水产养殖动物病害防治

水产养殖动物病害防治

实验指导

目录

实验一疾病常规检查方法与诊断 (1)

实验二细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本及病原体的观察 (4)

实验三单胞菌的人工感染与分离 (6)

实验四单殖、复殖吸虫类的观察 (7)

实验五甲壳动物病病原体的观察 (9)

实验六虾病的观察 (10)

实验七线虫类的观察 (11)

实验八纤毛虫类的观察 (12)

实验九原生虫病及病原的观察 (14)

实验一疾病常规检查方法与诊断

一、实验目的

通过对本实验课的学习，了解常规的肉眼检查和显微镜检查疾病的方法，对检查结果进行分析、比较，做出疾病诊断。

二、实验材料

活的或刚死的病鱼。

三、实验方法

(1)体外检查

1．肉眼检查：观察鱼有无病症、有无大型寄生虫。并对出现部位、寄生虫的种类、数量等情况作好记录。

2．显微镜检查：对鱼体表主要部位，如鳃、鳍、体侧刮一些黏液或用剪刀下少量鳃、鳍组织，放在滴有一滴蒸馏水的载玻片上，加盖玻片后在显微镜下检查，并做好记录。

(2)体内检查

实质器官如肝、肾等组织器官切下一小块，放在干净的两块载玻片之间挤压，组织压碎后移开一块载玻片，在有压碎的组织一片载玻片上加一滴水后，加盖盖玻片，在显微镜下观察，并做好记录。

（3）检查顺序

1．体表粘液：目检鱼体两侧，各鳍。除肉眼可见的病原体及其胞囊外，其中如原虫、吸虫囊蚴等可用解剖刀将体表粘液刮下进行镜检。

2．鳍：将各鳍拉开，目检，或将鳍全部剪下置玻片上逐个进行镜检。

3．鼻腔：先用肉眼观察是否有大型寄生虫或病象，然后用吸管从鼻孔里吸取少许内含物镜检。4．鳃：包括鳃的外观形态、颜色，刮取鳃粘液或取鳃丝镜检。鳃的颜色和种种病象，并把详细观察情况记录下来（左右两边鳃要分别说明），肉眼检查完毕，即用小剪刀取一小块鳃组织（检查左右第一、二两片），放在已滴入有适当清水的载玻片上，盖上盖片迅速进行镜检。检查原生动物后，可把整个鳃放在培养皿里，加入清水，将整个鳃辨逐片剪下，在解剖镜下观察。观察时用两根解剖针，把鳃丝逐条挑开，仔细观察。或用镊子把每片鳃片上的粘液完全刮下检查。

5．血液：检查血液可从鳃动脉，心脏、尾动脉取血。根据不同要求采取不同的方法。

从心脏取血：两鳃盖之间的鱼体腹面及狭处的下方为围心腔将此处的鳞片除去，用小剪刀将皮肤剪开一个小口，再用微吸管插入心脏，即可吸取血液。血液可用涂片和置于培养皿用生理盐水稀释后分别进行镜检。

6．吸口腔：经肉眼检查后，再用镊子刮限上下颚一些粘液，进行镜检。

7．体腔：首先将鱼剖开，注意避免将腹腔里面的肠或其他器官剪破，体腔内器官显露出来时不要急于把内脏取出或弄乱，首先要仔细观察显露出来的器官，有无可疑的病象，或有否大型寄生虫。如果发现有白点，可能是粘孢子虫或其他寄生虫。肉眼检查完毕。把腹腔液用吸管吸出镜检。接着

把整个内脏放在解剖盘上，将逐个器官分开，依次进行检查。

8．脂肪组织：用压碎法把脂肪组织压薄后检查。

9．肠道：将肠的外壁上所有的脂肪组织，尽量除干净，否则在检查时，许多脂肪油滴混进肠的内含物里，会妨碍观察。除干净脂肪组织后把肠前后伸值，检查前、中、后三段。

10．肝、脾、胆囊、心脏、鳔、肾、膀胱、性腺、眼、脑、骨髓、肌肉等，应先用肉眼检查，以后用压碎法进行镜检，并固定和保存标本。

四、病鱼检查诊断原则

先肉眼后镜检先外后内先腔后实

五、检查时应注意事项

1．具有典型症状的活鱼或刚死的鱼。

2．鱼病检查诊断原则：先肉眼后镜检、先外后内、先腔后实。

3．检查的鱼体，解剖所取出的内器官，必须保持湿润。

4．检查时要按顺序进行，小心操作。解剖过程中应保持器官的完整，避免混淆和污染，影响诊断的正确性。

5．为了防止通过器械污染，每一器官接触的用具须洗净后，再使用。

6．一时不能诊断的病象，要注意保留标本。

六、实验问答

1．病鱼检查中应注意哪些事项？为什么？

2．在主要器官检查时，发现哪些病原体？登记到病鱼检查记录表。

3．对检查结果进行分析、比较做出诊断。

4．假如我们看到一条鱼下颌比上颌长许多，是什么原因？

鱼病检查(调查)记录表：

鱼名：学名俗名编号全长

标准长体高重量年龄

性别

鱼的来源：塘名面积水深

实验二细菌性、真菌性、藻类性鱼病

的病变标本及病原体的观察

一、实验目的

通过对细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察，掌握病变症状和病原体的形态特征，为今后诊断传染性鱼病打下基础。

二、实验用具、药品

显微镜解剖镜小镊子小剪刀解剖针凹玻片盖玻片酒精灯吸管火柴载玻片草酸铵结晶紫液革兰氏碘液番红液95％酒精0.85％生理盐水蒸馏水

三、实验材料

1．烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本。

2．水霉、鳃霉活体或固定标本。

3．烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本。

4．嗜酸卵甲藻标本。

四、实验内容

（一）病变标本观察：

1．烂鳃病观察：肉眼观察病鱼头部颜色特别暗黑，鳃丝腐烂发白，常带有许多污泥，严重时鳃丝尖端软骨外露，鳃盖骨内表皮充血，中间部分表皮被腐蚀成一个圆形小洞，从外表看像透明的天窗。2．肠炎病变观察：病鱼头部黑，肛门红肿，严重时用手轻压病鱼腹部就有血黄色粘液从肛门流出。解剖观察全肠呈紫红色，肠壁形成血浓或乳黄色的粘液。

3．赤皮病的观察（又称出血性腐败病和赤皮瘟）：主要病变是病鱼体表局部或大部出血发炎，鳞片脱落，特别在鱼体腹部两侧，更为明显，鳍基部充血及鳍条腐烂。

4．肤霉病：引起这种病的病原体常见的有绵霉属(Achlya)和水霉属(Saprolegnia)。水霉主要寄生在鱼的表皮，其菌丝是细长的丝状体，繁殖多了，呈灰白色的棉花状，又称为“生毛病”。肉眼容易辨别出来。

5．鳃霉病：病变主要特点是病原体侵入鳃丝，鳃微血管被堵塞，鳃失去正常的鲜红色而呈苍白成粉红色，但由于鳃霉肉眼不易观察到，特别是菌丝体在鳃组织内寄生的情形，须用显微镜检查。6．嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病（又称打粉病）：病原体嗜酸卵甲藻（Oodinium acidophilum）。寄生的成熟个体呈肾脏状，中部有明显凹陷，体内充满碎末淀粉粒，淡绿色的质体和色素体。中央有一个大而圆的细胞核，随着卵甲藻的生长和发育，寄生增生的粘液细胞就愈多愈厚，严重感染病鱼，肉眼看时，就好像涂了一层高低不平的朱粉样子，故有打粉病之称。

（二）病原体的观察：

1．烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌（Flexibacter colnmnaris）：赤皮病的病原体荧光毛杆菌（Pseudomonas fluorescens），用载玻片和凹玻片进行高倍镜或油镜观察细菌活体的运动、繁殖方法。2．固定染色观察：细菌可用镜检做活体检查，但由于体内很小，胞质透明，细胞结构不易辨别，用革兰氏染色，根据对染料的不同反应，可区别细菌为两大类，即革兰氏染色阴性或阳性。