干细胞体外培养概述74页PPT
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干细胞技术ppt课件
体细胞。在有些情况下，这两个概念是一样的。
祖细胞分别存在于生物的各种成体组织中，负
责组织损伤后的修复再生过程。在损伤发生后，祖
细胞可以被动员激活，大量增殖并迁移到受损部位，
分化成成熟的细胞，替换受损的组织。
在人体的多种组织器官中都已鉴定到相应的祖
细胞，例如：血液祖细胞、皮肤祖细胞、小肠祖细
胞、肺脏祖细胞等等。由于祖细胞具有帮助组织器 官修复再生的“神奇”功能，因此科学家们正尝试 培养祖细胞并将其移植到患者体内，用来治疗多种 退行性以一种特定的方式呈 现出来，才能发挥它们的作用
发展一种成功的干细胞疗法，最大的困难之一是，如何
让这些干细胞按照我们所需要的方式表现出来，困难之
二是，一旦干细胞移植进入体内，怎样才能让它们以一 种正确的方式与体内其它细胞整合与发挥功能。例如， 为了治疗许多神经系统的疾病，干细胞植入体内后，需 要成长为特定类型的神经元细胞。并且它们也需要知道
2. 迄今被广泛接受和疗效确定的干细胞疗法很少
已被严格的临床试验所证实的干细胞所能治疗的疾病类 型仍然非常有限。 疗效最确定和最广泛使用的干细胞疗法是：造血干细胞 移植用于治疗血液系统和免疫系统疾病，或者用于特定癌症 治疗所造成的血液系统损伤的修复治疗。 对于骨、软骨、皮肤和角膜疾病或损伤的再生和修复治 疗，可以使用来源于这些特定组织的干细胞。 这些干细胞疗法是被医学界公认为安全和有效的，也是 国家所允许的合法干细胞治疗，可以收费的。 还有就是近年来刚批准的免疫细胞治疗癌症的，主要是 DC-CIK免疫细胞，严格说还不能算是真正的干细胞。
对称分裂
非对称分裂 • 干细胞与祖细胞
细胞在彻底分化前，能转化成某种中间细胞， 这种中间细胞被称作祖细胞或前体细胞。 与干细胞不同，祖细胞的分化具有更多的明确 性，也就是说，只能分化为一些目标细胞。它们另 外一个最重要的区别是：干细胞可以无限增殖，而
细胞生物学实验课-76页PPT资料
显微镜下可发现细胞回缩变圆，细胞间隙增大，此时应立 即终止消化
加入完全培养基5mL，用吸管反复吹打 计数板计数 分瓶培养
细胞的消化传代方法
生长细胞形态
四、作业与思考
1．简述细胞传代培养的操作程序及注意事项。 2．细胞培养获得成功的关键要素是什么? 3．简述体外培养细胞的形态特征及其生长阶段。 4．绘制细胞生长曲线图。 5．绘制细胞分裂指数图。
4、金属器材的清洗处理方法 金属器材的清洗处理方法 纸擦去表面的油脂
洗衣粉煮沸或用1%碳酸氢钠化传代方法
吸除或倒掉旧培养液
加入2mL，无钙、镁PBS，漂洗一次后倒掉 加入1mL消化液（0.25%胰蛋白酶或0.02%EDTA或混合液）
肉眼可观察到“薄膜”现象时，倒掉消化液 继续作用2～3分钟
分别在5min、15min、20min观察细胞融合
细胞融合
2、PCC诱导和观察
90分钟后离心弃上清 加入0.075mol/lKCl8ml
混匀37℃25分钟 加入1ml固定液混匀离心弃上清
加7ml固定液固定20min 离心弃上清加0.5ml固定液 滴片（冰、高、烤）Giemsa染色12min
水冲、晾干、镜检
细胞工程实验
新乡医学院生命科学实验教学中心
课程组成员：杨慈清 、李虎、王红霞、许重洁
办公电话：3029114
目录
实验一 动物细胞的培养 实验二 细胞融合技术与染色体提前凝集标本制 备实验三 小鼠MEF饲养层的制备 实验四 MS培养基的配制和愈伤组织诱导 实验五 原生质体的分离、纯化和活力鉴定
实验一 动物细胞的培养
显微镜下的培养细胞
三、实验方法
方法
1、玻璃器材的清洗处理方法 2、塑料器材的清洗处理方法 3、橡皮器材的清洗处理方法 4、金属器材的清洗处理方法 5、细胞的消化传代方法
加入完全培养基5mL，用吸管反复吹打 计数板计数 分瓶培养
细胞的消化传代方法
生长细胞形态
四、作业与思考
1．简述细胞传代培养的操作程序及注意事项。 2．细胞培养获得成功的关键要素是什么? 3．简述体外培养细胞的形态特征及其生长阶段。 4．绘制细胞生长曲线图。 5．绘制细胞分裂指数图。
4、金属器材的清洗处理方法 金属器材的清洗处理方法 纸擦去表面的油脂
洗衣粉煮沸或用1%碳酸氢钠化传代方法
吸除或倒掉旧培养液
加入2mL，无钙、镁PBS，漂洗一次后倒掉 加入1mL消化液（0.25%胰蛋白酶或0.02%EDTA或混合液）
肉眼可观察到“薄膜”现象时，倒掉消化液 继续作用2～3分钟
分别在5min、15min、20min观察细胞融合
细胞融合
2、PCC诱导和观察
90分钟后离心弃上清 加入0.075mol/lKCl8ml
混匀37℃25分钟 加入1ml固定液混匀离心弃上清
加7ml固定液固定20min 离心弃上清加0.5ml固定液 滴片（冰、高、烤）Giemsa染色12min
水冲、晾干、镜检
细胞工程实验
新乡医学院生命科学实验教学中心
课程组成员：杨慈清 、李虎、王红霞、许重洁
办公电话：3029114
目录
实验一 动物细胞的培养 实验二 细胞融合技术与染色体提前凝集标本制 备实验三 小鼠MEF饲养层的制备 实验四 MS培养基的配制和愈伤组织诱导 实验五 原生质体的分离、纯化和活力鉴定
实验一 动物细胞的培养
显微镜下的培养细胞
三、实验方法
方法
1、玻璃器材的清洗处理方法 2、塑料器材的清洗处理方法 3、橡皮器材的清洗处理方法 4、金属器材的清洗处理方法 5、细胞的消化传代方法
脂肪干细胞的体外培养PPT讲稿
脂肪干细胞成脂分化
ASC在特定促进因素下可分化为脂肪细胞，长期培养仍可维持此种分化能力。 脂肪细胞分化过程大致如下：
（1）脂肪干细胞向脂肪细胞定向分化，形成脂肪母细胞（一种尚未出现脂滴的 梭形细胞）；（2）脂肪母细胞经过生长抑制、克隆性增殖，形成前体脂肪细胞 （此时细胞刚开始出现脂滴）；（3）前体脂肪细胞经过生长抑制、克隆性增殖 和一系列基因表达的变化，形成不成熟脂肪细胞或多室脂肪细胞（内含大量小脂 滴）；（4）多室脂肪细胞随着脂肪在细胞中的沉积，小脂滴逐渐汇集成一个大 脂滴充满脂肪细胞的大部分，形成成熟脂肪细胞或单室脂肪细胞，成为成熟的脂 肪细胞。
Zuk等认为，ASC可能由多种异源性细胞构成，其中包括内皮细胞、成纤维细
胞、平滑肌细胞以及前体脂肪细胞等。现有ASC主要由成纤维细胞以及来自间 叶组织的细胞构成，仅伴有少量内皮细胞与平滑肌细胞。上述细胞在ASC中的 含量甚低，不可能定向培养分化为其他组织细胞，但进一步确认和识别真正的 ASC的表面蛋白及其基因仍是必要的。
间充质干细胞没有特异的表面标志已得到公认。免疫组化染色和流式细胞仪检
测等免疫表型的结果对确认脂肪干细胞有辅助作用，但鉴定脂肪干细胞的最好 方法是进行多系定向诱导，并进行相应检测以确定诱导成功。
脂肪干细胞的表面标记
a)粘附分子：ADAS细胞始终表达tetraspan蛋白(CD9)、整合素β1(CD29)和 α4(CD49 d)；细胞间粘附分子1(ICAM 1，CD54)、endoglin(cd102)、血管细胞 粘附分子(VCAM，CD106)及活化的淋巴细胞粘附分子(ALCAM，CD166)。但不表 达神经细胞粘附分子(NCAM，CD56)、细胞间粘附分子3(ICAM-3，CD50)、整合 素αb(CD11b)和β2(CD18)及内皮选择蛋白(E selectin，CD62)； b)分子受体：可表达透明质酸盐(CD44)和转铁蛋白(CD71)的受体； c)细胞外基质蛋白和糖蛋白：ADAS细胞能生成Ⅰ和型胶原、骨桥蛋白、ostenectin、 Thy-1(CD90)和MUC-18(CD146)； d)肌蛋白：能表达平滑肌细胞内的肌动蛋白和波形蛋白；e)造血细胞标记：不表达 造血细胞标志物CD14、CD31或CD45； f)补体调节蛋白：确定能表达衰变加速因子(CD55)和补体蛋白； g)组织相容性抗原：表达类组织相容性蛋白HLA-ABC，而不表达类蛋白HLA-DR。
干细胞概述ppt课件
8
9
干细胞是目前人类组织器官功能再生的唯一希望
10
Part 1 干细胞
干 细 胞 （ Stem-cell ） 即 为 起
源细胞，是指尚未发育成熟的细胞， 它具有多分化潜能和自我复制的功能 ，在特定条件下，可以分化成不同的 功能细胞，形成多种组织和器官。
干细胞形态
干细胞分类
✓ 按分化能力可分为全能干细胞 (totipotent stem cells)、多能干细 胞 (pluripotent stem cells)以及单能干细胞 (unipotent stem cells) ；
以往认为，中枢神经系统的神经元在出生前或出生后不久，就失去再生能力。但近年的一些研究表明，成年哺乳动 物的脑组织仍可不断产生新的神经元，成人脑组织中同样存在NSC,主要是在侧脑室下层(SVZ)和海马齿状回两处。
目前多使用基因转移的方法，建立神经干细胞系，即诱导NSC的细胞周期不断循环往复，从而阻止其分化过程。永 生化的NSC具有较好的生物学特性，它们能自我复制并在体外大量增殖，在移植人体内后仍具有多向分化潜能，同 时可被转染并稳定地表达外源基因。
25
神经干细胞
根据部位分类神经嵴干细胞(neural crest stemcell，NCSC)和中枢神经干细胞(CNS-SC)。
外周神经干细胞(PNS-SC)，既可发育为外周神经细胞、神经内分泌细胞和Schwann氏细胞，也能分化为色素细胞 (pigmented cell)和平滑肌细胞等。NSC一般是指存在于脑部的中枢神经干细胞(CNS-SC)，其子代细胞能分化成为 神经系统的大部分细胞。
两位科学家山中伸弥和汤姆斯共同获得诺贝尔医学奖
2
不能神话也不能妖魔化干细胞
心脑血管疾病、恶性肿瘤、病毒性疾病、遗传病仍是医学领域4大生 命科学难题，目前全球治疗效果有限，干细胞也不例外。
9
干细胞是目前人类组织器官功能再生的唯一希望
10
Part 1 干细胞
干 细 胞 （ Stem-cell ） 即 为 起
源细胞，是指尚未发育成熟的细胞， 它具有多分化潜能和自我复制的功能 ，在特定条件下，可以分化成不同的 功能细胞，形成多种组织和器官。
干细胞形态
干细胞分类
✓ 按分化能力可分为全能干细胞 (totipotent stem cells)、多能干细 胞 (pluripotent stem cells)以及单能干细胞 (unipotent stem cells) ；
以往认为，中枢神经系统的神经元在出生前或出生后不久，就失去再生能力。但近年的一些研究表明，成年哺乳动 物的脑组织仍可不断产生新的神经元，成人脑组织中同样存在NSC,主要是在侧脑室下层(SVZ)和海马齿状回两处。
目前多使用基因转移的方法，建立神经干细胞系，即诱导NSC的细胞周期不断循环往复，从而阻止其分化过程。永 生化的NSC具有较好的生物学特性，它们能自我复制并在体外大量增殖，在移植人体内后仍具有多向分化潜能，同 时可被转染并稳定地表达外源基因。
25
神经干细胞
根据部位分类神经嵴干细胞(neural crest stemcell，NCSC)和中枢神经干细胞(CNS-SC)。
外周神经干细胞(PNS-SC)，既可发育为外周神经细胞、神经内分泌细胞和Schwann氏细胞，也能分化为色素细胞 (pigmented cell)和平滑肌细胞等。NSC一般是指存在于脑部的中枢神经干细胞(CNS-SC)，其子代细胞能分化成为 神经系统的大部分细胞。
两位科学家山中伸弥和汤姆斯共同获得诺贝尔医学奖
2
不能神话也不能妖魔化干细胞
心脑血管疾病、恶性肿瘤、病毒性疾病、遗传病仍是医学领域4大生 命科学难题，目前全球治疗效果有限，干细胞也不例外。
干细胞ppt课件
any cell of the extraembryonic membranes (e.g., placenta).
ppt精选版Lawrence M. Hinman
18
多潜能（ Pluripotent）干细胞—是具有自我更新 能力和高度增殖以及多向分化潜能，并可以定向 诱导分化为三个胚层中所有种类的去了发育成完整个体的能力，发育潜能 受到一定限制。
• 在体外培养扩增时,经遗传操作、选择和 冻存,均不失其全能性;在不同生长条件 下具有不同的功能状态。
ppt精选版Lawrence M. Hinman
14
成体干细胞横向分化的普遍性
n 预测并阐明横向分化机制,就有可能利用 病人自身健康组织的干细胞诱导分化成 病损组织的功能来治疗疾病。
n 这样既可解决免疫排斥问题,又可避免胚 胎细胞来源不足和社会伦理问题。
发育生物学的新领域
第十九章 干细胞
近年来在干细胞理论和技术研究方面取得 了长足的进展。 1999 年12 月,美国《科学》杂志把干细胞生物 学和以干细胞临床应用为内容的干细胞生物 工程评为20 世纪世界科学进展的最重要领域 。 已经成为继人类基因组大规模测序之后最具 活力、最有影响和最有应用前景的生命科学 研究领域之一。
2004-2005 韩国研究者黄禹锡(Hwang Woo-suk)声称利用体细胞核 转移技术培育出几种人类胚胎干细胞系，后来被证实是伪造的
2006 英国科学家用脐带血干细胞分化出第一个人造肝细胞
ppt精选版Lawrence M. Hinman
6
干细胞的起源和进展
2007.1 科学家发现在羊水中存在一种新型干细胞，它可以在研究与治疗 中替代胚胎干细胞
2008.3 自体间充质干细胞成功治疗关节变性病
干细胞及行业概述ppt课件
• 2） 中游的干细胞增殖及干细胞基因药物的研发技术壁垒较高，但 潜力巨大。其中中源协和冠昊生物在进行干细胞培养与制剂开发。
• 3） 下游细胞治疗以医院为主体，判断政策放开后中游企业会向下 游扩张。目前从事细胞治疗的医院主要为部队医院，如北京302 医 院等、海军总医院、武警总医院等。
• 随着干细胞科普知识的普及，新生儿干细胞存储市场有望达到百300 亿规模。我国目前每年新生儿数量约1700 万人，其中城市新生儿数 量不低于30%，随着二胎政策的放开，预计5 年后每年新生儿数量 将达到2010 万左右。 随着近年来干细胞科普知识的广泛普及、干 细胞治疗政策的放开，我们判断新生儿储存干细胞的比例将逐渐提 升。假设10%储存干细胞，则市场空间为2万RMB/例*1700 万例 ×10%=340 亿/年。
干细胞概念股有哪些？ 干细胞概念股盘点
•
仟源医药（300254）:绝地转型,扬帆起航。自从限抗政策执行以来,公司原有主业抗生素受到抑制,但自2013
年已企稳;并购海力生和保灵集团,进入儿童产品和孕妇保健品领域;2014年收购杭州恩氏基因,进入基因保存以及环
境污染物检测业务。
•
北陆药业（300016）:主业稳健增长，战略布局细胞治疗与基因检测。进军细胞治疗领域，培育新利润贡献:
干细胞基础知识及行业概述
干细胞（stem cell）
• 未分化的 • 自我更新的 • 无限增殖（长期体外培养） • 多向分化潜能
干细胞的应用
药品开发
体外培养组织中 干细胞新药物的 实验研究 更快的药物 开发
培养队能干细胞 组织/细胞的治疗
研究开发
控制细胞分化的基 因程序是什么？
知识的快速获 得
骨髓
紫鑫经营。第二代基因测序仪技术主要是与中科院北京基因组研究所合作，目前基因测序仪仍处于研发试生产阶
• 3） 下游细胞治疗以医院为主体，判断政策放开后中游企业会向下 游扩张。目前从事细胞治疗的医院主要为部队医院，如北京302 医 院等、海军总医院、武警总医院等。
• 随着干细胞科普知识的普及，新生儿干细胞存储市场有望达到百300 亿规模。我国目前每年新生儿数量约1700 万人，其中城市新生儿数 量不低于30%，随着二胎政策的放开，预计5 年后每年新生儿数量 将达到2010 万左右。 随着近年来干细胞科普知识的广泛普及、干 细胞治疗政策的放开，我们判断新生儿储存干细胞的比例将逐渐提 升。假设10%储存干细胞，则市场空间为2万RMB/例*1700 万例 ×10%=340 亿/年。
干细胞概念股有哪些？ 干细胞概念股盘点
•
仟源医药（300254）:绝地转型,扬帆起航。自从限抗政策执行以来,公司原有主业抗生素受到抑制,但自2013
年已企稳;并购海力生和保灵集团,进入儿童产品和孕妇保健品领域;2014年收购杭州恩氏基因,进入基因保存以及环
境污染物检测业务。
•
北陆药业（300016）:主业稳健增长，战略布局细胞治疗与基因检测。进军细胞治疗领域，培育新利润贡献:
干细胞基础知识及行业概述
干细胞（stem cell）
• 未分化的 • 自我更新的 • 无限增殖（长期体外培养） • 多向分化潜能
干细胞的应用
药品开发
体外培养组织中 干细胞新药物的 实验研究 更快的药物 开发
培养队能干细胞 组织/细胞的治疗
研究开发
控制细胞分化的基 因程序是什么？
知识的快速获 得
骨髓
紫鑫经营。第二代基因测序仪技术主要是与中科院北京基因组研究所合作，目前基因测序仪仍处于研发试生产阶
干细胞PPT演示文稿
3、多能干细胞：具有分化多种组织的潜能，但失去了发 肓成完整个体的能力（间充质干细胞）
4、专能干细胞：由多能干细胞分化而来，只能向一种类 型的细胞分化（肝脏干细胞等）
干细胞的四大特性
➢ 自我更新：
干细胞可以通过自我复制，产生与亲本完全相同的子代 细胞，以保持干细胞数量的恒定可通过分裂维持自身细 胞的特性和大小；
根据其发育阶段可分为： 1、胚胎干细胞（Embryonic stem cells） 2、成体干细胞（Adult stem cells）。
根据其分化潜能可分为：
1、全能干细胞：可分化成人体的各种细胞，从而组成各 种组织和器官，最终发肓成为一个完整的生物体（受精 卵）
2、亚全能干细胞：是人体发育过程中存留于多种组织中 的其分化能力接近于全能的成体干细胞。
➢ 多向分化：
干细胞在一定条件下可以进入分化程序，可进一步多向 （或定向）分化为逐步成熟的次级子代细胞，最终形成 功能特异的组织细胞，在组织修复和新陈代谢中起重要 作用；
干细胞的四大特性
➢ 自动归巢：
干细胞在体内定向迁移至特定的组织部位，在不同环境的诱导下，依赖性 地分化为特定的组织细胞。
➢ 免疫原性低：
2010年11月15日 温家宝总理考察中 国科学院广州生物 医药与健康研究院 时强调“干细胞研 究代表着科技事业 未来发展的重要方 向。”
干细胞研究
奥巴马2009年签署 行政命令，宣布联邦 政府资金可用于支持 胚胎干细胞的研究。
干细胞研究
医药界的诺贝尔奖——美国盖伦奖包括三个奖项：最佳药 品，最佳生物制品和最佳医疗器械。 Hemacord——美国纽约血液中心的首个脐带血干细胞产 品获得2014年美国盖伦奖的最佳生物技术产品奖。
干细胞基础知识
4、专能干细胞：由多能干细胞分化而来，只能向一种类 型的细胞分化（肝脏干细胞等）
干细胞的四大特性
➢ 自我更新：
干细胞可以通过自我复制，产生与亲本完全相同的子代 细胞，以保持干细胞数量的恒定可通过分裂维持自身细 胞的特性和大小；
根据其发育阶段可分为： 1、胚胎干细胞（Embryonic stem cells） 2、成体干细胞（Adult stem cells）。
根据其分化潜能可分为：
1、全能干细胞：可分化成人体的各种细胞，从而组成各 种组织和器官，最终发肓成为一个完整的生物体（受精 卵）
2、亚全能干细胞：是人体发育过程中存留于多种组织中 的其分化能力接近于全能的成体干细胞。
➢ 多向分化：
干细胞在一定条件下可以进入分化程序，可进一步多向 （或定向）分化为逐步成熟的次级子代细胞，最终形成 功能特异的组织细胞，在组织修复和新陈代谢中起重要 作用；
干细胞的四大特性
➢ 自动归巢：
干细胞在体内定向迁移至特定的组织部位，在不同环境的诱导下，依赖性 地分化为特定的组织细胞。
➢ 免疫原性低：
2010年11月15日 温家宝总理考察中 国科学院广州生物 医药与健康研究院 时强调“干细胞研 究代表着科技事业 未来发展的重要方 向。”
干细胞研究
奥巴马2009年签署 行政命令，宣布联邦 政府资金可用于支持 胚胎干细胞的研究。
干细胞研究
医药界的诺贝尔奖——美国盖伦奖包括三个奖项：最佳药 品，最佳生物制品和最佳医疗器械。 Hemacord——美国纽约血液中心的首个脐带血干细胞产 品获得2014年美国盖伦奖的最佳生物技术产品奖。
干细胞基础知识
干细胞治疗PPT课件
16
.东北师范大学
供体细胞核与受体细胞质相互作用
核移植后,延长核质相互作用时间可促 进核重塑及发育程序的重编程。
G0与G1早期细胞此时DNA合成未开始， 细胞活动缓慢，移入卵母细胞后需用 较长时间从抑制状态恢复，这恰好利 于卵母细胞质对移植核的再编程过程。
17
.东北师范大学
干细胞治疗
18
.
干细胞治疗的特点
括营养、生长及抗凋亡因子等。 促进细胞间传导能力，包括电刺激、
电传导、细胞连接、传导通路重建、 离子通道开放与介质释放等。
20
.
干细胞移植的安全性问题
除结果观察外，移植后一般不易证实在 靶器官中能否产生足够的效应细胞。
异源污染：是否能避免动物性污染。 致癌性：干细胞体外培养扩增能否形成
突变积累，干细胞有形成畸胎瘤的倾向。 移植稳定性：移植后的免疫排斥问题。
瞬间性钙震荡是精子入卵后引起激 活及胚胎发育的基础。震荡频率、 振幅及持续时间都将影响胚胎发育。
凡能引起钙震荡的方法都能激活卵 母细胞及核移植胚胎。
11
.东北师范大学
受精瞬间触发的卵细胞钙震荡 (calcium wave)
12
.东北师范大学
重组胚孤雌激活的常用方法
电激活:高压直流脉冲形成瞬间微孔， 钙离子进入，卵母细胞激活，多次脉 动可提高激活率。
40
.
脐带间充质干细胞移植治疗结果
8例患者均移植成功，中途无脱落。 治疗有效：对肌强直、震颤等症状改
善显著。与移植前相比专业评分有所 降低，差异比较明显。 治疗无效：对运动迟缓、体位不稳等 症状未见改善，主要可能是观察期较 短的原因。
41
.
间充质干细胞治疗帕金森病的可能机制
.东北师范大学
供体细胞核与受体细胞质相互作用
核移植后,延长核质相互作用时间可促 进核重塑及发育程序的重编程。
G0与G1早期细胞此时DNA合成未开始， 细胞活动缓慢，移入卵母细胞后需用 较长时间从抑制状态恢复，这恰好利 于卵母细胞质对移植核的再编程过程。
17
.东北师范大学
干细胞治疗
18
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干细胞治疗的特点
括营养、生长及抗凋亡因子等。 促进细胞间传导能力，包括电刺激、
电传导、细胞连接、传导通路重建、 离子通道开放与介质释放等。
20
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干细胞移植的安全性问题
除结果观察外，移植后一般不易证实在 靶器官中能否产生足够的效应细胞。
异源污染：是否能避免动物性污染。 致癌性：干细胞体外培养扩增能否形成
突变积累，干细胞有形成畸胎瘤的倾向。 移植稳定性：移植后的免疫排斥问题。
瞬间性钙震荡是精子入卵后引起激 活及胚胎发育的基础。震荡频率、 振幅及持续时间都将影响胚胎发育。
凡能引起钙震荡的方法都能激活卵 母细胞及核移植胚胎。
11
.东北师范大学
受精瞬间触发的卵细胞钙震荡 (calcium wave)
12
.东北师范大学
重组胚孤雌激活的常用方法
电激活:高压直流脉冲形成瞬间微孔， 钙离子进入，卵母细胞激活，多次脉 动可提高激活率。
40
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脐带间充质干细胞移植治疗结果
8例患者均移植成功，中途无脱落。 治疗有效：对肌强直、震颤等症状改
善显著。与移植前相比专业评分有所 降低，差异比较明显。 治疗无效：对运动迟缓、体位不稳等 症状未见改善，主要可能是观察期较 短的原因。
41
.
间充质干细胞治疗帕金森病的可能机制
干细胞技PPT课件
一、概 述
在一些原本认为不可更新的组织中发现干细胞， 如：亚脑室区、侧脑室区和嗅球的连接处以及 海马区；
目前已发现存在干细胞的组织有：骨髓、外周 血、脐血、血管、脑、脊髓、皮肤、骨骼肌、 肝脏、胰腺、角膜、视网膜、牙齿和消化系统 上皮等。
一、概 述
• 1999年12月，美国科学家在《美国科学院院刊》 报告说，小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横 向分化”为血液细胞。随后，世界各国的科学 家相继证实，成体干细胞包括人类的成体干细 胞具有可塑性。骨髓间充质干细胞可分化为骨细胞、
一、概述
• 干细胞是重建、修复病损或衰老组织、器官功 能的理想种子细胞。
• 干细胞除了在细胞治疗、组织器官移植、基因 治疗具重要意义外，还在新基因发现与基因功 能分析、发育生物学研究、新药开发与药效以 及毒性评估等领域具有重要的意义。
一、概述 • 干细胞研究1999年被Science评为十大
科技进展之首；2000年再度入选世界十 大科技进展。
一、概 述
• 1995年，Thomson等获得恒河猴胚胎干细胞； • 1996年，Pain等获得鸡胚胎干细胞； • 1997年美国华盛顿大学的多纳尔·托马斯报告说，将
正常人的骨髓移植到病人体内，可以治疗造血功能障 碍； • 1998年，Thomson和Shamblott实验室分别用人的胚泡 和早期胚胎的生殖嵴培养出胚胎干细胞（ES）和生殖 嵴干细胞（Embryonic germ stem cell）；
中调节分化蛋白的不均匀分配决定）。
2、干细胞的特征：
• 对称分裂(symmet ric cell division) , 形成两个相同的子干细胞;
• 非对称分裂(asymmet ric ccell division) , 即干细胞分裂后的两个子细 胞一个为干细胞, 而另一个为祖细胞, 祖 细胞在外界刺激因子的作用下可以向多个 细胞系的终末期分化。