 生长 培养 基 中含 有不 同 该
聚合物 或其 衍 生 物 。培 养 基 中的底 物 在 菌 株 生 长 过 程 中被 变成 可溶 状态 , 培养基 中底 物相 应 与 水 解 酶产量 可 根据 培养基 的透 明程度 显示 出来 。
Z agTeig S i uj g h n i n h ni y K n
Absr t tac :Ma n n a d io rc ma a r h o n a n s me nn n a e t e c mpo i o fh mi el ls n v g tlc l i st n o e c lu o e i e e a el i wa 1 l.Ac o d n o t i e e ts b tt n so he man c i n o m fe it n e,h y c n b c r i g t he df r n u si f ue t n t i han a d fr o xse c t e a e d vd d i t n a ii e n o ma n n,g l co n a aa t ma n n,gu o n a n a a t —gu o n n, c h v i l c ma n n a d g lco l c ma na whih a e df -
糖替 代程 度分 成不 同种 类 , 甘露 糖 和半乳 糖 的 比 例 为 1 1 1 高半 乳 糖 ) 3 5: ( 半 乳 糖 ) .:( 和 . 1低 。
在 甘露 聚糖 和半乳 甘露 聚糖 中 1一D一甘露 聚糖 3
葡甘 露聚糖 等 多糖被 水解 的程 度受 主链 上 B—D
一
半 乳糖 糖 苷 残 基 的 数 量 和 存 在 形 式 ( — Mc
p p r a e・
K e o ds: a n s ma n n; p lc t n yW r m n a e; n a a p ia i o
1 甘 露聚糖 及其 形态 与结构
接 的 D型残基 ( el和 Y r , 0 3 。半 纤维 0Ni l ok 2 0 )
甘露 聚糖 和异 甘 露 聚糖 是 植 物 细胞 壁 中半 纤 维 的一个 组 成 成 分 。通 过植 物 细 胞 壁 的 多糖 结 构分 析 已经 揭示 细 胞 壁 主要 含 有 三 种类 型 的
由于植 物 中甘 露 聚糖 的异 质 性 和 复 杂 的化
学特性 , 微生物很难将其彻底降解成为可被作为 能 量来 源 、 容 易 利用 的单 糖 , 个 过程 还 需 要 且 这 内切 1—14一甘露 聚糖 酶 和外 切 的甘 露糖 苷 酶 3 , 协 同参 与 ( 1 才 能 完 成 。另 外 还 需 要 一 些 其 表 )