气相色谱的内标法定量相关材料(精)

用气相色谱的内标法定量时, 内标物需具备什么条件?

1. 内标物的分子结构、性质与待测组分的相似或相近，且在待测组分附近出峰。

2. 试样中不存在内标物，且内标物应与试样中各组分完全分离，即在色谱图上内标物单独出峰。

3. 内标物应是纯物质或含量准确已知。

4. 内标物与试样互溶，且不发生不可逆化学反应。

气相色谱分析中，内标法的优点是什么，在什么情况下使用内标法进行定量分析内标法的优点是：①在进样量不超限(色谱柱不超载的范围内，定量结果与进样量的重复性无关。②只要被测组分及内标物出峰，且分离度合乎要求，就可定量，与其他组分是否出峰无关。③很适用于测定药物中微量有效成分或杂质的含量。由于杂质(或微量组分与主要成分含量相差悬殊，无法用归一化法测定含量，用内标法则很方便。

当某种混合物组分复杂不能知道所有成分时首选内标法。

例子；

气相色谱内标法测定甲缩醛的含量，选用正构烷烃内标物比较好、

顶空气相色谱内标法测定乳酸钠溶液中残留溶剂

在制作内标标准曲线时应注意什么?

在用内标法做色话定量分析时，先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做重量比和面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致，因此，在制作标准曲线时，不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速

等，还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时，各点并不完全落在直线上，此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差，在使用过程中应定期进行单点校正，若所得值与平均值的偏差小于2，曲线仍可使用，若大于2，则应重作曲线，如果曲线在铰短时期内即产生变动，则不宜使用内标法定量。

定量分析中怎样选择内标法或外标法？

选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液，进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中，进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。

内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。

选择内标物有4个要求：1. 内标物应是该试样中不存在的纯物质；2. 它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3. 加入内标物的量应接近于被测组分；4. 色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。

内标法的优点是测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。

二内标法优缺点

在做含量测定时依照什么原则来选定方法的？

我们一般作体外药物分析时均采用外标法，体内药物分析，因提取步骤烦琐，都采用内标法进行校正，但如果仪器稳定、方法的重现性好，也可使用外标法，国外体内药物分析用外标法的也有不少，但最好使用内标

法。

对于体内药物分析，分析方法的误差反而不是那么的重要，而在样品处理的过程中引入的误差要引起足够的重视，所以，一般在处理过程中加入内标以校正误差。这个时候，回收率的高低又不是绝对的要求很高，虽然要求绝对回收率在70%或者80%以上，但是，有时候低一些也无所谓，关键是回收率的稳定性，测定的重现性。

一般内标法能够消除进样量不准造成的系统误差，在采用自动进样器的前提下，这两种方法的精密度差别并不大。但是，建立内标法色谱条件明显要麻烦些，所以在采用自动进样器的仪器上，尽可以采用外标法进行测定。

药典中采用内标法进行测定的往往是一些老的品种，现在一般的趋势是采用外标法测定。实际上，内标法中需要对两个色谱峰进行积分同样也会引起误差增大的。

数据处理

色谱分离参考图：

举例

内标法测定甲苯含量

（1）记录实验条件。

（2）从打印出的色谱分析结果上将苯、甲苯的峰高填入表中

: （3）根据标准溶液分析测定所得到的数据，按下式计算出甲苯的峰高校正因子(以苯为标准物：

i s s i h h m h m f . . /=）甲苯（（4）根据甲苯试样溶液分析测定所得到的数据，按下式计算出样品中甲苯的含量(以苯

为

内标物：

%100. . . /⨯=）甲苯（样甲苯h s s i f m m h h w