高效液相色谱法测定黄芩中黄芩苷含量

１２ ４ ６ ８ｈ测 定 ，以各 色 谱 峰 峰 面 积 的 积 分 值 计 算 ， Ｓ ， ， ， ， ＲＤ
Ｗ ａｅｓ 效 液 相 色 谱 仪 （ 括 Ｗ ａｅｓ１ ｔｒ 高 包 ｔｒ６ ６泵 ， ｔｒ Ｗａｅｓ
分 别 为 ２ Ｏ ，． ， ． ， ． ， ． ， 明 其 重 复 性 ． ％ ２ １ １ ９ ２０ ２ ０ 表
山西医药杂志 ２ ｌ Ｏ ２年 １月 第 ４ 卷 第 １期 上 半 月 Ｓ ａ ｘ Ｍｅ ，ａ ｕ ｒ ０ ２ Ｖ １ １ Ｎｏ １ｔｅＦｒｔ ｌ ｈ ｎ ｉ ｄＪＪ ｎ ａｙ２ １ 。 ｏ．４ ， ． ｈ ｉ ｓ
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８５ ・
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药 物研Fra Baidu bibliotek究 ・
高效液 相色谱法测定黄芩中黄芩 苷含量
作 者 简介 ： 翠 先 ， ，９ ５年 ｌ 白 女 １６ Ｏ月生 ， 管 药 师 ， 州市 人 主 忻
民 医院 ，３０ ０ ０ ４ ０
２４ 对 照 品溶 液 制备 ： 对 照 品 黄 芩 适 量 ， 密 称 定 ， 别 ． 取 精 分
置 于 １ ＯｍＬ量 瓶 中 ， 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 得 加 摇 即 单 一 成 分 对 照 品溶 液 。
３ 结 果
［ ］ 许 勇 ， 晓琛 ， 波 ． 外 分 光 光 度 法 测 定 复 方 银 杏 叶 胶 囊 总 ３ 黄 陆 紫
好。
２８ ４ ７检测器 ）ＡＧ１ ５电子天平 （ ； ３ 梅特勒公 司） 。Ａｇｌ ｔ ｉ ｎ 。 ｅ Ｃ
色 谱 柱 （ ． Ｘ５ ｍ）（ ａｅｓ 司 ） Ｅ ｏ ｒ色 谱 工 作 ４ ６ ０ｒ ａ Ｗ ｔｒ 公 ； ｍｐ ｗｅ 站 （ ａｅｓ 司 ） 甲 醇 为 色 谱 纯 （ 号 ２ ０ １ １ ， 京 化 Ｗ ｔｒ 公 。 批 ０８２５ 北 学 试 剂 有 限 公 司） 磷 酸 为 分 析纯 （ 号 ２ ０ ０ １ ， 京 化 学 ； 批 ０４１１北
性 良好 。
中分 离 纯 化 黄 酮类 化 合 物 具 有 重 要 意 义 。本 研 究 测 定 黄 芩
中黄芩苷 的高效液相 色谱测 定方 法 ， 为黄 芩质 量控 制及 资
源选择提供 了科学依据 。
１ 材 料 与 仪 器
３ ３ 稳 定 性 试 验 ： 制 备 好 的样 品 溶 液 ， 别 在 制 备 后 ０ ． 取 分 ，
甲醇 稀 释 至刻 度 ， ３ ０ｎ 测 吸 光 度 。以 吸 收 度 值 ｙ对 浓 于 ７ ｍ 度 Ｘ 进 行 线 性 回 归 ， 算 回 归 方 程 ｙ一０ Ｏ ０２ ． ６ Ｘ， 计 ． ０ ＋０ ２ ４ ｒ 一０ ９ ９６ 线性 范 围 ５ ２ ｇ ｍＬ ． ９ ， ～ ５ｔ ／ 。 ￣
２ ３ 供 试 品 溶 液 的 制 备 ： 芩 药 材 约 ０ ５ｇ 精 密 称 定 ； ． 黄 ． ， 置
于 ５ ０ｍＬ三 角 烧 瓶 中 ， ２ 加 ５ｍＬ 甲醇 回 流 ３ ｎ 冷 却 ； ０ｍｉ， 转
移 至 ５ ＯｍＬ量 瓶 中 ， 甲醇 至 刻 度 ， 匀 ， 过 ； 续 滤 液 ５ 加 摇 滤 取
忻 州 市 人 民 医 院 （ ３ ０ ０ 白翠 先 ０４０ ）
黄酮 类 化 合 物 是 一 类 重 要 的 植 物 化 学 成 分 ， 我 国传 是
统 中 医药 和植 物 化 学 物 质 中重 要 的 活 性 物 质 。从 常 见 药 物
９ ． 、４ ５ 和 ９ ． ％ ， 示 其 回收 率 高 。 ５ ９ ９ ． ５０ 显 ３ ２ 重 复 性 试 验 ： 密 吸 取 对 照 品 溶 液 １ ． 精 ０ｍＬ， 复 进 样 ５ 重 次 ， 定 黄 芩 峰 面 积 ， 果 其 Ｒ Ｄ 为 ０ ３ ， 明仪 器 重 复 测 结 Ｓ ．４ 表
定。
参 考 文 献
Ｅｉ 张国峰， ｌ 吴瑕 ， 白雪 ， ． Ｌ 等 ＨＰ Ｃ法 同 时 测 定 野 葛 花 中 ４种 异 黄
酮 成 分 的含 量 ． 阳药 科 大 学 学 报 ，０ ９ ２ （ ）４ —４ 沈 ２ ０ ，６ １ ：０４ ．
２ １ 色 谱 条 件 的 选 择 ： ｉ ｎ １柱 （０ｍｍ ×４ ６ｍｍ， ． Ａｇｌ ｔＣ８ ５ ｅ ． ５ ｍ） 以 乙 腈 超 纯 水 为 流 动 相 ， 用 梯 度 洗 脱 ， 样 量 为 １ ， 采 进 ０ Ｌ， 紫 外 扫 描 图谱 可 知 ， 芩 在 ３ ０ｎ 为 特 征 吸 收 ， 此 由 黄 ７ ｍ 为 选 择 ３０ｎ 为 检 测 波 长 。 同 时 考 察 色 谱 柱 温 在 ３ 、５ ４ ７ ｍ Ｏ ３ 、Ｏ
２ 方 法
黄 芩 药 材化 学 组 成 复 杂 ， 了 黄 芩 外 ， 有 一 些 杂 质 ， 除 还 且 不 容 易 鉴 别 ＿ 。 同 时 国 内对 于 黄 芩 药 材 的提 取 工 艺 研 究 １ ］ 报 道 不 多 ， 外 则 未 见 报 道 。杨 向 东 等 嘲 以 紫 外 光 为 检 测 国 手 段 ， 用 正 交设 计 法 观 察 了 回馏 提 取 黄 芩 药 材 总 黄 芩 的 采 影 响 因 素 。还 有 研 究 考 察 了超 声 提 取 黄 芩 药 材 总 黄 芩 的 影 响 因素 。 同时 黄 酮 类 化 合 物 作 为 植 物 次 生 代 谢 产 物 ， 含 其 量 受 到 自身 遗 传 因素 、 理 生 化 因 素 的影 响 ， 时也 受 到 植 生 同 物 生 长 发 育 进 程 及 其 所 处 的生 长 环 境 条 件 的影 响 。 在 药 材 生 长 过 程 中 ， 细 胞 内 的 黄 酮 不 断 发 生 合 成 、 化 或 降 解 等 其 转 生 理 生 化 反 应 ， 以不 同采 收期 黄酮 含 量 出现 差 异 所 。我 们建立的分析条件测定黄芩药材 的化合物黄芩苷 ， 密 度、 精 回收率等均符合要求 ， 定性佳 ， 现性好 ， 分析速度 快 ， 稳 重 且 操 作 简 单 ， 据 可 靠 ， 用 于 黄 芩 药 材 中 黄 酮 成 分 的含 量 测 数 可
的 黄芩 中 黄 芩 苷 含 量 分 别 为 ５ ５ ，．４ ，． ２ 。 ． ０ ５ ５ ５ ５
４ 讨 论
所有 黄 芩 药 材 均 由我 院药 剂 科 中 药 师 鉴 定 。 对 照 品 黄 芩 为 我 院 天 然 药 物 化 学 实 验 室 提 供 ， 度 均 ＞ ９ 。 纯 ８
３４ 加 样 回收 率 试 验 ： 供 试 品 溶 液 过 直 径 为 ０ ４ ｍ 的 ． 取 ． ５ｒ ｉ 微 孔 滤 膜 ， 别 进 样 １ Ｌ， 据 批 号 分 别 测 定 ， 平 均 值 。 分 Ｏ 根 取 结 果 表 明 ， 芩 中 含 有 黄 芩 苷 Ｏ ２ ２ｍｇ ｇ 黄 芩 苷 含 量 为 黄 ． ４ ／ ， ５ ５ 。具 体 分 别 为 ： 号 ２ １０ ８ 、 ０ １ ５０ ２ １ ０ １ ．２ 批 ０ １ ５ ０ ２ １ ０ ３ 、０ １５ ２
及４ ５℃ 对 分 离 的 影 响 ， 终 选 择 了 ３ ℃ 的 柱 温 。 体 积 流 最 Ｏ
量 为 １ Ｏ ｍＬ ｍｉ。 ． ／ ｎ
２ ２ 标 准 曲 线 的 制 备 ： 密 吸 取 黄 芩 苷 标 准 溶 液 （ 度 为 ． 精 浓 ５ ｇ ｍＬ ，． ，． ，． ，． ，． ０ｔ ／ ） １ ０ ２０ ３０ ４０ ５０ｍＬ置 １ ￣ ０ｍＬ容 量 瓶 ， 加
ｍＬ， 于 ２ 置 ５ｍＬ量 瓶 中 ， 甲醇 稀 释 至 刻 度 ， 得 供 试 品 溶 用 即
液。
Ｅ ］ 杨 向东 ， 博 ， 四艳 ， ． 交 试 验 法 优 选 葛 花 总 异 黄 酮 提 取 ２ 刘 陈 等 正
工 艺 的研 究 ． 北 中 医杂 志 ，０ ９ ３ （ ） ６— １ 湖 ２ ０ ，０ ８ ：０６ ．
试 剂 六 厂 ）盐 酸 为 分 析 纯 （ 号 ２ ０ ０ ０ ， 京 化 工 厂 ） 乙 ； 批 ０７７８北 ； 醇为分析纯 （ 号 ０００ ， 京 化工厂 ） 批 ８８８北 。其 中建 立 含 量 测 定 方法用黄芩 药 材为 ２ １ ０ １年 ６月 购 买 于 当 地 药 材 公 司 。
３ １ 精 密 度 试 验 ： 对 照 品 溶 液 ２ ． 取 ０ｍＬ， 行 连 续 进 样 ６ 进 次 ， 得 黄 芩 面 积 的相 对 标 准 偏 差 （ Ｓ ） 别 为 ０ ５ ％ ， 测 ＲＤ分 ． ９ 显 示 其 精 密 度 良 好 。然 后 精 密 称 取 已 知 含 量 的 ３份 黄 芩 药 材 ， 样 品 准 备 与 处 理 方 法 制 备 计 算 回 收 率 ， 果 分 别 为 按 结
黄 酮 含 量 ． 国医 药 研 究 ，０ ８ ２ ８ ：３６ ． 中 ２ ０ ，（ ） ６—４
Ｅ］ 王欣杨 ， ４ 于治 国 ， 晓 霞 ， ． 效 液 相 色 谱 法 同 时测 定 斛 寄 生 高 等 高 中 四种 黄 酮 ． 中草 药 ，Ｏ Ｏ ４ （ ） １ ５１ ７ ２ ｌ ，１ １ ：３—３ ． （ 稿 日期 ：Ｏ１一 ６ ２ ） 收 ２ １Ｏ — ８