分光光度计解析
752紫外可见分光光度计使用方法解析
752紫外可见分光光度计一、仪器的工作原理分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。
各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。
τ=I/Iolog I/Io=KCLA= KCL从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时.透过的光是根据溶液的浓度而变化的,752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。
二、仪器的安装、使用、安装1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查,电源电压是否正常,接地线是否牢固可靠,在得到确认后方和接通电源使用。
2 仪器经过运输和搬运等原因,会影响波长准确度,应进行仪器调校后使用。
使用:仪器使用前需开机预热30min。
本仪器键盘共有4个键,分别为; 1 A /τ/C/F1SD2 ▽/0%3?/100%4 A /τ/C/F键:每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。
A——吸光度(Absorbance)T——透射比(Trans)C——浓度(conc)F——斜率(Factor)(2)F值通过按键输入(后面介绍如何设置)5SD键:该键具有2个功能a)用于RS232串行口和计算机传输数据(单向传输数据,仪器发向计算机)。
b)当处于F状态时,具有确认的功能,即确认当前的F值,并自动转到C,计算当前的C 值(C=F*A)。
6 ▽/0%键:该键具有2个功能a)调零;只有在τ状态时有效,打开样品室盖,按键后应显示0.000。
b)下降键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动减1,如果按住本键不放,目动减1会加快速度;如果F值为0后,再按键它会自动变为1999。
而按键开始自动减1。
7 ?/100%键;该键具有2个功能a)只有在A、τ状态时有效,关闭样品室盖,按键后应显示0.000、100.0。
紫外可见分光光度计使用中常见问题解析
紫外可见分光光度计使用中常见问题解析分光光度计是实验室里最常用的一种理化分析仪器,本文就分光光度计在使用过程中出现的几个常见问题,如仪器的预热、波长准确度的检查与校正、吸收池的使用方法、吸光度测定重复性等问题进行分析,并提出解决这些问题的适宜方法。
紫外可见分光光度计是分析测试实验室里常见的一种分析仪器,用于测定被测物质在一定波长照射下所产生的吸光度的大小,从而实现对物质进行定性或定量分析。
在平时的日常教学及到企业调研时,发现在分光光度计使用问题上,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不规范的问题,下面就常见的一些问题进行讨论。
1关于仪器的预热问题在一般分光光度计的使用说明书上,要求仪器预热时间约20分钟;若是带微处理器的分光光度计,开机后仪器自动进入自检(初始化)状态,约需10分钟左右。
在分光光度计预热这个环节上,很多使用者或多或少存在问题,如开机只预热电路系统(不调节波长、打开吸收池暗箱盖预热等)或认为初始化过程就是预热等等。
对带微处理器有自检功能的分光光度计,开机后仪器自检(初始化)结束后,在测定窗口上,设置所需波长值,用一个吸收池装上纯净水置于光路上,调“0000A”后,预热仪器,当仪器显示读数不再变化后即可进行测定。
对于紫外可见分光光度计,由于有双光源(钨灯与氘灯),为了延长灯的使用寿命,开机自检完成后可以关掉测定时不用的光源灯。
2关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时,是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。
当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降,这时才应进行波长准确度的检查,最简易的检查方法(粗检)是:仪器开机后,调节波长为580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能观察到一长方形的黄色光斑,说明波长准确度属正常范围,否则就应进行波长校正。
当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后,必须进行波长准确度的检查与校正。
粗检同上,其校正方法有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。
752紫外可见分光光度计使用方法解析
752紫外可见分光光度计一、仪器的工作原理分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。
各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。
τ=I/Iolog I/Io=KCLA= KCL从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时.透过的光是根据溶液的浓度而变化的,752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。
二、仪器的安装、使用、安装1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查,电源电压是否正常,接地线是否牢固可靠,在得到确认后方和接通电源使用。
2 仪器经过运输和搬运等原因,会影响波长准确度,应进行仪器调校后使用。
使用:仪器使用前需开机预热30min。
本仪器键盘共有4个键,分别为; 1 A /τ/C/F1SD2 ▽/0%3∆/100%4 A /τ/C/F键:每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。
A——吸光度(Absorbance)T——透射比(Trans)C——浓度(conc)F——斜率(Factor)(2)F值通过按键输入(后面介绍如何设置)5SD键:该键具有2个功能a)用于RS232串行口和计算机传输数据(单向传输数据,仪器发向计算机)。
b)当处于F状态时,具有确认的功能,即确认当前的F值,并自动转到C,计算当前的C 值(C=F*A)。
6 ▽/0%键:该键具有2个功能a)调零;只有在τ状态时有效,打开样品室盖,按键后应显示0.000。
b)下降键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动减1,如果按住本键不放,目动减1会加快速度;如果F值为0后,再按键它会自动变为1999。
而按键开始自动减1。
7 ∆/100%键;该键具有2个功能a)只有在A、τ状态时有效,关闭样品室盖,按键后应显示0.000、100.0。
UV752N紫外可见分光光度计解析
UV752N紫外可见分光光度计
一、UV752N型紫外可见分光光度计仪器简介
UV752N型紫外可见分光光度计可广泛应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制、司法刑侦、检验检疫林业、地质勘探、食品检测等行业,是理化实验室常用的分析仪器之一
二、UV752N型紫外可见分光光度计技术参数
★光学系统:CT光栅单色器,1200/mm
★波长范围:195nm ~1020nm
★光谱带宽:4nm
★波长准确性:±nm
★波长重复性:1.0nm
★光度测量范围:0~199.0%,0~1.999A,0~1999C
★光度准确性:±.5%T
★光度重复性:0.2%T
★测量光程:100nm
★杂散光:<0.3%T(220nm 360nm
★稳定性:±.004A/小时(500nm,预热1小时
★显示方式:4位液晶
★信号输出:RS232C
★光源:6V10W进口PHILIP钨灯进口长寿命氘灯
★工作电压:220/110VAC, 50-60HZ
可选配100mm比色皿(适用于糖厂钢铁厂饲料厂使用
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详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项紫外可见分光光度计是一种科学仪器,它可以测量物质分子吸收光谱。
它还可以用来测量样品中物质的含量,以及检测物质的结构和化学性质。
作为一种重要的分析工具,它在化学、生物学、制药等领域中都得到了广泛的应用。
本文详细解析了紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项。
紫外可见分光光度计是一种原理上可以让用户对紫外线和可见光源中某些分子作出反应、精确测量样品中物质含量的仪器。
它是专业用来测量物质分子吸收光谱的仪器。
根据吸收光谱,用户可以精确测量样品中物质的含量,以及计算出样品的结构和化学性质。
它的使用对于科学研究和制药领域都有很重要的意义。
紫外可见分光光度计的使用非常简单,但需要遵循一些基本的步骤和注意事项。
首先,使用者要正确安装、组装紫外可见分光光度计,其次,要确保紫外可见分光光度计处于稳定的工作状态。
仪器应该置于室内,且要保持不变温,以避免对测量结果造成干扰。
其次,使用者要根据实验要求调整紫外可见分光光度计的参数,以获得最真实的测量结果。
最后,使用者要按照说明书的要求进行定期的维护保养。
另外,在使用紫外可见分光光度计过程中,还应注意以下几点:1.不要将样品放置在仪器上方,以免影响读数的准确性。
2.使用前应将样品放置在室温下2小时以上以便读数准确。
3.实验中所用样品不能带有油脂、杂质等物质,以免影响测量结果。
4.使用高温时,应注意样品具有一定的稳定性,以免受温度的影响而产生误差。
5.实验中如遇到仪器故障,及时反馈给生产厂家,以便及时进行维修。
综上所述,紫外可见分光光度计的正确使用对于科学研究和制药领域都具有重要的意义。
因此,使用者在使用紫外可见分光光度计时一定要遵守上述步骤和注意事项。
只有正确使用,才能得到更准确、更可靠的测量结果,以提高科学研究和制药水平。
分光光度计的原理与应用解析
分光光度计的原理与应⽤解析紫外可见分光光度计的原理与应⽤分光光度计就是利⽤分光光度法对物质进⾏定量定性分析的仪器。
它是现代实验室检测⽤的常规仪器。
常⽤于核酸、蛋⽩定量以及细菌⽣长浓度的定量。
在印染⽅⾯,我们可以⽤分光光度计测量染⾊时染料的上染百分率,以及整理在织物上助剂的浓度,还可以⽤于颜⾊的测量。
同时它还⼴泛地应⽤于⾷品检测、农药的检测及⼯业上⽯油的检测等。
紫外可见分光光度计在实验中的应⽤⾮常⼴泛,故我们要熟悉并掌握它的原理及应⽤。
⼀、分光光度计的组成各种型号的可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单⾊器、吸收池、检测器及信号指⽰系统。
1.光源在紫外可见分光光度计中,常⽤的光源有两类:热辐射光源和⽓体放电光源。
热辐射光源⽤于可见光区,如钨灯和卤钨灯;⽓体放电光源⽤于紫外光区,如氢灯和氘灯。
2.单⾊器单⾊器的主要组成:⼊射狭缝、出射狭缝、⾊散元件和准直镜等部分。
单⾊器质量的优劣,主要决定于⾊散元件的质量。
⾊散元件常⽤棱镜和光栅。
3.吸收池吸收池⼜称⽐⾊⽫或⽐⾊杯,按材料可分为玻璃吸收池和⽯英吸收池,前者不能⽤于紫外区。
吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm 光径吸收池最为常⽤。
4、检测器检测器的作⽤是检测光信号,并将光信号转变为电信号。
现今使⽤的分光光度计⼤多采⽤光电管或光电倍增管作为检测器。
5、信号显⽰系统常⽤的信号显⽰装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及⾃动记录和数字显⽰装置等。
⼆、分光计的分类国际上⼀般按紫外可见分光光度计的仪器结构将其分为单光束、准双光束、双光束和双波长四类。
单光束可见分光光度计光度准确度差。
常见的721、751、753、754 等可见分光光度计都是单光束仪器,因为他们的分析误差较⼤,所以, 它们在使⽤上受到限制。
⼀般来讲, 对要求较⾼的制药⾏业、质量检验⾏业、科研等⾏业不适宜使⽤单光束紫外可见分光光度计。
准双光束紫外可见分光光度计有两种类型: ⼀种是两束单⾊光, ⼀只⽐⾊⽫, 两只光电转换器; 另⼀种是⼀束单⾊光, ⼀束复合光,⼀只⽐⾊⽫, 两只光电转换器。
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项紫外可见分光光度计是多功能实验仪器中的一种,它可以测量和分析样品中的紫外可见光谱的吸收。
由于紫外可见分光光度计的多种用途,它已成为实验室中不可缺少的仪器之一。
本文将详细介绍紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项,以助于使用这种仪器的人员能够更加正确有效地使用该仪器。
首先,在使用紫外可见分光光度计之前,应检查仪器的各个部分和电源。
确保所有接头处都接好,确保仪器的电源也被正确插入。
其次,将样品分离出来,并将其原液和添加剂放入样品瓶中,然后将样品瓶装入仪器的样品腔内,这是进行测量的基本程序。
接下来,在配置仪器的参数和设置时,需要仔细校准谱线周期。
紫外可见分光光度计测量波长为200到900nm之间,但可根据样品的特性调整其扫描范围,以适应不同的应用需求。
最后,在完成配置后,操作员将进行实际测量。
接下来,我们来谈谈在使用紫外可见分光光度计时应该注意的事项。
首先,使用时应注意安全,任何维修或检修工作都应在专业的技术人员的指导下进行。
此外,请勿将恒温槽设定过高,否则可能会烧坏恒温槽以及样品。
其次,在使用仪器之前,请严格检查每个部件及其安装是否完好,确保各部件间的连接是正确的,以免测量过程中出现问题。
再次,在测量过程中应注意,不要让仪器受到震动,否则将影响测量的准确性。
最后,在使用之后,应当关闭采样灯管,按下关机按钮,以确保仪器的健康和安全。
以上就是本文所介绍的关于紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项。
紫外可见分光光度计是多功能实验仪器中的一种,它可以测量和分析样品中的紫外可见光谱的吸收,是实验室中不可缺少的仪器之一。
使用前应确保所有部件安装正确,安全地进行操作,使用后应关闭电源,并及时检查、清洗和保养,以确保该仪器的正常使用。
分光光度计 原理
分光光度计原理
分光光度计是一种常用的光学分析仪器,它基于光的吸收和透过性质来测定溶液中物质的浓度。
分光光度计的工作原理可概括为以下几个步骤:
1. 光源:分光光度计通常采用可见光、紫外光或红外光作为光源。
光源发出的光经过准直和色散装置,得到一定波长范围内的单色光。
2. 样品室:光通过进入样品室,其中样品室通常由一个透明的玻璃或石英池构成,以容纳待测物质。
样品室还会有一个专门调节光程长度的装置。
3. 滤光片或光栅:进入样品室的光会通过滤光片或光栅,这样可以选择出特定波长的光,以用于检测特定的物质。
滤光片或光栅会根据不同的波长进行选择和调节。
4. 探测器:通过滤光片或光栅选择出的光进入探测器。
探测器可根据光的强度或能量进行测量,常用的探测器包括光电二极管、光电倍增管或光电流计。
5. 数据分析与显示:探测器接收到光信号后,会将光强度转换为电信号,并通过放大和转换电路进行处理。
最后,测量结果会通过显示屏或计算机显示出来。
常见的测量结果表达方式包括吸光度、透射率和浓度等。
通过测量样品吸光度或透射率的变化,分光光度计可以对溶液中的物质浓度进行定量分析,常用于化学、生物、药物等领域中的定量分析实验。
原子吸收光谱仪 分光光度计
原子吸收光谱仪分光光度计
原子吸收光谱仪(Atomic Absorption Spectrophotometer,AAS)是一种用于分析金属元素含量的仪器。
它利用原子在特定波长
下吸收光线的原理,通过测量样品中金属元素吸收光线的强度来确
定其浓度。
分光光度计是AAS中的一个重要部分,它能够分解来自
样品中的光线,并测量吸收光线的强度。
AAS分光光度计的工作原理是基于原子在特定波长下吸收光线
的特性。
当样品被加热至高温时,其中的金属元素会被激发并跃迁
至高能级。
然后,通过向样品中传入特定波长的光线,可以使金属
原子吸收并跃迁至高能级。
分光光度计会测量样品吸收光线的强度,从而得出金属元素的浓度。
AAS分光光度计在许多领域都有广泛的应用,包括环境监测、
食品安全、药物分析等。
它具有高灵敏度、高选择性和高准确性的
特点,能够快速、准确地分析样品中金属元素的含量。
因此,AAS
分光光度计在科学研究和工业生产中发挥着重要作用。
总的来说,AAS分光光度计作为原子吸收光谱仪的核心部件,
是一种非常重要的分析仪器。
它的高灵敏度和准确性使其成为许多
行业中不可或缺的工具,为金属元素含量的分析提供了有力支持。
随着科学技术的不断发展,AAS分光光度计将会在更多领域展现其价值,为人类的发展和进步做出更大的贡献。
分光光度计的工作原理
分光光度计的工作原理分光光度计是一种常用的实验仪器,用于测量物质溶液中的吸光度。
它的工作原理基于光的吸收和透射的特性,通过分析溶液中不同波长的光的强度变化,可以确定物质的浓度和化学组成。
1. 光源分光光度计的工作原理首先涉及光源的选择和使用。
常见的光源包括白炽灯、氘灯和钨灯等。
这些光源会发出连续光谱,即从紫外到红外的各种波长的光线。
光源会发出的光通过一个光栅或棱镜进行分光,将不同波长的光线分开,形成光谱。
2. 样品室样品室是分光光度计中用于放置溶液样品的区域。
样品室通常由两个透明的玻璃窗组成,样品正好位于这两个窗口之间。
当光通过样品室时,一部分光被样品吸收,一部分光透过样品。
3. 光路与检测器经过样品室的光线会进入光路系统,通过透镜的收集和聚焦,最终到达检测器。
常用的检测器包括光电二极管或光电倍增管。
检测器会将光信号转换为电信号,并将其量化以便显示和记录测量结果。
4. 比较测量法分光光度计的工作原理可以基于比较测量法进行。
在这种测量方法中,首先要对纯溶剂进行基线校准,即测量不含任何溶质的溶剂的吸光度,以获得一个无吸光的基准值。
然后,将待测样品放入样品室中,测量样品的吸光度。
通过比较样品吸光度和基准值,可以确定样品中溶质的浓度。
5. 定量分析分光光度计还可以用于定量分析,即通过测量样品吸光度来确定溶质的浓度。
在定量分析中,通常使用标准曲线法。
首先,准备一系列已知浓度的溶液标准样品。
然后,测量这些标准样品的吸光度,得到吸光度和浓度之间的关系。
最后,通过测量待测样品的吸光度,利用标准曲线可以推算出溶质的浓度。
总之,分光光度计的工作原理是基于光的吸收和透射特性的。
通过测量样品吸光度,可以判断溶质的浓度和化学组成。
这种仪器广泛应用于生物、化学、环境等领域,为科学研究和实际应用提供了有力的工具。
可见光分光光度计原理
可见光分光光度计原理
可见光分光光度计是一种用于测量物质溶液中吸光度的仪器。
它的原理基于比尔-朗伯定律,即溶液中溶质的浓度与其吸光度成正比。
光度计的基本结构由光源、分光装置、样品室和光电探测器组成。
光源可以是白炽灯、氘灯或钨灯,它会发射出连续谱的可见光。
分光装置将白光分解成不同波长的单色光,常见的分光元件包括光栅和棱镜。
样品室通常是一个透明的试管或石英池,用于容纳待测溶液。
当光通过样品室时,溶质会吸收特定波长的光,吸收的强度与溶质的浓度成正比。
最后,光电探测器会测量透过样品室的光的强度,并将其转换为电信号。
实际测量中,首先校准光度计,在无样品的情况下,调整零点和百分比透光率的刻度。
然后将待测溶液放入样品室中,将溶液的吸光度转化为百分比透过率。
透过率可以使用自动计算机或手动计算方法得到。
根据比尔-朗伯定律,透过率与溶质的浓度成正比,可以通过透过率计算溶质的浓度。
总之,可见光分光光度计通过测量溶质对可见光的吸收来间接测量溶液中溶质的浓度。
理论基础是比尔-朗伯定律,实际测量中需要校准光度计,然后将吸光度转化为透过率来计算溶质的浓度。
分光光度计工作原理
分光光度计工作原理
分光光度计是一种用于测量物质溶液中吸收、透射或反射光线强度的仪器。
它
的工作原理基于光的吸收特性,通过测量样品对特定波长的光的吸收程度来确定样品中物质的浓度或其他性质。
下面将详细介绍分光光度计的工作原理。
首先,分光光度计通过光源产生一束白光,然后使用光栅或棱镜将白光分解成
不同波长的单色光。
这些单色光经过选择后,通过样品池中的样品溶液。
在样品中,特定波长的光会被样品中的物质吸收,而其他波长的光则会透射或反射出来。
接下来,分光光度计使用光电二极管或光电倍增管等光电探测器来测量样品对
各个波长光的吸收或透射程度。
这些光电探测器将光信号转换为电信号,并通过放大和数字化处理后,得到样品对各个波长光的吸收或透射数据。
然后,分光光度计使用内置的计算机或外部计算机对得到的数据进行处理,根
据比色法或光度法等原理,计算出样品中物质的浓度或其他性质。
这些计算结果可以直接显示在仪器的屏幕上,也可以通过打印机或计算机输出。
最后,分光光度计通过校准和标定等方法,确保测量结果的准确性和可靠性。
校准是指通过使用标准溶液来调整仪器的零点和灵敏度,以保证测量的准确性;标定是指通过测量一系列标准溶液的吸光度,建立浓度与吸光度之间的标准曲线,以便后续样品的浓度测量。
总的来说,分光光度计的工作原理是利用光的吸收特性来测量样品中物质的浓
度或其他性质。
它通过分解白光、测量样品对各个波长光的吸收或透射程度,然后经过数据处理和校准标定等步骤,最终得到样品的浓度或其他性质的测量结果。
分光光度计在化学、生物、环境等领域有着广泛的应用,是一种十分重要的分析仪器。
紫外分光光度计的原理
紫外分光光度计的原理紫外分光光度计是一种用于测量物质对紫外光吸收的仪器,它利用了物质分子在紫外光作用下的能级跃迁和吸收现象,从而实现对物质浓度和化学结构的分析。
紫外分光光度计的原理基于光的吸收和透射特性,下面将详细介绍其工作原理。
首先,紫外分光光度计通过紫外光源产生一定波长的紫外光束,这些光束通过单色器进行单色处理,然后进入样品室。
在样品室中,样品溶液吸收部分紫外光,其余部分透射通过样品。
接着,光束分为两部分,一部分进入光电倍增管,另一部分进入参比池。
光电倍增管产生电信号,经过放大、处理,最终转换为吸光度值。
参比池用于校正光源强度和单色器的漂移,保证测量结果的准确性。
紫外分光光度计的原理是基于比尔定律的。
比尔定律指出,物质溶液对单色光的吸收与其浓度成正比。
根据比尔定律,紫外分光光度计通过测量样品吸收光的强度和参比池的吸收光强度,计算出样品的吸光度。
进而根据标准曲线或者已知吸光度和浓度的关系,可以确定样品的浓度。
在实际应用中,紫外分光光度计的原理还涉及到光源的选择、单色器的性能、样品室的设计等因素。
光源的选择直接影响到测量的灵敏度和准确性,单色器的性能决定了光束的单色度和分辨率,样品室的设计则影响到样品的均匀性和稳定性。
因此,在使用紫外分光光度计时,需要严格控制这些因素,以确保测量结果的可靠性和准确性。
总之,紫外分光光度计的原理是基于物质对紫外光的吸收特性,利用比尔定律实现对物质浓度和化学结构的分析。
在实际应用中,需要注意光源、单色器、样品室等因素对测量结果的影响,以确保测量的准确性和可靠性。
紫外分光光度计在化学、生物、环境等领域有着广泛的应用,是一种重要的分析仪器。
分光光度计工作原理
分光光度计工作原理分光光度计是一种用于测量物质溶液中物质浓度或化学反应速率的仪器。
它利用光的吸收、透射和散射特性来测量溶液中的物质浓度,是化学分析中常用的一种仪器。
分光光度计的工作原理主要包括光源、样品室、检测器和数据处理系统。
首先,光源发出一束白光,经过光栅或凹面镜的分光装置分成不同波长的单色光。
这些单色光经过样品室时,会与样品中的化合物发生相互作用,吸收特定波长的光。
样品室中的溶液吸收的光强度与样品中溶质的浓度成正比,这就是分光光度计测量溶质浓度的基本原理之一。
其次,经过样品室的光进入检测器。
检测器会将样品吸收的光转换成电信号,然后将电信号送入数据处理系统进行处理。
数据处理系统会根据检测器接收到的信号计算出样品中溶质的浓度,并将结果显示在仪器的屏幕上或输出到打印机上。
在分光光度计的工作过程中,需要注意一些影响测量结果的因素。
例如,样品室中的溶液应该是均匀的,以确保光能够均匀地通过样品。
另外,样品室的光程长度也会影响测量结果,光程长度越长,样品吸收光的强度就越大。
总的来说,分光光度计通过测量样品吸收、透射或散射光的强度来确定样品中化合物的浓度,其工作原理基于光的吸收特性。
通过合理地选择光源、分光装置、检测器和数据处理系统,可以有效地测量样品中化合物的浓度,为化学分析提供了重要的技术手段。
分光光度计的应用范围非常广泛,包括环境监测、食品安全、药物分析等领域。
它的工作原理和测量方法相对简单,但在实际应用中需要严格控制各种影响因素,以确保测量结果的准确性和可靠性。
随着科学技术的不断发展,分光光度计的性能和测量精度也在不断提高,将为化学分析和科学研究提供更加可靠的技术支持。
分光光度计的原理
分光光度计的原理
分光光度计是一种用于测量物质溶液中物质浓度、吸光度等参数的仪器,其原
理主要基于光的吸收和透射特性。
在分光光度计中,光源发出的光线通过样品后,被光电二极管或光电倍增管检测,然后将检测到的光信号转换成电信号,最终通过数据处理得到所需的测量结果。
在分光光度计中,光源发出的连续光谱经过单色器分解成单一波长的光,然后
通过样品后,光电二极管或光电倍增管检测到通过样品后的光信号,再将其转换成电信号。
当样品中的物质吸收了特定波长的光线后,通过光电二极管或光电倍增管检测到的光信号就会减弱,这种减弱的程度与样品中物质的浓度成正比。
因此,通过测量光线透射或吸收的变化,就可以得到样品中物质的浓度或吸光度。
分光光度计的原理可以用于分析物质的浓度、反应速率等参数。
通过测量样品
吸收或透射的光强,可以得到样品中物质的浓度,从而实现对物质浓度的快速准确测量。
同时,分光光度计还可以用于研究物质的反应速率。
在化学反应中,随着反应的进行,吸光度会随之变化,通过测量吸光度的变化,可以得到反应速率的信息。
除此之外,分光光度计还可以用于分析样品中的杂质。
在样品中存在多种物质时,各种物质对光的吸收特性不同,通过测量吸光度的变化,可以对样品中的杂质进行分析和检测。
总之,分光光度计是一种基于光的吸收和透射原理的测量仪器,通过测量样品
中光的吸收或透射变化,可以实现对物质浓度、反应速率等参数的快速准确测量,具有广泛的应用前景。
分光光度计的使用原理
分光光度计的使用原理
分光光度计是一种用于测量光的强度和波长的仪器。
它的基本原理是通过光的分光作用将进入仪器的光线分成不同波长的光束,然后利用光的强度来测量样品对不同波长的吸光度。
首先,进入光度计的光线经过一个入射光栅或棱镜,被分解成不同波长的光束。
这些光束被聚焦到一个狭缝上,经过狭缝后形成一条狭窄的光束。
然后,样品被置于光束路径中,光束通过样品时会产生吸收或透射。
光通过样品后,进入一个检测器中。
检测器可以是光电二极管、光电倍增管或光电管等。
当光通过检测器时,会产生一个电信号,其大小与光的强度成正比。
测量过程中,仪器会记录下不同波长下的光的强度对数,即吸光度。
通过测量不同波长下的吸光度,可以得到样品的吸收谱。
根据比尔-朗伯定律,吸光度与样品浓度成正比。
因此,可以
利用分光光度计来测量样品浓度。
为了减小误差,分光光度计通常会进行白光校正和背景校正。
白光校正是通过一个透明样品(如纯水)来调整仪器的零点,以消除仪器自身的漂移。
背景校正则是通过在测量中引入一个未加样品的“空白”溶液,用于纠正样品中其他杂质的影响。
通过上述原理,分光光度计可以广泛应用于化学分析、生物分析、环境监测等领域,用于测量物质的浓度、反应速率等。
UV9100型紫外可见分光光度计解析
UV9100型紫外可见分光光度计解析UV9100型紫外可见分光光度计操作指南:1.翻开仪器右侧面下方的电源开关,将仪器背后面下方的灯光选择杆拨到“ D〞处〔即氘灯〕,启动仪器左侧面下方的氘灯触发按钮。
2.调节“波长调节旋钮〞。
3.推开比色室的盖子。
将空白和样品溶液分别仔细倒入特殊的石英比色皿中,用卫生纸擦去比色皿外表的余液,然后将比色皿插入比色室里的卡座中,拉动卡座拉杆,将空白液的比色皿置于光路中。
4.按一下“ MODE〞键,使“ %T〞的指示灯亮,在比色室的盖子翻开的状态下按一下“0%T〞键,使显示窗中的数字为0.000 。
关闭比色室的盖子,按一下“100%T ABSO〞键,使显示窗中的数字为100.0 。
这样,仪器就调整好了,请注意,每测一次样品前都要重新调整“ 0%〞和“100%〞。
再按一下“ MODE〞键,使“ABS〞指示灯亮,按一下“ 100%T ABSO〞键,使显示窗中的数字为0.000 。
5.拉动卡座拉杆,将样品液的比色皿置于光路中,此时,显示窗中的数字即为样品的吸光度。
6.关于比色皿:比色皿的前后有 2 个光滑面,是用来对准光路的,左右有 2 个粗糙面,手只能拿比色皿的粗糙面,不能接触光滑面。
比色皿的内部的清洗只能用蒸馏水润洗〔用洗瓶〕,不可用卫生纸或其它物品捅进去擦洗,比色皿的 2 个光滑面一定要保持清洁,如发现有指纹或残液,须用卫生纸轻轻擦拭干净。
7.比色皿是成套发放的,严禁混用,本实验使用的是石英比色皿〔底部标记S〕,一套 2只。
8.使用完毕后先用自来水内外冲洗干净比色皿,再用洗瓶冲洗比色皿的内外外表 1 次,将其粗糙面朝下斜靠在培养皿中。
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***分子吸收能量同样具有量子化的特征,即分子只能 吸收等于两个能量之差的光子能量,产生三种能级跃迁。 由于三种能级跃迁所需能量不同,所以需要不同波长的 电磁辐射使他们跃迁,及在不同的光学区域产生吸收谱 带,便产生了相应的三种光谱一电子光谱,振动光谱和 转动光谱。
ΔE电子>>ΔE >>ΔE
式中E电子、E振动、E转动分别表示电子运动状态的能量、 分子中原子间的相对振动及分子绕其质量中心转动的 能量。
根据量子理论,分子吸收的能量应与能级差相对应, 也即被吸收的光子的频率应与分子跃迁的能级差相适应:
ΔE=E2-E1=hυ或υ=(E2-E1)/h=ΔE/h
1240 (nm)
E
****分子对紫外-可见光的吸收所产生的光谱是具有较宽 波长范围的吸收带。在分子中每个电子在能级之间产生
跃迁的同时伴随有许多振动和转动能吸的跃迁。所以, 分子对紫外-可见光的吸所产生的光谱是具有较宽波长范 围的吸收带,它是由许多波长非常接近的线状光谱聚集 而成,称其为带状光谱。如图所示。
分光光度计
一、光学分析法 二、分光计的应用 三、分光光度计 四、UV Probe软件包
光学分析法
光学分析法是一类极其重要和最常用的仪 器分析方法。它是基于电磁辐射与物质相互 作用后产生的物理现象(辐射,吸收或散射) 而建立起来的分析方法。它既可以进行定性, 也可以进行定量和结构分析,其应用范围非 常广泛。
分光光度法是建立在分子对于光吸收基础上的一 种分析方法,它属于分子光谱的范畴。可用于无 机物和有机物的定量分析,也可以进行有机物的 定性及结构分析。
应用领域:物理学、化学、生物学、医学、材 料学、环境科学、化工、医药、环境检测、冶 金。
物质颜色和吸收光颜色的关系
物质颜色
吸
颜
色
收 波
光 长(nm)
黄绿 黄 橙 红
浓度
Abs
分子吸收光谱
* 分子也具有特征的分子能级。分子内部的运动可 分为: 价电子运动,分子中原子在平衡位置的振动和分 子绕其中心的转动。因此分子具有电子能级、振动能 级和转动能级。
**当分子受到外界的光能照射之后,引起分子能 级与原子能级跃迁不同。当分子受到外界的光能照射 之后,引起了分子中价电子的能级跃迁, 同时,也引 起分子中原子的振动能级和转动能级的跃迁即从基态 能级能级跃迁到激发态能级。
紫外吸收光谱及可见吸收光谱,一般包含若干谱带系, 不同谱带系相当于不同的电子能级跃迁,一个谱带系(即 同一电子能级跃迁)含有若干谱带,不同谱带相当于不同 的振动能级跃迁,同一谱带内又包含若干光谱线,每一条 相当于转动能级的跃迁。它们的间隔约为0.25nm。一般的 分光光度计,由于分辨率的限制观察到的为合并成较宽的 带,所以分子光谱是一种带状光谱。
紫红 紫 蓝
绿蓝 蓝绿
紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 绿 红
400 ~ 450 450 ~ 480 480 ~ 490 490 ~ 500 500 ~ 560 560 ~ 580 580 ~ 600 600 ~ 650 650 ~ 750
吸收光谱
UV/VIS/NIR 光照射到物质上
透射光 I1
检测器
光谱与电子的跃迁
产生原因:吸收光谱产生是由于分子中价电子能级 的跃迁和分子与离子中的振动及转动能级的跃迁引 起的。
电子能级差ΔE最大,一般为1~20eV,电子光谱在 紫外-可见区;吸收光波长范围200 400 nm(近紫 外区) ,可用于结构鉴定和定量分析。吸收光波长 范围400750 nm (可见区),主要用于有色物质的定 量分析 振动能级差ΔE次之,一般为0.05~1eV;纯振动光 谱在红外区;吸收光波长范围2.51000 m ,主要用 于有机化合物结构鉴定。 转动能级差最小,一般为0.05~10-4eV,纯转动光 谱在远红外区。
吸收
A=
log
1 =
eC l
T
此处
T
e
l C
: 透射率
: 摩尔消光系数 : 光程长 : 浓度
成立条件:①单色光 ②稀溶液
A = log —1 = - log T = e C l = abc
T 吸光度、透过率与浓度的关系
(波长、吸收池光程一定)
1
0.8
0.6
0.4
0.2
%T
0 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4
光谱法是基于光和物质相互作用时,测量由物质内部 发生量子化的能级间的跃迁所产生的发射,吸收或散射光 谱的波长和强度进行分析的方法。
2. 光谱法分类
原子光谱
{ 光谱法 分子光谱
原子光谱是原子外层或内层电子产生能级跃迁而形 成的,其光谱为线状光谱。属于原子光谱分析的方法有 原子发射光谱法(AES)、原子吸收光谱法(AAS)、原子荧 光光谱法(AFS) 及X射线荧光光谱法(XFS, X-Ray Fluorescence Spectrometry )等。
入射光 I0
自光源
光程长 透射率 T =
I0
I1
紫外/可见分光光度计的简单原理:
➢朗伯定律(1760年):物质对光的吸收
与物质厚度成正比:A=f(b)
➢比耳定律(1852年):物质对光的吸收
与物质浓度成正比:A=f(c)
LAMBERT-BEER定律
当一束平行的单色光通过某一均匀溶液时,溶液的吸 光度与溶液的浓度和光程的长度的乘积成正比。
1. 光学分析法分类
{ 非光谱法
光学分析法 光谱法
非光谱法是基于光与物质相互作用时,通过测量电 磁辐射的 诸如折射、干涉、散射、衍射及偏振等基本 性质发生变化的分析方法。 非光谱法中,电磁辐射只 改变了传播方向及速度等,而物质的内能不发生变化。 属于这类分析方法有的折射法、浊度法、旋光法、散射 等方法。
分子光谱则是分子中电子能级、振动和转动能级的 变化形成的,其光谱为带状光谱,也即连续光谱。属于 该类分析方法的有紫外-可见分光光度法(UV-vis),红外 吸 收 光 谱 法 (IR) , 分 子 荧 光 光 谱 法 (MFS) 及 化 学 发 光 法 (CLS)和分子磷光光谱法(MPS)等。
3. 分光光度法
0.6 0.1 0
200 250 300 350 400 450 500 /nm
K2CrO4吸收曲线
230 240 250 260 270 nm
苯蒸气的吸收光谱
可见分子的能量由多方面因素决定的,其总能量由下式 表示:
E总= E电子+E振动+E转动 在分子中,每一个电子能级都有多个可能的振动能级存 在;而每一个振动能级又有许多可能的转动能级存在。 所以,一个分子所具有的能级数目远远多于原子能级数 目。因此,分子吸收光谱比原子光谱复杂得多。