微生物菌落总数测定详细讲解
实验三--食品中微生物菌落总数的测定
5、及时将已冷却到46℃的培养基倾入到平皿中，并转动
平皿使其混合均匀
6、37℃倒置培养2天
7、按照计数Biblioteka 则计数五、菌落计数方法 选取菌落数在30~300cfu之间，无蔓延生长的平板 计数 低于30的记录具体菌落数，大于300的可记录为多 不可计，每个稀释度采用2个平行的均数 有较大片状菌落生长者不宜采用， 若片状小于平板一半时且余部均 匀分布，则以半个平板菌落数2 倍报告 无明显界限链状菌落每条单链视 为一个菌落
1、计数结果的表述
若只有一个稀释度平板在30~300CFU，则计算两平行平 板的均数，再乘以稀释倍数报告之 若有连续两个稀释度符合计数要求则按下公式：
所有符合计数要求 的平板菌落数之和
菌落总数
例：10-2=232，244 10-3=33，35 N= (232+244+33+35) (2+2×0.1)×10-2 = 24727
灭菌生理盐水当中，充分振荡，混合均匀，制成
10-1稀释度样品
2、梯度稀释法依次稀释样品到10-4
菌落总数操作流程图
3、选择10-2、10-3、10-4三个稀释度的样品均液，用无菌 移液管分别吸取1mL到无菌平皿中，每个稀释度做2个 平皿；同时，吸取1mL无菌生理盐水到1个平皿中作为
空白对照
4、熔化培养基
标准平皿活菌计数法（SPC法）是最常用的活菌计
数法
将微生物细胞充分稀释到单个分散，把这些单个分
散的细胞通过混菌法或涂布法使其均匀分布在平皿
培养基上，培养后长出的菌落肉眼可见，每个菌落
都由原液中单个细胞发育而来。
反映食品被细菌污染的程度
由于倾注平板法的局限，会有一部分细菌在该实验
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法引言：菌落总数是指在一定的培养条件下，菌落形成的数量。
菌落总数检测是食品微生物检验中的一个重要指标，用于评估食品中微生物的污染程度和卫生质量。
本文将介绍国标菌落总数检测方法的步骤和原理。
一、国标菌落总数检测方法的步骤国标菌落总数检测方法主要包括样品制备、平板计数和结果计算三个步骤。
1. 样品制备需要准备好待测样品。
样品通常是食品、水或其他物质，可以是液体或固体。
将样品称取一定的量，然后按照一定的比例与适量的生理盐水进行稀释，以降低样品中菌落的数量，使其适合于后续的菌落计数。
2. 平板计数将制备好的样品溶液均匀地倒入已经凝固的琼脂平板中，然后用无菌铲子或无菌玻璃棒将溶液均匀涂抹在琼脂平板表面。
待琼脂凝固后，将平板倒置放置在恒温培养箱中，以利于菌落的生长。
根据不同的样品特点和需求，可以选择适当的培养温度和时间。
3. 结果计算在菌落生长适宜的条件下，菌落会在琼脂平板上形成。
在菌落形成后，使用计数器或目视观察，对菌落进行计数。
计数时需要遵循一定的规则，如避免重复计数、避免边缘菌落等。
最后，根据计数结果和样品的稀释倍数，计算出菌落总数。
二、国标菌落总数检测方法的原理国标菌落总数检测方法基于微生物在适宜的培养条件下形成可见的菌落的特性进行。
其原理主要包括稀释平板法和菌落计数法。
1. 稀释平板法稀释平板法是菌落总数检测的一种常用方法。
通过将样品与一定量的生理盐水进行稀释，使菌落的数量适于计数。
然后将稀释好的样品均匀涂抹在琼脂平板上，使菌落在琼脂上生长形成可见的菌落。
根据样品的稀释倍数和计数得到的菌落数量，计算出菌落总数。
2. 菌落计数法菌落计数法是国标菌落总数检测方法的关键步骤。
在菌落生长适宜的条件下，菌落会在琼脂平板上形成。
然后使用计数器或目视观察，对菌落进行计数。
计数时需要遵循一定的规则，如避免重复计数、避免边缘菌落等。
最后，根据计数结果和样品的稀释倍数，计算出菌落总数。
三、国标菌落总数检测方法的应用国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、饮用水、药品、化妆品等领域。
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法一、引言菌落总数是指在一定条件下，通过菌落计数方法，测定在样品中存在的微生物总数。
它是评价食品、水质和环境卫生状况的重要指标之一。
国标菌落总数检测方法是指根据国家标准规定的菌落总数检测方法进行微生物总数的测定。
本文将详细介绍国标菌落总数检测方法的原理、步骤及其应用领域。
二、原理国标菌落总数检测方法基于菌落形成的原理，通过将待测样品进行适当稀释，并在寒暖培养条件下培养一定时间，然后对形成的菌落进行计数。
根据国家标准，通常采用平板计数法和膜过滤法两种方法进行菌落总数的检测。
平板计数法是将适量的待测样品均匀涂布在含有适宜培养基的平板上，然后在适当温度下进行培养，最后对菌落进行计数。
该方法适用于微生物菌落较多的样品，如食品和水样等。
膜过滤法是将待测样品通过特定的膜过滤器，过滤到含有适宜培养基的培养皿中，然后在适当温度下进行培养，最后对膜上形成的菌落进行计数。
该方法适用于微生物菌落较少的样品，如空气和药品等。
三、步骤1. 样品制备：将待测样品按照国家标准要求进行适当稀释，以确保在培养过程中菌落呈现合适的数量。
2. 平板计数法：将稀释好的样品用无菌棉签均匀涂布在含有适宜培养基的平板上，然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。
3. 膜过滤法：将稀释好的样品通过无菌膜过滤器过滤到含有适宜培养基的培养皿中，然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。
4. 培养：根据国家标准要求，将培养皿或平板在适当温度下培养一定时间，以促使菌落的生长和形成。
5. 计数：在培养时间结束后，使用显微镜或菌落计数器对菌落进行计数，然后根据国家标准计算出菌落总数。
四、应用领域国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、水质和环境卫生等领域。
在食品行业中，菌落总数的检测可以评估食品的卫生状况和微生物污染程度，有助于保障食品的安全性；在水质监测中，菌落总数的检测可以评估水质的卫生状况和微生物污染程度，有助于确保饮用水的安全性；在环境卫生监测中，菌落总数的检测可以评估环境卫生状况和微生物污染程度，有助于维护公共卫生和环境健康。
食品微生物学检验菌落总数测定
食品微生物学检验菌落总数测定一、定义菌落总数是指样品经过处理，在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度和时光、pH、需氧性质等)，所得1mL(g)检样中形成的微生物菌落总数。
菌落总数不等同于细菌总数，有两方面的缘由：一方面，每种细菌生长时对环境条件的要求都不太一样，如厌氧菌和嗜冷菌在菌落总数测定条件下难以生长繁殖，有特别养分要求的一些细菌也受到了限制，因此，所得的结果，只反映一群在一般养分琼脂中发育的、嗜温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。
另一方面，细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在平板上浮现的菌落可能来源于单个细胞，也可能来源于细胞块。
二、卫生学意义菌落总数是食品卫生指标中的重要项目，主要作为判定食品被污染程度的标记。
通常认为，食品中菌落总数越多，被致病菌污染的可能性越大。
菌落总数的多少在一定程度上标记着食品卫生质量的优劣，但不能单凭菌落总数一项指标来评定食品卫生质量的优劣，必需协作大肠菌群和致病菌项目的检验，才干做出比较全面精确的评价。
三、检验办法根据GB4789.2-2016举行，标准规定了食品中菌落总数(aerobic plate count)的测定办法。
菌落总数的检验程序见图4-4。
图4-4菌落总数的检验程序四、注重事项 (1)要有“无菌操作”的概念。
所用玻璃器皿必需是彻低灭菌的，剪刀、镊子等器具要举行消毒处理，假如样品有包装，应用70%在包装开口处擦拭后取样，全部操作应该在超净工作台或经过消毒处理的无菌室中举行。
(2)应注重取样的代表性，液体样品取样前须先振摇，固体样品取样时宜多采几个部位，不要集中于一点。
(3)稀释液可选用灭菌生理盐水、蒸馏水或蛋白胨水(1g/L)，蛋白胨水最为合适，由于蛋白胨水对细菌细胞有更好的庇护作用。
假如对含盐量较高的样品举行稀释，则宜采纳蒸馏水。
(4)在做10倍递增稀释时，吸管或吸头插入样品匀液内不能低于液面2.5cm，以防吸管或吸头从稀释液内取出时有过多的液体黏附于管外。
菌落总数检验(食品微生物课件)
二、菌落总数的报告
（1）菌落数小于100 CFU 时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
（2）菌落数大于或等于100 CFU 时，第3 位数字采用“四舍五入”原则修 约后，取前2 位数字，后面用0 代替位数；也可用10 的指数形式来表示，按 “四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
二、菌落总数的报告
知识点：菌落总数测定原理
情境：微生物检测技术 任务：菌落总数测定
课程：食品微生物技术
菌落总数测定原理
一、菌落总数
什么叫菌落总数
食品检样经过处理，在一定条件下(如培养基、培养 温度和培养时间等)培养后，所得每g(mL)检样中形成 的微生物菌落总数。
二、菌落总数测定原理
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释 之后，其中的微生物充分分散成单个细胞， 取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培 养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见 的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一 个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和 取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
(n1 0.1n2 )d
式中： N——样品中菌落数； ∑C——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和； n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数； n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数； d——稀释因子（第一稀释度）。
一、菌落总数的计算方法
（3）若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU，则对稀释度最高的平 板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释 倍数计算。
菌落总数检测报告
一、菌落总数的计算方法
（1）若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板 菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌 落总数结果。
微生物检测菌落总数测定方法
微生物学检验菌落总数的测定1 原理微生物活体数量的测定方法，常用平板培养计数法。
它是通过将样品制成均匀的一系列不同稀释度的稀释液，再取一定的稀释液接种，使其均匀分布于培养皿中特定的培养基内，最后根据在平板上长出的菌落数计算出每克（或mL ）样品中的活菌数量。
2 材料和仪器2.1 平皿：φ90mm 。
2.2 无菌锥形瓶：容量250mL ，500 mL 。
2.3 无菌吸管：1mL （具0.01mL 个度）,10mL （具0.1mL 刻度）或微量移液器及吸头。
2.4 灭菌锅。
2.5 恒温培养箱2.6 涂棒。
2.7 酒精灯。
2.8 超净工作台。
2.9 磁力搅拌器。
2.10 漩涡振荡器3 检验程序菌落总数的检验程序见下图。
方法①↙ ↘方法②↘ ↙4 操作步骤4.1 培养基和试剂的配制4.1.1 平板计数琼脂培养基：LB培养基（最常用）牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠5g琼脂20g蒸馏水1LpH 7.0～7.2将上述成分加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH值，分装锥形瓶中，121℃高压灭菌30分钟。
4.1.2 无菌生理盐水的配制：称取8.5g氯化钠溶解于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌30分钟。
4.2 样品的稀释：4.2.1 固体样品：称取10g固体样品置于盛有90mL无菌生理盐水的无菌锥形瓶中（内装数粒无菌玻璃珠），在旋转式摇床上200r/min充分振荡30min，制成1：10的样品均液，即10-1稀释液。
4.2.2用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品均液1mL（吸取前需要摇匀1：10稀释液），缓慢加入盛有9mL无菌生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不能触及稀释液面），用漩涡振荡器振荡，混合均匀，制成1：100的样品稀释均液。
4.2.3按照4.2.2操作程序，制备10倍系列样品稀释液，每递增稀释一次，换用一次1mL无菌吸管或吸头。
4.2.4 根据对样品活菌数量的估计，选择3~4个适宜稀释度的样品均液（比如10-6，10-7，10-8，10-9稀释液）。
菌落总数的定量测定原理
菌落总数的定量测定原理您好,细菌的定量测定主要通过计算细菌在培养基上的菌落数目来实现。
以下是菌落总数定量测定的原理和步骤:一、原理菌落总数的测定是通过将含有细菌的样品在固体培养基上进行培养,统计形成的菌落数目来估算原始样本中活菌的含量。
因为每一个菌落理论上是由一个细菌细胞繁殖形成的,所以菌落数目可以反映样品中活菌的数目。
菌落总数法是对环境、食品等样品中的微生物进行定量检测的常用方法。
二、操作步骤(1)称取一定量样品(污水、食品等),配置适当的稀释度,一般做3-5个稀释度。
(2)吸取适量不同稀释度的样品(通常0.1ml、0.5ml等),涂布均匀到预先准备好的固体培养基平板上,每种稀释度设置2-3个平行。
(3)将涂有样品的培养基倒置置于培养箱,在最适合样品中细菌生长的温度下培养一定时间,通常1-3天。
(4)培养结束后,将培养基取出,统计每个稀释度平板上形成的菌落数。
选择菌落数目在30-300个之间的平板计数,以获得较准确的结果。
(5)根据稀释度计算出原样品中菌落形成单位的数量,即CFU/ml或CFU/g,即为菌落总数。
计算公式:菌落总数(CFU/ml或CFU/g) = 平板计数的菌落数÷稀释度÷接种量(ml)三、注意事项(1)样品要充分混匀,进行适当稀释,以获得单独分散的菌落。
(2)平板要平整,接种要均匀,避免菌落聚集。
(3)培养条件要适宜样品中的细菌生长。
(4)计数时,避免重复计数同一菌落。
(5)同一样品应设置多个稀释度的平行,选取菌落数在30-300之间的结果最准确。
(6)运算时注意计数的稀释倍数。
综上所述,菌落总数定量测定通过统计单位样品量中形成的菌落数量,从而推算出原始样品中的菌量,是一种简便可靠的微生物定量检测方法,在环境监测和食品微生物检验中应用广泛。
但操作过程需遵循标准方法,并注意各种影响因素,方能获得准确可靠的结果。
食品微生物学检验菌落总数测定国标
食品微生物学检验菌落总数测定国标1. 前言好啦，今天咱们聊聊一个不那么热门，但绝对重要的话题——食品微生物学检验中的菌落总数测定。
说到这，很多小伙伴可能会皱起眉头，觉得这事儿离自己有点远，实际上，它和我们每天吃的东西密切相关呢！就像那句老话说的：“民以食为天”，吃得安全，咱们才有精力去干其他事情，不是吗？2. 什么是菌落总数？2.1 基本概念首先，菌落总数到底是个啥呢？简单来说，菌落总数就是在特定的培养基上，经过一段时间培养后，能够看到的细菌数量的总和。
这就好比在一块田地里，你数出有多少棵小苗。
哦，对了，当然这些小苗可不是蔬菜，而是一些微小的细菌。
它们可能是有益的，也可能是有害的，所以我们得好好查查！2.2 重要性那么，为啥我们要测这个菌落总数呢？这里面有个“门道”。
如果这个数值过高，说明食品可能被污染了，吃下去就有风险。
想想看，要是你吃的蛋糕上面跑了一群细菌，那可真是“甜蜜的负担”啊，吃了不但没啥好处，还可能拉肚子，这就得不偿失了！所以，了解菌落总数，就像是给食品加了一道安全锁，能让我们更放心地享受美食。
3. 如何进行菌落总数测定？3.1 检测步骤现在，我们来聊聊这个测定是怎么进行的。
一般来说，测定过程分几个步骤，听起来可能有点复杂，但别担心，咱们一步步来，绝对能搞定！首先，咱们需要准备一个无菌的培养基，常见的比如营养琼脂。
这就像是给细菌准备的“豪华酒店”，要干净、舒适，细菌才愿意来入住。
接着，就需要将待测食品样品进行稀释。
想象一下，你的美食是个“大胃王”，可不能让它一口气吃下去太多细菌，不然肚子受不了。
然后，咱们将稀释后的样品倒在培养基上，轻轻摇匀，放入恒温箱中，让细菌们慢慢“开派对”。
大约24到48小时后，打开恒温箱，就能看到小小的菌落在培养基上欢快地生长。
3.2 结果分析等菌落长出来后，就得开始数数了。
数菌落就像数星星，虽然不一定每颗都能看得清楚，但大致上能看到它们的数量。
然后，再根据稀释倍数，计算出样品中细菌的总数。
菌落总数检测方法
菌落总数检测方法菌落总数检测是一种常见的微生物检测方法，用于评估食品、饮用水、医药制品、化妆品等产品的卫生质量。
菌落总数是指在一定条件下，一定时间内生长的微生物菌落总数，是评价样品中微生物污染程度的重要指标。
正确的菌落总数检测方法对于保障产品质量和消费者健康具有重要意义。
菌落总数检测方法主要包括表面菌落总数检测和悬浮菌落总数检测两种。
表面菌落总数检测是指将样品表面的微生物进行检测，常用的方法包括接触平板法和印记法。
接触平板法是将含有富集培养基的琼脂平板与样品表面接触一定时间，然后进行培养计数。
印记法则是将样品表面印在琼脂平板上，然后进行培养计数。
悬浮菌落总数检测是指将样品中的悬浮微生物进行检测，常用的方法包括滤膜法和涂布法。
滤膜法是通过将样品过滤到膜上，然后将膜培养计数。
涂布法则是将样品涂布在琼脂平板上，然后进行培养计数。
在进行菌落总数检测时，需要注意以下几点。
首先，样品的采集和处理应当符合相关标准和规范，避免外界环境对样品的污染。
其次，培养基的选择应当根据样品的特性和检测要求进行合理选择，以保证菌落的生长和计数准确。
此外，培养条件的控制也非常重要，包括温度、湿度、培养时间等因素，都会对菌落总数的检测结果产生影响。
最后，在进行菌落计数时，需要注意菌落的形态和颜色，避免误判。
除了传统的培养计数方法外，现代生物技术的发展也为菌落总数检测提供了新的手段。
比如，基于PCR技术的快速检测方法可以在较短的时间内对样品中的微生物进行快速检测和鉴定，大大缩短了检测周期。
另外，基于光学原理的生物传感器技术也可以实现对微生物的快速检测，具有灵敏度高、操作简便等优点。
总的来说，菌落总数检测方法是保障产品卫生质量的重要手段，正确的检测方法和操作流程对于获取准确的检测结果至关重要。
随着生物技术的不断发展，菌落总数检测方法也在不断完善和更新，为产品质量安全提供了更多的保障。
希望本文所述内容对您有所帮助，谢谢阅读！。
微生物 菌落总数 测定详细讲解
菌落总数测定详细讲解一、茵落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。
菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内，、所含能于某种周体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。
菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记，也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态．以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据．二、茵落总数测定的几项说明1．菌落总数的测定。
是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。
由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20％)，因而并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。
2．鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。
3．每种细菌都有它一定的生理特性，培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。
因此，要得到较全面的细菌菌落总数，应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧气供应等。
但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定，都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的，因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。
菌落总数原理
菌落总数原理菌落总数是指在一定条件下，某一物质中菌落的总数。
菌落总数是微生物学中常用的一个指标，可以反映出样品中微生物的数量和种类。
而菌落总数的测定原理，是通过将待检样品进行适当稀释后，分别接种在含有适宜营养物质的琼脂平板上，培养一定时间后，观察并计数形成的菌落，从而推算出原始样品中微生物的数量。
菌落总数的测定原理主要包括以下几个步骤：首先，对待检样品进行适当稀释。
由于原始样品中微生物的数量可能非常庞大，直接接种在琼脂平板上会导致菌落过多，难以准确计数。
因此，需要对待检样品进行适当的稀释，以便在琼脂平板上形成可数的菌落。
其次，将稀释后的样品分别接种在琼脂平板上。
接种时需要注意均匀涂布，避免菌落过于密集，影响计数的准确性。
然后，将接种好的琼脂平板置于恒温培养箱中进行培养。
培养的时间和温度需要根据待检样品中微生物的特性而定，一般为24-48小时，有些微生物可能需要更长的时间。
最后，观察并计数形成的菌落。
在培养结束后，需要对琼脂平板上的菌落进行观察和计数。
这一步需要仔细操作，以确保计数的准确性。
通过以上步骤，我们就可以得到待检样品中微生物的数量。
菌落总数的测定原理相对简单，但需要严格按照操作规程进行，以确保结果的准确性和可比性。
菌落总数的测定原理在食品、药品、环境卫生等领域有着广泛的应用。
在食品行业中，菌落总数可以反映食品的卫生状况和微生物污染情况，对于保障食品安全具有重要意义。
在药品生产中，菌落总数的测定也是质量控制的重要环节，可以确保药品的纯度和安全性。
在环境卫生监测中，菌落总数可以反映出环境中微生物的污染程度，为环境卫生管理提供重要依据。
总之，菌落总数的测定原理是微生物学中的重要内容，它通过一系列的操作步骤，可以准确反映出待检样品中微生物的数量，具有广泛的应用前景。
在实际操作中，我们需要严格按照操作规程进行，以确保结果的准确性和可比性，从而更好地为食品安全、药品质量和环境卫生提供保障。
菌落总数测定的步骤
菌落总数测定的步骤以菌落总数测定的步骤为标题，写一篇文章：菌落总数测定是微生物学实验中常用的方法之一，用于确定水样、食品样品或其他物质中的微生物菌落数。
下面将详细介绍菌落总数测定的步骤。
一、准备工作在进行菌落总数测定之前，首先需要准备好所需的实验材料和设备。
这些包括培养基、平板、培养皿、移液器、恒温培养箱、显微镜等。
二、样品处理1. 从待测样品中取一定量，如10毫升。
2. 将样品加入到含有适当培养基的培养皿中。
3. 使用移液器将样品均匀涂布在培养基表面。
三、培养条件1. 将涂有样品的培养皿放入恒温培养箱中。
2. 设置适当的温度和培养时间。
四、计数菌落1. 取出培养皿，使用显微镜观察培养基表面的菌落。
2. 通过目测或使用计数板等工具，对菌落进行计数。
五、计算菌落总数1. 根据所使用的培养皿和所涂布的样品量，计算菌落形成的单位。
2. 将计数结果乘以单位，得到菌落总数。
六、结果分析通过菌落总数测定，可以得到待测样品中的微生物菌落数。
根据菌落总数的大小，可以初步判断待测样品是否符合微生物质量标准。
需要注意的是，在进行菌落总数测定时，应注意以下几点：1. 实验操作要严格遵守无菌操作的要求，以避免外界微生物的污染。
2. 培养基的选择要根据待测样品的特性，以确保菌落的生长和形成。
3. 培养条件的控制要准确，包括温度、湿度、氧气浓度等。
4. 在计数菌落时，要注意避免重复计数同一个菌落，以保证结果的准确性。
菌落总数测定是微生物学中常用的定量方法之一，它可以快速、准确地确定待测样品中微生物菌落的数量。
通过合理的实验步骤和操作，可以得到可靠的结果，并为食品、水质等领域的微生物质量控制提供参考依据。
菌落总数测定的方法
菌落总数测定的方法
菌落总数测定是一种常见的微生物检测方法，用于检验食品、水、药物、化妆品等样品中微生物的数量。
其测定步骤如下：
1. 准备好样品。
2. 将样品按一定比例加入培养基中，使得微生物得以繁殖。
3. 将培养基混匀后，将其倒入培养皿中，使得培养基均匀分布。
4. 使用平板法、斜板法或混合法等方法将培养皿中的培养基表面均匀涂布。
可根据样品中微生物的预估数量选择相应的涂布方式。
平板法适用于样品量较小的场合，斜板法适用于样品数量较大且需要进行质粘分析的场合，混合法适用于样品中微生物数量较低的情况。
5. 使用孔气道计数器或无菌的计数棒对培养皿进行计数，并计算得到菌落总数。
菌落总数可以根据前述涂布方式和培养时间进行调整。
通常，气道计数器需要在24-48小时内完成计数，而计数棒测定则需要在3-5天后进行。
6. 记录测定结果和样品信息，并分析评估菌落总数是否符合卫生标准。
微生物菌落总数的测定—菌落总数的计数方法
混合均匀。
•
6、 待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温
箱内培养48±2h，水产品30±1℃温箱内培养72±3h。
•
如样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生
长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼
脂培养基（约4毫升），凝固后培养。
• （二） 菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，必要
菌落总数的测定
三 、 材料
1、 食品检样 2、 培养基 平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 3、 其它 无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培养箱等。
四、 流程
• 1、检样 • 2、做几个适当倍数的稀释液 • 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加入
灭菌平皿内 • 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混匀 • 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2）小时 • 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量 • 7、 计算菌落总数 → 报告
10-4
3.1x106
• 2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜
计数范围内时，应以两者比值决定。若其比值小 于2，应报告两者的平均数；若大于等于2，则报 告稀释度较小的菌落数。
试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 271
60
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
32
10-3，10-4
2.6x105
12
微生物检测-第四章菌落总数的测定课件
卫生细菌学检验
第四章 菌落总数的测定
第一节 菌落总数(Total colony count)的 概念和测定意义
美国药典MPN法测菌落总数，三级三管制
阳性管数 1 mL(g) ×3 2 2 2 2 0.1 mL(g) ×3 2 2 2 2 0.01 mL(g) ×3 0 1 2 3 MPN CFU/100mL(g) 210 280 350 420 95%可信限 下限 上限
40 100
470 1500
3 3 3 3
三、注意事项
器具干净，灭菌 样品具有代表性 稀释液要有空白对照 蛋白胨水最合适，含盐量高时，用水最合适
培养基的温度
梯度稀释要换管，每管充分振摇 培养基的琼脂1.5%
混合检样时向两个方向旋转
稀释倍数越高，检样数越少
出现链状菌落时以一个菌落记，片状菌落不宜采用 无菌操作 计数准确
所有平皿菌落密布时，在稀释度最大的平皿上，任意 数2cm2,除以2，乘以63.6cm2，再乘以稀释倍数
5.乳酸菌、乳链球菌、双歧杆菌
酸奶及保健制品，评价产品质量 吸取检样液体稀释液1mL于培养皿中，注入已 熔化并冷却至45℃的溴甲酚紫（BCP）培养基、 或改良的LAB培养基、豆芽汁培养基、改良MRS 琼脂、心脑培养基等，轻轻摇匀，静置，冷凝 后，35-37℃倒置培养72h，计数。 BCP用于乳酸菌、乳链球菌， MRS琼脂用于乳 酸菌，豆芽汁用于链球菌，心脑培养基用于双 歧杆菌，LAB用于三种菌。
微生物检测之菌落总数的检测
菌落总数一、菌落总数介绍：菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
二、检验方法菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。
国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。
检验方法参见：GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》三、说明（一）样品的处理和稀释：1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法国标菌落总数检测方法是一种常用的微生物检测方法，用于评估给定样品中的微生物污染水平。
该方法可以应用于食品、环境、水源等多个领域，以评估样品中微生物的数量。
下面将详细介绍国标菌落总数检测方法的步骤和原理。
一、步骤1.准备培养基：根据需要进行培养的菌种不同，可以选择适当的培养基。
通常，使用含水解鱼肉膏、蛋白胨、肉汤、大豆胨等成分的富含营养物质的琼脂培养基。
2.准备样品：样品可以是食品、水样、环境表面样品等。
根据不同的样品，采取适当的方法进行取样，确保样品代表性。
3.稀释样品：为了获得适当的菌落数，通常需要对样品进行稀释。
将一定数量的样品与适量的稀释液混合均匀，得到一系列不同浓度的稀释液。
4.涂布方法：将上一步稀释好的样品涂布于琼脂培养基上。
可以采用平板涂布法或膜过滤法。
平板涂布法是将稀释好的样品倒入已凝固的琼脂平板上，用涂布棒均匀涂布。
膜过滤法是将稀释好的样品过滤到已凝固的膜上，将膜放在培养基上。
5.培养条件：根据需要培养的菌种不同，选择合适的培养温度和时间。
一般而言，大多数细菌在30-37℃下培养24-48小时。
6.菌落计数：培养一定时间后，可以观察到样品中的菌落。
使用显微镜或计数板等工具，对菌落进行计数。
7.统计和计算：根据计数结果和稀释倍数，可以计算出原始样品中的菌落总数。
二、原理微生物培养基提供了微生物生长所需的营养物质。
在适当的温度和湿度下，微生物会在培养基上生长形成菌落。
每个菌落代表一种或多种微生物。
根据菌落的形态、大小和颜色等特征，可以初步推测菌种。
计数并统计菌落总数可以评估样品中微生物的数量。
在菌落总数检测方法中，样品的稀释是为了确保菌落的数量适宜且分散均匀。
过高的菌落数量可能导致菌落过于密集，不容易准确计数。
过低的菌落数量可能导致菌落太稀疏，有些菌落容易被忽略。
选择合适的稀释倍数可以使得菌落数量适宜，方便计数并计算菌落总数。
总结起来，国标菌落总数检测方法是一种常用的微生物检测方法，通过样品的稀释、涂布、培养和计数等步骤，评估给定样品中的微生物数量。
微生物检测——菌落总数测定你知道多少？
微生物检测——菌落总数测定你知道多少？菌落总数就是在一定的条件下，每克或每毫升样品所生长出来的细菌菌落总数。
菌落总数测定的意义在于判定样品被细菌污染的程度以及卫生质量，能够预测样品存放、使用的期限长短，也便于研究人员了解细菌在不同环境中的繁殖动态。
1.设备和材料除了微生物实验室常规灭菌以及培养设备之外，在菌落总数测定的过程中所需要的设备和材料如下：（1）恒温培养箱，温度控制在36℃±1℃，30℃±1℃；（2）冰箱：温度控制在2℃-5℃；（3）恒温水浴箱，温度保持在46℃±1℃；（4）天平：感量为0.1g；（5）均质器；（6）振荡器；（7）无菌吸管：其标准为1ml（具有0.01ml刻度），10ml（具有0.1ml刻度）或微量移液器以及吸头；（8）无菌锥形瓶：容量为250ml和500ml；（9）无菌培养皿：直径为90mm；（10）pH计或pH比色管或精密的pH试纸；（11）放大镜和菌落计数器。
2.平板倾注法测定菌落总数所需要的检验步骤如下：（1）首先要采取样品；（2）对样品进行稀释处理，得到所需要测定的样品；（3）做平板；（4）对样品中的细菌进行培养，为其创造良好的繁殖环境；（5）菌落计数；（6）对菌落总数测定的结果进行报告。
2.1样品的稀释以及做平板在处理固体和半固体样品时，需要的操作如下。
称取25g样品放置在盛有225ml磷酸盐缓冲液或者生理盐水的无菌均质杯中，8000r/min-10000r/min均质1min-2min，或者放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min-2min，制作成1:10的样品均液。
在处理液体样品时，需要的操作如下。
以无菌吸管吸取25ml样品放置在盛有225ml磷酸盐缓冲液或者生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内放置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分摇晃均匀，制作成1：10的样品均液。
用1ml无菌吸管或者微量移液器吸取1:10样品均液1ml，沿着管壁缓慢注入盛有9ml稀释液的无菌试管中，注意吸管或者吸头尖端不要触及稀释液面，振摇试管或者换用一支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制作成1:100的样品均液。
菌落总数原理
菌落总数原理菌落总数是微生物学中的一个重要指标，它是指在一定的培养条件下，菌落在寒暖培养基上生长形成的一个个可见的小圆点或小斑点。
菌落总数的测定是一种常用的微生物检测方法，它可以用来评价食品、饮用水、空气、医药制品等的微生物质量，也可以用于环境微生物的监测。
菌落总数的测定原理是通过将待测样品在适当条件下培养，使其中的微生物形成可见的菌落，然后通过计数来确定其中微生物的数量。
下面将对菌落总数的测定原理进行详细介绍。
首先，菌落总数的测定需要使用寒暖培养基，寒暖培养基是一种含有寒暖适宜微生物生长的培养基，可以促进不同类型的微生物在其上生长形成可见的菌落。
在进行菌落总数测定时，首先需要将待测样品进行适当稀释，然后在寒暖培养基上均匀涂布，利用培养箱进行培养，待培养时间结束后，通过肉眼观察和计数器进行菌落计数，最后通过计算得出菌落总数。
其次，菌落总数的测定原理是基于微生物在寒暖培养基上的生长特性。
不同类型的微生物对培养条件有着不同的要求，有的需要在较低温度下生长，有的则需要在较高温度下生长。
因此，寒暖培养基能够满足不同微生物的生长需求，使其在培养基上形成可见的菌落。
通过对菌落的计数，可以了解待测样品中微生物的数量，从而判断样品的微生物质量。
最后，菌落总数的测定原理是基于统计学原理。
在进行菌落计数时，需要随机选择几个培养皿进行计数，然后通过统计学的方法计算出菌落总数的平均值和标准差，以此来反映待测样品中微生物的数量和分布情况。
通过统计学的分析，可以对菌落总数的测定结果进行可靠性评估，确保测定结果的准确性和可靠性。
综上所述，菌落总数的测定原理是基于微生物在寒暖培养基上的生长特性和统计学原理，通过对菌落的计数来确定待测样品中微生物的数量。
菌落总数的测定是一种常用的微生物检测方法，具有简单、快速、准确的特点，广泛应用于食品、饮用水、医药制品等领域。
希望本文对菌落总数的测定原理有所帮助，谢谢阅读。
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菌落总数测定详细讲解一、茵落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。
菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内，、所含能于某种周体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。
菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记，也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态．以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据．二、茵落总数测定的几项说明1．菌落总数的测定。
是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。
由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20％)，因而并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。
2．鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。
3．每种细菌都有它一定的生理特性，培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。
因此，要得到较全面的细菌菌落总数，应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧气供应等。
但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定，都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的，因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。
三、茵落总数的测定测定食品中菌落总数时，是将食品检样做成几个不同的lO倍递增稀释液，然后从各个稀释液中分别取出一定量在平皿内与营养琼脂相混合，经培养后，按一定要求计算出皿内琼脂平板上所生成的细菌集落数，并再根据检样的稀释倍数，计算出每g或m1样品中所含细菌菌落的总数。
四、菌落总数测定中的一些要求和规定为了正确地反映食品中各种需氧和兼性厌氧菌存在的情况，检验时必须遵循以下一些要求和规定。
(一)所用器皿及稀释液1．检验中所用玻璃器皿，如培养皿，吸管、试管等必须是完全灭菌的，并在灭菌前彻底洗涤干净，不得残留有抑菌物质。
2．用作样品稀释的液体，每批都要有空白对照。
如果在琼脂对照平板上出现几个菌落时，要追加对照平板，以判定是空白稀释液，用于倾注平皿的培养基，还是平皿吸管或空气可能存在的污染。
3．检样的稀释液虽可用灭菌盐水或蒸馏水，但以用磷酸缓冲盐水特别是O．1％蛋白胨水为合适，因蛋白胨水对细菌细胞有更好的保护作用，不会因为在稀释过程中而使食品检样中原已受损伤的细菌细胞导致死亡。
如果对含盐量较高的食品(如酱品等)进行稀释，则宣采用蒸馏水。
(=)检样稀释1．检样稀释时，应以无菌手续称取(或量取)有代表性的样品25g(或m1)剪碎放于含有225ml灭菌稀释液的玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分振摇作成l：lO的稀释液。
如系肉、鱼等固体样品，最好剪细于灭菌乳钵内与稀释液研匀，或与稀释液同置于灭菌均质器杯中(国产均质器，目前以江苏武进郑陆医学仪器厂产品较简便而实用)，以8000一l 0000rpm速度搅拌1分钟，使做成均匀的1：10稀释液。
2．根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，将上述l：lO的检样稀释液再做成几个适当的lO倍递增稀释液。
即取1：10稀释液1ml与9ml稀释液混和做成l：lOO的稀释液，然后依次递增稀释，做成1：1 000、1：10000等稀释液。
注意每递增稀释一次，必须另换1支l ml灭菌吸管，这样所得检样的稀释倍数方为准确。
3．从吸管筒内取出灭菌吸管时，不要将吸管尖端碰着其他仍留在容器内的吸管的外露部分；而且吸管在进出装有稀释液的玻璃瓶和试管时，也不要触及瓶口及试管口的外侧部分；因为这些部分都可能接触过手或其他沾污物。
4．在作10倍递增稀释中，吸管插入检样稀释液内不能低于液砸2．5cm；吸入液体时，应先高于吸管刻度，然后提起吸管尖端离开液面，将尖端贴于玻璃瓶或试管的内壁使吸。
管内液体调至所要求的刻度，这样取样较准确，而且在吸管从稀释液内取出时不会有多余的液体粘附于管外。
5．当用吸管将检样稀释液加至另一装有9mL空白稀释液的试管内时，应小心沿管壁加入，不要触及管内稀释液，以防吸管尖端外侧部分粘附的检液也混入其中。
(三)平板接种与培养1．将稀释液加至灭菌平皿内时，应根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2—3个适宜稀释度，分别在作1O倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移lml 稀释液加入皿内(从皿侧加入，不要揭去皿盖)，最后将吸管直立使液体流毕，并在皿底干燥处再擦一下吸管尖将余液排出，而不要吹出。
每个稀释度应作2个平皿。
2．用于倾注平皿的营养琼脂应预先加热使融化，并保温于45±1℃恒温水浴中待用。
倾注平皿时，每皿内倾入约15ml，最后将琼脂底部带有沉淀的部分弃去。
3.为了防止细菌增殖及产生片状菌落，在检液加入平皿后，应在20分钟内向皿内倾入琼脂，并立即使其与琼脂混和均匀。
4．检样与琼脂混和时，可将皿底在平面上先向一个方向旋转，然后再向相反的方向旋转，以使充分混匀。
旋转中应加小心，不要使混和物溅到皿边的上方。
为了保证混和均匀，而不溅及皿边的上方，可使用江苏省无锡县卫生防疫站童鹤泉设计制成的自动平皿旋转仪，直接将加有检样的平皿放在旋转仪上(可同时放4只平皿)，加入琼脂后，开动电钮，在数十秒钟内即可自动左右旋转而使皿内的检样与琼脂混合均匀。
5．皿内琼脂凝固后，不要长久放置，然后始翻转培养；而应于琼脂凝固后，在数分钟内即应将平皿翻转予以培养，这样可避免菌落蔓延生长。
必要时，可先将皿打开倒置(皿底向上)于温箱内经15~60分钟使琼脂表面干燥后，再将皿底移至盖内倒置于温箱内培养。
这样可以阻止运动性强的变形杆菌属、假单胞菌属和芽胞杆菌属中一些菌株在琼脂表面扩展生长。
6．为了控制污染，在取样进行检验的同时，于工作台上打开一块琼脂平板，其暴露的时间，应与该检样从制备、稀释到加入平皿时所暴露的最长的时间相当，然后与加有检样的平皿一并置于温箱内培养，以了解检样在检验操作过程中有l无受到来自空气的污染。
7．培养温度，应根据食品种类而定。
肉、，乳、蛋类食品用37℃培养，水产品用30℃培养。
培养时间为48±2小时。
其他食品，如清凉饮料，调味品，糖果、糕点．果脯，酒类(主要为发酵酒)、豆制品和酱腌莱均系用37℃24±2小时培养。
培养温度和时间之所以有这种不同的区分，乃是因为在制定这些食品卫生标准中关于菌落总数的规定时，分别采用了不同的温度和培养时间所取得的数据之故。
水产品因来自淡水或海水，水底温度较低，因而制定水产品细菌方面的卫生标准时，系用30℃作为培养的温度。
(四)对照试验1．加入平皿内的检样稀释液(特别是10_1的稀释液)，有肘带有食品颗粒，在这种情况下，为了避免与细菌菌落发生混淆，可作一检样稀释液与琼脂混和的平皿，不经培养，而于4℃环境巾放置，以便在计数捡样菌落时用作对照。
2．为了防止检样中食品颗粒与菌落混淆，也可在已溶化而保温于45℃水浴内的琼脂中，按每100ml加lml O．5％氯化三苯四氮唑(2，3，5triphenyltetrazolium chloride，TTC)水溶液之量加入适量的TTC。
培养后，如系食品颗粒，不见变化，如为细菌，则生成红色菌落．配好的TTC溶液，应先用来与不加TTC的作对照，以观察其对计数是否有不利的作用(TTC 在一定浓度下对革兰氏阳性菌有抑制作用)。
TTC溶液要放冷暗处保存，以防受热与光照而发生分解。
无色的TTC是作为受氢体加入培养基中，如果有细菌存在，培养后，在细菌脱氢酶的作用下，TTC便接受氢而成为红色的三苯基甲艏(formazan)，使菌落呈现红色，其反应式如图2-I：(五)菌落计数1．从温箱内取出平皿进行菌落计数时，应先分别观察同一稀释度的两个平皿和不同稀释度的几个平皿内平板上菌落生长情况。
平行试验的2个平板与菌落数应该接近，不同稀释度的几个平板上菌落数则应与检样稀释倍数成反比，即检样稀释倍数越大，菌落数越低，稀释倍数越小，菌落数越高。
2．计数菌落时，应选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定的标准。
1个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数；如其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
如在一个稀释度的两个平板中，一个平板的菌落数在30一300之间，另一个大于300或小于30时，则以菌落数在30—300间的平板作为计数的标准。
3．菌落计数所得结果，可分别按以下几种不同情况作报告。
(1)若1个稀释度的平均菌落数在30—300之间，则将该菌落数乘其稀释倍数报告之，如表2-1中例1，报告为164×102=16400，或1．6×104。
(2)若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30—300之间，则视二者之比如何来决定。
若其比值小于2，应报告其平均数，如表2-1中例2：46000／29500=1．6<2，故报告为：(46000+29500)／2=37750或3．8×lO4。
若大于2，则报告其中较小的数字，如表2-1中例3：60000／27lOO=2.2>2，故报告为：27lOO或2．7×104。
若等于2，亦报告其中较小的数字，如表2-1中例4：3000／1500=2，故报告为：1500或1．5×lO3．(3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之，如表2-1中例5，报告为：313×108=313000或3．1×105。
(4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀表2-1 稀释度的选择及菌落数报告方式释倍数报告之，如表2-1中例6，报告为：27×10=270或2．7×10。
(5)若所有稀释度均无菌落生长，则以小于l(<1)乘以最低稀释倍数报告之，如表2-1中例7，报告为：<l×10，或<lO。