气相色谱仪使用方法及实验操作步骤
气相色谱仪的顶空操作步骤
气相色谱仪的顶空操作步骤气相色谱仪(Gas Chromatograph, GC)是一种常用的分离和分析仪器,在化学、药学、食品、环境等领域有广泛应用。
GC的顶空技术是一种样品前处理技术,用于提取和浓缩无机和有机挥发性化合物。
本文将详细介绍气相色谱仪的顶空操作步骤。
一、实验准备1.1检查仪器:确保GC仪器处于正常工作状态,如气源是否充足,连管是否完好等。
1.2准备样品:准备待分析的样品,保证样品质量好,并满足分析的要求。
1.3准备标准溶液:如果需要进行定量分析,需要准备相应的标准溶液。
1.4准备顶空瓶:准备干净的顶空瓶,检查瓶子是否干燥、无污染。
二、顶空操作步骤2.1设置仪器参数:根据样品性质和分析要求,设置好仪器参数,如流速、恒温箱温度等。
2.2连接顶空瓶:使用气密连接装置将顶空瓶连接到色谱柱或分析装置的进样口上。
2.3开启气源:打开压缩空气、氮气或其他推进气体供应,确保气源的压力稳定。
2.4调整气源流量:根据仪器的要求和实际情况,调整气源的流量,一般情况下,推进气体的流量应为10-20 mL/min。
2.5检查顶空瓶:检查顶空瓶的密封性,确保没有样品泄漏。
三、样品顶空操作3.1放入样品:将待分析的样品放入顶空瓶中,一般情况下,样品量应为1-2 mL。
3.2封闭顶空瓶:将顶空瓶的盖子紧密封闭,保证瓶内不会发生任何泄漏。
3.3预冷:将顶空瓶放入恒温箱中,预冷至所需温度。
预冷的温度根据样品的挥发性和分析要求而定,一般为常温或低于常温。
3.4按压释放:在样品预冷的同时,按压释放顶空瓶内的气体,使样品中的挥发性化合物蒸发到顶空瓶的顶部空气中。
3.5等待蒸发:等待一定时间,使得样品中的挥发性化合物充分蒸发到空气中。
3.6采样:使用GC仪器的自动进样装置,将顶空瓶中的顶空气体采样进GC柱进行分析。
四、分析与结果4.1进样条件设置:根据分析要求,设置好GC仪器的进样条件,包括温度、流速、进样方式等。
4.2分析过程:开启色谱仪,进行样品分析。
杭州气相色谱仪操作规程
杭州气相色谱仪操作规程
《杭州气相色谱仪操作规程》
一、实验目的
通过操作杭州气相色谱仪,掌握色谱原理及技术,进行样品的分析和检测。
二、实验材料
1. 杭州气相色谱仪
2. 色谱柱
3. 样品溶液
4. 气源(氢气、氮气、氦气等)
5. 注射器
6. 色谱软件
三、操作步骤
1. 打开色谱仪电源,同时打开氢气、氮气等气源,待色谱仪预热达到工作温度后可进行下一步操作。
2. 将色谱柱固定在色谱仪中,连接好进样口和检测器,并进行气路连接。
3. 调节色谱仪的运行参数,如流速、温度等,根据样品类型和需要进行调整。
4. 将样品溶液用注射器注入到色谱柱的进样口中,注意不要进样过多,避免柱内液相过多而影响分析结果。
5. 启动色谱软件,设置样品分析的参数和检测模式,开始采集数据。
6. 分析结束后,关闭色谱仪电源和气源。
清洁和维护色谱柱
及其他设备。
四、注意事项
1. 操作时应注意色谱仪设备的安全性,避免发生意外事故。
2. 样品溶液的进样量和处理方法应谨慎,以免影响实验结果。
3. 定期保养和维护色谱仪设备,确保其正常运行。
以上就是《杭州气相色谱仪操作规程》,操作人员应严格按照规程进行操作,确保实验的准确性和安全性。
气相色谱仪操作步骤
气相色谱仪操作步骤气相色谱仪(Gas Chromatograph,简称GC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境科学等领域。
下面将详细介绍气相色谱仪的操作步骤,以帮助读者更好地掌握和运用该仪器。
一、准备工作1. 确认气相色谱仪处于正常工作状态,例如检查仪器的电源和气源是否正常连接。
2. 打开气相色谱仪的主机,启动仪器,然后等待一段时间,使仪器温度稳定在操作温度范围内。
3. 检查气相色谱仪的气源,确保气源的压力稳定,并进行必要的调整。
二、样品处理1. 准备样品及溶剂,并按照实验要求进行配制。
2. 将样品溶解于溶剂中,并进行必要的预处理,例如过滤、稀释等。
3. 采用适当的方法,将样品溶液转移至气相色谱仪的进样器中。
三、进样1. 调整进样器的温度和压力,以确保样品能够顺利地进入气相色谱仪的色谱柱中。
2. 设置进样器的进样体积或进样位置,根据需要确定样品的进样量。
四、色谱柱设置1. 选择合适的色谱柱,并确保其完好无损。
2. 将色谱柱安装在气相色谱仪中,并根据需要对色谱柱进行温度和压力的调节。
五、操作参数设置1. 设置气相色谱仪的运行参数,例如温度程序、流动速率、进样模式等。
2. 根据需要,选择合适的检测器和检测器参数。
六、开始分析1. 确保所有的操作参数设置完成后,点击“开始”按钮,启动气相色谱仪的运行。
2. 在分析过程中,观察仪器的运行状态,确保仪器正常工作。
七、数据处理1. 获取气相色谱仪分析的数据,并进行必要的处理。
2. 根据实验要求,对数据进行解读和分析,并形成相应的结论。
八、仪器维护1. 在分析结束后,将仪器设置回初始状态,并进行必要的清洗和保养。
2. 定期检查仪器的性能和状态,确保仪器的正常运行。
气相色谱仪操作步骤是使用气相色谱仪进行样品分析的基本流程。
通过准备工作、样品处理、进样、色谱柱设置、操作参数设置、开始分析、数据处理和仪器维护等步骤的操作,可以获得准确可靠的分析结果,并有效地利用气相色谱仪进行科学研究和实验分析。
气相色谱操作规程
气相色谱操作规程
《气相色谱操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过气相色谱分析技术,掌握样品的分离与检测方法,提高实验者对色谱仪器的操作技能,进一步加深对气相色谱的理论与实践知识。
二、实验原理
气相色谱是利用气相色谱分析仪器对样品进行分离和检测的一种分析方法。
该方法通过样品在色谱柱中的分配和扩散,实现对混合物中各种组分的分离,然后利用检测器进行定量或定性分析。
三、实验步骤
1. 样品制备:将待测样品按照实验要求充分制备,并注明详细标签。
2. 色谱仪器准备:打开气相色谱仪器,进行相关初始化操作,包括检查色谱柱和检测器的清洁程度、连接气源并设置好气流速率和流场温度等。
3. 样品注入:将样品溶液通过进样口注入色谱柱中,注意保持流量均匀。
4. 色谱分离:根据最佳分离条件设定,进行色谱柱温度程序升温、保持和降温,保证样品能够被充分分离。
5. 数据采集和分析:通过色谱仪器数据采集系统采集样品分离结果,利用相关软件进行数据处理和分析。
四、注意事项
1. 实验者需严格遵守化学品安全操作规程,正确佩戴防护装备。
2. 对色谱柱和检测器进行长期维护,保持其功能的稳定。
3. 样品注入时,注意避免造成进样口的污染和堵塞。
4. 在操作过程中,注意观察并记录相关操作和设备的异常情况,及时调整。
五、实验总结
通过本次实验,实验者能够熟练地掌握气相色谱仪器的操作规程,进一步理解气相色谱的理论基础和分析应用,提高了实验者对色谱分析技术的应用能力和操作技能。
气相色谱仪使用方法说明书
气相色谱仪使用方法说明书一、前言气相色谱仪(Gas Chromatography, GC)是一种广泛应用于化学分析领域的仪器,具有高分离能力、分析速度快和检测灵敏度高等特点。
本说明书将详细介绍气相色谱仪的使用方法,以帮助用户正确操作仪器,并保证分析结果的准确性和可靠性。
二、仪器及配件1.仪器:XXX型气相色谱仪2.气源:气相色谱仪需要接入高纯度稳定的氢气、氮气和空气供给装置。
3.色谱柱:色谱柱是气相色谱仪的重要部件,不同的分析需求可能需要不同类型的色谱柱。
使用前需要检查柱子是否损坏或污染,可以进行条件恢复或更换。
4.进样器:气相色谱仪通常配备了进样器,用户需要根据分析目标选择合适的进样方式和进样器类型。
5.检测器:检测器是气相色谱仪的核心组件,可以根据实际需要选择合适的类型和参数。
三、仪器操作步骤以下为一般的气相色谱仪使用方法步骤:1.前期准备1.1 确保气源供应充足并连接正确。
检查氢气、氮气和空气的供应装置,确保气源没有泄漏。
1.2 检查色谱柱的状态。
检查色谱柱是否完好无损,如果有损坏或污染,需进行更换或清洗。
1.3 检查进样器和检测器。
确保进样器和检测器连接稳固,没有松动或漏气。
2.仪器开机2.1 打开气相色谱仪电源开关,待仪器启动正常后,进行进一步的操作。
2.2 启动控制软件,并与仪器建立通讯连接。
3.样品进样3.1 按照分析需要,选择合适的样品进样方式和进样器类型。
手动进样和自动进样是常见的进样方式。
3.2 确保样品进样器和进样口的连接牢固,在进行样品进样前,检查进样器是否已经装好,并调整好相关参数。
3.3 进行样品进样。
根据实验要求,将样品准备好,经过适当的处理或预处理后,将其注入进样器中。
4.方法设定4.1 根据分析要求,设置合适的色谱柱和检测器。
4.2 在控制软件中设定色谱的温度、流速和温度程序等参数。
4.3 进行仪器的初始调试。
在开始正式分析前,运行程序进行初始调试,并根据示意图和结果进行相关参数的调整。
安捷伦气相色谱仪操作规程
安捷伦气相色谱仪操作规程安捷伦气相色谱仪操作规程一、实验目的本实验旨在熟悉和掌握安捷伦气相色谱仪的操作方法,了解色谱仪的常见故障及其处理方法,以提高色谱分析的准确性和可靠性。
二、实验仪器1. 安捷伦气相色谱仪一台2. 气相色谱柱3. 气源和载气瓶4. 样品进样器5. 检测器三、实验步骤1. 打开色谱仪电源,等待仪器启动完成。
2. 检查气源和载气瓶,确保气源充足。
3. 将气相色谱柱固定在色谱仪柱座上,并将柱座连接至进样器。
4. 打开进样器,将待测试样品加入进样器中。
5. 设置进样器的进样时间和进样容量,确保进样量符合分析要求。
6. 在色谱仪的控制面板上设置分析方法,包括温度程序、流速和检测器参数等。
7. 开始进样,将样品注入气相色谱柱进行分离。
8. 监控检测器输出信号,记录峰形和峰面积等数据。
9. 分析结束后,关闭进样器和色谱仪电源,并及时清理进样器和色谱柱。
四、注意事项1. 在操作色谱仪前,务必佩戴防护眼镜和实验手套,确保个人安全。
2. 气源和载气瓶的气压要稳定,确保色谱分析的流速稳定。
3. 进样器要经常清理,以避免污染样品和柱床,影响分析结果。
4. 在设置分析方法时,要根据待测物的性质和要求进行合理设定。
5. 小心操作、轻放仪器,避免对仪器造成损坏。
6. 如遇到色谱仪故障,应及时关闭仪器并联系维修人员处理。
五、常见故障及处理方法1. 色谱柱压力过高:可能是气源压力过高或柱床堵塞,应检查气源压力和清理柱床。
2. 峰形异常:可能是进样量过大或柱床老化,应调整进样量或更换色谱柱。
3. 检测器信号异常:可能是检测器故障或进样器漏气,应检查检测器和进样器。
4. 柱床损坏或破裂:可能是柱温不合适或柱床老化,应修复或更换柱床。
六、实验安全注意事项1. 使用化学品时,注意避免接触皮肤和吸入,加强通风换气。
2. 处理废弃物时,应按规定分类处理。
3. 操作过程中严禁大声喧哗,以免影响他人安全。
4. 实验后要及时清理工作台和仪器设备。
气相色谱仪原理及操作步骤
气相色谱仪原理及操作步骤
一、气相色谱仪的原理
用色谱柱先将混合物分离,然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。
色谱柱的分离原理在于惯用的具有吸附性的色谱柱填料,使得混合物中各组分在色谱柱中的两相间进行分配。
由于各组分的吸附能力不同,因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
二、气相色谱仪的操作步骤如下:
1. 准备工作:检查仪器安全阀是否处于开启状态,确认分析柱安装正确,温度设定在操作手册规定的温度范围内,并检查各部份是否连接完好。
2. 样品溶解:将样品加入溶剂中,采用高速搅拌混匀,以确保样品完全溶解,得到浓缩的溶液。
3. 溶液导入:将溶液加入检测器中,控制流量大小,确保流量的稳定性。
4. 调零:使用空白样品进行调零,确保实验数据准确性。
5. 开始实验:按照实验要求逐次放入样品,并监测色谱图及色谱曲线。
6. 记录数据:记录实验数据,包括色谱图及色谱曲线。
7. 清理仪器:关闭安全阀,拆卸分析柱,清理仪器,确保下次实验的正确进行。
气相色谱仪的使用方法说明书
气相色谱仪的使用方法说明书1. 引言气相色谱仪(Gas Chromatograph, GC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、环境、食品、药物等领域。
本文将详细介绍气相色谱仪的使用方法,包括样品准备、仪器操作、数据分析等方面,旨在帮助用户正确高效地运用气相色谱仪进行分析实验。
2. 实验前准备在进行气相色谱分析之前,需要进行一系列的准备工作:2.1 样品准备样品的准备通常包括样品的收集、提取和预处理等步骤。
确保样品的纯度和完整性对获得准确可靠的分析结果至关重要。
2.2 仪器准备对气相色谱仪进行仔细的检查和准备,确保各部分设备的正常工作。
包括检查进样口、色谱柱、流动相、检测器等部分。
2.3 标准曲线的制备准备一系列已知浓度的标准溶液,用于后续的定量分析。
3. 仪器操作步骤3.1 开机与系统初始化打开气相色谱仪的电源,启动系统软件,进行系统初始化和仪器自检。
3.2 进样口的设置根据不同的样品性质和应用要求,选择合适的进样口类型,如液相进样口或固相进样口。
3.3 色谱柱的选择与更换根据分析的具体要求,选择合适的色谱柱。
更换色谱柱时,需注意操作的规范,避免损坏色谱柱和产生不必要的样品交叉污染。
3.4 流动相的设置选择适合分析物性质和分离要求的流动相,调整流速和温度等参数来优化分离效果。
3.5 检测器的设置根据分析物的性质和检测需求,选择合适的检测器,并根据仪器要求进行相应的设置。
3.6 样品进样将准备好的样品通过进样口进入气相色谱仪进行分析。
在进样过程中,需控制好进样量和速度,确保分析结果的准确性和重复性。
3.7 数据采集和分析根据所选的分析方法和仪器设置,进行数据的采集和记录,并使用适当的数据分析软件对结果进行处理和解读。
4. 数据结果的解读与分析根据气相色谱仪的分析结果,对样品中的目标成分进行定量和定性的解读与分析。
可使用已建立的标准曲线进行定量,或进行峰的识别和峰面积积分计算等操作。
5. 仪器维护和注意事项5.1 仪器的日常维护定期对气相色谱仪进行维护和保养,包括清洁进样口、色谱柱的更换、检测器的检查和标定等。
仪器操作流程气相色谱质谱联用仪的操作流程
仪器操作流程气相色谱质谱联用仪的操作流程气相色谱质谱联用仪(GC-MS)是一种常用的分析仪器,可用于物质的定性和定量分析。
本文将介绍仪器的操作流程,包括仪器的准备工作、样品的制备和进样、仪器参数的设置、分析过程的操作以及数据处理等内容。
一、仪器的准备工作1. 确保仪器的正常运行:检查仪器的电源和气源是否正常,仪器的各部分是否安装牢固。
2. 启动并预热:打开仪器的电源开关,并根据仪器的说明书进行预热,通常需要预热时间为30分钟至1小时。
二、样品的制备和进样1. 样品的制备:根据需要进行样品的提取、浓缩、纯化等操作,确保样品处理过程中不产生干扰物。
2. 进样:将经过处理的样品通过适配器等设备装入注射器中,再将注射器插入进样口,进行样品的进样。
三、仪器参数的设置1. GC参数的设置:根据分析的需要,设置气相色谱的流速、温度程序和气流速率等参数,以获得良好的分离效果。
2. MS参数的设置:设置质谱的扫描范围、离子化方式和质谱分析模式等参数,以获取所需的质谱图谱。
四、分析过程的操作1. 启动仪器:在仪器参数设置好后,启动GC-MS联用仪,待仪器进入工作状态后,进行后续操作。
2. 开始分析:通过软件界面选择相应的方法,并点击开始按钮,仪器将按照预设参数进行分析,直至分析结束。
3. 监控分析结果:实时监控分析过程中的信号强度和峰形等参数,以确保分析结果的准确性和可靠性。
4. 重复分析:若分析结果不符合要求,可进行重复分析或调整仪器参数,直至获得满意的结果。
五、数据处理1. 数据记录:将分析结果保存至计算机或相关储存介质,方便后续的数据处理和数据分析。
2. 数据处理:使用专业的数据处理软件对分析结果进行峰识别、峰面积计算、定性和定量分析等操作。
3. 数据解释:根据分析结果,结合仪器参数和相关知识,解释分析结果所代表的化合物及其性质。
总结:以上是气相色谱质谱联用仪的操作流程。
正确操作仪器,合理设置仪器参数,对样品进行适当的处理和进样,以及准确地进行数据处理和解释,对获得准确、可靠的分析结果非常重要。
气相色谱仪的使用步骤
气相色谱仪的使用步骤
气相色谱仪的使用步骤如下:
1. 准备样品:将要分析的样品准备好,并根据需要进行适当的前处理,比如溶解、稀释或者提取。
2. 样品进样:使用合适的方法将准备好的样品注入到气相色谱仪中。
常见的进样方法包括气相自动进样器、手动进样器以及头空进样器等。
3. 选择气相色谱柱:根据分析目的选择合适的气相色谱柱,考虑分离效果、分离时间、柱温等因素。
4. 设置柱温程序:根据样品的性质和分析要求,设置合适的柱温程序,包括起始温度、升温速率、终止温度等。
5. 选择载气:根据样品的性质和分析目的选择合适的载气,常用的载气有氢气、氮气、氦气等。
6. 设置流速:根据柱子类型、样品性质和分析目的选择合适的气相流速,通常在0.5-10 mL/min之间。
7. 设置检测器参数:根据样品的性质和分析要求,设置合适的检测器参数,包括检测器温度、增益、灵敏度等。
8. 开始分析:启动气相色谱仪,开始分析。
样品将通过进样口进入柱子,在柱子中根据物质的挥发性和亲和性程度发生分离。
9. 数据处理:根据检测器输出的信号,使用相应的数据处理软件对数据进行处理和解析,得到最终的分析结果。
10. 仪器维护:分析完成后,进行仪器的日常维护工作,包括清洁仪器、更换消耗品等。
请注意,以上步骤仅为一般性的使用步骤,具体操作应根据实际仪器的说明书和实验要求进行。
气相色谱使用步骤
气相色谱使用步骤一、样品准备在进行气相色谱分析之前,需要准备好待测样品。
根据不同的分析需求,选择合适的样品处理方法,如萃取、蒸馏、吸附等,以获得纯净的样品。
同时,需要注意样品的浓度和进样量,以保证分析结果的准确性和可靠性。
二、仪器开启在开始分析之前,需要先开启气相色谱仪器的电源和气源,并检查仪器是否处于正常状态。
确认仪器正常后,开始进行后续操作。
三、参数设置根据待测样品的特点和实验要求,设置气相色谱仪的各项参数,如柱温、进样口温度、检测器温度、气体流量等。
在设置参数时,需要考虑样品的性质、分离效果和检测灵敏度等因素。
四、载气选择根据实验需求选择合适的载气,如氢气、氮气、氦气等。
载气的纯度和流量也会影响分析结果的准确性和可靠性,因此需要注意载气的质量和流量控制。
五、样品进样将处理好的样品用微量注射器或自动进样器注入进样口,并保证进样量的准确性和一致性。
进样时要避免产生气泡或污染,同时需要注意注射器的清洁和消毒。
六、开始分离样品进入色谱柱后,开始进行分离操作。
根据待测样品的特点和分离要求,选择合适的色谱柱和分离条件,如柱温、流速等。
在分离过程中,需要注意观察色谱图的峰形和分离效果,并及时调整参数以获得最佳的分离效果。
七、数据采集通过色谱工作站或数据采集系统记录色谱图和相关数据,如峰高、峰面积等。
采集的数据将用于后续的数据处理和分析。
在数据采集过程中,需要注意保证数据的准确性和可靠性。
八、结果分析根据采集的数据进行定量和定性分析,以获得样品的组成和浓度等信息。
在进行结果分析时,需要考虑样品的来源、分析方法的特点和误差范围等因素,以保证分析结果的准确性和可靠性。
九、仪器关闭完成分析后,需要先关闭气相色谱仪的加热系统和载气流量控制器等设备,并检查仪器是否正常关闭。
同时需要注意及时清洗和保养色谱柱等组件,以保证仪器的使用寿命和稳定性。
气相色谱操作规程
气相色谱操作规程气相色谱(Gas Chromatography,GC)是一种常用的物质分析技术,具有分离效果好、分析速度快、准确度高等特点,在化学、药学、环境科学等领域得到广泛应用。
下面是气相色谱操作规程的详细内容:一、实验室准备1.确保实验室内通风良好,气体供应正常且安全。
2.检查气相色谱仪的运行状态,确认温度控制、流速控制等参数正常。
3.检查气相色谱仪的气缸气体储备是否充足,如有需要及时更换。
4.必要时检查色谱柱是否合适、完好无损。
二、样品准备1.根据实验目的选择合适的样品。
2.样品处理时注意避免污染和损害,如需要进行前处理步骤请按照标准程序进行。
3.样品的含量应适当,过高的样品浓度可能对柱产生损害,过低的样品浓度可能导致分离不明显。
三、仪器调试1.打开气相色谱仪电源,确认主机的运行状态。
2.打开色谱仪软件,设置仪器参数,如温度范围、流速等。
3.等仪器达到稳定状态后,进行进样口和柱温的热平衡。
四、进样1.根据实验需要选择合适的进样方式:液相进样、气相进样或固相微萃取进样等。
2.根据进样方式配置进样装置,确保进样量准确。
3.进样前务必清洗进样装置,防止样品交叉污染。
五、气路准备1.确认色谱柱和检测器的连接状态良好,防止泄漏。
2.检查气体流动的管路是否通畅且无杂质,必要时可使用气路吹扫设备进行清洗。
3.检查气液分离器和其他气路部件的正常工作,防止气体漏出。
六、实验步骤1.打开气体阀门,调节气流速度以及进样口的温度。
2.开始进样后,根据进样量和柱的截留时间调节进样速度。
3.实时监测检测器的信号,观察峰形、峰高及峰面积等参数。
4.根据实验需要可以进行多次进样或使用不同温度梯度。
七、数据处理1.将色谱仪得到的数据导入计算机,使用相应的数据处理软件进行数据分析。
2.结果计算前,对数据进行必要的校正,如去除基线漂移、背景信号等。
3.对数据进行定性分析和定量分析,并根据需要绘制曲线和图表。
八、实验结束1.关闭进样阀门和气体阀门,关闭分离柱的温度控制。
气相色谱仪操作规程
气相色谱仪操作规程气相色谱仪(Gas Chromatograph, GC)是一种常用的分离和检测技术,广泛应用于化学分析、环境监测、食品安全及医药等领域。
为了确保色谱仪的正常运行并获得准确的分析结果,需要遵循一定的操作规程。
以下是气相色谱仪操作规程的详细内容:1.实验前准备a.检查气相色谱仪的仪器及附件是否完好无损,如进样口、柱温控制系统、检测器等。
b.确保色谱仪的气源供应正常,并检查气源压力是否稳定。
c.准备好实验所需的溶剂和样品,并确保其纯度和浓度符合要求。
d.清洗和烘干所使用的色谱柱,并安装在色谱仪中。
2.仪器启动与调试a.打开色谱仪主电源,并启动系统软件。
b.检查色谱仪的液晶屏是否显示正常,确认系统软件是否能正常运行。
c.若色谱仪处于长时间未使用状态,应进行预热处理,以使温度稳定。
d.对色谱仪进行仪器校正,确保温度和流量控制系统的准确性。
e.检查气路系统的漏气情况,确保进样口、色谱柱等都没有泄漏的现象。
3.样品进样a.将待分析样品制备好,并用纯溶剂稀释至合适浓度。
b.将样品注入进样器,并设置合适的进样体积。
c.充分冲洗进样器以避免样品残留。
d.确保进样器进样口与色谱柱连接良好,避免泄漏。
4.柱温控制a.设置合适的柱温,以确保所选的柱温能够分离样品中的目标物质。
b.启动柱温控制系统,并等待柱温达到设定温度。
5.气相流动a.确认气源的压力和流量稳定,并通过检测器观察气相流动情况。
b.调节气源的压力和流量,以确保色谱柱中的气相流动速度稳定。
6.检测器操作a.设置检测器的相关参数,如放大倍数、增益等。
b.启动检测器系统,并等待稳定。
c.若使用质谱检测器,需进行样品库普通库与实时库的校准。
7.数据获得与分析a.在色谱仪软件中设置适当的实验参数,如流速、温度程序等。
b.启动数据采集,并观察色谱图的生成情况。
c.根据色谱图的峰形和峰面积,进行目标物质的定性定量分析。
d.撰写实验记录,并整理和保存获得的数据和分析结果。
气相色谱仪的操作说明书
气相色谱仪的操作说明书一、仪器概述气相色谱仪是一种常用的分析仪器,在化学、生物、环境等领域有广泛的应用。
它可以通过气相色谱法对复杂的混合物进行分离、定性、定量分析。
本操作说明书将详细介绍气相色谱仪的操作步骤和注意事项,以帮助用户准确、高效地使用该仪器。
二、仪器准备1. 确保气相色谱仪已经正确连接电源,并待仪器完全启动。
2. 检查气相色谱仪的气源供应是否正常,检查气瓶压力是否足够。
3. 检查色谱柱是否正确安装并连接好。
三、样品准备1. 根据需要进行样品的准备和预处理,确保样品质量和稳定性。
2. 选择适当的溶剂将样品溶解或稀释至适当浓度。
3. 若样品需要进一步提取或衍生化处理,请使用合适的方法进行。
四、样品注射1. 打开气相色谱仪软件,进入样品注射界面。
2. 将样品注射器插入进样口,并调整进样量和进样速度。
3. 注意避免气泡进入样品注射器,以免影响结果准确性。
五、仪器参数设定1. 在气相色谱仪软件中设置适当的方法参数,如柱温、流速、进样量等。
2. 根据样品性质和需要设定检测器的相关参数,如检测器的温度、增益等。
六、开始分析1. 点击软件中的“开始分析”按钮,仪器将开始进行色谱分离。
2. 观察色谱图,并根据需要进行峰识别和数据分析。
3. 如需再次分析样品,请确保注射器和色谱柱已清洗干净。
七、数据处理与结果分析1. 将数据导出到数据处理软件进行进一步的数据处理和分析。
2. 根据结果对样品进行定性、定量分析,并进行结果报告。
八、仪器关机1. 结束实验后,关闭气相色谱仪软件。
2. 将色谱柱进行适当的清洗和保养,确保其长期稳定使用。
3. 关闭气源和电源开关,完成仪器的关机。
使用气相色谱仪时需要注意以下事项:1. 操作过程中要注意安全,避免接触有毒有害物质,并正确佩戴个人防护设备。
2. 柱头和进样口要定期清洗,避免交叉污染和保持良好的色谱分离效果。
3. 注意样品的保存和处理,避免样品质量的变化对结果产生影响。
4. 定期进行仪器的维护和保养,如更换柱子、检修检测器等。
气相色谱仪使用方法及实验操作步骤
气相色谱仪使用方法及实验操作步骤
一、打开氢气发生器和空气发生器电源;
二、待空气压力达到0.4MPa后,打开氮气发生器电源;
三、打开气相色谱仪电源(检查仪器右侧各压力表是否在初始值,如果压力不是初始值,应该检查气路是否有异常,如果仪器超过一周没使用,开气相色谱电源前,氮气发生器应工作1小时以上);
四、设置各路温度参数,仪器开始升温;
五、启动色谱工作站,待仪器温度均达到设定值时,打开点火开关;
六、确认点着火以后,关闭点火开关,待基线稳定时,就可以开始进样分析了;
七、一天的分析完成后,要关机时,先关氢气发生器电源;
八、设置柱箱温度参数至室温,其他各路关闭控温状态;
九、待柱箱温度降至50℃时,关掉气相色谱仪电源;
十、关掉空气发生器电源,关闭氮气发生器电源。
注:1、载气1压力表无压力,严禁给仪器升温;
2、检测器温度不超过100℃,严禁点火;
3、柱箱设定温度严禁超过260℃,否则易损坏色谱柱;
4、柱箱在高温时(超过80℃),严禁打开柱箱门;
5、色谱仪使用半个月后,应在正常开机的条件下,连接吸附管,把六通阀旋至进样状态,升温老化一次,老化条件为(柱箱250℃,进样220℃,检测280℃)。
气相色谱仪的操作流程及注意事项
气相色谱仪的操作流程及注意事项一、操作流程:1.准备工作:a.检查气源:确认稳定的载气和氢气等气源是否充足,检查气源压力是否稳定。
b.准备标准物质:根据实验需要,根据需要,分别准备标准样品和待测样品。
c.准备色谱柱:检查色谱柱的状态,如是否损坏或需要更换。
d.准备进样器:检查进样器的情况,例如是否干净,是否需要更换。
2.组装仪器:a.连接气源:连接气瓶到气源连接口,确保密封良好。
b.连接载气和氢气:将载气和氢气连接到色谱仪的气道上。
c.连接进样器:将进样器插入气相色谱仪中并正确连接。
3.稳定系统:a.打开电源:打开气相色谱仪的电源。
b.打开制冷器:打开制冷器,确保色谱柱温度稳定。
c.调整气流:根据实验需要,调整气流速率。
4.校准仪器:a.校准进样器:使用标准样品校准进样器,确保进样量的准确性。
b.校准检测器:使用标准样品校准检测器,确保检测器的响应准确。
5.进行样品测试:a.进样:将标准样品和待测样品分别注入进样器。
b.开始运行:根据实验需要,设置合适的色谱程序,包括温度梯度和流速等参数。
c.检测和记录:色谱仪会自动分离和检测混合物中的成分,结果会以柱状图的形式显示。
记录结果并分析。
6.分析结果:a.数据处理:将柱状图的峰面积与峰面积或浓度进行对比。
b.解释结果:分析峰的相对保留时间和相对峰面积,以确定化合物的身份和浓度,并与标准物质进行比较。
二、注意事项:1.安全注意事项:a.气瓶使用:确保气瓶使用正确,并根据规定的操作步骤连接和使用气瓶。
b.实验操作:遵守实验室安全操作规程,注意防止化学品的溅出或挥发。
c.色谱柱处理:小心处理色谱柱,避免碰撞和损坏。
d.废物处理:将废物处理得当,按照规定的程序进行处理。
2.仪器操作注意事项:a.初始条件:在进行实验前,确保色谱仪处于稳定状态,包括温度梯度和流速等参数。
b.标准物质:选择准确的标准物质进行校准,确保结果的准确性。
c.进样量:根据样品浓度和进样器容量,选择适当的进样量,避免进样过多或过少。
气相色谱仪操作步骤
气相色谱仪操作步骤气相色谱(Gas Chromatography,GC)是一种将化学物质分离、鉴定和定量的方法。
它基于样品挥发性的气体分离原理,通过样品与固定相互作用,不同化学物质在气相色谱柱中传递速度不同而分离出来。
气相色谱仪操作步骤如下:1.准备工作a.打开气相色谱仪电源,检查仪器的状态是否正常。
b.开启气源,包括载气(通常为氢气、氦气或氮气)和零空气(纯净气)。
调节气压使其稳定在合适的范围内。
c.打开气相色谱仪的耗气物流量计,确保载气和零空气的流量合适。
d.打开样品进样口,准备好待测样品。
2.调整气相色谱仪参数a.打开气相色谱仪的控制软件,连接仪器并进行初始化。
b.设置柱温和检测器温度。
根据待测化合物的性质和柱子类型,确定合适的温度范围。
c.切换流量控制模式到压力控制模式。
根据柱子类型和样品类型,设置合适的进样量和进样速度。
3.样品进样a.准备样品注射器。
将样品加入注射器的样品室,并将样品放置在进样口上方。
b.打开进样阀,将样品注入色谱柱。
确保进样量均匀且不会超过柱子的容量。
4.柱温程序a.启动柱温,调节到设定的温度。
在温度变化过程中,观察色谱图的变化,并根据需要进行调整。
b.开始样品分离过程。
样品进入色谱柱后,各组分开始按照它们的挥发性和相互作用性质分离。
5.检测器设置a.确定使用的检测器类型(如火焰离子化探测器,质谱仪等)。
b.设置检测器的相关参数,如增益、阈值等。
确保检测器处于合适的状态,并能够检测到样品的组分。
c.观察检测器输出的信号,并记录下色谱图。
6.数据分析a.通过观察色谱图,确定各组分的保留时间。
保留时间是组分在柱子中传递所需的时间。
b.根据标准品或标准曲线,对样品进行定量分析。
计算出各组分的浓度或含量。
7.清洗和保养a.在分析结束后,关闭进样口和进样阀,切断气源。
b.清洗色谱柱。
使用合适的溶剂反流洗涤色谱柱,帮助去除残留样品和杂质。
c.关闭仪器并进行日常保养,如更换流量计的吸收剂和泄漏检测器的检漏液。
7890A气相色谱仪操作规程
7890A气相色谱仪操作规程一、实验目的本实验操作规程旨在指导使用者正确地操作7890A气相色谱仪,保证实验结果的准确性和可重复性。
二、实验前准备1.安全防护:佩戴实验室规定的防护手套和眼镜。
2.仪器检查:检查7890A气相色谱仪的外观是否完好,各部分接口是否连接牢固,并确保仪器处于正常工作状态。
3.样品准备:准备待测样品,并按照实验需求进行必要的前处理。
三、仪器操作步骤1.打开电源:按下电源开关,待仪器进入自检程序后,显示屏上将显示仪器的型号及序列号等信息。
2.系统初始化:按照仪器操作界面上的提示,选择相应的系统初始化选项,等待系统自检完成。
3.气路准备:将气源连接到气相色谱仪上,并打开相关气源开关。
根据实验需求,选择合适的气路计算机程序设置,并等待气路稳定。
4.标样准备:根据实验需要配置标样。
将标样溶液注入进样瓶,并将进样瓶插入进样器。
进入仪器操作界面,选择进样程序,注射标样。
5.数据处理:启动数据处理软件,将仪器上获取的数据通过计算机进行处理和分析。
6.关机操作:实验结束后,关闭气源和电源开关,进行仪器的常规保养和清洁。
四、实验注意事项1.仪器保养:定期对7890A气相色谱仪进行常规保养和维护,保持仪器的稳定性和准确性。
2.样品处理:样品处理过程中应注意操作的规范性和准确性,避免样品受到污染或损坏。
3.数据处理:数据分析时应使用合适的方法和软件进行处理,保证结果的可靠性和准确性。
4.安全操作:实验过程中应遵守实验室的相关安全操作规程,注意使用防护措施。
5.清洁卫生:使用完后要及时清洗和消毒相关试剂瓶和仪器部件,保持实验环境的清洁卫生。
五、常见故障排除1.仪器无法启动:检查电源连接是否正常,并确认电源开关是否打开。
2.气路不稳定:检查气源是否正常供应,并检查气源管路连接是否牢固。
3.数据采集异常:检查数据处理软件和计算机的连接是否正常,并检查仪器是否处于正常工作状态。
4.小峰信号异常:检查进样瓶是否插入正确,并检查进样量和进样速度是否符合设定要求。
气相色谱仪使用方法及实验操作步骤
液相色谱仪、气相色谱仪、原子吸收分光光度计、红外光谱仪、核磁共振、原子发射光谱等分析仪器气相色谱仪使用方法及实验操作步骤:A、打开氮气、氢气、空气发生器的电源开关(或氮气钢瓶总阀),调整输出压力稳定在0.4Mpa左右(气体发生器一般在出厂时已调整好,不用再调整)。
B、打开色谱仪气体净化器的氮气开关转到“开”的位置。
注意观察色谱仪载气B的柱前压上升并稳定大约5分钟后,打开色谱仪的电源开关。
C、设置各工作部温度。
TVOC分析的条件设置:(a)柱箱:柱箱初始温度50℃、初始时间10min、升温速率5℃/min、终止温度250℃、终止时间10min; (b)进样器和检测器:都是250℃。
脂肪酸分析时的色谱条件:(a)柱箱:柱箱初始温度140℃、初始时间5min、升温速率4℃/min、终止温度240℃、终止时间15min; (b)进样器温度是260℃,检测器温度是280℃。
D、点火:待检测器(按“显示、换档、检测器”可查看检测器温度)温度升到150℃以上后,打开净化器上的氢气、空气开关阀到“开”的位置。
观察色谱仪上的氢气和空气压力表分别稳定在0.1Mpa 和0.15Mpa左右。
按住点火开关(每次点火时间不能超过6~8秒钟)点火。
同时用明亮的金属片靠近检测器出口,当火点着时在金属片上会看到有明显的水汽。
如果在6~8秒时间内氢气没有被点燃,要松开点火开关,再重新点火。
在点火操作的过程中,如果发现检测器出口内白色的聚四氟帽中有水凝结,可旋下检测器收集极帽,把水清理掉。
在色谱工作站上判断氢火焰是否点燃的方法:观察基线在氢火焰点着后的电压值应高于点火之前。
E、打开电脑及工作站(通道一分析脂肪酸,通道二分析碘),打开一个方法文件:脂肪酸分析方法或碘分析方法。
显示屏左下方应有蓝字显示当前的电压值和时间。
接着可以转动色谱仪放大器面板上点火按钮上边的“粗调”旋钮,检查信号是否为通路(转动“粗调”旋钮时,基线应随着变化)。
待基线稳定后进样品并同时点击“启动”按钮或按一下色谱仪旁边的快捷按钮,进行色谱数据分析。
气相色谱仪操作流程
气相色谱仪操作流程气相色谱仪是一种常用的分析仪器,在化学、环境科学、生物医药等领域有广泛的应用。
本文将介绍气相色谱仪的操作流程,以帮助使用者正确、高效地进行实验。
一、仪器准备在使用气相色谱仪前,首先需要准备好实验所需的仪器和材料。
1. 器材准备:将需要使用的色谱柱、进样针、色谱峰分离器等器材准备好,并确保其完好无损。
2. 拉伸列:将色谱柱拉伸至合适的长度,通常为3-5米,确保柱内不含气泡。
3. 清洗柱:使用适当的溶剂清洗色谱柱,去除表面的杂质和残留物。
二、仪器启动1. 电源开启:将气相色谱仪接通电源,并确保主机和色谱仪各部分的电源灯正常亮起。
2. 仪器检测:进行系统自检,检查各个部件是否正常工作,如进样器、稳定器、检测器等。
3. 参数设置:根据实验需要,设置气相色谱仪的温度、流速、进样体积等参数,确保实验条件的准确性。
三、样品处理1. 样品制备:将待测样品按照实验要求进行适当的前处理,如提取、浓缩、纯化等,以获得可靠和准确的分析结果。
2. 样品进样:使用进样针将处理好的样品吸取一定体积,然后通过进样器导入色谱柱中。
3. 进样模式选择:根据实验要求,选择合适的进样方式,如进样体积定量、进样时间定量或进样浓度定量。
四、分离分析1. 柱温控制:根据不同的样品和分析要求,将色谱柱的温度设置为合适的数值,以实现样品成分的分离。
2. 气路调节:根据实验要求,调整气相色谱仪的气路,如载气的流速、压力等,以确保样品能在色谱柱中有效地进行分离和检测。
3. 检测器设置:根据样品的特性和分析目的,选择合适的检测器,并进行相应的参数设置,如增益、灵敏度等。
4. 数据采集:启动气相色谱仪的数据采集系统,开始记录样品的信号响应,并实时监测和记录色谱峰的出现情况。
五、结果解析1. 色谱峰鉴定:根据样品分离出的色谱峰的相对保留时间和特定的检测器响应,对分析结果进行鉴定和确认。
2. 峰面积计算:对峰面积进行积分计算,以获得样品中各组分的相对含量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
液相色谱仪、气相色谱仪、原子吸收分光光度计、红外光谱仪、核磁共振、原子发射光谱等分析仪器气相色谱仪使用方法及实验操作步骤:A、打开氮气、氢气、空气发生器的电源开关(或氮气钢瓶总阀),调整输出压力稳定在0.4Mpa左右(气体发生器一般在出厂时已调整好,不用再调整)。
B、打开色谱仪气体净化器的氮气开关转到“开”的位置。
注意观察色谱仪载气B的柱前压上升并稳定大约5分钟后,打开色谱仪的电源开关。
C、设置各工作部温度。
TVOC分析的条件设置:(a)柱箱:柱箱初始温度50℃、初始时间10min、升温速率5℃/min、终止温度250℃、终止时间10min; (b)进样器和检测器:都是250℃。
脂肪酸分析时的色谱条件:(a)柱箱:柱箱初始温度140℃、初始时间5min、升温速率4℃/min、终止温度240℃、终止时间15min; (b)进样器温度是260℃,检测器温度是280℃。
D、点火:待检测器(按“显示、换档、检测器”可查看检测器温度)温度升到150℃以上后,打开净化器上的氢气、空气开关阀到“开”的位置。
观察色谱仪上的氢气和空气压力表分别稳定在0.1Mpa 和0.15Mpa左右。
按住点火开关(每次点火时间不能超过6~8秒钟)点火。
同时用明亮的金属片靠近检测器出口,当火点着时在金属片上会看到有明显的水汽。
如果在6~8秒时间内氢气没有被点燃,要松开点火开关,再重新点火。
在点火操作的过程中,如果发现检测器出口内白色的聚四氟帽中有水凝结,可旋下检测器收集极帽,把水清理掉。
在色谱工作站上判断氢火焰是否点燃的方法:观察基线在氢火焰点着后的电压值应高于点火之前。
E、打开电脑及工作站(通道一分析脂肪酸,通道二分析碘),打开一个方法文件:脂肪酸分析方法或碘分析方法。
显示屏左下方应有蓝字显示当前的电压值和时间。
接着可以转动色谱仪放大器面板上点火按钮上边的“粗调”旋钮,检查信号是否为通路(转动“粗调”旋钮时,基线应随着变化)。
待基线稳定后进样品并同时点击“启动”按钮或按一下色谱仪旁边的快捷按钮,进行色谱数据分析。
分析结束时,点击“停止”按钮,数据即自动保存。
F、关机程序:首先关闭氢气和空气气源,使氢火焰检测器灭火。
在氢火焰熄灭后再将柱箱的初始温度、检测器温度及进样器温度设置为室温(20-30℃),待温度降至设置温度后,关闭色谱仪电源。
最后再关闭氮气。
高效液相色谱我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表:鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。
三、色谱法分类 (3)四、色谱分离原理 (3)II.基本概念和理论 (5)一、基本概念和术语 (5)二、塔板理论 (8)三、速率理论(又称随机模型理论) (9)III.HPLC系统 (10)一、输液泵 (11)二、进样器 (13)三、色谱柱 (14)四、检测器 (17)五、数据处理和计算机控制系统 (20)六、恒温装置 (20)IV.固定相和流动相 (20)一、基质(担体) (20)二、化学键合固定相 (22)三、流动相 (23)1.流动相的性质要求 (23)2.流动相的选择 (24)3.流动相的pH值 (24)4.流动相的脱气 (25)5.流动相的滤过 (25)6.流动相的贮存 (26)7.卤代有机溶剂应特别注意的问题 (26)8.HPLC用水 (26)V.HPLC应用 (27)一、样品测定 (27)二、方法研究 (27)附件:高效液相色谱法(HPLC)复核细则 (28)一、对起草单位的要求: (28)二、对复核单位的要求: (28)二、HPLC的特点和优点HPLC有以下特点:高压——压力可达150~300 Kg/cm2。
色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。
高速——流速为0.1~10.0 ml/min。
高效——可达5000塔板每米。
在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。
同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:速度快——通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。
柱子可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。
样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
三、色谱法分类按两相的物理状态可分为:气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。
气相色谱法适用于分离挥发性化合物。
GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC),其中以GLC应用最广。
液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。
LC同样可分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。
此外还有超临界流体色谱法(SFC),它以超临界流体(界于气体和液体之间的一种物相)为流动相(常用CO2),因其扩散系数大,能很快达到平衡,故分析时间短,特别适用于手性化合物的拆分。
按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、排阻色谱法(EC,又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、凝胶渗透色谱法(GPC)和亲和色谱法。
(此外还有电泳。
)按操作形式可分为纸色谱法(PC)、薄层色谱法(TLC)、柱色谱法。
四、色谱分离原理高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。
1.液固色谱法使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。
分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。
常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。
适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。
常用于分离同分异构体。
2.液液色谱法使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。
分离过程是一个分配平衡过程。
涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。
由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。
现在多采用的是化学键合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。
液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。
正相色谱法采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。
常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
反相色谱法一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。
适用于分离非极性和极性较弱的化合物。
RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。
随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。
为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。
但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。
有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。
正相色谱法与反相色谱法比较表正相色谱法反相色谱法固定相极性高~中中~低流动相极性低~中中~高组分洗脱次序极性小先洗出极性大先洗出从上表可看出,当极性为中等时正相色谱法与反相色谱法没有明显的界线(如氨基键合固定相)。
3.离子交换色谱法固定相是离子交换树脂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基(称阳离子交换树脂)或季氨基(阴离子交换树脂)。
被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。
缓冲液常用作离子交换色谱的流动相。
被分离组分在离子交换柱中的保留时间除跟组分离子与树脂上的离子交换基团作用强弱有关外,它还受流动相的pH值和离子强度影响。
pH值可改变化合物的解离程度,进而影响其与固定相的作用。
流动相的盐浓度大,则离子强度高,不利于样品的解离,导致样品较快流出。
离子交换色谱法主要用于分析有机酸、氨基酸、多肽及核酸。
4.离子对色谱法又称偶离子色谱法,是液液色谱法的分支。
它是根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子对化合物后,在非极性固定相中溶解度增大,从而使其分离效果改善。
主要用于分析离子强度大的酸碱物质。
分析碱性物质常用的离子对试剂为烷基磺酸盐,如戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等。
另外高氯酸、三氟乙酸也可与多种碱性样品形成很强的离子对。
分析酸性物质常用四丁基季铵盐,如四丁基溴化铵、四丁基铵磷酸盐。
离子对色谱法常用ODS柱(即C18),流动相为甲醇-水或乙腈-水,水中加入3~10 mmol/L的离子对试剂,在一定的pH值范围内进行分离。
被测组分保时间与离子对性质、浓度、流动相组成及其pH值、离子强度有关。
5.排阻色谱法固定相是有一定孔径的多孔性填料,流动相是可以溶解样品的溶剂。
小分子量的化合物可以进入孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,直接随流动相流出。
它利用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完成分离。
常用于分离高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质、核酸等。
II.基本概念和理论一、基本概念和术语1.色谱图和峰参数Ø色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。
Ø基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。
一般应平行于时间轴。
Ø噪音(noise)——基线信号的波动。
通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
Ø漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。
主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
Ø色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。
流出曲线上的突起部分。
正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss 曲线)。
不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。