两种方法检测促红细胞生成素的方法学比较
EPO光激化学发光定量检测方法的建立
［ 摘
要］ 目的 ： 建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫 （ Ｌ ｉ Ｃ Ａ） 技术定量检测血清促红细胞生成素 （ Ｅ Ｐ Ｏ） 的方法 ， 并对
方法进行 方法学评估 。方法 ： 采用棋盘格滴定法 ， 用针对 Ｅ Ｐ Ｏ抗原的一个单克隆抗体及两个 多克 隆抗体 ， 分别包被发光 微粒 ， 及进行生物素化 ， 两两配对筛选出最佳双抗体组合 ， 进而确定 最佳反应浓度 ， 建立光激化 学发 光检测 Ｅ Ｐ Ｏ的方法 ， 建立标准 曲 线， 评价该方法 。研究中采用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ９ ． ０பைடு நூலகம்件 和 Ｅ Ｌ ２ Ｓ Ａ Ｃ ａ ｌ ｃ进行统计分 析。结果 ： 筛 选到一组最适抗 体 ， 分别 与发光微粒 和生
Ｃ Ｈ Ｅ ＮＫ ａ ｉ ， ＷＵＤ ａ ｎ ， Ｎ Ｉ Ｅ Ｑ ｉ ｎ ｇ — Ｄ ｏ ｎ ｇ， Ｘ Ｉ Ａ ＮＧＰ ， Ｒ Ｅ Ｎｆ ｉ ｅ ， Ｌ Ｉ Ｈ ｕ ｉ — Ｑ ｉ ａ ｎ ｇ ．Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｉ ｍｍ ｕ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ
Ｔｈｅ ｅ ｓ ｔ ａ ｂｌ ｉ ｓ ｈ ｍｅ ｎｔ ｏ ｆ ｌ ｉ ｇ ｈ ｔ ｉ ｎｉ ｔ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｃ ｈｅ ｍｉ ｌ ｕ ｍｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈｅ ｑ ｕａ ｎｔ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐｌ ａ ｓ ｍａ ｅ ｒ ｙ ｔ ｈ ｒ ０ ｐ ０ ｉ ｅ ｔ ｉ ｎ
陈 凯② 吴 丹② 聂庆 东③ 相 平④ 任 杰④ 李会 强
（ 天津 医科 大 学 医学检 验 学院 免疫学教 研 室， 天津 ３ ０ ０ １ ４ ０ ）
备课素材：如何判断细胞的活性 高中生物人教版必修1
如何判断细胞的活性细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标,检测方法如下：一、染色计数法1. 化学染色法染色计数法是细胞培养中检查细胞死活最常用的方法，直接利用死细胞和活细胞对染料的不同亲和力，检查细胞活性，能在光学显微镜下观察到染色结果。
可分为两类：死细胞着色法和活细胞着色法。
使死细胞着色的常用染料有台盼蓝、苯胺黑、伊红Y。
能使活细胞着色的常用染料有结晶紫、亚甲基蓝、甲苯胺蓝等。
其中最常用的是台盼蓝染色法。
细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA结合，使其着色，而活细胞能阻止染料进入细胞内，故可以鉴别死细胞与活细胞。
通过细胞计数可得出细胞的存活率。
本染色法方便实用，价格低廉，操作简单。
但是台盼蓝染色时，时间不宜过长，否则部分活细胞也会着色，会干扰计数。
而且，细胞没有经过固定，形态不清晰。
2. 荧光染色法一些荧光染料对死细胞和活细胞也有不同的作用效果，利用荧光显微镜检测细胞活性。
如碘化丙啶（PI），被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡细胞的细胞膜，因此活细胞不被染料上色，只有死细胞或凋亡细胞才能被染上红色。
吖啶橙（AO）能透过质膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，使之发出明亮的绿色荧光。
溴乙锭（EB）仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。
也可应用AO-EB双染法鉴定细胞死活。
这种检测方法相比传统的染料，具有灵敏度高，操作简便，结果容易分辨等特点，而且利用双染法还可以分辨活细胞、凋亡早期细胞、凋亡晚期细胞、死亡细胞。
在细胞凋亡的检测上有很广泛的应用。
缺点在于，要求特殊的仪器进行检测，如荧光显微镜、激光扫描共聚焦显微镜或流式细胞仪。
而且通过荧光染料具有毒性，操作时需要带手套。
二、克隆（集落）形成试验克隆形成试验是测定单个细胞增殖能力的有效方法之一，其基本原理是单个细胞在体外持续分裂增殖6次以上，其后代所组成的细胞群体，称为克隆或集落。
一般情况，每个克隆可含50个以上的细胞，大小在0.3~1.0mm3之间。
红细胞计数的方法学评价、临床意义
红细胞计数的方法学评价、临床意义红细胞计数作为一项重要的临床检验指标，对于评估人体内红细胞数量的情况具有重要意义。
在临床应用中，我们常常会遇到血液疾病、贫血等相关疾病的诊断和治疗过程中需要对患者进行红细胞计数的情况。
本文将从方法学评价、临床意义等方面对红细胞计数进行全面探讨。
一、方法学评价1. 射光法射光法是目前应用最广泛的一种红细胞计数方法，其原理是利用射光透过血液时的散射原理来计算红细胞的数量。
该方法具有快速、准确的优点，然而在特殊情况下（如血液黏稠度高、红细胞形态异常等情况），射光法也存在一定的局限性。
2. 流式细胞术流式细胞术是近年来发展起来的一种新方法，它利用复杂的激光技术和高级图像处理技术来实现红细胞计数。
该方法可以应对一些传统方法难以解决的问题，对红细胞形态异常的样本也能够进行快速准确的分析。
3. 自动化计数仪自动化计数仪是一种集成了先进的传感器、光学系统和计算机分析技术的设备，具有高速、高效的特点。
它主要用于血液学检验的自动化分析，能够快速、准确地完成红细胞计数，是目前临床应用中的主流方法之一。
二、临床意义红细胞计数是评估机体贫血情况的重要指标之一。
通过对患者红细胞数量的测定，可以了解患者贫血的类型、严重程度，从而指导临床诊断和治疗。
在临床应用中，红细胞计数常常与血红蛋白浓度、红细胞压积等指标一起组成“血常规”检验项目，用于帮助医生进行疾病诊断和治疗监测。
在贫血的诊断中，红细胞计数可以帮助医生判断患者贫血的类型，如缺铁性贫血、再生障碍性贫血、溶血性贫血等，从而更准确地选择合适的治疗方案。
红细胞计数也可以用于监测患者治疗后的疗效，如血液透析、输血等治疗过程中，对红细胞数量的监测可以帮助医生判断治疗效果，及时调整治疗方案。
红细胞计数还可以作为一种健康体检指标，帮助人们及时了解自己的身体健康状况。
通过定期进行红细胞计数及相关指标的检测，可以帮助人们及时发现潜在的健康问题，预防疾病的发生。
红细胞生成素α的药效学和药动学及其在非肾脏性疾病中的应用
红细胞生成素α的药效学和药动学及其在非肾脏性疾病中的
应用
Markh.,A;罗勤
【期刊名称】《国际药学研究杂志》
【年(卷),期】1995(022)005
【摘要】红细胞生成素α作为人重组红细胞生成素的一种，在一些非肾脏疾病中的能起到矫正贫血、替代输血提高患者生活质量等作用。
本文就其在艾滋病患者、癌症患者、骨髓发育不良综合征、红细胞增生异常而引起的贫血、类风湿关节炎等疾病中的应用，及其药效学、药动学和给药方法等方面进行综合评价。
【总页数】2页(P299-300)
【作者】Markh.,A;罗勤
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R969.4
【相关文献】
1.药动学-药效学结合模型及其在兽用抗菌药物中的应用 [J], 杨亚军;李剑勇;李冰
2.药动学/药效学原则在多药耐药性不动杆菌感染治疗中的应用 [J], 王菊仙
3.药动学-药效学结合模型在中药研究中的应用 [J], 齐娜;冯海萍;徐勤;陆洁
4.药动学/药效学结合模型及其在优化渔用抗菌药物给药方案中的应用 [J], 徐丽娟;李梦影;王浩;吕利群
5.微透析技术在药动学及药动学-药效学模型研究中的应用进展 [J], 胡贺佳;陈艳;王爱民;王永林;巩仔鹏
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Science：纯化学方法合成重磅生物制品促红细胞生成素
Science：纯化学方法合成重磅生物制品促红细胞生成素促红细胞生成素（erythropoietin, EPO）是一种常见的抗癌辅助药物，用于改善化疗引起的贫血，上市产品有Procrit (Johnson & Johnson)、Epogen (Amgen)、Aranesp (Amgen)。
EPO是一种含166个氨基酸的糖蛋白，Ser126、Asp24、Asp38、Asp83四个位点都能接上不同的糖基，从而产生了多种糖基化形式。
目前生物制品的生产大多依靠基因重组技术，这种方法得到的是多个糖基化形式的混合物，无法得到单一结构的纯品。
然而研究显示，EPO的糖基化形式对活性、稳定性有影响，研究构效关系、寻找最优糖基化形式必须先得到单一形式EPO纯品。
为了解决这个问题，斯隆-凯特林癌症研究所完成了促红细胞生成素的全合成，拿到EPO糖基化I型纯品。
关于EPO的全合成见：Science. 2013, 342(6164), 1357-1360.Science对EPO全合成的点评见：Science. 2013, 342(6164), 1332-1333.EPO的全合成得益于自然化学连接技术（native chemical ligation, NCL），在温和条件实现多肽链的选择性连接，突破固相化学只能合成50个氨基酸长度多肽的限制。
传统的NCL技术要求两段多肽链在连接位点有半胱氨酸残基，而EPO则不具备合适的半胱胺酸残基，研究人员应用斯克利普斯研究所报道的脱硫技术（metal-free desulfurization, MFD），在温和条件下将半胱氨酸转化为丙氨酸，从而解决肽链组合连接的问题。
关于自然化学连接技术见：Science. 1994, 266(5186), 776-779.关于NCL-脱硫联用连接肽链技术见：J. Am. Chem. Soc. 2001, 123(4), 526-533.关于多肽合成中的Cys-Ala转化见：Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 9248-9252.EPO合成的另一大难点是合成多糖侧链，因为糖环上含有多个羟基，而EPO的N-苷侧链有多个分枝，糖单元数目达到20，选择性精确合成这样的糖链比肽链难得多，没有统一的building block和合成方法。
研究生考试-《西医综合》-生理学-第三章 血液练习题库
[单选题] 11、肝素抗凝的主要机制是（ ）。 A 抑制凝血酶原的激活 B 抑制 FⅩ的激活 C 促进纤维蛋白吸附凝血酶 D 增强抗凝血酶Ⅲ活性
正确答案：D 答案解析：①肝素具有强的抗凝作用，主要通过增强抗凝血酶Ⅲ的活性而发挥间接抗凝作用。 ②肝素还可刺激血管内皮细胞释放 TFPl 而抑制凝血过程。③在缺乏抗凝血酶Ⅲ的条件下肝 素的抗凝作用很弱。
正确答案：C 答案解析：①促红细胞生成素主要是促进晚期红系祖细胞的增殖，并向原红细胞分化，也可
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
作为存活因子抑制晚期红系祖细胞的凋亡而促进红细胞的生成；②EPO 还可加速幼红细胞的 增殖和血红蛋白的合成，促进网织红细胞的成熟与释放；③对早期红系祖细胞的增殖与分化 也有一定的促进作用。
[单选题] 5、产生促红细胞生成素的主要部位是（ ）。 A 腺垂体 B脾 C肾 D 骨髓
正确答案：D 答案解析：A 项，血红蛋白由珠蛋白和亚铁血红素结合而成，血液呈现红色是因为其中含有 亚铁血红素。B 项，红细胞的主要功能是运输 O2 和 CO2。C 项，红细胞运输 O2 的功能是靠 细胞内的血红蛋白来实现的，一旦血红蛋白逸出到血浆中，便丧失其运输 O2 的功能。D 项， 正常成年男性血红蛋白含量为 120～160g/L，女性为 110～150g/L。
[单选题] 24、血浆晶体渗透压的形成主要决定于血浆中的（ ）。 A 葡萄糖 B 尿素 C Na＋和 Cl－ D 氨基酸
正确答案：C 答案解析：血浆的渗透压主要来自溶解于其中的晶体物质。由晶体物质所形成的渗透压称为 晶体渗透压，约 80%来自 Na+和 Cl－。
聚乙二醇重组人促红细胞生成素在食蟹猴体内的药代动力学检测方法
1. JOINN Laboratories Inc., Beijing 100176; 2. Angde Biotech Pharmaceutical Co., Ltd., Dong'e 252201; China
［Abstract］ Objective: To establish two sensitive, specific and rapid ELISA methods for detection of PEGylated
收稿日期： 2017-05-04 作者简介： 李开通 （1985- ） ， 男， 硕士研究生， 助理研究员， （E-mail） likaitong@ 通信作者： 孙云霞， （E-mail） sunyunxia@
李开通等： 聚乙二醇重组人促红细胞生成素在食蟹猴体内的药代动力学检测方法
828
doi: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.06.022
生 物 技 术 通 讯 LETTERS IN BIOTECHNOLOGY Vol.28 No.6 Nov., 2017
研究报告
聚乙二醇重组人促红细胞生成素在食蟹猴体内的 药代动力学检测方法
李开通 1， 徐楠楠 1， 汪宁 1， 肖琳琳 1， 刘海峰 2， 庞甲佩 2， 孙云霞 1
LI Kai-Tong1, XU Nan-Nan1, WANG Ning1, XIAO Lin-Lin1, LIU Hai-Feng2, PANG Jia-Pei2, SUN Yun-Xia1*
*Corresponding author, E-mail: sunyunxia@
1. 北京昭衍新药研究中心股份有限公司 （生物制品安全性评价北京市重点实验室） ， 北京 100176； 2. 昂德生物药业有限公司， 山东 东阿 252201
促红细胞生成素测定及其在临床中的应用
第9卷第06期·总第110期2011年03月·下半月刊78促红细胞生成素测定及其在临床中的应用程玉萍关键词：促红细胞生成素；检测方法；临床检测；综述doi：10.3969/j.issn.1672-2779.2011.06.053 文章编号：1672-2779（2011）-06-0078-02促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）是一种调节红细胞生成的激素。
以往研究认为，EPO在体内的主要作用是与其受体（EPO receptor，EPOR）结合后，促进红系祖细胞分裂分化为成熟的红细胞，抑制其凋亡。
因此，临床上EPO被广泛应用于治疗各种原因引起的贫血。
近年来研究发现，EPOR还广泛表达于人体内的非造血组织，它们与EPO结合发挥器官保护、免疫调理、抗炎等多种非造血作用，所以EPO被认为是一种多效性作用的细胞因子。
本文主要就EPO及其受体生物学特性，测定方法及其在临床的应用进展作一综述。
1 EPO及其受体生物学特性天然EPO是一种含唾液酸的酸性糖蛋白，分子量为34000，在胚胎早期，EPO由肝脏产生，出生以后主要转由肾脏产生。
编码EPO的基因位于7号染色体，由165个氨基酸残基组成。
由基因重组技术合成的重组人促红细胞生成素（rhEPO），分子量为30400，其理化性质和生物学活性与天然EPO相同。
EPO的生物学活性是通过和EPOR结合而产生的。
研究发现EPO和EPOR可以在人、鼠以及其他成年动物的缺血、缺氧器官的组织细胞中表达。
EPO的产生受组织氧合状态的调节，组织氧的降低可刺激肾脏和肝脏中EPO的产生并使其受体表达增高。
EPOR是由507个氨基酸组成的跨膜糖蛋白。
新近研究发现其具有两种不同的类型，一种为同型二聚体（EPOR）2，与EPO造血作用相关。
EPO与其结合后促进红系祖细胞分化增殖，用于各种原因引起贫血的纠正。
同时该功能对心血管疾病的益处在于随着红细胞的增加，可以增加血液携氧能力，从而减少应激对心肌的损伤。
(医学课件)促红细胞生成素
促红细胞生成素临床应用
• 肾功能衰竭所致的贫血 • 癌性贫血 • 结缔组织病贫血 • 骨髓增生异常综合征贫血
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用途
• 医疗用途：增加红血球的数目，用于贫血、 组织断离、早产儿，用在癌学和血液学方 面。
• 体育用途(兴奋剂)：增加训练耐力和训练负 荷，属于国际奥委会规定的违禁药物。
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慢性肾脏病贫血治疗指南解读
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• 调节因素：EPO的产生由组织的氧合状态调节，
低氧可刺激Epo的产生从而调节红细胞的生成。 • 最主要的调节因子是低氧诱导因子-1α (HIF-1α)，
它是至少 20个与红细胞生成和血管发生有关基因 的转录激活子，包括 EPO、转铁蛋白、血管内皮 生长因子 ( VEGF) 以及一系列葡萄糖代谢的重要 基因。EPO在机体缺氧时由转录因子复合物- HIF 诱导上调, 以调节红细胞生成, 从而使机体适应低 氧状态(如高原、贫血等)。 • 而钴、锰、镍等过渡元素的离子、铁的螯合剂也 能刺激 Epo的产生。
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EPO 的生成
• 产生细胞：1993年Maxwell等通过免疫双标记和
免疫电镜证实，Epo生成细胞是肾间质中位于毛 细血管与耗氧小管之间的形态学定义的Ⅰ型细胞， Ⅰ型细胞包括两种不同的细胞群即成纤维细胞和 树枝状细胞。肝脏是胎儿时期Epo合成的主要器 官，也是成人肾外合成Epo的主要器官。 • 大约90%的EPO由肾小管旁间质细胞分泌。正常 人血浆EPO水平维持在15-20IU/ L。
（K/DOQI指南）
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贫血定义和检查
·定义：
WHO的贫血诊断标准：成人女性血红蛋白（Hb）＜12g/dl， 成人男性 Hb＜13g/dl。
·贫血检查时机：
所有慢性肾脏病患者，不论其分期和病因，都应该定期检查 Hb。女性Hb＜11g/dl，男性 Hb＜12g/dl时应实施贫血检查。
采用两种贫血形态学分类法对150例肾性贫血的结果分析
肾性贫血是一个复杂 的过程 ， 因肾损伤造成 Ｅ Ｏ生成 减 Ｐ 少使红 系祖细胞不能进一步分化而引起贫血 ，由于此种病 因
测 。每天检测前分别用高 、 低 ３种浓度的全血质控物做室 中、 内质控 ， 结果在控 ， 执行检测 。本组 健康对照仪测参考 范围 ：
ＭＣ ８ — ９ ｍ ＭＣ ： ７ ３ ｇ ＭＣ Ｖ： ３ ９ ， Ｈ ２ ～ ３ ｐ ， ＨＣ： １ ～ ４ ／ ＲＤＷ ： ３ １ ３ ９ ｇＬ，
意义 的细胞 ， 还会影响其他系列细胞 的检查 。此时必须进行 涂片复检 。为此 ， 国内专 家多次提出 ， 在各种 参数及图形正 常的情况下 ， 结合临床表现可 以做筛选手段 。
综上所述 ，血涂片显微镜检查应作为全血 细胞分析 的一
项很重 要的质量控制 ， 是减 少差错 、 免 医疗 纠纷 的重 要措 避
２ 结 果
１０例 肾性 贫血 患 者 ４个 红 细 胞 指 数 的 检测 结 果 见 ５
Ｂ 不足有关。传统分类法对贫血 的鉴别诊断有一定意义 ， ： 但 实践证 明此法忽 视了 由于红细胞体积 的异质性对 ＭＣ Ｖ准确
・
６６ ・ ２
医蕉苤 查 ２ １ 生 第 １ 鲞第 ６ Ｑ２ ９ 期 Ｊ ｍａｏ Ｐａ ｉ ｌ ｅｉ １ ｅｈｉ ｅ， ｕｅ ０２ Ｖ１１， ０６ ｏ ｌ ｆ ｒ ｔａ Ｍ ｄｃ ｃｎ ｕｓ Ｊｎ １， ０ ９ Ｎ ｕ ｃｃ ａＴ ｑ ２ ．
２２ 交叉 干扰 的排 除 ： 萄糖与肌 酐测 定相邻时 ， ． 葡 最好 在其
中间 加入 丙氨 酸 转氨 酶 （ ） 天 冬氨 酸转 氨酶 （ Ｓ ） Ａ 或 Ａ Ｔ 或
尿素氮等非 氧化酶法测定 项 目 ， 即先测定葡 萄糖 ， 然后 测定 Ａ 或 Ａ Ｔ或尿素氮 ， Ｓ 再测定 肌酐 ， 这样可 消除葡萄糖 测定 对肌酐 的影 响 ， 上述方法 的测定 结果 为（ ５ ＋ ．）￣ ｏ Ｌ 用 ７． ８ ５ ４ ｍＹ 和（ ８ ．＋ ．）￣ ｏ Ｌ ２ ９０ ２ Ｉ ｌ 。与单 独测定肌 酐的结 果做统计 学处 ４ ｍ ／ 理， 差异无统计学 意义 （＞ ． ） 尸 ００ 。 ５
血液学检验练习题库(含答案)
血液学检验练习题库（含答案）一、单选题（共70题，每题1分，共70分）1、关于血管作用的错误描述是（）A、促凝作用B、抗血栓C、不参与凝血的调节D、参与一期止血E、激活血小板正确答案：C2、变性珠蛋白小体生成试验与下列哪种疾病有关（）A、G6PD缺乏症B、PNHC、PK酶缺乏症D、遗传性球形红细胞增多症E、自身免疫性溶血性贫血正确答案：A3、下列哪项说法不符合凝血过程（）A、凝血系统与抗凝系统有关B、凝血系统与激肽系统有关C、凝血系统与补体系统有关D、内、外凝血途径之间无关E、凝血系统与纤溶系统有关正确答案：D4、下列哪种疾病在输血时易引起溶血性输血反应（）A、蚕豆病B、珠蛋白生成障碍性贫血C、ABO血型不合D、PNHE、恶性贫血正确答案：C5、慢性粒细胞白血病（CM1）是起源于下列哪种细胞的克隆性增殖性疾病（）A、单克隆性小淋巴细胞B、嗜酸粒细胞C、嗜碱粒细胞D、造血干细胞E、原始粒细胞正确答案：D6、多发性骨髓瘤常不会出现下列哪一项异常（）A、酚红排泄试验异常B、血尿素氮增加C、血磷正常或增加D、血肌酎增加E、血钙下降正确答案：E7、下列哪项不符合造血障碍的特点（）A、黄骨髓减少B、骨髓增生减低C、呈正常细胞性贫血D、造血组织与脂肪组织容积比降低E、全血红骨髓总量减少正确答案：A8、急性再障的骨髓增生程度一般为（）A、明显活跃B、增生减低C、增生活跃D、极度活跃E、极度减低正确答案：E9、临床上患者尿检查中，检出哪一项异常对诊断多发性骨髓瘤意义最大（）A、本周蛋白B、蛋白尿（++++）C、蛋白管型尿D、原始细胞E、血尿正确答案：A10、诊断戈谢病最有意义是（）A、骨髓检查B、B-葡萄糖脑甘脂酶活性测定C、细胞化学染色D、家族史E、神经鞘磷脂酶活性检测正确答案：BIK下述哪项不符合急性血管内溶血（）A、常见血红蛋白尿B、蚕豆病属血管内溶血C、尿胆原阳性D、血浆游离血红蛋白常降低E、高热、寒战、黄疸正确答案：D12、下列哪项不符合嗜酸性粒细胞增多症（）A、骨髓中嗜酸性粒细胞以幼稚型为主B、少数患者外周血中可见幼稚嗜酸性粒细胞C、骨髓中红系和巨系多数正常D、骨髓中嗜酸性粒细胞也增多E、诊断主要依据是多次血常规检查正确答案：A13、下列哪项不在全血细胞减少的范畴（）A、红细胞减少B、粒细胞减少C、淋巴细胞减少D、血小板减少E、以上都不正确正确答案：C14、下列哪项说法符合凝血过程（）A、凝血酶激活因子IB、凝血酶激活因子VC、凝血酶激活因子Vn1D、凝血酶激活因子XIE、以上都是正确答案：D15、尿含铁血黄素试验哪项有错误（）A、PNH患者本实验阳性,并可持续数周B、患者有血红蛋白尿本实验就呈阳性结果C、阳性对慢性血管内溶血的诊断价值最大D、阳性提示尿中有铁排出E、实验原理是应用普鲁士蓝反应原理正确答案：B16、t（15;17）染色体移位形成PM1-RARA融合基因，对下列哪种白血病有诊断价值（）A、M1B、M3C、M4D、A11E、CM1正确答案：B17、TFP1可抑制下列蛋白质的活性,但除外（）A、P1B、TF∕VΠaC、因子XaD、凝血酶E、胰蛋白酶正确答案：D18、维生素B12测定对下列哪种疾病有价值（）A、再生障碍性贫血B、缺铁性贫血C、巨幼红细胞性贫血D、白血病E、溶血性贫血正确答案：C19、下列哪项实验室结果最不符合大多数急性白血病初诊时改变（）A、贫血B、白细胞减少C、白细胞增多D、血小板增多E、血小板减少正确答案：D20、BT延长可见于下列疾病,但除外（）A、血小板减少性紫瘢B、血小板无力症C、遗传性出血性毛细血管扩张症D、血友病E、血管性血友病正确答案：D21、促红细胞生成素（EPo）的造血调控不包括（）A、刺激造血干细胞向红系方向发展B、促进幼红细胞分化成熟C、促进幼红细胞形成血红蛋白D、减少红系祖细胞凋亡的比例E、增强红细胞的寿命正确答案：E22、目前应用基因探针可以诊断的血液病有如下几种,但除外（）A、珠蛋白生成障碍性贫血B、HbS病C、真性红细胞增多症D、甲型或乙型血友病E、AT缺陷症正确答案：C23、恶性淋巴瘤最常见的临床表现是（）A、皮疹B、无痛性淋巴结肿大C、脾肿大D、发热E、肝肿大正确答案：B24、原位溶血的场所主要发生在（）A、肝脏B、骨髓C、血管内D、淋巴结E、脾脏正确答案：B25、下列哪项用于慢性粒细胞白血病（CM1）细胞化学染色（）A、POXB、ACPC、NAPD、POX、NAPE、P OX、ACP>NAP正确答案：C26、在一般临床实验室,测定B-TG和PF4的方法是（）A、E11SA法B、免疫沉淀法C、RIAD、免疫扩散法E、免疫电泳法正确答案：A27、下列哪组产物是由交联性纤维蛋白降解产生（）A、X、Y、D、E及A、B、C、H碎片B、X’、Y'、D、E'及A、B、C、H碎片C、X、Y、D、E及D-二聚体D、X、Y'、D、E'及D-二聚体E、X、Y、D、E和A、B、C、H碎片及D-二聚体正确答案：D28、传染性单核细胞增多症中，下列哪项检查才能确诊（）A、外周血中可见异型淋巴细胞B、骨髓中可见大量的异型淋巴细胞C、EBV抗体阳性D、外周血中可见大量单核细胞E、骨髓和外周血中可见大量的异型淋巴细胞正确答案：C29、胞体小（10~20μm）,核染色质较粗密,分布不匀,核仁「3个,常模糊，胞质少,蓝色,无颗粒,常有出芽或小泡状,不规则突起,有时可见分离又与细胞相连的胞质碎片（似形成血小板）。
动物生理学 第6章：血液
血液一. 单项选择题（每小题2分，共15题）1. 促红细胞生成素的作用是促进（）×A 铁的吸收B VitB12的吸收C 雄激素的释放D 骨髓造血和红细胞成熟【正确答案】 D2. 用罗马数字Ⅰ-XⅢ表示凝血因子，其中因属于V因子活化而来，从而已经被取消因子命名的是（）×A 因子ⅥB 因子ⅢC 因子ⅣD 因子ⅤE 因子XⅢ【正确答案】 A3. 用溶血标本测定血清中的离子浓度（）×A 氯离子偏高B 钙离子偏高C 钾离子偏高D 钠离子偏高【正确答案】 C4. 血浆晶体渗透压的形成主要决定于血浆中的(注：选项中Na+、Cl-=Na+、Cl-)（）×A 各种正离子B 各种负离子C Na+和Cl-D 氨基酸和尿素E 葡萄糖和氨基酸【正确答案】 C5. 低温储存较久的血液，血浆中哪种离子浓度升高(注：选项中Na+、K+、Ca2+、Cl-、HCO3-=Na+、K+、Ca2+、Cl-、HCO3-)（）×A Na+B Ca2+C K+D Cl-E HCO3-【正确答案】 C6. 红细胞膜上钠泵活动所需能量主要由葡萄糖通过哪条途径产生（）×A 糖原分解和有氧氧化B 糖原分解和糖原异生C 糖原分解和无氧氧化D 糖原异生和磷酸戊糖旁路E 糖酵解和磷酸戊糖旁路【正确答案】 E7. 成年人骨髓中储存的中性粒细胞约为血液中的（）×A 1-5倍B 10-20倍C 50-150倍D 500-1000倍E 5000-10000倍【正确答案】 C8. 叶酸和维生素B12缺乏常引起（）×A 缺铁性贫血B 再生障碍性贫血C 失血性贫血D 巨幼红细胞性贫血E 溶血性贫血【正确答案】 D9. 嗜碱性粒细胞颗粒中含有（）×A 肝素，组胺，嗜酸性粒细胞趋化因子和过敏性慢反应物质B 过氧化物酶和碱性蛋白质C 过氧化物酶和溶酶体酶D 前列腺素E和多集落刺激因子E 组胺酶，碱性蛋白溶酶体酶【正确答案】 A10. 红细胞发生叠连后，红细胞（）×A 表面积与容积的比值减少，于血浆的摩擦减小，使血沉加快B 表面积与容积的比值减少，于血浆的摩擦减小，使血沉减慢C 表面积与容积的比值减少，于血浆的摩擦增大，使血沉减慢D 表面积与容积的比值增加，于血浆的摩擦增大，使血沉加快E 表面积与容积的比值增加，于血浆的摩擦减小，使血沉加快【正确答案】 A11. 正常情况下出血时间为（）×A 0-0.5minB 1-3minC 5minD 6minE 10min【正确答案】 B12. 血小板与非血小板表面的粘着现象称为血小板（）×A 粘附B 聚集C 释放D 凝集E 激活【正确答案】 A13. 目前认为致聚剂引起血小板聚集的可能机制是(注：选项中Ca2+=Ca2+)（）×A 抑制血小板膜上的磷脂酶A2使血小板内血栓烷A2合成减少B 通过血小板膜上相应受体使cAMP减少，IP3 ,Ca2+，cGMP增加C 抑制血小板的磷酸二脂酶（PDE),使cGMP增加D 激活酪氨酸蛋白激酶系统E 与ADP代谢产物有关【正确答案】 B14. ABO血型系统凝集原特异性的决定簇是（）×A 脂蛋白B 寡糖链C 糖原D 糖蛋白E 磷脂【正确答案】 B15. 大细胞贫血是由于（）×A 缺少铁B 缺少铁和蛋白质C 缺少维生素B12和叶酸D 缺少促红细胞生成素【正确答案】 C二. 多项选择题（每小题3分，共10题）1. 血清与血浆的区别在于（）×A 缺乏纤维蛋白原B 增加了血小板释放的物质C 缺乏某些凝血因子D 含有大量的白蛋白E 含大量的球蛋白【正确答案】 A, B, C2. 如果某男是B型血（）×A 他的基因型可以是AB型B 他的父亲可以是O型血C 他的孩子不是B型血就是O型血D 如果他的妻子是B型血，孩子的血型只能是B型或O型E 如果他的妻子是O型血，孩子的血型只能是B型或O型【正确答案】 B, D, E3. 生理型止血过程包括（）×A 血小板粘着于受损伤血管B 血液凝固，血块回缩C 血小板释放5－羟色胺使小血管收缩D 血小板聚集形成血小板止血栓E 纤溶系统激活【正确答案】 A, B, C, D, E4. 小血管损伤后，生理止血过程包括（）×A 血流速度变慢B 受损小血管收缩C 血小板聚集形成止血栓D 受损局部血液凝固形成血凝块E 血管壁修复、伤口愈合【正确答案】 B, C, D5. 正常人的血液在血管内不发生凝固的原因有（）×A 血液流动快B 血管内膜光滑完整C 纤维蛋白溶解系统的作用D 有抗凝血物质存在E 缺乏某些凝血因子【正确答案】 A, B, C, D6. 血浆蛋白主要生理功能有（）×A 多种代谢物的运输载体B 缓冲血浆pH变化C 参与机体的免疫功能D 参与生理性止血E 维持血浆胶体渗透压【正确答案】 A, B, C, D, E7. 引起血沉加快的因素有（）×A 白细胞增多B 血浆球蛋白增多C 血浆白蛋白减少D 血浆纤维蛋白原增多E 血浆磷脂增多【正确答案】 B, C, D8. 下列哪些情况使血沉加快（）×A 血沉加快的红细胞置入正常血浆B 正常红细胞加入血沉加快的血浆C 血液中的白蛋白增加D 血液中的球蛋白增加E 血浆中的球蛋白减少【正确答案】 B, D9. 凝血酶的直接作用是（）×A 激活因子XIIIB 使纤维蛋白原水解成纤维蛋白单体C 使纤维蛋白单体形成不溶性的纤维蛋白多聚体D 使可溶性的纤维蛋白多聚体形成稳固的纤维蛋白多聚体E 抑制纤溶酶活性【正确答案】 A, B10. 下列可延缓或防止凝血的有（）×A 血液中加入柠檬酸钠B 血液置于硅胶管中C 血液中加入肝素D 血液中加入双香豆素E 将血液置于冰水混合物中【正确答案】 A, C, E三. 判断题（每小题1分，共10题）1. 人体安静状态下，其贮备血量相对较多。
在职同等学力考研西医综合(生理学-血液)模拟试卷1(题后含答案及解析)
在职同等学力考研西医综合（生理学-血液）模拟试卷1(题后含答案及解析)题型有：1. A1/A2型题 2. B1型题 3. X型题1．60kg体重的正常成年人的血量为A．3．0～3．6LB．4．2～4．8LC．5．4～6．0LD．6．0～9．0LE．10～20L正确答案：B 涉及知识点：血液2．Rh血型系统中抗原性最强的抗原是A．C抗原B．c抗原C．D抗原D．d抗原E．E抗原正确答案：C 涉及知识点：血液3．白细胞膜上最强的同种抗原是A．A抗原B．B抗原C．D抗原D．H抗原E．HLA抗原正确答案：E 涉及知识点：血液4．促红细胞生成素的主要作用是促进A．多能造血干细胞进入细胞周期B．早期红系祖细胞增殖、分化C．晚期红系祖细胞增殖、分化D．幼红细胞增殖与合成血红蛋白E．网织红细胞释放入血正确答案：C 涉及知识点：血液5．肝素抗凝的主要机制是A．抑制凝血酶原的激活B．抑制FX的激活C．促进纤维蛋白吸附凝血酶D．增强抗凝血酶Ⅲ活性E．抑制血小板聚集正确答案：D 涉及知识点：血液6．红细胞沉降率变快主要是由于A．红细胞脆性增大B．血浆中球蛋白和纤维蛋白原含量增多C．血浆中白蛋白和卵磷脂含量增多D．红细胞内血红蛋白浓度降低E．血细胞比容减小正确答案：B 涉及知识点：血液7．机体细胞内液与组织液通常具有相同的A．Na+浓度B．K+浓度C．Cl-浓度D．胶体渗透压E．总渗透压正确答案：E 涉及知识点：血液8．可释放组胺酶的血细胞是A．淋巴细胞B．单核细胞C．嗜酸性粒细胞D．嗜碱性粒细胞E．中性粒细胞正确答案：C 涉及知识点：血液9．凝血FⅦ的作用是A．激活FⅨB．使FⅩa对FⅡ的作用加快C．使FⅨa对FⅩ的作用加快D．使FⅡa对FⅠ的作用加快E．使FⅨ活化成FⅨa的速度加快正确答案：C 涉及知识点：血液10．人体各部分体液中蛋白质浓度的比较，正确的是A．细胞内液＞组织液＞血浆B．细胞内液＞血浆＞组织液C．血浆＞组织液＞细胞内液D．血浆＞细胞内液＞组织液E．血浆=细胞内液＞组织液正确答案：B 涉及知识点：血液11．通常所说的血型是指A．红细胞上受体的类型B．红细胞表面特异性凝集素的类型C．红细胞表面特异性凝集原的类型D．血浆中特异性凝集素的类型E．血浆中特异性凝集原的类型正确答案：C 涉及知识点：血液12．下列关于输血的叙述，哪一项是错误的A．ABO血型系统相符合便可输血，不需进行交叉配血B．必要时O型血可输给其他血型的人C．必要时AB型的人可接受其他血型的人的血D．Rh阴性的人不可接受Rh阳性的血液E．Rh阳性的人可接受Rh阴性的血液正确答案：A 涉及知识点：血液13．血管损伤后止血栓能正确定位于损伤部位，有赖于血小板的下列哪项特性A．黏附B．聚集C．收缩D．吸附E．释放正确答案：A 涉及知识点：血液14．血凝块的回缩是由于A．纤维蛋白收缩B．红细胞叠连C．白细胞变形D．血小板收缩蛋白收缩E．红细胞破裂正确答案：D 涉及知识点：血液15．血小板磷脂酶A2激活可产生A．血小板活化因子B．ADPC．TXA2D．ATPE．组胺正确答案：C 涉及知识点：血液16．依赖维生素K的凝血酶因子共有的生化特征是分子中均含有A．谷氨酸B．丙氨酸C．γ-羧基谷氨酸D．天门冬氨酸E．γ-氨基丁酸正确答案：C 涉及知识点：血液17．在凝血过程中最后起底物作用的因子是A．FⅠB．FⅡC．FⅨD．FⅩE．FⅩⅢ正确答案：A 涉及知识点：血液18．中性粒细胞的主要功能是A．释放细胞毒素B．产生抗体C．参与生理止血D．释放组胺E．吞噬正确答案：E 涉及知识点：血液A．FⅤB．FⅧC．FⅨD．FⅩE．FⅪ19．内源性和外源性凝血途径的共同途径始于正确答案：D 涉及知识点：血液20．外源性凝血途径的FⅦa可以激活内源性凝血途径的正确答案：C 涉及知识点：血液A．vWFB．ADPC．纤维蛋白原D．PDGFE．5-羟色胺21．血浆中参与血小板黏附的关键性物质是正确答案：A 涉及知识点：血液22．可诱导血小板聚集的物质是正确答案：B 涉及知识点：血液A．红细胞数目B．血浆总蛋白含量C．血浆球蛋白含量D．血浆白蛋白含量E．血浆NaCl含量23．血液的黏滞性主要决定于正确答案：A 涉及知识点：血液24．血浆总渗透压主要决定于正确答案：E 涉及知识点：血液25．红细胞消耗葡萄糖产生的能量是用于A．保持低铁血红蛋白不被氧化2+</sup>氧化为Fe<sup>3+</sup>“ value1=“B”>B．使Hb的Fe2+氧化为Fe3+C．保持红细胞膜的完整性D．供应红细胞膜上钠泵的活动正确答案：A，C，D解析：红细胞消耗葡萄糖通过糖酵解产生的ATP主要用于维持细胞膜上的钠泵活动，以保持细胞膜内外的Na+和K+的正常分布，从而能够维持细胞容积和双凹圆碟状的形态。
促红生长素(EPO)
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检验方法
可由SD大鼠来完成。其大致做 法为：一周两次，连续3周对实验 动物皮下注射rHuEPO；实验对照 组则同等剂量的生理盐水，在实验 结束时，检测实验组与对照组红细 胞计数、血红蛋白含量及血球压积， 以确定rHuEPO的体内生物学活性。
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检验结果记录
组别
注射方式
检验类别
红细胞计数
血红蛋白含 量 血球压积
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不良反应及禁忌
谷丙转氨酶
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常见有血压升高、心悸。偶见瘙痒感、皮
疹及GOT或GPT值升高、恶心、呕吐、眩晕、
头痛、发热、血钾升高等。 血液透析不能控制
动脉血压升高的患者、铅中毒及感染患者禁用，
天 冬 氨
有药物过敏者、变态反应体质者慎用。应及时 对用本品治疗者的血压进行监测，必要时给抗
酸 高血压药物。应注意血管栓塞情况，有时需增
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重组人促红素注射液（CHO细胞）
【商品名】益比奥 【规格】1万国级单
位/瓶 【生产厂家】沈阳
三生制药 【成分】重组人促
红素。辅料：人 血白蛋白、氯化 钠、一水枸橼酸、 二水枸橼酸三钠
h14构建基因组噬菌体克隆EPO基因血细胞 中提取基 因组DNA
BamHⅠ酶切
回收酶切片段
插入噬菌体 EMBL3载体
EPO是促红细胞生成素的英文简称。 人体中的促红细胞生成素是由肾脏 和肝脏分泌的一种激素样物质，能 够促进红细胞生成。服用红细胞生 成素可以使患肾病贫血的病人增加 血流比溶度（即增加血液中红细胞 百分比）。人体缺氧时，此种激素 生成增加，并导致红细胞增生。
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EPO 的应用
EPO兴奋剂是 根据促红细胞 生成素的原理 人工合成，它 能促进肌肉中 氧气运输，从 而使肌肉更有 劲、工作时间 更长.
执业西药师考试药学综合辅导：促红细胞生成素
执业西药师考试药学综合辅导: 促红细胞生成素促红细胞生成素（EPO）及其类似物、生长激素（hGH）及其类似物, 具有外源性药物（肽类兴奋剂）与内源性激素（人体自然生成）区分小, 在人体内药物代谢时间短等特点, 曾长期无精确牢靠的检测方法, 而被运发动广泛滥用, 也是反兴奋剂斗争中重点讨论的热点药物。
EPO和hGH都属肽类激素, 列在《2022年禁用清单》中的其他肽类激素品种还有：促皮质素、促性腺激素（含黄体生成素、绒毛膜促性腺激素）、胰岛素及其类似物、胰岛素样生长因子等。
下面, 我们着重介绍一下有代表性的两种肽类激素类兴奋剂——EPO和hGH。
促红素及其类似物（EPO）“世界上跑得最快的女人”、悉尼奥运会3金2铜得主——马里昂。
琼斯, 因使用EPO、hGH和THG（一种新型类固醇激素）, 成为历因滥用兴奋剂入狱的第一人。
还有如下运发动和团体曾被查出访用EPO：环法自行车赛“七冠王”美国的阿姆斯特朗、俄罗斯自行车运发动佩特洛、德国女子铁人三项运发动尼娜。
克拉福特、2022年奥运会瑞士女子铁人三项冠军麦克马洪、中国竞走运发动秦爱华、美国男子400米世界冠军格罗米。
扬（终生禁赛）、意大利尤文图斯俱乐部（1994～1998年间）等。
EPO是人体肾脏分泌的一种肽类激素, 能使骨髓生成红细胞的量增加, 提高血红蛋白含量, 增加血液携氧、供氧力量, 是临床上一种治疗肾性贫血的药物。
由于能显着提高有氧运动时间, 因而EPO受到一些运动工程和运发动的青睐, 对提高耐力工程如自行车、铁人三项、赛艇、长距离游泳、长跑以及冬季工程等成绩效果明显, 据称可提高15%的成绩。
EPO受运发动偏爱的另一个缘由是, 国际上EPO检测技术不过关, 各国运发动根本可无顾忌地使用EPO.但在2022年之后, 国际上EPO的检测技术渐渐提高, 局面有所改观。
由于被大量滥用, EPO在过去的20多年中, 曾导致24名自行车运发动死亡, 仅2022年, 就有8名自行车选手的死与EPO有关, 其中有环法自行车大赛前总冠军潘塔尼。
罗沙司他联合促红素与单一应用促红素在治疗慢性肾脏病患者肾性贫血中的效果对比分析
罗沙司他联合促红素与单一应用促红素在治疗慢性肾脏病患者肾性贫血中的效果对比分析【摘要】目的：分析对比在慢性肾脏病肾性贫血患者中采取罗沙司他联合促红素与单一促红素治疗的效果。
方法:本次研究中病例筛选为我医院接收的慢性肾脏病伴肾性贫血患者60例，通过随机数字表法将入选的病例分成观察组与对照组,每组30例，对照组采取单一促红素治疗，观察组采取罗沙司他联合促红素治疗，对比两组治疗效果。
结果：观察组患者的贫血症状改善时间明显短于对照组（P<0.05）；观察组患者血清指标以及铁代谢指标改善效果优于对照组（P<0.05）；观察组患者治疗总有效率高于对照组（P<0.05）；观察组患者并发症发生率与对照组相比无明显差异,（P＞0.05）。
结论:对慢性肾脏病患者肾性贫血治疗中采用罗沙司他联合促红素方案,可进一步提高疾病治疗效率,尽早改善患者的贫血症状，减少并发症发生。
【关键词】慢性肾脏病；肾性贫血；罗沙司他；促红素；效果分析Comparative analysis of the effect of rosalat combined with single application in the treatment of renal anemia in patients with chronic kidney disease[Abstract] Objective: To analyze and compare the effect of renal anemia in patients with chronic kidney disease. Methods: In this study, the cases were selected for 60 patients with renal anemia received by our hospital. The selected cases were pided into observation group and control group, 30 cases in each group. The control group was treated with single protin, and the observation group was treated withroxostat and protin, and the treatment effect of the two groups wascompared. Results: The improvement of anemia symptoms in the observation group was significantly shorter than the control group (P <0.05); the serum index and iron metabolism index were better than the control group (P <0.05); the total response rate was higher than the control group (P <0.05);The incidence of complications in the patients in the observation group compared with the control group, (P> 0.05). Conclusion: In the treatment of renal anemia in the patients with chronic kidney disease, it can further improve the efficiency of disease treatment, improve the symptoms of anemia as soon as possible, and reduce the occurrence of complications.[Key words] Chronic kidney disease; renal anemia; rosalat; propin; effect analysis慢性肾脏病是一种常见的肾脏疾病，其特点是肾功能逐渐减退，导致体内废物和水分无法正常排出。
肾脏生成促红细胞生成素分子学基础
肾脏生成促红细胞生成素分子学基础
张道友
【期刊名称】《华夏医学》
【年(卷),期】1994(0)4
【摘要】无
【总页数】1页(P67)
【作者】张道友
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R69
【相关文献】
1.促红细胞生成素在斑马鱼胚胎发育中抑制肾脏细胞凋亡 [J], 折剑青;娄博文;吴岳;袁祖贻
2.氨甲酰化促红细胞生成素对慢性肾衰竭合并急性肾损伤大鼠肾脏的保护作用 [J], 梅艳;洪权;马倩;张杰;谢院生;蔡广研;陈香美
3.左卡尼汀联合促红细胞生成素治疗血液透析伴肾脏贫血临床效果观察 [J], 叶素华
4.慢性肾脏病促红细胞生成素抵抗原因分析及研究进展 [J], 李海男;印璞;金玉芬;任雪娇;于庭
5.促红细胞生成素产生细胞与慢性肾脏病贫血及肾纤维化关系的研究进展 [J], 李菲;魏日胞
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两种方法检测促红细胞生成素的方法学比较698滑膜内大量淋巴细胞,浆液细胞和单核细胞浸润,新生血管和纤维组织增生,其厚度可明显增加.本研究超声检查准确地测量了治疗前后滑膜的厚度,增厚滑膜形态有均匀分层增厚,绒毛样,不规则增厚,在显示滑膜炎改变方面,高频超声比MRI更为敏感fl】.超声对RA患者髌上囊的检测方便,快捷,实用性强,在类风湿性关节炎疗效评价中值得推广和应用.(图1～3见插页)参考文献[1】蒋明,DavidY,林孝义,等.中华风湿病学[M].第1版.北京:华夏出TianjinMedJ,Aug2009,V ol37No8版社,2004:420--435.[2]田平.关节及滑膜囊积液的超声检查明.中华超声影像学杂志,1998,7(5):313—315.[3]王振剐,陈秀华,高明.B型超声检查在类风湿关节炎膝关节积液诊断中的应用fJ】.第一军医大学,2000,16(9):792—794.[4]刘子君.骨关节病理学【M】.第3版.北京:人民出版社,1992:379-386.[5]陈庆,姜凡.彩色多普勒超声诊断在类风湿性关节炎膝关节病变中的诊断价值【JJ.中国实用医药,2008,(3)2h66—68.(2009—03—24收稿2009—06-05修回)(本文编辑闫娟)两种方法检测促红细胞生成素的方法学比较李君刘鸿黄义文刘金玲关键词红细胞生成素化学发光测定法放射免疫测定经红细胞增多症促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是一种调控红细胞生成的糖蛋白激素,促进红系祖细胞存活,增殖,分化和成熟,是诊断真性红细胞增多症(Pv)及各种贫血的有价值的实验室指标【l】.随着临床检测技术的进步,目前EPO的检测有多种方法并存,选择一种合适的检测方法满足临床需要具有一定的意义.为此,笔者采用化学发光免疫法(CLIA)和放射免疫法(RIA)同时测定血清EPO浓度并进行方法学评价.1材料与方法1.1仪器与试剂(1)CLIA法采用天津西门子公司全自动化学发光免疫分析仪及其配套试剂.(2)RIA法采用中佳光电GC一1200.y放射免疫计数器,试剂购自解放军总医院科技开发中心放免所.1.2标本来源(1)收集我院2006年9月一2008年6月血液科住院患者42例,男23例,女19例,年龄16～77岁.依据文献报道,按EPO水平分为高,低含量组,高EPO组共计23 例,其中溶血性贫血11例,再生障碍性贫血7例,巨幼红细胞贫血5例;低EPO组10例,均为Pv患者,按住院顺序余后9例Pv患者,因RIA试剂原因,仅用CLIA正常参考区间验证.(2)本院不同职业体检正常者123例,其红细胞和血红蛋白检测结果正常,无肝,肾及血液系统疾病,男62例,女61例,年龄24～76岁,每间隔lO岁为1组,24—39岁为1组, 60岁及以上为1组,年龄分布均匀,并剔除数据中离群点标本1例.随机选取其中3O例为正常对照组.所有样本均在清晨7～10点静脉采血,离心分离血清,于一70℃保存待测.1.3检测方法随机抽取30例正常人,高EPO组23例及低EPO组lO例标本同时用两法检测,其余正常查体者和9例Pv患者仅用CLIA检测;并进行精密度,回收试验及相关性分析等方法学评价.CLIA和RIA检测严格按试剂盒说明书操作,室内质控均合格.1.4统计学处理采用SPSS11.5统计学软件对2种方法检测结果进行Spearman's等级相关性分析,正态分布行D检验,偏态分布者以中位数(四分位数间距)表示,多组均值比较行Kruskai—WallisH非参数检验,2组间比较行Mann—WhitneyU非参数检验.2结果2.1精密度检测取高低值2个浓度标本,分别用2种方法同1批内重复检测lO次,批间1次倜,测定5周,见表1.表1CLIA法和RIA法的精密度比较2.2回收试验取高,低2种浓度的混合血清,加入已知浓度的EPO标本.用CLIA和RIA测回收率.结果CLIA法的回收率分别是95.61%,100.23%,平均回收率为97.92%;RIA法的回收率分别是80.48%,110.37%,平均回收率为95.43%.2.32种方法测定结果比较2.3.13组分别采用CLIA和RIA方法测定EPO含量的比较CHA法高EPO组和低EPO组与正常对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01);RIA法高EPO组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),低EPO组与正常对照组作者单位:300052天津医科大学总医院特检中心(李君,黄义文,刘金玲);天津医科大学总医院血液科(刘鸿)天津医药2009年8月第37卷第8期差异无统计学意义(P>0.05),见表2.表22种方法检测3组EPO水平结果P<0.012.3.22种测定方法相关性比较高EPO组2种方法检测结果有相关性r=0.67,P<0.O1),低EPO组和正常对照组2种方法检测结果无相关性(r分别为0.16和0.24,均P>0.05o2.4CLIA检测正常人参考区间123例体检正常者EPO检测结果为偏态分布,中位数(四分位间距)为8.71(4.85)IU/L; EPO参考区间为4.o0～20.92Iu/L.其中62例男性的EPO含量为8.70(4.30)IU/L,61例女性为8.60(5.30)IU/L,男女之间差异无统计学意义(z=0.22,P>0.05).24～39岁,40～49 岁,50—59岁,6O岁及以上各组EPO含量分别为7.60(2.7), 8.90(5.45),7.95(4.48),8.95(5.97)IU/L,各年龄组间差异亦无统计学意义=0.70,P>0.05).3讨论RIA法检测EPO应用多年,CLIA法检测EPO亦有报道,通过2种检测方法学评价,结果显示CLIA法批内,批间的精密度均优于RIA法.2种方法检测高EPO组有相关性, 而低EPO组和正常组无相关性,考虑可能是CLIA法自动化程度高,检测重复性好;而RIA法低剂量区精密度较差及手工操作有误差等.由于贫血发病机制不同,可致EPO含量不同.溶血性贫血,再生障碍性贫血,巨幼红细胞贫血,其组织缺氧均可导致肾脏生成分泌EPO增加,EPO水平较正常人明显升高口.本研究显示,2种检测方法高EPO组和正常组EPO含量差异有统计学意义(P<0.O1);提示2种检测方法均可满足高含量EPO检测,为临床贫血分型提供依据.红细胞增多症分为PV和继发性红细胞增多症,前者PV为一种骨髓增生性疾病,红系克隆性增殖,反馈性抑制EPO的分泌,故Pv患者EPO水平降低,高EPO可排除Pv诊断,故检测患者血清699EPO浓度是鉴别PV有价值的实验室指标.本实验结果显示,CLIA法检测低EPO组和正常对照组差异有统计学意义(P<0.01);而RIA法检测低EPO组和正常对照组差异无统计学意义(P>0.05).RIA法检测数据显示低EPO组患者中有1例高于正常对照组EPO水平上限,而CLIA法检测低EPO组均低于正常对照组EPO水平或正常对照组低值范围,与许剑辉等四报道用RIA法检测PV患者42例中有5例高于正常值范围相近.上述检测结果显示CLIA法优于RIA法,更符合临床诊断.一种新检测项目应用于临床,实验室应进一步进行方法学评价并同时确定其参考区间,参考区间是II缶床判断健康与否的关键[61.CLIA检测EPO试剂厂家没有提供明确的参考区间,本实验用CLIA法检测123例正常人标本,结果显示不同性别和不同年龄组间均差异均无统计学意义,EPO不受性别及年龄的影响,故将123例正常人标本为1组计算其正常参考范围,用CLIA法所得参考区间为4.00～20.92IU/L.经临床42例患者验证,回顾分析,本室建立参考区间与临床符合,19例Pv患者CLIA法检测EPO水平均低于正常对照组EPO水平或正常对照组低值范围,可初步用于临床.参考文献【1]李蓉生,杨江燕,李琦,等.正常人及贫血患者红细胞生成素水平的观察L玎.中华血液学杂志,1993,14(5):227—228.【2】陈宗铠,曹凤林,杨惠芬,等.贫血患者红细胞生成素水平与血红蛋白浓度关系的研究[J].天津医科大学,2002,8(2):209—212.【3]MossuzP,GirodonF,DonnandM,eta1.Diagnosticvalueofserum erythropotinlevelinpatientswithabsoluteerythroeytosis[J].Haem—aotologica,2004,89(1o1:1194-1198.【4JSirhanS,FairbanksVF,TefferiA.Redcellmassandplasmavdume measurementsinpolyeythemia[J].Cancer,2005,104(3):213—215. 【5]许剑辉,邵宗鸿,赵艳津.真性红细胞增多症患者红细胞生成素水平的变化及其临床意义【J].中华血液学杂志,2007,28(2):119—120.【6]6陈桂山,杨有业,温冬梅,等.临床生化检验项目生物参考区间适用性验证探讨叨.中华检验医学杂志,2008,31(2):170—174. (2008—10—29收稿2009—02—18修回)(本文编辑孙东建)天津市胸科医院天津市第三中心医院天津医科大学总医院天津市长征医院天津市结核病控制中心天津港口医院天津医科大学代谢病医院天津,武警医学院附属医院《天津医药》协作办刊单位(排名不分先后)天津市儿童医院天津市第一中心医院天津医科大学第二医院天津市传染病医院天津市安定医院天津市人民医院天津华立达生物工程有限公司泰达国际心血管病医院消息天津市第五中心医院(塘沽医院)天津医科大学口腔医院海洋石油总医院天津市大港油田集团职工总医院天津医学高等专科学校天津市口腔医院天津市公安医院天津市第四中心医院。