兽医生物制品概述优秀课件

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兽医生物制品学ppt课件

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巢式PCR示意图

3.反向PCR(IPCR):
反向PCR用于扩增已 知序列两端的未知 DNA片段,因此一对 引物与常规PCR一样 与已知序列互补但是 方向却是相反的。 IPCR步骤主要包括酶 切、自身连接还化、 扩增和序列分析。
四、聚合酶链反应(PCR)


PCR技术是DNA体外扩增技术,以单链DNA为模 板,在DNA聚合酶的作用下引物沿5‘→3’方向不断延 伸,利用4种dNTP合成新的互补DNA链,然后在高 温下变性为单链,再在低温下使引物DNA片段与其复 性,并在DNA聚合酶的作用下开始新一轮DNA合成。 经如此反复循环(变性-退火-延伸)30~60次左右 就可在短时间内将目的DNA扩增数百万倍。PCR技术 为疾病诊断提供了简便、快速、特异、敏感的检测手 段,适于检测不宜分离培养或含量极微的样品中病原 体特定基因片段的有无,或分析不同样品中此片段的 异同。 为了检测RNA样品可以先进行反转录,然后进行 PCR扩增DNA,这就是RNA的反转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)。PCR与酶切图谱分析和分子杂交技术
免疫标记法


抗杂交体标记法:在杂交过程中作为探针的核酸 与其互补的核酸能形成杂交体,杂交体本身具有 一定抗原性,因而可用抗杂交体的抗体并结合带 标记的第二抗体对杂交体进行检测 半抗原标记法:通过对已知核酸片段做一定的修 饰,在探针的某些部位连接半抗原,探针通互补 核酸片段 杂交后,与半抗原的特异性抗体结合, 再通过结合带标记的第二抗体对形成的杂交体进 行检测。
斑点杂交
1、原理及步骤:提取病毒、细菌、Cell DNA ↓ 点样品至膜、干燥、固定 ↓ 探针、DNA变性、杂交 ↓ 洗膜、放射自显影 2、应用: ↓ 1)混合样品DNA 结果分析

免疫诊断与防治—生物制品应用(动物微生物技术课件)

免疫诊断与防治—生物制品应用(动物微生物技术课件)

细菌疫苗和类毒素制造工艺流程
病毒性组织疫苗制造工艺流程
生物制品的概念
• 利用微生物、寄生虫及其组织成分或代谢产物以及动物或 人的血液与组织液等生物材料研制成的,用于传染病或其 他疾病的预防、诊断和治疗的生物制剂称为生物制品。
兽医临床常用的生物制品及其 应用
种类
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
应用
• 疫苗
• 预防
• 诊断液
• 诊断
• 免疫血清
• 治疗
疫苗
• 概念:使机体产生人工主动免疫的生物制品。
• 抗独特型疫苗:抗独特型抗体,可刺激机体产生与抗原特异性抗体具有同等免疫 效应的抗体,由此制成的疫苗。
• DNA疫苗:将编码保护性抗原的基因与能在真核细胞中表达的载体DNA重组,用重 组的DNA做的疫苗。
• 基因工程活疫苗: • 基因缺失疫苗:是用基因工程技术将毒株毒力相关基因切除构建的疫苗。 • 重组活载体疫苗:是用基因工程技术将保护性抗原基因(目的基因)转移到 载体中,使之表达。 • 非复制性疫苗:又称活—死苗,与重组活载体疫苗类似,但载体病毒接种后 只产生顿挫感染,不能完成复制过程,无排毒的隐患,同时又可表达目的抗 原,产生有效的免疫保护。
生物技术疫苗
• 概念:生物技术疫苗是利用生物技术制备的分子水平的疫苗。
• 种类 • 基因工程亚单位疫苗:用DNA重组技术,将编码病原微生物 保护性抗原的基因导入受体菌或细胞,使其在受体细胞中 高效表达,分泌保护性抗原肽链。提取保护性抗原肽链, 加入佐剂即制成基因工程亚单位疫苗。 • 合成肽疫苗:用化学合成法人工合成病原微生物的保护性 多肽,并将其连接到大分子载体上,再加入佐剂制成疫苗 。
• 异源苗:用具有共同保护性抗原的不同种病毒制成的疫苗。例如用 火鸡疱疹病毒(HVT)预防鸡马立克氏病。

兽医生物制品制造

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03 生产工艺与设备介绍
生产工艺流程简介
原料准备
选择高质量的原料,并进行严格的检验,确 保原料符合生产要求。
预处理
对原料进行必要的预处理,如清洗、破碎、均 质等,以提高生产效率和产品质量。
提取
采用适当的提取方法,从原料中提取出目标成分 ,如抗原、抗体等。
纯化
通过层析、超滤、电泳等技术,对提取的目标成分 进行纯化,去除杂质和不需要的成分。
通过细胞培养、动物实验等方法检测原材料的生物活 性,确保其有效性。
供应商评估与选择
供应商资质审核
核实供应商的营业执照、 生产许可证等资质文件, 确保其合法经营。
供应商现场考察
对供应商的生产现场、质 量管理体系等进行实地考 察,确保其生产能力和质 量控制水平符合要求。
供应商业绩评价
收集供应商的历史业绩、 客户反馈等信息,对供应 商进行综合评价,选择优 质供应商。
分类
根据用途和制备方法的不同,兽医生物制品可分为疫苗、抗 血清、诊断液、细胞因子、微生态制剂等多种类型。其中, 疫苗是预防动物传染病的重要工具,包括灭活疫苗、弱毒疫 苗、基因工程疫苗等。
发展历程及现状
发展历程
兽医生物制品的制造经历了传统制造、现代生物技术制造等阶段。随着生物技 术的不断发展,兽医生物制品的制造水平不断提高,品种不断增加,质量也不 断提升。
制定原料、辅料、包装材料、半成品、成品的质量标准和检验操作规 程,建立批记录、留样观察等制度。
强化员工培训和质量意识
定期开展员工培训和质量意识教育,提高员工对质量的重视程度和操 作技能水平。
建立完善的质量追溯体系
对原料、辅料、包装材料等的来源、质量状况进行详细记录,确保产 品质量可追溯。

兽医生物制品学课件讲义PPT100页

兽医生物制品学课件讲义PPT100页
42、只有在人群中间,才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话,只需要教; 而要挑战别人所说的话,则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是:在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
兽医生物制品学课件讲义
51、山气日夕佳,飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣,泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿,帝乡不可期。 54、雄发指危冠,猛气冲长缨。 55、土地平旷,屋舍俨然,有良田美 池桑竹 之属, 阡陌交 通,鸡 犬相闻 。
41、学问是异常珍贵的东西,从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹

兽医生物制品学课件

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利用微生物、寄生虫及其代谢产物, 或者含有特异性抗体的血清制成的,供诊 断动物传染病及寄生虫或检查动物免疫状 态以及鉴定病原微生物的生物制品。 诊断抗原:变态反应性抗原:纯蛋白衍生物 结核菌素(PPD)、布氏杆菌水解素。 血清反应性抗原 :布氏、炭疽、鸡白痢等。
3.诊断血清:
多用抗原免疫羊、兔或其他动物制成



二、生物制品生产的申报与审批 1、实验室实验 2、田间实验 3、中间实验 4、区域实验 5、申报


6、审批 7、新制品试生产 8、申请转为正式生产 9、经兽药评审委员会再评价后,建设列 入规程的,发给正式生产批准文号



第四节 我国兽医生物制品事业的概况与成 就 ★ 1951 年 , 成 立 了 兽 医 生 物 制 品 监 察 所 (1982年改名中国兽药监察所)。 ★猪瘟兔化弱毒苗属世界领先地位, ★马传贫弱毒苗、牛瘟疫苗、鸭瘟疫苗、 小鹅瘟疫苗、仔猪副伤寒苗属国际水平。 ★与发达国家相比仍有许多不足。


二、生物制品菌毒种的一般要求
1、来源(历史)清楚 ,资料完整 由中监所或中监所委托分管的单位负责 供应 2、生物学特性比较典型 菌、毒种的形态特征,培养特性, 对动物的病原性特点,引起细胞病变的 特征 生物化学、免疫学及血清学特性



3、血清型相符 与疫苗使用区的流行病原相符 4、遗传性状稳定
(1)灭活苗(死苗)
一般灭活苗:菌、毒种经大量培养后, 灭活而成。 脏器灭活苗:利用病、死动物的含病原微 生物脏器制成 自家灭活苗:从病、死动物分离培养病原 体大量培养制成的灭活苗

(2)活苗(弱毒苗)
主要指弱毒活疫苗,人工诱变获得的弱毒 株或筛选的天然弱毒株或者失去毒力的无 毒株所制成的 同源疫苗(homologous vaccines)用所要 预防的病原体制成。 异源疫苗(heterogenous vaccines):火鸡疱 疹病毒疫苗、鸽痘病毒、麻疹苗

兽医生物制品的免疫学基础ppt课件

兽医生物制品的免疫学基础ppt课件
考评项目赋标准分,对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评,评 出各考 评项目 的考评 实际得 分,考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
第二章 兽医生物制品的免疫学基础
❖ 【知识目标】 ❖ 熟悉免疫学诊断与检测的常用技术; ❖ 理解免疫耐受及免疫应答的机制; ❖ 掌握体液免疫应答和细胞免疫应答; ❖ 了解动物早期(胚胎)免疫应答机理.
(一)常见动物免疫系统的个体发生
❖ 1.犊牛
❖ 犊牛的免疫系统在胚胎早期即已形成。虽然母牛的妊娠期是 280 d,但胎儿的胸腺在受胎后40 d即可出现。骨髓和脾脏 在55 d时出现,淋巴结在60 d可以见到,但peyer氏淋巴集 结要到75 d才出现。因为淋巴集结的发生较晚,说明它们可 能不是一级淋巴样组织,所以不能将它们看作是相当于禽类 的法氏囊器官。在胎犊45日龄时可见到外周血液淋巴细胞, 59 d可见到带IgM的细胞,135 d时可见到IgG的细胞出现。 血清抗体的检出最早时间,依赖于所用方法的灵敏程度。所 以应用极其敏感的病毒中和试验,一定能最旱检出针对病毒 的免疫应答。
考评项目赋标准分,对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评,评 出各考 评项目 的考评 实际得 分,考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
二、细胞免疫应答
❖ 如果将皮肤移植物从一个供体移植给与供体无关 的另一个同类受体动物,该移植物大约只能存活 10d左右。
考评项目赋标准分,对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评,评 出各考 评项目 的考评 实际得 分,考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
第二章兽医生物制品的免疫学基础

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二、核酸图谱分析


核酸图谱分析包括核酸电泳图谱、核酸酶 切图谱、寡核苷酸指纹图谱等。 适用于这些诊断技术的试剂,主要是核酸 提取、酶切、电泳等生化和分子生物学试 剂,商品化程度已很高。
(一)核酸电泳图谱分析



核酸电泳图谱是指分离纯化的核酸,由于分子量的差 异而在电泳中迁移速率不同,形成不同的带型。通过带型 异同度的分析可确定生物体间的遗传关系。质粒图谱分析 和RNA图谱分析都是电泳图谱分析。 1.质粒图谱分析 质粒是细菌细胞内能自主复制的染色 体外的DNA,它是耐药性、毒力因子等特殊遗传特性的 载体。多数细菌往往含有大小和数量不等的质粒,具有相 对稳定性,因此质粒图谱分析是细菌分型和流行病学的重 要工具,具有诊断价值。 该法简便、特异、快速、可靠,缺点是对一些无质粒 或质粒不稳定的菌株,以及质粒分子量相同而核苷酸序列 不同的菌株无分辨能力。

二:基因探针的标记方法
1.放射性探针的标记法 缺口平移标记法:在适当浓度的DNaseⅠ作用下, 在双链DNA上随机造成3’-OH端缺口,而大肠杆 菌DNA聚合酶Ⅰ有修补缺口的能力,其具有 5’→3’外切酶活性,在缺口处按5’→3’方向切除单 核苷酸;同时有5’→3’的聚合酶活性,在缺口处3’ 端加入底物中的单核苷酸,因而可从切口的5’除 去核苷酸并与3’端核苷酸的加入同时进行,以互 补的DNA单链为模板合成新的DNA,这时在反 应液中加入一种或多种标记的核苷酸(P-32,H3),从而形成高放射性的DNA探针
(一)核酸探针制备技术
基因探针的获取 二 1. cDNA探针:通过提取纯度较高的相应的 mRNA,反转录成相应的cDNA,再利内切酶不完全水解,从而得到许多片段, 选取长度在15-20kb的片段重组到噬菌体中, 经过体外包装,再转录到大肠杆菌,在固体培 养基上可得到许多噬菌斑,然后用菌斑原位杂 交筛选含有目的的基因作为探针。 3. 寡核苷酸探针:人工合成低于50个核苷酸的任 意序列的寡核苷酸片段作为探针

兽医生物制品学 绪论.ppt

兽医生物制品学 绪论.ppt
多价疫苗(polyvalent vaccine):指同一咱微生物中若干血清 型菌(毒)株的增殖培养物制备的疫苗。
多价疫苗能使免疫动物获得完全的保护力,且可在不同的地区使用。
混合疫苗(mixed vaccine):又称多联苗,指利用不同微生 物增殖培养物,按免疫学原理方法组合而成。
具有减少接种次数、使用方便等优点,是一针防多病的生物制剂。有 三联苗、四联苗等之分,如猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗。
同源疫苗(homologous vaccine):指利用同种、同
型或同源微生物株制备的,又应用于同种类动物免疫预防的 疫苗。 如猪瘟兔化疫苗,用于各种品种的猪以预防猪瘟。
异源疫苗(heterlogous vaccine):包含(1)用不同种
兽医生物制品的应用
免疫预防
疫苗 、类毒素等
诊断
抗原、抗体 各种试剂盒
治疗
高免血清、痊愈血清
1.2 兽医生物制品分类 、命名
按生物制品性质分类

疫苗(vaccine)

类毒素(toxoid)

诊断制品(diagnostic preparation)

抗病血清(antiserum)

病毒抗体复合物疫苗(virus-antibody complex
vaccine):该类疫苗由特异性高兔血清或抗体与适
合比例的相应病毒组成。
特点:可以延缓病毒释放,提高疫苗安全性和免疫 效 果,其关键是病毒与抗体的比例要适当。
重组活疫苗(recombinant live vaccine):
通过基因工程技术,将病原微生物致病性基因 进行修饰、突变或缺失,从而获得弱毒株。 基因工程活载体疫苗(genetic engineering live vector vaccine):

第二章 兽医生物制品概述 wang

第二章 兽医生物制品概述 wang
• 转基因植物可食疫苗 • 抗独特型疫苗 • 树突状细胞疫苗 • T细胞疫苗
基因工程亚单位疫苗
基因重组技术
病原体的某个或 某几个抗原基因
转入 适当细菌、酵母或哺乳动物细胞
目的基因表达
以获得的表达产物作为免疫原制成的疫苗,称为基因工程亚单 位疫苗。 如:乙型肝炎基因工程亚单位疫苗 口蹄疫基因工程亚单位疫苗
行之有效的免疫方法”。
• 经过一百多年的努力,1980年世界卫生组织宣布
全球消灭了天花。
• 1870年,法国科学家巴斯德发明了第一个细菌减
毒活疫苗——鸡霍乱疫苗。巴斯德将此归纳为对
动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的
免疫接种原理,从而奠定了疫苗的理论基础。因
此人们把巴斯德称为疫苗之父。
• 第二代疫苗——亚基疫苗的出现,克服了第一代 疫苗潜在致病性的问题。 天然或重组成分为主。
有排出疫苗毒的可能,存在污染的 不排毒,无污染危险 危险 可能存在其他传染因子 灭活过程中可将传染因子破坏
疫苗合用(联苗)较困难
运输、保存要求条件高 通常制成冻干苗以利保存
容易制成联苗或多价苗
运输、保存方便 均为湿苗
类毒素
又称脱毒毒素。是指细菌生长繁殖过程中产生
的外毒素,经化学药品(甲醛)处理后,成为无毒
• 60年代,我国育成牛肺疫兔化弱毒株,后来逐渐 推广应用牛肺疫兔化弱毒疫苗、牛肺疫兔化绵羊 适应弱毒疫苗和牛肺疫兔化藏系绵羊化弱毒疫苗。 • 1996年在全国消灭牛肺疫,而牛肺疫兔化弱毒疫 苗为世界公认。
猪瘟
• 20世纪50年代我国成功培育猪瘟兔化弱毒株,控制
了我国猪瘟的流行。
• 此外,许多重要禽病疫苗也广泛在养鸡场使用。
(三)按物理性状分类
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猪伪狂犬基因缺失疫苗
基因工程(genetic engineering)是在分子水平上对基因进行 操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细 胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的 操作。
它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质 →DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行 切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体 一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质 在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新 物种的一种崭新技术。
用基因工程技术将致病性微生物的免疫保护基因插 入到载体病毒或细菌(通常为疫苗菌、毒株苗。
禽流感重组鸡痘病毒基因工程疫苗H5亚型
由特异性高免血清或抗体与适当比例的相应病毒组 成。其特点是可以延缓病毒释放,提高疫苗安全性 和免疫效果,其关键是病毒与抗体的比例要适度。
病原体经物理或化学方法处理,除去其无效的毒 性物质,提取其有效抗原部分制备的一类疫苗。
每0.5ml含A1/(H1N1)型血凝素 不低于15μg 、A3/(H3N2)型血 凝素不低于15μg 、B型血凝素 不低于15μg。
第一节 兽医生物制品的概念与应用
一、兽医生物制品 二、兽医生物制品学
一、兽医生物制品(veterinary biological product)
概念:
是利用微生物、寄生虫及其组分或代谢产物以及 动物的血液、组织等生物材料为原料,通过生物学 、生物化学以及生物工程学的方法加工制成的一类 物质。
一、兽医生物制品(veterinary biological product) 应用: 用于动物传染病的免疫预防 、诊断、治疗
(1)灭活疫苗(inactived vaccine) (2)亚单位疫苗(subunit vaccine) (3)基因工程亚单位疫苗(genetic engineering vaccine) (4)抗独特型疫苗(ant-idiotypic vaccine)
由完整病毒或细菌经灭活剂灭活后制成,其关键 是病原体灭活,但要保持其免疫原性。
二、兽医生物制品学( veterinary biologicology )
概念:
是在微生物学、免疫学和传染病学的基础上, 采用生物学、生物化学及生物工程学等技术和方法, 研究和制备生物制品,用以解决动物疫病防治的一 门综合性应用学科。
二、兽医生物制品学( veterinary biologicology )
兽医生物制品概述优秀课件
目标
兽医生物制品学是一门什么类型的学科? 它涵盖了哪 些学科的理论技术? 关于兽医生物制品的定义是什么?其种类繁多、用 途各异的说法体现在哪些方面? 兽医生物制品生产和使用具有怎样的实际意义?未 来的发展趋势如何?
内容
第一节 兽医生物制品的概念与应用 第二节 兽医生物制品的分类与命名 第三节 兽医生物制品的发展状况
特点:
★不能在免疫动物体内繁殖,比较安全,不发生全身副 作用,无毒力返祖现象;
★有利于制备多价或多联等混合疫苗; ★制品稳定,受外界环境影响小,有利于保存运输; ⊕该类疫苗免疫剂量大,生产成本高,需多次免疫; ⊕一般只能诱导机体产生体液免疫和免疫记忆,常需要 用佐剂或携带系统来增强其免疫效果。
种类:
【基因工程的基本操作步骤】
1.获取目的基因是实施基因工程的 第一步。 2.基因表达载体的构建是实施基因 工程的第二步,也是基因工程的核 心。 3.将目的基因导入受体细胞是实施 基因工程的第三步。 4.目的基因导入受体细胞后,是否 可以稳定维持和表达其遗传特性, 只有通过检测与鉴定才能知道。这 是基因工程的第四步工作。
研究内容:
(1)兽医生物制品的生物学,即根据动物疫病病原理化 特性、培养特点、致病机理及免疫机理,获得合乎生物制品 质量要求,适于防制动物疫病的疫苗、诊断液和生物治疗制 剂。
二、兽医生物制品学( veterinary biologicology )
研究内容:
(2)兽医生物制品的工艺学,即研究生物制品的生产制 造工艺、保藏条件和使用方法等,并保证生产优良制品, 不断提高制品质量,防止可能存在的有害因素经生物制品 对动物健康造成的危害和动物疫病的传播。
的一类生物制剂。
按照疫苗的性质和制备工艺:
1. 活疫苗(live vaccine) 2. 死疫苗(killed vaccine) 3. 基因疫苗(genetic vaccine)
特点:
*可以在免疫动物体内繁殖; *能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应; *免疫力持久,有利于清除局部野毒; *产量高、生产成本低; ⊕该类疫苗残毒在自然界动物群体内持续传递后有毒力 增强和返祖危险; ⊕有不同抗原的干扰现象; ⊕要求在低温、冷暗条件下运输和储存。
是由微生物自然强毒株通过物理(温度、射线等)、化学 (醋酸铊、吖啶黄等)或生物(非敏感动物、细胞、鸡胚等) 处理,并经连续传代和筛选,培养而成的丧失或减弱对原宿 主动物致病力,但仍保存良好免疫原性和遗传特性的毒株, 或从自然界筛选的具有良好免疫原性的自然弱毒株,经培养 增殖后制备的疫苗。
通过基因工程技术,将病原微生物致病性基因进行 修饰、突变或缺失,从而获得弱毒株制备的疫苗。
第二节 兽医生物制品的分类与命名
一、兽医生物制品的分类 二、兽医生物制品的命名
一、兽医生物制品的分类
预防类制品:如疫苗、类毒素等 诊断类制品:如免疫学诊断试剂、细菌学诊断试剂、 病毒学诊断试剂等 治疗类制品:如免疫血清、血液制品、重组细胞因 子制品等
(一)疫苗(vaccine) 凡接种动物后能产生自动免疫、预防疾病
种类:
(1)弱毒疫苗(attenuated vaccine) (2)重组活疫苗(recombinant live vaccine) (3)基因工程活载体疫苗(genetic engineering live vetor vaccine) (4)病毒抗体复合物疫苗(virus- antibody complex vaccine)
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