小白鼠走迷宫
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小白鼠走迷宫实验
程瑞(2010301060005)章晓祎(2010301060009)
李丹(2010301060021)刘雨田子(2010301060026)
孙赫(2010301060030)
武汉大学生命科学学院生物学基地1班
【摘要】本实验通过在人为设置的迷宫里,小白鼠不断感受复杂通道的结构,调整和改进自己的行为。
随着训练次数的增加,条件反射逐渐建立,以至在大脑皮层形成记忆。
通过记录动物搜寻食物的时间长短可以对此加以评价。
同时可以通过控制变量法,考察一些自身因素(性别)和外界因素(如音乐和酒精)对此的影响。
【关键词】记忆能力性别酒精
前言:《实验动物学》最近10年,遗传科学家对两种动物建立了一系列遗传工程的技术,可以改变(去掉或加上)其体内基因的组成,这两种动物是老鼠和果蝇。
在哺乳类动物中,老鼠可谓具有得天独厚的优势。
昆虫类的果蝇行为简单,脑也较小,不如哺乳类的老鼠脑较大。
此外,老鼠也更接近人类,通过老鼠的实验可以间接地了解人脑的功能。
学习和记忆是神经系统高级中枢的重要机能之一。
学习是神经系统不断接受环境刺激而获得的行为习惯和经验;获得的行为习惯和经验维持一定时间的能力就是记忆。
动物的学习和记忆能力对其生存具有重要意义。
本次实验,我们通过观察,分析小白鼠学习和记忆过程,理解大脑在动物行为机制建立中的作用,类比发现促进人脑记忆形成的因素,试图发现更好的记忆方法;通过实验,了解数据统计分析在科学研究中的重要作用,提升实验技能。
1.材料与方法
1.1材料
同胎雌小白鼠6只,雄小白鼠3只,后补进雌小白鼠4只,雄小白鼠2只,迷宫,养鼠笼,鼠粮,奶酪,干草,秒表,1ml注射器(喂酒用),实验手套,温度计,50%vol酒
1.2方法
1.2.1实验准备
置备迷宫。
迷宫高度以小白鼠不能爬上为宜。
迷宫内道路宽度保持一致,且以稍宽于小白鼠身型为宜。
对雌小白鼠进行随机分组,并对所有小白鼠编号。
对性别组雄鼠为A1 A2 A3,对照组雌鼠为B1 B2 B3,酒精组雌鼠为C1 C2 C3。
保持生存状态一致,每次实验前饥饿12小时,但提供饮水。
实验环境准备:测量室温。
尽可能在相同室温下进行所有实验。
同时维持实验时室内安静、光亮适宜。
1.2.2实验阶段
在迷宫内特定地点放置小块奶酪,注意气味掩蔽。
取小白鼠1只放置在迷宫入口,开始记时。
注意观察小白鼠走迷宫过程,并适当记录。
小白鼠找到食物,停止记时,记录数据。
间隔5分钟,用以清理气味。
重复上述实验。
每只小白鼠每天重复3次,直至小白鼠能迅速找到食物。
酒精组:在进行前15分钟按体重计算剂量(0.02ml/g)进行灌喂50%VOL酒。
关于酒精摄取量以小白鼠总血量(占体重质量分数)8.3%进行计算,使血液中乙醇浓度维持在0.1%(微醺)。
由于对小白鼠进行空腹灌喂,所以假设15分钟后所有摄入酒精都进入血液。
具体为:(50%VOL酒)摄取量V=(m鼠*8.3%*0.1%)/(ρ酒精*5%) (单位:ml,g)
1.2.3数据统计分析
结合统计学方法和生物学知识分析结果得到结论。
2.结果
2.1数据记录(小数点前面的单位为分钟,后面的单位为秒)
1)小白鼠利用肢体接触迷宫挡板来确定前方是否有障碍,不断的摸索尝试中前进。
2)其视线朝向正前方,通常表现在迷宫的某一片区域内徘徊,忽略了身边的正确出口,从而在走迷宫时表现出盲目性。
1)大粉(B1)一直走不到终点,经食物引诱才到,可能会对实验产生不可忽视的误差。
2)老鼠攀爬迷宫时给予一定体罚。
3)右耳黑(C3)喂酒后走路明显摇晃,进入抢救,耳朵充血,身体状况不宜再进行实验。
1)双耳蓝(A2
)走路有畸形状,身体不正常(展不开),但行走速度极快,还企图多次“越
狱”(注意防范),同时进食相对较慢。
2)大粉(B1)较木讷,与前几次试验呈现相同状态,且对食物不热诚。
仍经过食物引诱才完成实验。
3)右耳黑(C3)依旧没有恢复,耳朵依旧充血,眼睛无法完全睁开,基本丧失行动能力,放弃实验。
(于第二天早晨发现死亡)
1)大黄(A1)抵达终点后总是不吃食物。
在捉取时其尾巴会以高节奏拍打地面,发出响声,
小白鼠尾巴十分具有攻击性。
2)双耳蓝(A2)比较虚弱。
3)左耳蓝(A3)走路摇晃,进食欲望不强,疑似物理性受伤。
4)左耳黑(C2)喂酒后逃跑意识严重,行为变得兴奋
实验日记:
2010.11.23周二
领回3雄6雌鼠,9只一笼,正常喂养。
2010.11.24周三
本日中午最后喂食。
晚7点生科院给小鼠标记,置备齐全实验材料。
尝试给小鼠喂酒。
小鼠被水打湿,后经烘干。
2010.11.25周四
降温使5只小鼠濒临死亡,经孙赫抢救救回4只,逝去1只。
2010.11.26周五
生科院又领回雌鼠2只。
2010.11.28周日
领回的2只雌鼠死亡,首批8只死亡3只。
目前存活着5只。
2010.11.30周二
疾控中心购鼠6只,2雄4雌,3周龄。
6只合笼。
因鼠年幼,改变饲料并加强保暖,喂食软麦片,并以热水温笼,毛巾挡风。
虑及小白鼠尚弱小,计划预养1周后实验。
2010.12.1周三
首批5只又伤亡1只,存活4只。
新6只早晚各喂一次,食物水源充足,中午换笼清洁。
2010.12.2—12.7
新6只食量渐长,开始吃鼠粮。
体型渐大,料理同前,期间有打斗争食现象。
首批4只存活1雄2雌,生命力顽强。
2010.12.8周三
本日早晨最后喂食。
晚7点生科院实验:1)以颜料标记2)环境吵冷凉,鼠不活跃3)未作酒精处理。
是夜,新6只中1只作耳朵穿棉线处理。
2010.12.9周四
棉线鼠正常,将新6只所有鼠作棉线穿耳标记处理。
2010.12.10周五
新6只中4只耳部所穿棉线遭脱落。
棉线标记失败。
2010.12.13周一
正常喂养,中午清笼。
2010.12.14周二
用水笔对老鼠耳朵发起再一次标记。
分别有左耳蓝(A3)、右耳蓝(B3)、双耳蓝(A2)、无耳蓝(B2)、左耳黑(C2)、右耳黑(C3)。
老鼠非常活跃,健康体征良好。
通过对老鼠进食的观察发现双耳蓝(A2)行为比较突出。
2010.12.15周三
加深耳部标记。
对于首批存活的三只老鼠进行标记。
分别有大黄(A1),大粉(B1),大蓝(C3)。
2010.12.16—12.25
实验进行中。
2.2折线图分析
3.讨论
3.1性别对小鼠学习与记忆能力的影响
由平均数据可得雄鼠记忆力略高于雌鼠。
但因为雌鼠组的B1过慢对雌鼠组造成较大误差,所以结果并不确定。
因为样本容量限制无法得出更确切的结论。
由实验数据可得:雌鼠记忆力较稳定,雄鼠波动较大。
雄性大脑中灰质多于雌性,雌性大脑中白质多于雄性一般来说,灰质好比是大脑中的一个个信息处理单元,而白质是联系这些信息处理单元的网络。
推测雌鼠的大脑更善于将迷宫的图像联系起来。
而雄鼠因为信息联系起来能力稍弱所以波动较大。
进一步分析
第一,试验完成后,我们发
现雌性小老鼠虽然初始走
迷宫并不熟练,但是学习进
步很大,由于有个体差异的
原因,有一只雌老鼠对走迷
宫有一点迟钝,不仅进步微
小,而且完成任务所用时间
非常的多;由此可得,雌性
小老鼠对新环境的即时应
变能力不强,但是有很强的
后期学习适应能力,在进化
方面有优势;
第二,雄性老鼠虽然有
很强的即时应变能力,
但是对环境的长期适应
能力不好,相对于雌鼠,
在进化和适应环境方面
有劣势。
3.2酒精对小鼠学习与
记忆能力的影响
多次实验后酒精组C1C2
鼠走迷宫所需时间趋于
稳定,均比对照组B2B3
所需时间长,排除对照
组B1鼠的误差,可初步得到结论,酒精对小鼠记忆能力有着不良影响。
酒精能够让小鼠的神经变得迟缓,从而抑制他走迷宫的能力。
进入体内的乙醇由于不能被消化吸收,会随着血液进入大脑。
在大脑中,乙醇会破坏神经原细胞膜,并会不加区别地同许多神经原受体结合。
酒精会削弱中枢神经系统,并通过激活抑制性神经原(伽马氨基丁酸)和抑制激活性神经原(谷氨酸盐、尼古丁)造成大脑活动迟缓。
伽马氨基丁酸神经原的紊乱和体内的阿片物质(抗焦虑、抗病痛)的分泌会导致多巴胺的急剧分泌。
体内阿片物质同时还与多巴胺分泌的自动调节有关。
酒精会对记忆,决断和身体反射产生影响,并能导致酒醉和昏睡。
酒精组C3鼠的死亡也恰恰证明了酒精对小鼠的不良影响,当然,也有可能是因为我们对小鼠灌喂酒精的剂量不慎太大而导致其死亡。
同时,这个实验也提醒我们,不要过量饮酒。
有研究表明,长期的酗酒会严重的损伤大脑海马体,影响认知和记忆能力。
1/4的酗酒者出现过焦虑,抑郁,幻觉或妄想等症状。
误差分析
1、由于所选研究样品太少,试验次数限
制,结果可能不太准确
2、老鼠活动时室内温度无法真正达到室
温,可能会影响老鼠活动,而有些对温
度有敏感的老鼠更是会出现活动困难
3、实验过程中有老鼠怀孕,可能会影响
其活动能力,试验中有老鼠行动过于缓
慢,可能就是这个原因
4、对酒精的喂食方法可能不太专业,可
能在实验过程对老鼠有过大的折磨,而
且酒精的量不好把握,直接影响到小鼠
的行动能力
致谢
本实验得到杜老师、高老师的指导,各学长学姐及校图书馆和百度搜索引擎的帮助,谨致谢意。
对本实验做出巨大贡献的小白鼠们表达敬意。
小鼠饲养手记:
1.保暖:由于实验时间在冬季,小鼠体积很小,维持体温的能力不强,所以保暖措施尤
为重要。
起初我们借鉴前辈的经验,在鼠笼里铺报纸,再放上一些卫生纸碎屑,但效果不好,有小鼠险些冻死。
后来我们向其他组同学借了木屑,外加卫生纸屑铺在鼠笼里,小鼠由于天性会在木屑中挖洞,数只小鼠挤在一起保暖效果很好。
最好能将鼠笼放在纸箱里并将纸箱盖上,有条件的可以贡献一条毛巾盖在笼上或放在笼里,效果都很好。
在有太阳的中午可以将鼠笼放在窗台上晒太阳,保持干燥,但不要忘记在日落之前将鼠笼收回,也要小心鼠笼掉到楼下。
在下雪等恶劣天气最好将鼠笼放在寝室,平时可以放在走廊。
2.喂食:切忌在无需饥饿的情况下喂足食物,避免小鼠自相残杀(这是非常有可能发生
的事)。
小鼠是杂食性动物,理论上什么都可以吃,但偏爱谷类,可以买瓜子花生喂养,有条件的买鼠粮,更有条件的可以买奶酪。
另,出大门右走至高架处有一花鸟市场可以买到专业设备。
注意,院里提供的喂水器极有可能漏水,小鼠一旦被淋湿就很容易冻死,有条件最好去花鸟市场买一个好一点的喂水器。
3.“种内斗争”:若有小鼠被咬伤一定要单独喂养,并且对肇事鼠进行一定惩罚。
喂食
时小鼠会争抢食物,记得对弱势小鼠单独关照。
参考文献
[1] 黄诗笺主编《动物生物学实验技术》高等教育出版社施普林出版社2001.8:109,131,132
[2] 罗满林、顾为望主编《实验动物学》中国农业出版社 2002.8P127-143.
[3] 苗明三主编《实验动物和动物实验技术》中国医药出版社 .北京.1997.6
[4] Danneman,Peggy《Laboratory mouse》高等教育出版社 2007。