核酸扩增检测实验室设计及工作流程
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所有实验用洁净物品如离心管、吸头等的存放和准备处。 商品试剂盒： 75%乙醇、焦碳酸二乙酯（DEPC）处理水、
有机溶剂等可能需要自配 自制试剂：一次较大量配制，然后分装成小瓶保存，每次
检测时，取出一小瓶使用，未用完的即弃掉，不再使用。 仪器设备主要有加样器、天平、离心机和冰箱等，最好配
备超净工作台。
如果在标本接收区分离血清（浆）标本，有1 台分离血清（浆）用离心机、1台生物安全柜、 1台冰箱、加样器及相应一次性经高压处理的 消耗品如带滤芯吸头、标本接收编号记录本以 及记号笔等即可。
如果不在标本接收区分离血清（浆）标本，只 是简单的接收，则就不需要分离血清（浆）用 离心机、生物安全柜、加样器及其消耗品。
谢谢！
其他实验室
其他实验室
产物分析区
扩增区
标本制备区
试剂准备区
传递窗
空气流向
传递窗
空气流向
传递窗
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
缓冲间
专用走廊
工作流向
关于“区域”合并
如使用扩增和产物分析同时完成的实时荧光 PCR仪进行核酸扩增检测，扩增区和产物分析 区可以合并。
如使用核酸提取、扩增及产物分析等均在一台 仪器上完成的全自动核酸检测分析仪，标本制 备区、扩增区和产物分析区可合并。
扩增及产物分析区
热循环仪的电源应专用，并配备一个 不间断电源（UPS）或稳压电源。
每次扩增后，可使用可移动紫外灯对 扩增热循环仪进行照射。
扩增仪应定期进行校准。
核酸扩增实验室最有效的防“污染”措施
实验室的“通风” 次氯酸钠溶液的使用 1mol/L HCl溶液的使用 紫外照射 无水乙醇溶液？
其他实验室
其他实验室
走廊
走廊
其他实验室
空气流向
标本制备区
其他实验室
其他实验室
其他实验室
标本制备区
空气流向+
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空来自百度文库流向++
门
门
扩增和产 物分析区 空气流向++
其他实验室
试剂准备 区
空气流向
其他实验室
其他实验室
空气流向
走廊
走廊
其他实验室
空气流向+
其他实验室
标本制备 区
理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
理想的核酸扩增实验室设计B
产物分析区
扩增区
空气流向
空气流向 缓冲间
专用走廊
标本制备区
试剂准备区
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
工作流向
核酸扩增检测实验室设计的一般原则
核酸扩增检测实验室的设计
依据：卫生部颁发的《临床基因扩 增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
血液标本的接收
通常的工作流程：标本采集 血清分离
编号 保存或检测
应在四个测定区域之外的地方或区域内接 收
接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
标本的接收区的仪器设备要求
无“基因”或“核酸”概念的重要性
符合基本要求的核酸扩增检测实验室的条件
（1）试剂准备区、标本制备区和扩增及产物分析区等三 个或四个区域在物理空间上，必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空间还是在使用中，应始终处于完全的分隔 状态，不能有空气的直接相通。
（2）各区的可移动的仪器设备及各种物品包括实验记录 本、记号笔、试管架及清洁用具等必须专用。
扩增及产物分析区
扩增反应体系的配制和提取核酸的加入，可在标本制备区 也可在本区内进行，关键是要防止产物的污染。如果空间 允许的话，也可在一个独立的区域内进行。
加样时，先加提取的核酸模板样本，每加完一个即盖好盖 子，然后加阳性质控核酸模板，再就是标本制备阴性质控 和仅含按样本一样稀释的主反应混合液的扩增阴性质控， 这样做的目的是，最大可能地测出以前扩增产物的交叉污 染。
标本制备区
仪器设备主要有混样设备、核酸提取仪、生物安 全柜、加样器、高速台式（冷冻）离心机、加热 模块或水浴箱、冰箱等。生物安全柜不应放在实 验室门口等易受人员走动影响的地方，也不应直 对分体式空调。
主要是用于血液样本的混样、核酸样本的提取。
加样器吸头必须带滤芯。
使用加热模块时，如在模块孔中填入二氧化硅细 砂，然后将标本管置于细砂中温育，可得到较为 一致的温育温度。
（3）应在标本制备区、扩增及产物分析区等相对有可能 出现“污染物”的区域安装排风扇或其它排风和有效的装置， 以使空气按试剂准备区标本制备区扩增（及产物分析） 区方向流动。
核酸扩增实验室的工作流程
试剂准备区 标本制备区 扩增区及扩增产物分析区
试剂准备区
核酸扩增实验室中最为“洁净”的区域，不应有任何核酸 的存在，包括试剂中所带的标准品和阳性对照。
各区独立
注意风向 因地制宜
“十六字口诀”
方便工作
A
扩增区
门 产物分析区
标本制备区 门
门 试剂准备区
门
外走廊
门
B
扩增及产物 分析区
标本制备区 门
试剂准备区 门
门
外走廊
门
标本制备区
空气流向
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向
门
门
扩增和产 物分析区
空气流向
其他实验室
试剂准备区
空气流向
有机溶剂等可能需要自配 自制试剂：一次较大量配制，然后分装成小瓶保存，每次
检测时，取出一小瓶使用，未用完的即弃掉，不再使用。 仪器设备主要有加样器、天平、离心机和冰箱等，最好配
备超净工作台。
如果在标本接收区分离血清（浆）标本，有1 台分离血清（浆）用离心机、1台生物安全柜、 1台冰箱、加样器及相应一次性经高压处理的 消耗品如带滤芯吸头、标本接收编号记录本以 及记号笔等即可。
如果不在标本接收区分离血清（浆）标本，只 是简单的接收，则就不需要分离血清（浆）用 离心机、生物安全柜、加样器及其消耗品。
谢谢！
其他实验室
其他实验室
产物分析区
扩增区
标本制备区
试剂准备区
传递窗
空气流向
传递窗
空气流向
传递窗
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
缓冲间
专用走廊
工作流向
关于“区域”合并
如使用扩增和产物分析同时完成的实时荧光 PCR仪进行核酸扩增检测，扩增区和产物分析 区可以合并。
如使用核酸提取、扩增及产物分析等均在一台 仪器上完成的全自动核酸检测分析仪，标本制 备区、扩增区和产物分析区可合并。
扩增及产物分析区
热循环仪的电源应专用，并配备一个 不间断电源（UPS）或稳压电源。
每次扩增后，可使用可移动紫外灯对 扩增热循环仪进行照射。
扩增仪应定期进行校准。
核酸扩增实验室最有效的防“污染”措施
实验室的“通风” 次氯酸钠溶液的使用 1mol/L HCl溶液的使用 紫外照射 无水乙醇溶液？
其他实验室
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走廊
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空气流向
标本制备区
其他实验室
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试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
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门
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试剂准备 区
空气流向
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标本制备 区
理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
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专用走廊
工作流向
理想的核酸扩增实验室设计B
产物分析区
扩增区
空气流向
空气流向 缓冲间
专用走廊
标本制备区
试剂准备区
空气流向 缓冲间
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工作流向
核酸扩增检测实验室设计的一般原则
核酸扩增检测实验室的设计
依据：卫生部颁发的《临床基因扩 增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
血液标本的接收
通常的工作流程：标本采集 血清分离
编号 保存或检测
应在四个测定区域之外的地方或区域内接 收
接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
标本的接收区的仪器设备要求
无“基因”或“核酸”概念的重要性
符合基本要求的核酸扩增检测实验室的条件
（1）试剂准备区、标本制备区和扩增及产物分析区等三 个或四个区域在物理空间上，必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空间还是在使用中，应始终处于完全的分隔 状态，不能有空气的直接相通。
（2）各区的可移动的仪器设备及各种物品包括实验记录 本、记号笔、试管架及清洁用具等必须专用。
扩增及产物分析区
扩增反应体系的配制和提取核酸的加入，可在标本制备区 也可在本区内进行，关键是要防止产物的污染。如果空间 允许的话，也可在一个独立的区域内进行。
加样时，先加提取的核酸模板样本，每加完一个即盖好盖 子，然后加阳性质控核酸模板，再就是标本制备阴性质控 和仅含按样本一样稀释的主反应混合液的扩增阴性质控， 这样做的目的是，最大可能地测出以前扩增产物的交叉污 染。
标本制备区
仪器设备主要有混样设备、核酸提取仪、生物安 全柜、加样器、高速台式（冷冻）离心机、加热 模块或水浴箱、冰箱等。生物安全柜不应放在实 验室门口等易受人员走动影响的地方，也不应直 对分体式空调。
主要是用于血液样本的混样、核酸样本的提取。
加样器吸头必须带滤芯。
使用加热模块时，如在模块孔中填入二氧化硅细 砂，然后将标本管置于细砂中温育，可得到较为 一致的温育温度。
（3）应在标本制备区、扩增及产物分析区等相对有可能 出现“污染物”的区域安装排风扇或其它排风和有效的装置， 以使空气按试剂准备区标本制备区扩增（及产物分析） 区方向流动。
核酸扩增实验室的工作流程
试剂准备区 标本制备区 扩增区及扩增产物分析区
试剂准备区
核酸扩增实验室中最为“洁净”的区域，不应有任何核酸 的存在，包括试剂中所带的标准品和阳性对照。
各区独立
注意风向 因地制宜
“十六字口诀”
方便工作
A
扩增区
门 产物分析区
标本制备区 门
门 试剂准备区
门
外走廊
门
B
扩增及产物 分析区
标本制备区 门
试剂准备区 门
门
外走廊
门
标本制备区
空气流向
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向
门
门
扩增和产 物分析区
空气流向
其他实验室
试剂准备区
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