3制药微生物培养基制备
培养基制备的方法
培养基制备的方法培养基是微生物学研究和实验室中微生物的生长和繁殖的基础。
培养基的制备主要分为固态培养基和液态培养基两种形式。
下面我将详细介绍培养基的制备方法。
1. 固态培养基制备方法：a. 准备所需材料：琼脂、食物源（如肉汤、蛋白胨等）、矿物质、维生素、葡萄糖等。
b. 称取适量矿物质、维生素和葡萄糖，并添加到蒸馏水中，溶解成浓缩液。
c. 称取适量肉汤或蛋白胨等食物源材料，并加入蒸馏水中，并在加热搅拌的条件下溶解。
d. 将步骤b和c中的溶液混合，并加热搅拌，使其完全溶解，并达到所需浓度。
e. 将溶液倒入试管或培养皿中，使用自动灌装机进行灌装。
f. 放入高压灭菌锅中，在121高压下灭菌15-20分钟。
取出后冷却至室温。
g. 检查培养基是否凝固，如凝固则放入冰箱中保存。
2. 液态培养基制备方法：a. 准备所需材料：氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、葡萄糖等。
b. 称取适量氯化钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，并加入蒸馏水中，溶解成浓缩液。
c. 称取适量葡萄糖，并加入蒸馏水中，并在加热搅拌的条件下溶解。
d. 将步骤b和c中的溶液混合，并加热搅拌，使其完全溶解，并达到所需浓度。
e. 将溶液倒入试管或培养瓶中，并使用自动灌装机进行灌装。
f. 倒入适量培养基后，使用高压灭菌锅进行灭菌。
高压灭菌条件一般为121高压15-20分钟。
g. 取出后冷却至室温，检查液态培养基是否出现浑浊或沉淀物，若有则需要重新制备。
在制备培养基过程中，需要注意以下几个方面：1. 材料选择：根据实验需要，选择适合微生物生长的食物源、矿物质、维生素等材料。
2. 材料溶解：将所需材料称取放入试管或容器中，并加入适量的蒸馏水中进行溶解，加热搅拌加快溶解速度。
3. 浓度调整：根据实验需要和微生物的生长条件，调整培养基材料的浓度，以满足微生物生长的要求。
4. 灭菌处理：使用高压灭菌锅进行灭菌处理，达到高温高压杀灭细菌、真菌和病毒的目的。
灭菌是为了减少外界微生物对培养基的污染，保证实验的准确性和可靠性。
培养基制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本成分和配制方法。
2. 熟悉培养基的灭菌操作流程。
3. 了解培养基在微生物培养中的应用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，通常由碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等组成。
根据微生物的营养需求和实验目的，可以配制不同类型的培养基。
灭菌是保证培养基无菌的关键步骤，常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤灭菌等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 酵母提取物- 胰蛋白胨- 琼脂- NaCl- K2HPO4- MgSO4·7H2O- 水- 水平式电热灭菌锅- 高压蒸汽灭菌锅- 烧杯- 玻璃棒- 试管- 移液器- 灭菌指示剂- 灭菌棉塞2. 仪器：- 电子天平- 灭菌器- 玻璃器皿四、实验步骤1. 培养基的配制：- 称取酵母提取物10g、胰蛋白胨20g、琼脂15g、NaCl 5g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g，加入适量水溶解。
- 将溶液转移至烧杯中，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
- 将溶液转移至锥形瓶中，用移液器定容至1000mL。
- 将锥形瓶置于电热灭菌锅中，进行121℃、20min的高压蒸汽灭菌。
2. 灭菌指示剂的加入：- 在灭菌后的培养基中，加入灭菌指示剂，观察指示剂的变化，确认培养基是否灭菌彻底。
3. 培养基的倒平板：- 将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倒入平板中，待凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。
五、实验结果与分析1. 培养基灭菌效果：- 通过观察灭菌指示剂的变化，确认培养基灭菌彻底。
2. 培养基平板制备：- 倒平板过程中，注意无菌操作，防止污染。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 灭菌过程中，应控制好温度和时间，确保培养基灭菌彻底。
3. 倒平板过程中，应注意无菌操作，防止污染。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了培养基的基本成分和配制方法，熟悉了培养基的灭菌操作流程，了解了培养基在微生物培养中的应用。
培养基的制作方法
培养基的制作方法培养基是微生物学研究中常用的实验材料，用于培养和繁殖微生物。
正确的制备培养基对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。
本文将介绍培养基的制作方法，以帮助读者掌握正确的制备技巧。
一、准备工作1. 清洗和消毒培养器具：包括量筒、容量瓶、烧杯、培养皿等。
使用去离子水或含0.1%次氯酸钠的消毒液进行清洗和消毒。
2. 准备所需试剂和培养基成分：包括碳源、氮源、无机盐、维生素、生长因子等。
根据实验需要选择合适的配方。
二、制备培养基步骤1. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
精确称量或计量试剂，避免误差。
2. 将所需试剂分别溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
注意溶解过程中的温度和pH值控制。
3. 将溶解好的试剂倒入容量瓶中，加入适量的去离子水，使总体积达到容量瓶标记线。
再次搅拌均匀。
4. 用适当的容器（如烧杯）接收制备好的培养基。
注意避免污染，避免气泡的产生。
5. 进行高温高压灭菌，通常为121摄氏度，压力为15磅，时间为20分钟。
确保培养基的无菌性。
6. 灭菌后，将培养基倒入培养器具（如培养皿、试管等），根据实验需要分装适量的培养基。
7. 将培养器具密封，避免外界污染。
存放于冰箱或低温冷藏室中，避光保存。
三、常见培养基的制备方法1. 营养琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需琼脂的质量。
b. 将琼脂溶解于适量的去离子水中，加热至完全溶解。
c. 加入所需营养成分，如葡萄糖、胰蛋白酶胨等。
搅拌均匀。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
2. 非琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
b. 将所需试剂溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
c. 调整pH值至所需的范围，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
四、培养基制备中的注意事项1. 注意实验室的洁净环境，避免外界污染。
2. 注意试剂的质量和纯度，避免影响培养基的质量。
3. 注意培养基的pH值控制，不同微生物对pH值有不同的要求。
微生物培养基的配制
其他物质
总结词
提供特殊营养或生理功能的物质。
详细描述
除了上述基本成分外，根据不同种类的微生物和实验需求，培养基中可能还需要添加其他物质，如维生素、氨基 酸、碱或酸等。这些物质可以提供特殊营养或调节培养环境的酸碱度，以满足某些特殊微生物的生长需求。
03
微生物培养基的配制步骤
确定培养目的
01
02
03
分离培养
为了分离出特定的微生物， 选择适合该微生物生长的 培养基。
鉴别培养
通过培养基上的微生物生 长表现，鉴别微生物的种 类或菌株。
生理生化研究
为了研究微生物的生理生 化特性，选择适合该特性 的培养基。
选择合适的培养基类型和材料
固体培养基
选择适宜的营养成分
用于微生物的分离、纯化和鉴别，常 加入琼脂作为凝固剂。
根据需要调整培养基的pH值，保证微生物的正常 生长。
灭菌处理
将配置好的培养基进行高温高压灭菌，以消除杂菌污染。 灭菌后，待培养基冷却至适宜温度后，进行分装、保存或使用。
04
微生物培养基的优化方法
通过实验确定最佳配方
实验设计
通过单因素实验、正交实验等方 法，系统地改变培养基中各成分
的浓度，以确定最佳配方。
溶氧量
对于好氧微生物，通过控制通气速率和搅拌 速度，探究溶氧量对微生物生长和产物生成 的影响，找到最适溶氧量。
选择合适的菌种或菌株
根据生产需求选择合适的菌种或菌株， 了解其生理生化特性，以便为其提供 适宜的培养条件。
对于具有相同功能的菌种或菌株，可 通过比较实验，选择生长快、产物产 量高、耐受性强的菌种或菌株。
实验指标
选择适宜的指标（如菌体生长速率、 产物产量等）来评估培养基的效果， 并确定最佳配方。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、引言在微生物学研究中，培养基的制备与灭菌是非常重要的步骤。
培养基是供养微生物生长和繁殖所必需的营养物质的混合物，而灭菌则是为了消除其中的有害微生物，保证培养基的纯净度。
本实验旨在探讨培养基的制备与灭菌的方法与步骤，以及其对微生物培养的影响。
二、培养基的制备2.1 选择培养基成分培养基的成分根据所需培养的微生物种类和目的而定，常见的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基之前，需要明确所需微生物的营养需求，选择合适的成分。
2.2 配制培养基根据所选的成分和配方，按照一定比例将各种成分溶解在适当的溶剂中，常见的溶剂包括蒸馏水和生理盐水。
注意溶解顺序和温度，保证各种成分充分溶解。
2.3 调节pH值微生物对pH值的要求各不相同，因此在制备培养基时需要调节pH值。
使用酸碱溶液逐滴加入培养基中，同时使用pH试纸或pH计检测pH值，直到达到所需的范围。
2.4 灭菌前的处理在灭菌之前，需要对培养基进行一些处理，包括过滤、加热和冷却等。
过滤可以去除其中的固体杂质和大颗粒微生物。
加热可以杀灭其中的有害微生物，常用的方法包括高温灭菌和压力灭菌。
冷却后的培养基可以用于微生物的培养。
三、灭菌实验3.1 高温灭菌高温灭菌是常用的灭菌方法之一，其原理是利用高温杀灭微生物。
将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入高温灭菌器中。
设置合适的温度和时间，一般为121℃，15-20分钟。
高温灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.2 压力灭菌压力灭菌是一种利用高温和高压杀灭微生物的方法。
将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入压力灭菌器中。
设置合适的温度和压力，一般为121℃，15-20分钟。
压力灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.3 灭菌效果验证灭菌后的培养基需要进行灭菌效果验证，以确保其中没有活菌存在。
常用的方法包括接种试验和平板计数法。
接种试验是将灭菌后的培养基接种到无菌平板上，观察是否有菌落生长。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告
实验目的，通过本次实验，掌握培养基的制备方法，为后续微生物实验提供基
础条件。
实验原理，培养基是微生物生长繁殖的营养物质，其主要成分包括碳源、氮源、磷源、微量元素和水。
培养基的制备需要根据不同微生物的生长需求进行配方，通常包括基础培养基和选择性培养基两种类型。
实验步骤：
1. 称取适量蔗糖和琼脂，加入蒸馏水中，混合搅拌至完全溶解；
2. 加入适量氨基酸、磷酸盐和微量元素，搅拌均匀；
3. 调节pH值至7.0，加热煮沸，然后灭菌；
4. 倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
实验结果，制备好的培养基呈黄色透明凝胶状，无异味，pH值稳定在7.0左右。
实验分析，本次实验中，我们成功制备了基础培养基，为后续微生物的培养提
供了必要条件。
在实验过程中，需要注意控制好各种原料的比例和加热时间，以保证培养基的质量和稳定性。
实验结论，通过本次实验，我们掌握了基础培养基的制备方法，并取得了良好
的实验结果。
培养基的质量对微生物的培养和研究具有重要影响，因此在实验过程中需要严格按照配方和操作规程进行操作，确保培养基的质量和稳定性。
实验改进，在今后的实验中，可以尝试制备不同类型的培养基，以满足不同微
生物的生长需求，并且可以对培养基的配方和制备工艺进行进一步优化，提高培养基的质量和效率。
总结，培养基的制备是微生物实验的基础，掌握好培养基的制备方法对于后续实验的顺利进行具有重要意义。
通过本次实验，我们对培养基的制备方法有了更深入的理解，为今后的实验工作奠定了基础。
以上就是本次培养基的制备实验报告内容，希望对大家有所帮助。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。
其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告实验目的，掌握培养基的制备方法和灭菌技术，保证培养基无菌，为微生物实验提供良好的生长条件。
一、培养基的制备。
1.1 培养基的组成。
培养基是微生物生长和繁殖的营养物质，通常包括碳源、氮源、矿物质盐和生长因子等。
根据不同微生物的需求，培养基的组成也有所不同。
1.2 制备步骤。
（1）称取适量的葡萄糖、蛋白胨、氯化钠等原料；（2）加入适量的蒸馏水，搅拌均匀；（3）调节pH值，通常为7.0-7.2；（4）分装至试管或培养皿中，加入琼脂（如需要固体培养基）；（5）高压蒸汽灭菌15分钟。
二、培养基的灭菌实验。
2.1 灭菌方法。
培养基的灭菌是为了保证培养基中无菌，通常采用高压蒸汽灭菌法。
在高压下，微生物及其孢子、病毒等能够被有效杀灭。
2.2 实验步骤。
（1）将制备好的培养基分装至试管或培养皿中；（2）密封好容器，放入高压灭菌锅中；（3）加水至适当高度，密封锅盖；（4）加热至121摄氏度，压力达到1.05kg/cm2后开始计时，持续15分钟；（5）关火，等待冷却后取出培养基。
实验结果，经过高压蒸汽灭菌处理后，培养基中无任何微生物生长。
证明培养基已达到无菌状态，可以用于微生物的培养和实验。
结论，通过本次实验，我们掌握了培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物实验提供了良好的条件。
同时，也加深了对无菌技术的理解和应用。
参考文献：[1] 陈华. 微生物学实验指导. 北京，高等教育出版社, 2015.[2] 王明. 实验室微生物学. 上海，上海科学技术出版社, 2018.以上为培养基的制备与灭菌实验报告。
（文档结束）。
培养基的制备步骤
培养基的制备步骤
嘿，咱今儿就来讲讲培养基的制备步骤，这可真是个有意思的事儿呢！
你想啊，培养基就像是微生物的小家园，咱得给它们打造一个舒适又营养的环境，让它们能开开心心地生长、繁殖。
首先呢，咱得准备好各种材料，这就好比是给小家园准备建筑材料一样。
什么水啊、各种营养成分啊，都得精挑细选，可不能马虎。
然后就是调配啦！就像做菜一样，得把各种材料按照一定的比例混合在一起，这可得有耐心，不能着急。
要是比例不对，那微生物们可就住得不舒服啦。
接着呢，要调节酸碱度。
这就好比给小家园调节温度和湿度一样重要，得让微生物们觉得刚刚好，不然它们可不乐意待。
再之后就是灭菌啦！这可是个关键步骤，就像给小家园来个彻底的大扫除，把那些坏家伙、杂菌都给消灭掉，给咱要培养的微生物一个干干净净的环境。
灭菌完了可不能马上就用哦，还得等它冷却下来，这就像是让小家园冷静冷静，准备迎接新主人。
等冷却好了，就可以把培养基倒到培养皿或者其他容器里啦。
这就像是给小家园摆上各种家具，让微生物们能舒舒服服地待着。
你说，这培养基的制备是不是挺有趣的？就像是在给微生物们盖房子、装修一样。
咱可得认真对待每一个步骤，这样才能培养出健康、
活泼的微生物呀！
想象一下，如果哪个步骤出了差错，那微生物们可能就长不好，或
者干脆不长了，那咱不就白忙活啦？所以啊，一定要细心细心再细心！
总之呢，培养基的制备虽然看起来有点复杂，但只要咱一步一步来，就一定能做好。
这不仅是一门技术，更是一门艺术呢！让我们一起努力，为微生物们打造出最棒的小家园吧！。
微生物培养基配制实验报告（共5篇）
微生物培养基配制实验报告(共5篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告实验目的，通过制备培养基，培养微生物，观察微生物的生长情况，了解培养基对微生物生长的影响。
实验原理，培养基是为了提供微生物生长所需的营养物质而制备的一种特定的生长环境。
培养基的制备包括选择合适的基础成分、添加适当的营养物质和调节pH值等步骤。
实验步骤：1. 准备所需材料和设备，蒸馏水、琼脂、培养基粉、试管、培养皿、pH试纸、称量器等。
2. 精确称量培养基粉，并加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀。
3. 将培养基溶液加热至沸腾，使琼脂完全溶解。
4. 调节培养基的pH值，使其达到微生物生长所需的最适pH。
5. 将培养基倒入培养皿中，待其凝固后，即可用于培养微生物。
实验结果与分析：经过制备的培养基，观察到微生物在培养基上生长良好，形成了典型的菌落。
通过不同培养基的制备，我们发现不同的微生物对培养基的要求也有所不同，有些微生物对酸性培养基更适应，有些对碱性培养基更适应。
因此，制备不同类型的培养基对于不同微生物的培养具有重要意义。
实验总结：通过本次实验，我们深入了解了培养基的制备过程和对微生物生长的影响。
制备培养基是微生物学实验中的重要环节，合理的培养基制备可以为微生物的培养提供良好的生长环境，有利于我们对微生物的研究和应用。
同时，我们也意识到不同微生物对培养基的要求不同，因此在实际应用中需要根据具体微生物的特性来选择合适的培养基。
通过本次实验，我们不仅掌握了培养基的制备方法，还加深了对微生物生长环境的理解，为今后的微生物学研究奠定了坚实的基础。
参考文献：1. 李华. 微生物学实验教程. 北京，高等教育出版社，2008.2. 微生物学实验指导. 北京，科学出版社，2015.3. 培养基制备与应用. 北京，化学工业出版社，2012.。
微生物培养基的制备
微生物培养基的制备一、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。
这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。
有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。
1、新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。
对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。
2、用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。
有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。
若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。
洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸，其作用是将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。
洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。
二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基(Media)。
由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。
我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。
1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
１）天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料，其成分难以确切知道。
用作这种培养基的主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。
用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分，但一般来讲，营养是比较丰富的，微生物生长旺盛，而且来源广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于配制实验室常用的培养基。
实验二 微生物培养基的配制和灭菌
培养基成分 牛肉膏 0.3g;蛋白胨 1g;氯化钠 0.5g;琼脂 2g;蒸馏水
100mL;pH 7.0～7.2;灭菌 1.05kg/cm2，20-25min
用量：
100-150mL/行；制备8-10个平板；2个/组（涂布/划线）
制作斜面（只需1个组制备）：无需抗生素
化学药剂消毒灭菌： 微生物实验室中常用的化学杀菌剂有升汞、甲醛、高锰酸钾、酒 精、碘酒、龙胆紫、石炭酸、漂白粉、新洁尔灭、煤酚皂溶液， 它们有的是杀菌剂，有的是抑菌剂。
培养基和玻璃器材的 灭菌方法
培养基配制的原则
配制培养基的配方，及方法 培养基蒸汽灭菌原理，方法
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
自养细菌能利用铵盐、硝酸盐作为机体生长的氮源与能源， 某些厌氧细菌在厌氧与糖类物质缺乏的条件下，也可以利用 氨基酸作为能源物质。 无机氮源：碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素 有机氮：蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。
生产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含 量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。
培养基的配制原则
一、营养成分 二、PH值 三、渗透压 四、氧化还原电位
培养基的配制原则
一、营养成分 总体原则
1. 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基， 如自养型微生物：由简单的无机物质组成
异养做生物：至少需要含有一种有机物质。
按微生物的主要类群来说，又有细菌、放线菌、酵母
菌和霉菌之分。它们所需要的培养基成分也不同，分别
实验程序2:分离培养微生物常用器皿的准备
清洗一些玻璃仪器：如三角烧瓶、试管、培养皿、吸管等。 棉塞的制作
包装培养皿和吸管等。
湿热灭菌法原理
实验三 培养基的制备
实验三培养基的制备、灭菌及微生物的分离与纯化实验三培养基的制备、灭菌及微生物的分离与纯化一、实验目的1. 了解配制培养基的一般方法和步骤；掌握牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基和马丁培养基的制备方法。
2. 了解灭菌的原理，掌握高压蒸气灭菌的操作方法。
3. 掌握严格的无菌操作技术，掌握从土壤中分离微生物的方法。
二、实验内容1．学习牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基和马丁氏培养基的配制。
2．学习高压蒸气灭菌的操作方法。
3．学习用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌；用平板划线方法分离微生物。
4．学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。
三、实验材料和用具牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HClKNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、4.5mL无菌水6管，10%酚液，49.5mL无菌水(带玻璃珠)1瓶。
土壤样品、试管、培养皿、移液管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、称量纸、牛角匙、pH试纸、棉花、报纸、记号笔、线绳、纱布、酒清灯等。
电炉、立式高压蒸气灭菌锅、手提式高压蒸气灭菌锅、超净工作台等。
四、操作步骤（一）培养基的制备1．牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如下：牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl5g，琼脂15～20g，水1000mL，PH7.4～7.6（1）称药品：按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。
牛肉膏可放在小烧杯中称量，用热水溶解后倒入大烧杯。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。
（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。
BIOLOG微生物鉴定专用培养基和接种液制备方法
BIOLOG微生物鉴定专用培养基和接种液制备方法培养基一、BUG + B培养基的制备1. 取一个容器，按量称取BUG培养基，如需配制1000mL培养基，方法如下：57 g BUG琼脂培养基950 ml 纯净水、蒸馏水或去离子水。
2.煮沸溶解。
3. 冷却后调整pH值至7.3 + 0.1 （25℃）。
4. 121℃灭菌15分钟。
5. 冷却至45-50℃。
6. 加50mL新鲜的脱纤羊血，摇匀。
7. 倒平板。
二、BUG + M培养基的制备1. 第1-5 步与BUG + B相同，除加水量为990 ml纯净水外。
2. 加10mL已灭菌的麦芽糖（浓度25%）。
3. 倒平板。
三、BUG培养基的制备1. 取一个容器，按量称取BUG培养基，如需配制1000mL培养基，方法如下：57 g BUG琼脂培养基950 ml 纯净水、蒸馏水或去离子水。
2.煮沸溶解。
3. 冷却后调整pH值至7.3 + 0.1 （25℃）。
4. 121℃灭菌15分钟。
5. 冷却至45-50℃。
6. 倒平板。
四、BUA + B培养基的制备1. 取一个容器，按量称取BUA培养基，如需配制1000mL培养基，方法如下：51.7 g BUA琼脂培养基950 ml 纯净水、蒸馏水或去离子水。
2. 用无氧的氮气吹洗下，轻微煮沸，搅拌以溶解琼脂和其它组份。
3. 冷却后调整pH值至7.2 + 0.1 （25℃）。
4. 121℃灭菌15分钟。
注意盖紧瓶盖，防止氧气进入。
5. 在无氧的氮气保护下，冷却至45-50℃。
6. 加50mL新鲜的脱纤羊血，摇匀。
7. 在厌氧环境中倒平板。
五、BUY培养基的制备1. 取一个容器，按量称取BUG培养基，如需配制1000mL培养基，方法如下：60g BUA琼脂培养基1000 ml 纯净水、蒸馏水或去离子水。
2.煮沸溶解。
3. 冷却后调整pH值至5.6 + 0.4 （25℃）。
4. 121℃灭菌15分钟。
5. 冷却至45-50℃。
微生物培养基的制备流程
微生物培养基的制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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制备微生物培养基的注意细节
制备微生物培养基的注意细节摘要：培养基是人工将多种物质按各种微生物生长需要配制而成的一种混合营养基质，用来培养或分离各种微生物的，没有培养基，微生物不能生长。
通俗的说培养基就是微生物的饭。
制备培养基,就等于给微生物营养平衡搭配,不要某种营养物质太多,也不要营养缺乏。
因此微生物培养基的制备，对检测微生物有着重要的影响。
本文对制备微生物培养基的注意细节进行简要的分析，以期为检测微生物提供有用的参考。
关键词：微生物；培养基；制备根据微生物的种类和实验目的的不同，培养基也有不同的种类和配制方法，培养基除了要满足微生物生长所要求的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的其他生活条件，如适宜的酸碱度、渗透压等。
因此根据不同种类微生物的要求，应将微生物调节到一定的ＰＨ值范围和适宜的温度。
一、称取用1/100的电子天平称取培养基所需药品。
称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。
二、溶化培养基放入烧杯中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻棒搅拌。
如果培养基中不含有琼脂，培养基不需要加热；如果含有琼脂，则需要用万用炉加热煮沸，完全溶解后，再补齐所需水，并搅拌均匀。
如果配制的培养基量很大，可用不锈钢锅加热溶化，可先用温水加热并随时搅动，防止焦化，如有焦化现象，配制的培养基就不能使用，要重新配制。
配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化，因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标，影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L，细菌不宜生长，铁含量超过0.14mg/L，妨碍细菌产毒素)。
对容易发生反应，产生沉淀的药品，要分开溶解，最后加入培养基，如磷酸氢二钾和硫酸镁。
三、调pH虽然培养基中含有缓冲物质成分，能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内，但是配出的培养基若不符合要求，就要进行必要的调整。
如果有已校准pH计，可用pH计；如果没有，可用精密的pH试纸，再根据需要用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸(微调可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸)调制所需的pH。
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发酵制药
培养基制备
氨基酸 丝氨酸 色氨酸 色氨酸 蛋氨酸 异亮氨酸 异亮氨酸 苏氨酸
氨基酸发酵的前体物质
菌体
前体物质
嗜甘油棒状杆菌 甘氨酸
异常汉逊酵母 氨茴酸
麦角菌
吲哚
脱氢极毛杆菌 2-羟基4-甲基硫代丁醇
作用：营养作用；环境条件（渗透压、pH等）； 稳定工艺控制（非营养成分，前体，促进剂， 消沫剂）。
• 培养基的组成和比例是否恰当，直接影响微生 物生长、生产和工艺选择、产品质量和产量。
发酵制药
2.4.1 培养基的成分
碳源 氮源 无机盐 水 生长因子 前体与促进剂 消泡剂
培养基制备
发酵制药
1、碳源
发酵制药
培养基制备
2、种子培养基－要求与质量控制
培养基成分必需完全，营养丰富。
用速效性、容易被利用的碳、氮源和无机盐等物质， 但浓度不宜高。
种子培养基要与发酵培养基相适应，主要成分接近， 不能差异太大。
缩短发酵的延滞期。
发酵制药
3、发酵培养基
培养基制备
•概念： 提供微生物生长、目标产物生成的生产用培养基。
发酵制药
培养基制备
3、理论计算与定量配制
• 微生物生长和生产可用下列表达式表示：
碳源和能源＋氮源＋其他营养物质→细胞＋产物 ＋CO2＋H2O＋热量
• 单位细胞生物量所需最小的营养物质: • 单位产量的最小底物浓度:
发酵制药
培养基制备
碳源和氮源进行转化率计算和分析
•初步计算：参考微生物的化学和元素组成。 •转化率：单位质量原料生产的产物量或细胞量。 •理论转化率：根据代谢途径的物料衡算 •实际转化率：发酵过程中实际测量数值计算。 •目标：使实际转化率靠近理论转化率。
粘质赛杆菌
α-氨基丁酸
阿氏棒状杆菌 D-苏氨酸
谷氨酸小球菌 高丝氨酸
产量/% 1.6 0.8 1.3 1.1 0.8 1.5 2.0
发酵制药
培养基制备
抗生素发酵常用的前体物质
抗生素 青霉素G
青霉素O 青霉素V
放线菌素 C3 链霉素
前体物质 苯乙酸或在发酵中能 形成苯乙酸的物质， 如乙基酰胺等 烯丙基－硫基乙酸 苯氧乙酸
•作用： 不仅要满足菌体的生长和繁殖，还要满足菌体合成目 标产物，是发酵生产中最关键和最重要的培养基。
发酵制药
3、发酵培养基－要求
培养基制备
• 营养物质浓度和粘度适中
• 组成上丰富完整
• 不同菌种和不同产物，对培养基的要求差异很 大，组成和配方需要优化
发酵制药
4、补料培养基
培养基制备
• 概念：发酵过程中添加补充的培养基。
单因素实验
例1 实验流程
考察不同碳源、氮源、磷酸盐浓 度对菌株发酵摇瓶的影响
正交实验 摇瓶发酵
确定最优碳源、氮源、磷酸盐浓度 采用最优培养基，确定初始pH 中试验证
生产发酵正交实验 确定大宗原料培养基组成
发酵制药
培养基制备
无法从生化反应原理来推断和计算出最佳培养基配 方
根据生理学和生物化学理论
参照前人所用的经验培养基 结合菌的特殊生物学和产品特征要求 进行大量细致和周密的试验研究
按发酵过程中所处位置和作用：斜面或平板固 体、种子、发酵和补料培养基。
发酵制药
培养基制备
1、固体培养基
概念： 细菌和酵母的固体斜面或平板培养基，链霉菌和丝状 真菌的孢子培养基。 制备： 液体培养基添加1.0-2.0%琼脂粉。 作用： 提供菌体的生长繁殖，形成孢子。
发酵制药
培养基制备
1、固体培养基－要求与质量控制
发酵制药
培养基制备
（3）控制培养基的黏度：
对发酵的影响： 高黏度的培养基，不易彻底灭菌 影响发酵的通气搅拌等物理过程 直接影响菌体对营养的利用 目标产物的分离提取造成困难 措施：固体不溶性成分，淀粉、黄豆粉等增加培养 基的黏度，酶水解，降低大分子物质
发酵制药 （4）控制灭菌操作：
培养基制备
不同促进剂所起的作用
• 起生长因素的作用； • 可推迟菌体的自溶； • 抑制某些合成其他产物的途径而使之向所需产物
的途径转化； • 降低了生产菌的呼吸，使之有利于抗生素的合成； • 改变发酵液的物理性质，改善通气效果； • 可与抗生素形成复盐，降低发酵液中抗生素的浓
度和促进抗生素的合成等。
抗生素 链霉素 去甲基链霉素 四环素
肌氨酸
肌醇、精氨酸、甲硫 氨酸
抗生素
前体物质
金霉素 氯化物
溴四环素 红霉素
灰黄霉素
溴化物
丙酸、丙醇、丙酸 盐、乙酸盐 氯化物
发酵制药
培养基制备
6、促进剂
• 概念： 促进产物生成的物质，但不是营养物，也不是 前体的一类化合物。
• 种类： 氯化物有利于灰黄霉素、金霉素合成。
表面活性剂吐温、清洗剂，脂溶性小分子化合 物等，起诱导作用。
发酵制药
5、生长因子
培养基制备
概念：
维持微生物生长所必需的微量有机物，不起碳源和氮源 作用。
种类：
维生素、氨基酸、嘌呤或嘧啶及其衍生物、脂肪酸等。 天然成分中含有：一般无需添加 。 营养缺陷型菌株：必需添加。
发酵制药
培养基制备
6、前体
• 概念： 加入到发酵培养基中的某些化合物，被直接结合到 目标产物分子中，而自身的结构无多大的变化。
发酵制药
培养基制备
小结
培养基组成与作用：C、N、无机盐、水、生 长因子、前体与促进剂、消泡剂
培养基制备与质量控制：固体、种子、发酵 培养基
生产用培养基制备：原则、实验方案、优化
发酵制药
思考题
培养基制备
（1）培养基组成成分有哪些，有何作用？
（2）固体培养基、种子培养基、发酵培养基的 组成特点及其如何衔接？
发酵制药
培养基制备
1、培养基设计一般原则
• 生物学原则：根据不同微生物营养和反应需求设计。 营养物质组成：较丰富，浓度适当。
成分之间比例：恰当，C/N比适宜，有机和无机氮
原料之间：不能产生化学反应。适宜的pH和渗透压
• 工艺原则：不影响通气搅拌、分离精制和废物处理， 过程容易控制。
• 低成本原则：原料来源方便，质量稳定，质优价廉。 • 高效经济原则：满足菌体生长和合成产物的需求，
• 单细胞培养基： 营养丰富，满足菌体生长迅速，不能引起变异。
• 孢子培养基： 基质浓度较低，无机盐浓度适量，以利于孢子形成。 营养不宜太丰富，否则不易产生孢子。
发酵制药
2、种子培养基
培养基制备
•概念：
供孢子发芽和菌体生长繁殖，摇瓶和种子罐培 养基,为液体。
•作用：
使种子扩大培养，增加细胞数目，生长形成强 壮、健康和高活性的种子。
发酵制药
培养基制备
（2）控制培养基原料的质量：
来源与种类的选择
农产副品：因品种、产地、加工、贮存条件不同 而质量差异较大。
化学原料：杂质含量也不相同。
措施：保持稳定的原料来源。 更换原料时，必需再进行一系列试验，确
保产量和质量的控制和稳定性。
发酵制药 原料的选择试验：
培养基制备
不同碳源、氮源对菌种生长的能力和产物的生产能力 很不相同。 对原料进行试验，选择满足发酵要求的来源。 注意： •碳氮浓度与配比：适宜 •速效和缓效成分相互配合，发挥综合优势 •pH：配制时加入酸碱性物质搭配，甚至使用缓冲剂。
去甲基金霉素 头孢菌素C 利福霉素B
抗生素的抑制剂
被抑制的产物
抑制剂
甘露糖链霉素 甘露聚糖
链霉素
乙硫氨酸
金霉素
溴化物、巯基苯并噻唑、硫 脲嘧啶、硫脲
金霉素
磺胺化合物、乙硫氨酸
头孢菌素N
L-蛋氨酸
其他利福霉素 巴比妥药物
发酵制药
培养基制备
7、消沫剂
• 概念： 降低泡沫的液膜强度和表面黏度，使泡沫破裂的化 合物。
（3）如何研制生产用培养基？
• 作用：稳定工艺条件，延长发酵周期，提高目标产 物产量
• 组成：各种必要的营养物质，碳源、氮源、前体
• 制备：按单一成分配制，各自独立控制，或按一定 比例制成复合补料培养基。
发酵制药
培养基制备
5、控制发酵培养基质量
（1）控制水质：
恒定水源和恒定的水质。 地下深层井水，对水质定期化验检查，使用符合要 求的水质配制各种培养基 措施：检测与控制水质参数 pH、溶解氧、可溶性固体、污染程度、各种矿物， 特别是重金属的种类和含量。
培养基制备
概念：
构成微生物细胞和代谢产物中碳素的营养物质。 作用：
为正常生理活动和过程提供能量来源，为细胞物 质和代谢产物的合成提供碳骨架。
发酵制药
碳源种类
培养基制备
糖类：葡萄糖、淀粉、糊精和糖蜜 脂肪：豆油、棉籽油和猪油 醇类：甘油、乙醇、甘露醇、山梨醇、肌醇 蛋白类：蛋白胨、酵母膏 速效碳源：糖类、有机酸 迟效碳源：酪蛋白水解产生的脂肪酸
发酵制药
培养基制备
3、无机盐和微量元素
• 概念： 组成生理活性物质或具有生理调节作用矿物质 • 作用方式： 低浓度起促进作用，高浓度起抑制作用。 • 种类：盐离子 磷、硫、钾、钠、镁、钙，常常添加 铁、锌、铜、钼、钴、锰、氯，一般不加。
发酵制药
培养基制备
4、水
• 菌体细胞的主要成分。 • 营养传递的介质。 • 良好导体，调节细胞生长环境温度。 • 培养基的主要成分之一。
发酵制药
培养基制备
2、氮源
概念： 构成微生物细胞和代谢产物中氮素的营养物质。 作用： 为生长和代谢主要提供氮素来源。 种类：无机氮源、有机氮源