培养基验收-营养琼脂
各种培养基及部分结果判读 HHT
各种培养基及部分结果判读1、营养琼脂(NA)用于一般细菌或真菌的培养及传代,细菌或真菌可在该培养基上形成菌落。
(注:主要做院感监测)2、5%羊血琼脂培养基(SBA)用于分离标本中一般细菌及需要血液成分的部分苛氧菌,多数细菌能在该培养基上形成具有典型特征的菌落,部分细菌能形成溶血现象。
根据溶血特征分为α溶血、β溶血、γ溶血,溶血特征有助于细菌鉴定。
3、巧克力培养基(CA)由于培养基中的血液受热破坏,血红素(X)及辅酶(V)释放出来,适合嗜血杆菌、奈瑟菌等需特殊生长因子细菌的分离培养。
大多数苛氧菌在该培养基上生长良好。
4、麦康凯培养基(MAC)该培养基属于弱选择性培养基,胆盐抑制革兰氏阳性细菌及部分真菌生长,对大部分肠道细菌及非发酵菌无抑制作用。
常作为革兰氏阴性杆菌的分离和初步鉴别之用,发酵乳糖的细菌在培养基上产粉色菌落,不发酵乳糖的菌落呈无色。
结果判读:大肠埃希菌:粉红色大菌落鼠伤寒沙门菌:无色中等军菌落奇异变形菌:淡橙色大菌落5、伊红亚甲蓝琼脂(EMB)该培养基是一种含酸碱染料的弱选择性培养基,伊红亚甲蓝既是指示剂又是选择剂,对革兰氏阳性菌有抑制作用。
不分解乳糖的细菌为无色或者灰白色。
用于分离肠道细菌及非发酵菌。
结果判读:铜绿假单胞菌:无色小菌落大肠埃希菌:紫红色有金属光泽的大菌落伤寒沙门菌:灰白色中等菌落球菌:不生长6、SS培养基该培养基为常用的弱选择性肠道致病菌分离鉴定培养基,用于从粪便标本或者环境中分离鉴定沙门氏菌和志贺氏菌。
结果判读:大肠埃希菌:红色菌落痢疾志贺菌:无色透明中等菌落鼠伤寒沙门菌:无色菌落,有黑色中心金葡菌:不生长7、XLD培养基XLD培养基即木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐培养基,用于从粪便标本或环境标本中分离鉴定沙门氏菌和志贺氏菌。
原理是加入去氧胆酸钠抑制某些肠道正常菌群来增加选择性。
正常肠道菌群因发酵木糖、蔗糖和乳糖呈黄色菌落,志贺和一些变形杆菌不发酵三种糖中的任何一种,而产生红色菌落。
营养琼脂配制标准操作规程
营养琼脂配制标准操作规程
1.目的
规范营养琼脂培养基配制的操作规程。
2.原理
培养基含有氮源、碳源和微量无机盐,适宜细菌生长繁殖。
3.用途
供细菌培养、菌株纯化及传种使用。
4.配方
营养琼脂干粉28g、蒸馏水1000ml
5.操作步骤
将28g营养琼脂干粉溶于1000 ml蒸馏水中,混匀至完全溶解,分装,经121℃灭菌15分钟,冷藏备用。
6.储存条件
2~8℃冰箱
7.有效期
实验室自行规定,确保培养基质量。
8.质量控制
8.1 质控频度每次新配制时做质控
8.2 质控方法及结果见表5-17。
表5-17 配制营养琼脂培养基质量控制方法及结果
试验方法结果
无菌试验<100块抽检5%,>100块
随机取10块,35℃培养24~
49h
无细菌生长
生长试验金黄色葡萄球菌
ATCC25923,35℃培养24~
49h
菌落浅黄色
铜绿假单胞菌ATCC27853 35℃培养24~48h 菌落无
色或浅绿色
直径>2.7mm
平行试验平行试验做质控时取新旧批号的
培养基同时做
9.注意事项
倾倒时温度不易过高,否则冷凝水过多易污染;若温度过低,琼脂易凝固。
参考文献
[1] 谢正旸主编。
现代微生物培养基和试剂手册。
福州:福建科学技术出版社,1994
[2] 王钦升,周正明,高屹主编。
实用医学培养基手册。
北京:人民军医出版社,1999
编写人:AAA、BBB 操作人:本室操作人员
批准人:。
微生物培养基种类大全
摘要:1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
3、基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
4、血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
营养琼脂实训报告心得体会
一、实训背景营养琼脂是一种广泛应用于微生物培养、分离和鉴定的培养基,具有营养丰富、易于制备、保存和运输等特点。
在食品、医药、环保等领域,营养琼脂的应用越来越广泛。
为了提高我们对营养琼脂制备和应用的理解,我们进行了为期两周的营养琼脂实训。
二、实训目的1. 掌握营养琼脂的制备方法;2. 了解营养琼脂在微生物培养、分离和鉴定中的应用;3. 提高实验操作技能和团队协作能力。
三、实训过程1. 实验材料(1)试剂:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、酵母提取物等;(2)仪器:高压蒸汽灭菌器、电热恒温水浴锅、移液器、试管、烧杯、玻璃棒等;(3)微生物:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 实验步骤(1)制备牛肉膏蛋白胨琼脂:将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等试剂加入去离子水中,加热溶解,调整pH值至7.2-7.4,加入琼脂,加热溶解后分装至试管,高压蒸汽灭菌;(2)制备葡萄糖琼脂:在牛肉膏蛋白胨琼脂中添加葡萄糖,按照上述步骤制备;(3)制备酵母提取物琼脂:在牛肉膏蛋白胨琼脂中添加酵母提取物,按照上述步骤制备;(4)制备营养琼脂斜面:将灭菌后的牛肉膏蛋白胨琼脂倒置于试管中,制成斜面;(5)微生物培养:将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等微生物接种至相应的琼脂平板上,培养观察。
3. 实验结果与分析(1)牛肉膏蛋白胨琼脂:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等微生物在牛肉膏蛋白胨琼脂上生长良好,表明该培养基具有丰富的营养成分;(2)葡萄糖琼脂:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌在葡萄糖琼脂上生长良好,而枯草芽孢杆菌生长较差,表明葡萄糖琼脂对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有选择性;(3)酵母提取物琼脂:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌在酵母提取物琼脂上生长良好,表明该培养基具有丰富的营养成分和微生物生长促进剂。
四、实训心得体会1. 营养琼脂在微生物培养、分离和鉴定中具有重要作用,通过实训,我们掌握了营养琼脂的制备方法,为今后的实验研究奠定了基础;2. 实验过程中,我们学会了高压蒸汽灭菌、移液、接种等操作技能,提高了实验操作水平;3. 团队协作在实验中具有重要意义,通过实训,我们培养了良好的团队精神,提高了沟通与协作能力;4. 实验过程中,我们遇到了一些问题,如培养基灭菌不彻底、接种操作不规范等,通过分析原因,我们找到了解决问题的方法,提高了实验成功率;5. 通过实训,我们认识到理论知识与实践操作相结合的重要性,只有将所学知识运用到实际操作中,才能提高实验技能和综合素质。
营养琼脂培养基的配置
营养琼脂培养基的配置
营养琼脂培养基其实就是一种选择性较低的营养成分的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和増菌,但是一般不用于细菌鉴定(除非该细菌菌落有比较特殊的形态)只适合营养要求不高的细菌生长。
营养琼脂
成分:
牛肉膏3g
氯化钠5g
蛋白胨10g
琼脂 15-20g
蒸馏水 1000ml
制备步骤:
检查所用物品级别和洁净程度合格.
戴上手套.
开启天平,放上一张称量纸,调零.
称取蛋白胨g,置一玻璃容器中.
称取牛肉浸出粉g,置同一玻璃容器中.
称取氯化钠g,置同一玻璃容器中.
称取琼脂g
关闭天平.
取1000ml蒸馏水倒入上述烧杯内,用玻璃棒搅拌.
放入水浴锅内微温溶解调节pH为弱碱性. 加入琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2. 分装,121℃高压灭菌15min.。
营养琼脂培养基的用途
营养琼脂培养基的用途
营养琼脂培养基的用途
营养琼脂培养基是一种营养培养基,主要用于培养一些细菌、真菌和病毒等实验样本。
它包括配方组成的琼脂、氯化钠等,其中用于支持细菌和真菌增殖的琼脂被称为营养琼脂。
营养琼脂培养基用于培养一些细菌、真菌和病毒等实验样本,可以提高实验精确度和准确性,保证细菌培养的稳定性。
它还可以作为生物学和分子生物学实验的研究材料,用于分子耦联实验,尤其是在细胞毒性分析中发挥着重要作用。
营养琼脂培养基也可以用于细菌、真菌培养、密集、分离和筛选,以及工厂样品的分离。
营养琼脂培养基还可以应用于实验细胞的培养,例如动物细胞、植物细胞、病毒细胞等,并可应用于病毒耐药性的研究。
研究人员还可以将营养琼脂培养基作为实验材料,用于蛋白质的表达,以便在蛋白质组学和蛋白质结构方面做有效的研究和分析。
此外,营养琼脂培养基还可以应用于抗菌活性试验、生物反应性试验、抗原性试验、分子测序等,帮助探究抗感染药物的作用,提高药物的性能。
由于营养琼脂培养基具有良好的物理和化学性质,它可以用于形成细胞膜,为细胞提供合适的环境,保护细胞结构,在实验中起着重要作用。
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实验报告营养琼脂结果(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在探究营养琼脂在微生物培养中的应用,观察不同微生物在营养琼脂上的生长情况,了解营养琼脂对微生物生长的影响。
二、实验原理营养琼脂是一种常用的固体培养基,主要由蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂和蒸馏水等成分组成。
它为微生物提供了必需的营养物质,有利于微生物的生长繁殖。
通过观察微生物在营养琼脂上的生长情况,可以判断其生长速度、形态、颜色等特征。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:营养琼脂、微生物样品、无菌试管、无菌移液器、酒精灯、培养箱、显微镜等。
2. 实验仪器:天平、移液器、酒精灯、培养箱、显微镜、无菌操作台等。
四、实验方法1. 准备营养琼脂:按照说明书配制营养琼脂,加热融化,待冷却至50℃左右时倒入无菌培养皿,凝固后备用。
2. 接种微生物:用无菌移液器取适量微生物样品,接种于营养琼脂平板上。
3. 观察生长情况:将接种好的平板放入培养箱中,在一定温度下培养一段时间,观察微生物的生长情况。
4. 观察显微镜下的菌落特征:用无菌镊子取少量菌落,置于载玻片上,滴加适量染色液,观察显微镜下的菌落特征。
五、实验结果与分析1. 不同微生物在营养琼脂上的生长情况实验结果显示,接种的微生物在营养琼脂上均能生长,且生长速度较快。
不同微生物在营养琼脂上的生长情况如下:(1)细菌:在营养琼脂上形成圆形、表面光滑、边缘整齐的菌落,菌落颜色为白色。
(2)真菌:在营养琼脂上形成圆形、表面粗糙、边缘不整齐的菌落,菌落颜色为白色或浅灰色。
2. 不同微生物在显微镜下的菌落特征通过显微镜观察,发现不同微生物的菌落特征如下:(1)细菌:菌落呈球形,细胞呈杆状,排列整齐。
(2)真菌:菌落呈圆形,细胞呈菌丝状,交织成网状。
3. 营养琼脂对微生物生长的影响实验结果表明,营养琼脂为微生物提供了丰富的营养物质,有利于微生物的生长繁殖。
不同微生物在营养琼脂上的生长速度和菌落特征均有所不同,这与微生物的营养需求、生长习性等因素有关。
普通肉汤琼脂培养基使用
中文名称:营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)英译名称:Nutrient Agar品种编号:022020营养琼脂规格:250g干粉培养基营养琼脂用途:用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定。
营养琼脂使用原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
微生物图册:营养琼脂配方(每升):蛋白胨10g牛肉膏粉3g氯化钠 5g琼脂15g最终pH 7.3±0.2营养琼脂使用方法:1、称取本品33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。
依次做1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7、菌落计数的报告:选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。
平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计。
营养琼脂培养基配方及使用说明
营养琼脂培养基配方及使用说明022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)(Nutrient Agar)营养琼脂培养基用途:营养琼脂培养基NA用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO标准)。
营养琼脂培养基检测原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
营养琼脂培养基配方(每升):蛋白胨 10g牛肉膏粉 3g氯化钠 5g琼脂 15g最终pH 7.3±0.2培养基使用方法:1、称取营养琼脂培养基NA 33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。
依次做1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
营养琼脂(NA)三层无菌包装即用平板
营养琼脂(NA)三层无菌包装即用平板
营养琼脂(NA)三层无菌包装即用平板介绍:
【包装规格】
【用途】
用于空间环境中浮游菌及沉降菌等微生物的测定以及实验室相关微生物指标的
测定。
【检验原理】
胨和牛肉浸出粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源,氯化钠能维持均衡的渗透压,琼脂是培养基的凝固剂。
【培养基配方成分】
【使用方法】
1、从储藏室(2-25℃)取出平皿,并恢复至室温。
2、将包装整体送入取样地点,在此过程中逐步去掉外面两层包装,最后一层包装在操作间打开。
3、按规定的方法和时间在取样点进行采样。
采样时应注意开盖和收皿手部都不得经过打开的平皿上空。
4、采样结束后,盖上皿盖,将平皿从洁净室取出,置于培养箱中按规定的温度和时间培养。
5、培养结束后,从培养箱中取出观察、计数。
【质量控制】
1. 感官、理化指标
淡黄色透明、清晰无沉淀,表面平整、无裂痕、无肉眼可见杂质和气泡,平皿的琼脂层厚度为5.5-6.5mm,pH值为7.2士0.2。
2. 生物学指标
下列质控菌株接种待测试培养基,如下:
3. 无菌及持水性实验
30-35℃培养7天,无菌落生长,无脱水收缩。
培养基适用性检查验证方案
培养基适用性验证方案编制:审核:批准:1.验证目的:本次验证的目的是确认无菌检查、微生物限度检查、控制菌检查用培养基应进行培养基的适用性检查,符合灵敏度要求。
2.参照标准2010版中国药典二部附录:XII A无菌检查法和XI G微生物限度检查法。
3.验证项目无菌检查、微生物限度检查、控制菌检查用培养基的适用性检查。
45.前提条件确认5.1所有本次验证实施过程中用到的仪器都已经过计量并且在计量有效期内。
5. 2所有参与本次验证的公司人员均进行相关培训6.接受标准6.1.液体培养基促生长能力检査:被检培养基与对照培养基管比较,被检培养基管试验菌应生长良好。
6.2.液体培养基指示能力桧查:与对照培养基管比较,被检培养基管试验菌生长情况、指示剂反应等应与对照培养基一致。
6.3.固体培养基促生长能力检査:被检培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征应一致。
6.4.固体培养基指示能力检査:被检培养基上试验菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。
6.5.培养基抑制能力检査:试验菌应不得生长。
6.6.无菌性检查:应不得有菌生长。
6・7・被检培养基上的菌落数不小于对照培养基上的菌落平均数的 生长的菌落大小、形态特征应一致。
7. 验证实施7.1 •试验用仪器和物料所用培养皿、移液管、工器具均应严格按照相关的灭菌程序灭菌;生物安全柜、灭菌器、霉菌培 养箱、生化培养箱、水浴锅、电热鼓风干燥箱等。
72验证用培养基及试剂适用性检查:70%,且74测试菌悬液菌液制备接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,于30〜35 ° C培养18〜24小时。
分别取上述新鲜培养物用0. 9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数50^100cful的菌悬液。
接种生抱梭菌至硫乙醇酸盐流体培养基中,30〜35 C培养18〜24小时。
上述新鲜培养物用0. 9%无菌氯化钠溶液制成每lml含菌数lO^lOOcfu的菌悬液。
营养琼脂(普通琼脂)
营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸[相当于10mg/毫升])1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。
营养琼脂对照培养基使用说明
营养琼脂对照培养基营养琼脂对照培养基产品说明:本品是一种最基本的非选择性培养基,含有氮源、碳源和微量无机盐适合一般细菌的生长繁殖。
因含有动、植物两种蛋白质,苛养菌也可利用其中的营养进行增殖。
营养琼脂对照培养基用途:细菌计数培养基适用性试验或检验营养琼脂对照培养基注意事项:1.检查平板内是否干裂或染菌,如长菌请勿使用;2.请在洁净的环境下操作,避免杂菌干扰;3.在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水,请在洁净的环境下将水倒出,然后在培养箱放置10-30Min,待其表面干燥后再接种;或在使用前,提前一到两周放置室温即可;4.弃物处理:使用后应高压灭菌或焚烧后按一般垃圾处理,也可按专业技术人员指示方法处理。
保存:避光保存,放于阴凉干燥处。
营养琼脂对照培养基其他相关对照培养基:硫乙醇酸盐流体对照培养基改良马丁对照培养基营养琼脂对照培养基营养肉汤对照培养基玫瑰红钠琼脂对照培养基胆盐乳糖对照培养基甘露醇氯化钠琼脂对照培养基沙氏葡萄糖肉汤对照培养基麦康凯琼脂对照培养基沙门、志贺菌属琼脂对照培养基4-甲基伞形酮葡萄苷酸(MUG)对照培养基沙氏葡萄糖琼脂对照培养基念珠菌显色对照培养基绿脓菌素测定用对照培养基基础梭菌增菌对照培养基哥伦比亚琼脂对照培养基溴化十六烷基三甲铵琼脂对照培养基基础四硫磺酸钠亮绿对照培养基基础乳糖发酵对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)对照培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基胰酪大豆胨肉汤对照培养基R2A琼脂对照培养基三糖铁琼脂对照培养基麦康凯液体对照培养基紫红胆盐葡萄糖琼脂对照培养基肠道菌增菌液体对照培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐对照培养基。
营养琼脂有哪些用途
培养基名称:营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)品种编号:022020培养基英译名称:Nutrient Agar培养基规格: 250g营养琼脂(用途:用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定。
营养琼脂使用原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升):蛋白胨10g牛肉膏粉3g氯化钠 5g琼脂15g最终pH 7.3±0.2营养琼脂(使用方法:1、称取营养琼脂(33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。
依次做1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7、菌落计数的报告:选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。
平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计A:稀释度的选择:应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之。
营养琼脂培养基配方及使用说明2页
营养琼脂培养基配方及使用说明2页
以下是一种常见的营养琼脂培养基的配方和使用说明:
营养琼脂培养基配方:
1. 蛋白胨:5克
2. 羊肉提取物:3克
3. 酵母提取物:3克
4. 胆盐:1.5克
5. 硫酸镁:0.2克
6. 琼脂:15克
7. 蒸馏水:1000毫升
使用说明:
1. 将蛋白胨、羊肉提取物、酵母提取物、胆盐和硫酸镁加入蒸馏水中,充分溶解。
2. 加热溶液至沸腾,然后煮沸2分钟。
3. 将琼脂添加到热溶液中,搅拌均匀。
4. 冷却至40-45°C,然后倒入培养皿中。
5. 等待琼脂凝固并变为固态后,即可用于细菌的培养。
营养琼脂培养基是一种常用的通用培养基,适用于各种细菌的生长。
制备过程中需要严格控制温度和时间,以确保培养基的质量稳定。
使用时要注意无菌操作,避免细菌的污染。
营养琼脂培养基的用途
营养琼脂培养基的用途
《营养琼脂培养基的用途》
一、什么是营养琼脂培养基?
营养琼脂培养基是一种液体琼脂,它是由多种有机和无机物质(氨基酸,糖类,矿物质,维生素),及其他特定成分组成的混合物,它通常是为了满足生物体的需求而制成的。
二、营养琼脂培养基的用途
1. 用于细菌培养:
营养琼脂培养基主要用于细菌的培养,它能够提供必要的养分,以促进细菌的生长、繁殖和发育。
2. 用于酿造:
营养琼脂培养基也可以用于酿造,它可以提供必要的营养,以确保酒的品质和香味。
3. 用于其他生物学实验:
营养琼脂培养基也可以用于其他生物学实验,它可以提供必要的养分,以支持实验的稳定性和可靠性。
三、营养琼脂培养基的注意事项
1. 使用营养琼脂培养基前,应当检查其是否有污染,并确保其安全性和可靠性
2. 营养琼脂培养基的添加应该根据实验的要求,按照规定的量添加。
3. 营养琼脂培养基在使用过程中,应当定期检查其质量,以确
保实验的准确性。
4.营养琼脂培养基一旦使用完毕,应当尽快处理和处置,以免造成环境污染。
MUG营养琼脂培养基
MUG营养琼脂培养基MUG营养琼脂培养基(NA-MUGAgarMedium)用途:用于滤膜法测定生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌(GB/T5750.12-2006)。
原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;琼脂是培养基的凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm 紫外灯下产生蓝白色荧光。
97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
配方(g/L):蛋白胨 5.0g牛肉膏粉 3.0g琼脂15.0gMUG 0.1g最终pH=6.8±0.2使用方法:1、称取本品23.1g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,在无菌操作条件下倾注直径50mm平板备用,倒好的平板在4℃下可保存两周。
2、将总大肠菌群滤膜法有典型菌落生长的滤膜进行大肠埃希氏菌检测。
在无菌操作条件下将滤膜转移到NA-MUG平板上,细菌截流面朝上,进行培养。
36±1℃培养4h。
3、观察结果:在暗处用波长为366nm功率为6W的紫外光灯照射,如果菌落边缘或菌落背面有蓝色荧光产生则表示大肠埃希氏菌为阳性。
质量控制:本品接种下列菌株,置于36±1℃温箱中培养48±2h,结果如下菌名菌号生长状况荧光大肠埃希氏菌ATCC25922 良好+产气肠杆菌CMCC(B)45103 良好-沙门氏菌CMCC(B)50115 良好-粪链球菌CMCC(B)32223 被抑制-贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。
贮存期二年。
规格:100g,参考文献:1.GB/5750.12-2006中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验方法微生物指标。
肉汤琼脂培养基使用说明
若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最底稀释倍数报告之(见表中例6)。
若有稀释度的平均菌菌落数均不在30-300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。
5 27 11 5 —— 270 270或2.7×102
6 0 0 0 —— <1×10 <10
7 多不可计 305 12 —— 30 500 31 000或3.1×104
质量控制:
本品接种下列菌株,置于36±1℃恒温箱中培养48±2h,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色—灰白色,圆形,边缘整齐,表面光滑,湿润。
菌落数的报告:
菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。
稀释度选择及菌落数报告方式
例次 稀释液及菌落数 两稀释液之比 菌落总数个/g或mL 报告方式个/g或mL
3、 根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、 稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
A:稀释度的选择:
应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见附表)。
营养琼脂和平板计数琼脂的区别
营养琼脂和平板计数琼脂的区别
对于了解微生物检测行业的人来说,菌落总数测定项目标准是分不同行业的,因为有食品的菌落总数测定、有空气的菌落总数测定、有水的菌落总数测定、有食品接触面的菌落总数测定,不同标准中有的使用的培养基是平板计数,有的则是营养琼脂。
那么,这两者的区别是什么呢?
根据培养基名称来看,平板计数琼脂培养基即PCA,是在08版GB中用于菌落总数测定的,配方:胰蛋白胨0.5%,酵母浸粉0.25%,葡萄糖0.1%,琼脂1.5%,蒸馏水配制;pH 6.8~7.2。
营养琼脂培养基即NA,配方:蛋白胨1%,牛肉膏0.3%,氯化钠0.5%,琼脂1.5%~2.0%,蒸馏水配制。
pH 7.2~7.4。
两者配方成分不一样,名字也不一样;但是都是可以用来做菌落总数的测定,所以说这两者从用途的本质上并没有太大的区别。
但是从实验结果来看,对于检测结果,偶尔几次试验两者的区别不大。
只是国际上有说法,在重复几百次试验后,PCA的结果略好些。
另外,从操作流程来看,用平板计数琼脂来做菌落总测定,有以下这些变化:
1、试剂从营养琼脂变成了平板计数琼脂。
2、添加了细菌总数检验测试片。
3、修改了计数计算公式。
4、添加了均质器或等效设备。
一般来说,营养琼脂(NA)和平板计数琼脂(PCA)都是用作嗜温性
细菌的培养基,二者成分大同小异,通常情况下可以互相替代。
当然如果是按照标准来做检测的话,尽量还是用与检测标准上相同的培养基。
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对照组
大肠埃希菌
2个平皿,培养温度34℃,培养48小时
金黄色葡萄球菌
2个平皿,培养温度34℃,培养48小时
枯草芽孢杆菌
2个平皿,培养温度34℃,培养48小时
结 果 判 断
对照培养基名称营养琼脂培养基厂家批号
检验者:校对者:温 度: ℃Fra bibliotek日期:日 期:湿 度:
药品检验所
检 验 原 始 记 录
第页
检品名称培养基适用性检查批 号
规 格检品编号
培养基名称营养琼脂培养基厂家
数量
检查依据:《中国药典》2010年版二部附录XI H P108页
培养基用法:取本品g,加L蒸馏水,加热煮沸使其完全溶解,摇匀分装,121℃高压灭菌20min,保存备用。
项 目
培养 条 件
菌落平均数(个)