最新植物器官培养

叶鞘、叶片、子叶）
繁殖器 官培养
花培养 （包括花托、花瓣、花丝、 花柄、子房、花药）
种子培养（包括成熟与未成熟） 胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、 胚珠、
子房、胚乳培养 ）
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外植体形态发生形成完整植株的途径
（一）外植体-愈伤组织-完整植株。 具体又可分为三种：
1、愈伤组织-同时长芽和根-植株。 2、愈伤组织-茎-根-植株。 3、愈伤组织-根-芽-植株。 4、愈伤组织-体细胞胚-植株
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4、培养的方法和程序
（1）培养基 ① 基本培养基 MS、White、 B5、 Heller培养基。 ② 蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。 ③ 激素（ 2，4-D，IAA， NAA ）和有机添加物有明显影 响。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。
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上，根依靠培养基中的养分和生长物质而不断生长。 第二种是液体培养法，把根尖接种在无琼脂的液
体培养基中，经常振荡使根获得充足的氧气。 第三种是固体-液体培养法，就是把根基部插入固
体琼脂培养基中，根尖浸在液体培养基中，根尖生长 而根不断的伸长和分枝。
二、茎尖的培养*
（一）茎尖培养概念及类型 （二）病毒在植物体内的分布 （三）茎尖培养方法及步骤
植物器官培养
第一节 概述
植物器官培养（Organ Culture）是指对植物某一器官 的全部、部分或器官原基进行离体培养的技术。分为 营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（胚胎、种子、 花器官）培养。
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植物 器官 培养
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营养器 官培养
根培养 茎培养（ 包括茎尖、茎段） 叶培养（包括叶原基、叶柄、
2、氮源 氮源有铵态氮、硝态氮和可溶性有机 氮如氨基酸或酰胺等，其中以硝态氮的效果最好。 加入含各种氨基酸的水解酪蛋白，能促进离体根 的生长。
3、碳源 以蔗糖的效果最佳，几乎为葡萄糖的10 倍。蔗糖的浓度为2—3%。
4、维生素 维生素以B1和B6最为重要，缺少它根 的生长受到阻碍，而加入它可使根的生长成倍的加 快。B1的使用浓度为0.1-1.0mg/L为宜。
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(一)茎尖培养概念及类型
茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行 无菌培养。
茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： ①微茎尖培养: 带有1-2个叶原基的生长点, 其长度不超 过 0.5mm。
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②普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧 芽。 这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便， 茎尖容易成活，成苗所需时间短 。
White培养基；2/3或1/2 MS 和 B5培养基 注：离体根生长要求提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效 果好，加入VB1、VB6最重要，生长素对离体根影响不一致。 培养温度25－27℃，暗光培养。
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离体根生长的营养要求
1、无机成分 要求培养基中有全部必要元素， 因为它是离体生长所需要的，一般的为MS、B5培 养基。
3. 培养条件
暗光和温度25-27℃。
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一、离体根的培养
4、根的间接增殖 第一步在脱分化培养基上诱导形成愈伤组织，如胡杨
的根段培养，可诱导形成白色愈伤组织。 第二步在再分化培养基上诱导形成芽的分化，如胡杨
从绿色愈伤组织分化出小植株。
胡 萝 卜 根 培 养
5、培养方式
离体根的培养方式有三种类型。 第一种固体培养法，即将根尖接种在固体培养基
茎尖生长状态
生长太慢：茎尖不增大→→变绿→→细胞逐渐老化→→休眠 原因: 生长素浓度太低；温度过低或过高；
第二节 营养器官培养
一、离体根的培养 二、茎尖的培养* 三、茎段的培养 四、离体叶的培养*
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一、离体根的培养
（一） 意义： ①生理代谢研究的优良实验体系 ②研究器官分化形态建成的良好体系 ③建立快速生长的根无性系 ④进行诱变育种
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（二） 培养方法
1. 培养基选择
5、生长物质 对离体根的生长而言，生长素的效 应最为明显，在一般情况，加入适量的生长素能促 进根的生长，其反应和需要量因植物种而异：
6、温度和光照 黑暗有利于根的形成，温度一般 在16-25℃
7、PH 根发生和生长所需的PH范围一般为5.0-6.0
2. 无性繁殖系的建立
种子消毒 →→ 接种→→待根伸长后从根尖一端切取长 1.2cm的根尖→→接种于培养基→→发育出侧根→→待侧 根生长约1周后切取侧根的根尖进行扩大培养→→又迅速 生长并长出侧根→→切下进行培养，如此反复→→得到 从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。
茎尖培养的意义： 普通茎尖培养技术来自百度文库单，操作方便，易成活，成苗 时间短，加快繁殖。 微茎尖培养可获得脱毒苗；
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(二)病毒在植物体内的分布
❖ 病毒侵染植株的叶片后，经过一段时间，即向附近的 细胞增殖转移。转移速度很慢，每小时只有几微米。 当叶片内病毒浓度增大到一定量时，就转移到韧皮部， 随后通过维管束转移到其它部分。由于病毒转移速度 慢，加上茎尖分生组织无维管束，病毒只能通过胞间 连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长 点的病毒数量极少，几乎检测不出。茎尖培养时，切 取的茎尖越小，带病毒的可能性就越小。
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2、材料处理及消毒
将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm长→→去叶（休眠 芽预先剥除鳞片） →→流水冲洗2-4h →→ 75％的酒 精中处理30s →→稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min(取 自老枝条上的可适当延长时间）→→用无菌水冲洗数次， 准备接种。
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3、接种
接种前再剥掉一些叶片，使茎尖0.5cm →→接种 要求：随切随接，动作迅速。 亦可将切下茎尖材 料在1－5% VC液中浸一下。
——茎尖脱毒的基本原理
（三）茎尖培养方法及步骤
及材
取
消料
材
毒处
理
接
培
驯
化
种
养
移 栽
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1、 取材
①直接取材：在生长旺盛、枝 条健壮、无病的母株上选生 长不久、杂菌污染少的顶梢 （1－2cm）（取前可喷杀菌 药，可顶芽或侧芽）。
②从试管苗获取。
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取1-2㎝顶梢