出血热病毒介绍

出血热病毒介绍出血热病毒介绍出血热病毒出血热( Hemorrhagic fever )不是一种疾病的名称，而是一组疾病或一组综合征的统称。

这些疾病或综合征是以发热、皮肤和粘膜出现瘀点或瘀斑、不同脏器的损害和出血，以及低血压和休克等为主要特征的。

引起出血热的病毒种类较多，它们分属于不同的病毒科(表31-1)。

目前在我国已发现的有肾综合征出血热病毒、新疆出血热病毒和登革病毒。

表31-1 人类出血热病毒及其所致疾病病毒科病毒主要媒介所致疾病分布披膜病毒科基孔肯雅病毒蚊基孔肯雅热亚洲、非洲黄病毒科黄热病病毒蚊黄热病非洲、南美洲登革病毒蚊登革热亚洲、加勒比海地区Kyasanur 森林病病毒蜱Kyasanur 森林病印度Omsk 出血热病毒蜱Omsk 出血热俄罗斯布尼亚病毒科肾综合征出血热病毒啮齿动物肾综合征出血热亚洲、欧洲、非洲、美洲Rift 山谷热病毒蚊Rift 山谷热非洲克里米亚-刚果出血热病蜱克里米亚- 刚果出血非洲、中亚毒热新疆出血热病毒蜱新疆出血热中国新疆沙拉病毒科Junin 病毒啮齿动物阿根廷出血热阿根廷Machupo 病毒啮齿动物玻利维亚出血热玻利维亚Lassa 病毒啮齿动物Lassa 热非洲丝状病毒科Marburg 病毒猴、蚊？Maburg 出血热非洲、德国Ebola 病毒？未确定Ebola 出血热非洲第一节汉坦病毒汉坦病毒( Hantavirus )是布尼亚病毒科( Bunyaviridae )的一个新属。

根据其抗原性及基因结构特征的不同，目前至少可区分为6 个型。

其中汉滩病毒、多布拉Hemorrhagic fever with renal syndrome ， HFRS )的病原；辛诺柏病毒、黑港渠病毒及囚犯港病毒为汉坦病毒肺综合症( hantavirus pulmonarysymdrome ，HPS )的病原。

HFRS 是由鼠类等传播的自然疫源性急性病毒性传染病，以往此病在中国和日本被称为流行性出血热，在朝鲜和韩国被称为朝鲜出血热，在前苏联被称为远东出血热和出血性肾炎，在斯堪的纳维亚国家被称为流行性肾病。

1980 年世界卫生组织将其统一命名为肾综合征出血热。

汉坦病毒的名称来自此病毒属的原型汉滩病毒76-118株( hantaanvirus )，最先由韩国李镐汪等在1978 年从韩国汉滩河附近流行性出血热疫区捕获的黑线姬鼠中分离出。

此后各地相继从不同动物及病人体内分离出许多株病毒，现国际上通称为 HFRS 病毒。

根据此病毒的形态学和分子生物学特征，目前已将其归入布尼亚病毒科(Bunyaviridae ) ，另立为一个新属，命名为汉坦病毒属 (Hantavirus )。

为区别属及型的名称，在中译名上分别称为“汉坦病毒属”与“汉滩病毒、生物学性状一)形态结构病毒体呈圆形或卵圆形，直径约 75～ 210nm ，平均 122nm 。

有包膜，包膜上有突起，长约6nm ，方格状。

病毒的核酸为单股负链 RNA ，分为 L 、M 、S 三个片段。

分子量分别为2.7×106、1.4×106和0.6×106道尔顿。

三个片段的碱基序列互不相同，但都具有同样的3′末端，为“ 3′ AUCAUCAUCUG ”，这一序列不同于布尼亚病毒科的其他属病毒。

编码四种蛋白，即 N 、G1、G2 和 L 。

N 为核蛋白，由 S 片段编码，其主要功能是包裹病毒 RNA 的三个片段，该蛋白免疫原性强。

G1和 G2 均为糖蛋白，由 M 片段编码，有独立存在的中和抗原位点和血凝活性位伐 -贝尔格莱德病毒、汉城病毒和普马拉病毒为肾综合征出血热N 、G1、G2 和 L 。

点，但也可部分重叠。

L 为依赖RNA 的RNA 多聚酶，由L 片段编码，在病毒复制中起重要作用。

HFRS 病毒的成熟方式为芽生成熟，其成熟过程与细胞的高尔基氏体和内质网有关。

病毒在pH5.6～6.4 时可凝集鹅红细胞。

(二)培养特性多种传代、原代及二倍体细胞均对HFRS 病毒敏感，实验室常用非洲绿猴肾细胞( Vero E6)、人胚肺二倍体细胞( 2BS)等来分离培养该病毒。

病毒在细胞内生长缓慢，一般需7～14d 病毒滴度才达高峰，一般不引起可见的细胞病变，通常需采用免疫学方法进行鉴定。

由于不同病毒在不同细胞上的适应性差异，决定其生长速度，与致病性强弱可能也有一定的关系。

易感动物有多种，如黑线姬鼠、长爪沙鼠、小白鼠、大白鼠等，但除了小白鼠乳鼠感染后可发病及致死外，其余均无明显症状（三）病毒型别已证实HFRS 病毒与其他出血热病毒无关，与布尼亚病毒科其他4 个属的病毒也无血清学关系。

采用血清学方法（主要是空斑减少中和试验）以及RT-PCR 技术和酶切分析方法，可将HFRS 病毒分为不同型别，见表31-2。

从我国不同疫区、不同动物及病人分离出的HFRS 病毒，分属于Ⅰ型和Ⅱ型，两型病毒的抗原性有交叉。

表31-2 汉坦病毒的型别流行地主要所致疾病区宿主病毒Hantaan (Ⅰ型，亚洲、欧HTN ) HFRS(EHF)黑线姬鼠Seoul （Ⅱ 型，全世界SEO）褐家HFRS(EHF) 鼠Puumala （Ⅲ型，欧洲、PUU ）洲Prospect Hill （Ⅳ 亚棕背HFRS(NE) 鼠俄草原不致病田Bayou(BAY) 北美不清楚鼠 Dobrava 病毒(Ⅵ黄欧洲HFRS型,DOB ）姬鼠Thottapalaym 病印度不清楚臭毒（Ⅶ型 ,TPM ）Sin Nombre(SNV) 北美 HPS鹿鼠Black Creek美HPS 棉Canal (BCC)El Moro西美HPSCanyan(ELMC)巢鼠HPS米板齿颈方（四）抵抗力病毒抵抗力不强。

对酸（pH3.0 ）和丙酮、氯仿、乙醚等脂溶剂敏感。

一般消毒剂如来苏尔、新洁尔灭等也能灭活病毒。

病毒对热的抵抗力较弱， 56～60℃ 30分钟可灭活病毒。

紫外线照射（ 50cm 、30 分钟）也可灭活病毒。

二、流行特点目前世界上已发现能携带本病毒的鼠类等动物百余种，疫源地遍及世界五大洲。

在亚洲、欧洲、非洲和美洲28 个国家有病例报告。

我国是HFRS 疫情最严重的国家，自本世纪30 年代首先在黑龙江省孙吴县发现此病后，疫区逐渐扩大，现已波及二十八个省、市、自治区。

自80年代中期以来，年发病人数超过10 万，病死率为3～5%，有的地区高达10%。

黑线姬鼠和褐家鼠是我国各疫区HFRS 病毒的主要宿主动物和传染源。

此病有明显的地区性和季节性，与鼠类的分布与活动有关。

Ⅰ型HFRS 发病多集于秋冬之间，Ⅱ型则多集中于春夏之间。

HFRS 的传播途径尚未完全肯定，认为可能的途径有3类5种，即动物源性传播（包括通过呼吸道、消化道和伤口3种途径）、虫媒传播和垂直传播。

其中动物源性传播是主要的传播途径，即携带病毒的动物通过唾液、尿、粪便排出病毒污染环境，人或动物通过呼吸道、消化道摄入或直接接触感染动物受到传染。

螨类也可能是该病的传播媒介。

三、致病性与免疫性（一）致病性病毒感染后，对毛细血管内皮细胞及免疫细胞有较强的亲嗜性和侵袭力。

潜伏期一般为两周左右，起病急，发展快。

典型病例具有三大主症：即发热、出血和肾脏损害。

HFRS 的发病机理很复杂，目前一般认为病毒直接作用是发病的始动环节，而免疫病理损伤也起重要作用。

病毒感染造成病毒血症以及全身毛细血管和小血管损伤，引起高热、寒战、乏力、全身酸痛、皮肤和粘膜出现出血点或出血斑，重者还可有腔道或各脏器出血、肾脏损害出现血尿、蛋白尿，电解质紊乱。

广泛的毛细血管和小血管损伤引起的出血、血浆渗出和微循环障碍等造成低血压或休克。

病程早期血液中IgE 水平增高，提示Ⅰ型变态反应可能通过血管活性物质的作用，使小血管扩张，渗出增加。

另外在早期病人体内即可出现大量循环免疫复合物，在血管壁、血小板、肾小球及肾小管上有免疫复合物沉积，血清补体水平下降；血清中也可检出抗基底膜和抗心肌抗体，这些现象表明Ⅲ型和Ⅱ型变态反应造成的免疫病理损伤也参与了HFRS 的致病。

（二）免疫性人对HFRS 病毒普遍易感，但仅少数人发病，大部分人呈现隐性感染状态，特别是Ⅱ型疫区的人群隐性感染率更高。

感染后抗体出现早，发热1～2 天即可检测出IgM 抗体，第7～10 天达高峰；第2～3 天可检测出IgG 抗体，第14～20 天达高峰，IgG 抗体在体内可持续存在30 余年。

近年来的研究结果表明，在不同的抗体成份中，对机体起免疫保护作用的主要是由G1 和G2 糖蛋白刺激产生的中和抗体和血凝抑制抗体，而由N 蛋白刺激产生的特异性抗体在免疫保护中也起一定作用。

细胞免疫在对HFRS 病毒感染的免疫保护中起同样起重要作用，HFRS 病人的抑制性T 细胞功能低下，T c 细胞和B 细胞功能相对增强，一些细胞因子（如白细胞介素1、干扰素、肿瘤坏死因子、白细胞介素2 受体、前列腺素E2 等）的水平在HFRS 的不同病期也有明显变化。

值得指出的是，上述细胞免疫（包括一些细胞因子）与特异性抗体一样，除参与抗感染免疫，具有抵御和清除病毒的作用以外，也参与变态反应，即也可能是造成本病免疫病理损伤的原因之一。

HFRS 病后可获持久免疫力，一般不发生再次感染，但隐性感染产生的免疫力多不能持久。

四、微生物学检查（一）病毒分离病人急性期血液、尸检组织或感染动物的肺、肾等组织均可用于病毒分离，组织需研磨成悬液。

常用Vero-E6 细胞分离培养，培养7～14 天后，用免疫荧光染色法检查细胞内是否有病毒抗原，胞浆内出现黄绿色颗粒荧光为阳性。

也可取检材接种易感动物来分离病毒，常用者为小白鼠乳鼠，通过腹腔或脑内接种，接种后逐日观察动物有无发病或死亡，并定期取动物脑、肺等组织，冰冻切片或将组织研磨成悬液后分别用免疫荧光法或ELISA 检查是否有病毒抗原。

用细胞或动物分离培养阴性者继续盲传，连续三代阴性者方能肯定为阴性。

此外在进行动物实验时采取严格的隔离及防护措施，以防止发生实验室感染。

（二）血清学检查检测特异性IgM 具有早期诊断价值。

根据情况可选用间接免疫荧光法和ELISA ，后者又可分为IgM 捕获法和间接法，其中以IgM 捕捉法的敏感性和特异性为最好。

检测特异性IgG 抗体IgG 抗体出现也较早，维持时间很长，因此需检测双份血清（间隔至少一周），恢复期血清抗体滴度比急性期升高4 倍以上可确诊。

常用检测方法为间接免疫荧光法和ELISA 。

此两种方法还可用于血清流行病学调查。

检测血凝抑制抗体采用血凝抑制试验进行检测，在辅助诊断和流行病学调查中也较常用。

四、防治原则（一）一般预防主要采取灭鼠、防鼠、灭虫、消毒和个人防护等措施。

（二）特异预防目前国内外已初步研制出三类HFRS 疫苗，即纯化鼠脑灭活疫苗（分别由朝鲜、韩国及我国研制）、细胞培养灭活疫苗（包括Ⅰ型疫苗和Ⅱ型疫苗，均由我国研制）和基因工程疫苗（由美国研制）。