HIV实验室检测及规范操作课件
hiv抗体检测标准操作程序课件
hiv抗体检测标准操作程序课件一、教学内容二、教学目标1. 理解HIV病毒的生物学特性和感染后的免疫应答机制。
2. 掌握不同类型的HIV抗体检测方法,尤其是酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验(Western blot)的操作流程与结果判读。
3. 能够独立进行HIV抗体检测的标准操作,并理解实验室安全及质量控制的要点。
三、教学难点与重点教学难点:HIV抗体检测的操作细节、结果判读以及质量控制措施。
教学重点:ELISA和Western blot试验的原理与实践操作,以及安全规程的遵守。
四、教具与学具准备1. 教具:PPT课件、HIV抗体检测操作视频、实验室安全手册。
2. 学具:ELISA试剂盒、Western blot试剂、移液器、离心机、生物安全柜、个人防护装备。
五、教学过程1. 引言(10分钟):通过一个实际案例引入HIV抗体检测在临床诊断中的重要性。
2. 理论讲解(30分钟):介绍HIV病毒学、免疫学基础,解释抗体检测原理。
3. 操作演示(20分钟):播放HIV抗体检测操作视频,讲解操作流程。
4. 例题讲解(15分钟):通过具体例题讲解如何进行结果判读。
5. 随堂练习(15分钟):模拟实验室环境,进行ELISA试验操作的练习。
6. 质量控制与安全讨论(10分钟):强调实验室质量控制措施及个人安全防护要点。
7. 答疑(10分钟):解答学生提出的问题。
六、板书设计1. HIV抗体检测流程图。
2. ELISA和Western blot试验原理简图。
3. 结果判读标准一览表。
七、作业设计1. 作业题目:对比分析ELISA和Western blot两种HIV抗体检测方法的优缺点。
答案:ELISA敏感性高,可用于大规模初筛,但有一定的假阳性率;Western blot特异性强,用于确证试验,但操作复杂、成本高。
2. 作业题目:简述实验室进行HIV抗体检测时,如何进行质量控制。
答案:包括使用标准品、质控血清进行室内质控,定期参加室间质评,严格操作规程,确保仪器设备校准等。
艾滋病检测原理和技术规范课件.
艾滋病检测原理和技术规范课件.一、教学内容本课件基于《生物技术实验教程》第十一章“艾滋病检测原理和技术规范”进行展开。
详细内容包括:艾滋病的基本知识、检测原理、常用检测技术(如ELISA、Western Blot、PCR等),以及实验操作流程和注意事项。
二、教学目标1. 掌握艾滋病的基本知识,了解艾滋病的传播途径和预防措施。
2. 熟悉艾滋病检测原理,掌握常用检测技术的操作流程和规范。
3. 培养学生的实验操作能力,提高实验安全意识。
三、教学难点与重点教学难点:艾滋病检测技术的操作流程和注意事项。
教学重点:艾滋病检测原理及常用检测技术的掌握。
四、教具与学具准备1. 教具:PPT课件、实验操作视频、实验器材。
2. 学具:实验手册、实验报告、实验器材。
五、教学过程1. 引入:通过讲解艾滋病的危害性和传播途径,引出艾滋病检测的重要性。
2. 理论讲解:a. 艾滋病基本知识介绍。
b. 艾滋病检测原理及常用检测技术。
3. 实践操作:a. 演示ELISA实验操作流程。
b. 学生分组进行实验操作,教师巡回指导。
4. 随堂练习:针对实验操作流程,设计相关问题,检验学生对知识的掌握。
六、板书设计1. 艾滋病基本知识a. 传播途径b. 预防措施2. 艾滋病检测原理a. 抗体检测b. 抗原检测c. 核酸检测3. 常用检测技术a. ELISAb. Western Blotc. PCR七、作业设计1. 作业题目:a. 简述艾滋病的基本知识及传播途径。
b. 解释艾滋病检测原理,列举三种常用检测技术。
c. 描述ELISA实验操作流程及注意事项。
2. 答案:a. 艾滋病基本知识及传播途径略。
b. 艾滋病检测原理及常用检测技术答案略。
c. ELISA实验操作流程及注意事项答案略。
八、课后反思及拓展延伸1. 课后反思:本节课通过讲解、演示、实践操作等环节,使学生掌握了艾滋病检测原理和技术规范。
但在实验操作过程中,部分学生仍存在操作不规范、安全意识不强等问题,需要在今后的教学中加强指导。
HIV感染的实验室检测课件
HIV感染的实验室检测课件一、教学内容本课件主要依据《医学微生物学》第13章“人类免疫缺陷病毒(HIV)感染与艾滋病”的内容进行展开。
详细教学内容包括HIV的结构特点、传播途径、实验室检测方法、检测技术及质量控制和评价。
二、教学目标1. 了解HIV的基本结构、传播途径及其在人体内的复制过程。
2. 掌握HIV实验室检测的基本方法、技术及其质量控制和评价。
3. 能够运用所学知识对HIV感染进行实验室检测和结果分析。
三、教学难点与重点教学难点:HIV实验室检测技术及其质量控制。
教学重点:HIV实验室检测方法、操作流程及结果分析。
四、教具与学具准备1. 教具:多媒体课件、实验室检测设备图片、检测流程图。
五、教学过程1. 实践情景引入:通过展示艾滋病疫情数据,引出HIV检测的重要性。
2. 理论讲解:2.1 HIV的基本结构、传播途径和复制过程;2.2 HIV实验室检测方法:抗原检测、抗体检测、核酸检测;2.3 实验室检测技术:酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹试验(WB)、聚合酶链反应(PCR)等;2.4 质量控制与评价:介绍实验室质量控制方法及评价标准。
3. 例题讲解:通过实际案例,讲解HIV实验室检测方法的选择、操作流程和结果解读。
4. 随堂练习:针对所学内容,设计练习题,巩固知识点。
5. 互动环节:学生提问,教师解答。
六、板书设计1. HIV实验室检测方法示意图;2. 实验室检测技术流程图;3. 质量控制与评价关键点。
七、作业设计1. 作业题目:1.1 列举HIV实验室检测的常用方法,并说明各自优缺点;1.2 某患者HIV抗体检测为阳性,试分析可能的原因;1.3 简述HIV核酸检测的原理及其在诊断中的应用。
2. 答案:八、课后反思及拓展延伸1. 反思:根据学生反馈,调整教学方法和节奏,提高教学质量。
2. 拓展延伸:2.1 了解我国艾滋病防治政策及实验室检测技术发展现状;2.2 探讨HIV实验室检测新技术及其在临床诊断中的应用前景。
HIV实验室检测ppt课件
0.04(NEG )
/
P24 (不确定)
134 P24 0.01(NEG HIV RNA 02 2011/12/1 / 4.49(POS) (不确定 ) (NEG) 2 Combi 试剂2次均出现阳性结果,P24抗原也均出现条带,但 ) • 罗氏HIV HIV-RNA分析病毒为阴性,最终报告为阴性,该患者实为淋巴瘤,分析 时注意干扰因素
WB P24 (不确定)
01
/
p24,p31 105 ,p51, 302.7(POS 11.09 1.8X105 02 2012/05/2 / p66, ) (POS) (POS) 5 gp120, gp160 • 该患者第1次检测罗氏HIV Combi PT和HIV Combi均为阳性、 ELISA为阴性、 HIVAg检测阳性,患者不同意做确证实验,在105天后第2次采血,罗氏HIV Combi PT 和国产ELISA法检出阳性,WB分析检出较多抗原亚类,实验室作HIV- RNA高精分析
•
淋巴瘤患者、孕妇、肿瘤病人、透析患者4种病人都可能出现HIV初筛阳
性,需特别对待
23
Case分享
• 华西案例分析 CASE 2 HIV Combi (COI) 2.59 (POS) ELISA (S/CO) 0.04 (NEG) HIV RNA (高精分析 )
WUXX Men Days since HIV Combi 30 Y first bleed PT (COI) 0 2012/02/1 0 51.15 (POS)
7
HIV实验室指标
初筛试验+确证试验 备注
筛查试验:ELISA, CIA, ECLIA 确证试验:WB, RIBA 仅测抗体 早期灵敏度更高
血清学检测
HIV检测技术ppt课件
HIV抗体不确定(±) 出现HIV抗体特异带,但不足以判定阳性。
免疫印迹法(WB)
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WB不确定结果
WB的敏感性和特异性均较高。其假阳性率低于1/2万,假 阴性率约为1/25万。其较高的特异性主要基于HIV不同抗 原组分的分离以及浓缩和纯化。由于能够同时检测多种抗 体以及对阳性判定的要求必须有两条以上的条带出现,因 而能够用WB方法鉴别初筛试验的假阳性结果。不过该方 法比较昂贵,技术要求高,影响因素多,操作不当和误判 带型的假阳性率>2%。另外,文献报道大约4%~20%的 样品经过HIV初筛复检阳性后,WB结果为“不确定”。 WB不确定结果的出现确实给临床诊断带来困难,需要更 多的时间和实验进一步确认,也会对受试者造成额外的心 理负担。从另一方面而言,WB不确定结果确是受试者真 实的血清学反应。
22
免疫胶体金(或胶体硒)快速试验 结果判断
反应区和质控区均出现红色条带为阳性, 质控区有条带反应区无条带为阴性,
反应区和质控区均无条带则实验无效。
艾滋病检测技术规范ppt课件
初筛结论
CONCLUTION
检测者
OPERATOR
全血□ 血浆□ 血清□ 唾液□ 尿□ 其它:_____
年龄 AGE 民族
ETHNICS
编号: NO.: 送检日期
DATE
送检人群
POPULATION
性别
GENDER
婚姻状况
MARRIAGE
□□□□□□□□□□□□□□□□□□
年月日
对样品进行初筛检测,
▪ 对呈阴性反应的样品,可出具HIV抗
体阴性(-)报告;对呈阳性反应的 样品,需要进一步做复检试验和确证 试验。
16
筛查程序
复检试验
▪ 对初筛呈阳性反应的样品,应使用原有试剂和另外一
种不同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
▪ 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂,则复检必须包
现住址
____________省__________市________县(区)_____________乡(镇、街道) ____________村__________(门牌号)
____________省__________市________县(区)_____________乡(镇、街道) 户籍地址
村__________(门牌号)
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(3)快速检测(RT)及其它检测试验
▪ 明胶颗粒凝集试验(PA):是HIV血清抗体检测的一种简便方法。
将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体,与待检样品作用。当待检样 品含有HIV抗体时,明胶颗粒与抗体发生凝集反应,根据凝集情 况判读结果。PA试剂有两种:同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分 别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。
hiv抗体检测标准操作程序课件
hiv抗体检测标准操作程序课件一、教学内容本课件依据《临床免疫学》第7章“病毒感染与免疫”的相关内容,详细讲解人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测的标准操作程序。
具体内容包括HIV病毒学基础、抗体检测原理、检测方法、操作步骤以及结果判读等。
二、教学目标1. 理解HIV病毒的生物学特性及其在人体内的感染过程。
2. 掌握HIV抗体检测的原理、方法及其操作步骤。
3. 能够独立完成HIV抗体检测的实验操作,并正确判读检测结果。
三、教学难点与重点教学难点:HIV抗体检测的操作步骤和结果判读。
教学重点:HIV抗体检测的原理、方法及其在临床诊断中的应用。
四、教具与学具准备1. 教具:PPT课件、实验操作视频、HIV抗体检测操作手册。
2. 学具:HIV抗体检测实验试剂、实验仪器、实验记录本。
五、教学过程1. 导入:通过展示HIV病毒感染与免疫的相关数据,引出HIV抗体检测在临床诊断中的重要性。
2. 理论讲解:(1)HIV病毒学基础;(2)HIV抗体检测原理;(3)HIV抗体检测方法。
3. 实践操作:(1)实验操作步骤讲解;(2)实验操作视频观看;(3)分组讨论:针对操作步骤中的注意事项进行讨论。
4. 随堂练习:发放实验操作手册,让学生根据手册完成HIV抗体检测的实验操作。
5. 结果判读:讲解HIV抗体检测结果判读标准,并引导学生进行实际操作。
六、板书设计1. HIV抗体检测标准操作程序2. 内容:(1)HIV病毒学基础;(2)HIV抗体检测原理;(3)HIV抗体检测方法;(4)实验操作步骤及注意事项;(5)结果判读标准。
七、作业设计1. 作业题目:HIV抗体检测实验报告。
2. 答案:包括实验操作步骤、结果记录及判读、实验心得等。
八、课后反思及拓展延伸2. 拓展延伸:引导学生关注HIV抗体检测在国内外的研究动态,了解新型检测技术及其应用前景。
重点和难点解析1. HIV抗体检测原理2. 实验操作步骤及注意事项3. 结果判读标准一、HIV抗体检测原理HIV抗体检测主要基于抗原抗体反应原理。
HIV检测技术 ppt课件
对初筛呈阳性反应的样品,应使用原有试剂和另外一 种不同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂,则复检必须包 括一种抗原抗体联合试剂。
艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品, 确证实验室可以直接进行确证试验。
原有试剂+另一 种原理初筛试剂
(3)快速检测(RT)及其它检测试验
优点:试验简便快速,适用于应急检测、门诊急 诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在 10~30分钟内得出结果。
缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保 存。
快速诊断试剂
(1)明胶颗粒凝集试验(PA) 将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体,与待检样品作
用,混匀后保温(一般为室温)。当待检样品含有 HIV抗体时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗 原-抗体反应,根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判 读结果。
加样 温育 洗板 显色
标准化操作及流程
试剂准备、标本收集、测定方法和仪器操 作写出正确的“标准操作程序”(SOP),所有 的实验技术人员在进行相关测定时,必须严格 按相应的SOP进行操作。
ELISA法结果判断
临界值概念: 将检测的阳性和(或)阴性对照的 OD值代入计算公式计算出来的判断阳性和阴性 结果的界值
吸附-穿入-脱壳-生物合成-组装成熟和释放
HIV-1通过gp120与靶细胞表面CD4分子和趋化因子受体结合
HIV感染后的血清学改变
HIV抗体检测目的
诊断:确定个体HIV感染状况而进行的检测,包括临床检 测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体 检等。
监测:了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检 测,检测的人群包括各类高危人群和一般人群。
HIV感染的实验室检测(共36张PPT)
• (3)实验结果
• ①阴性对照(NC),HIV-1阳性对照(PC1),HIV-2阳性对照 (PC2)
NC 必须<0.25方可用,排除NC≥0.25的值,计算NC平均 值。
NC界限范围:0.6倍NC均值<NC<1.4倍NC均值。
• 竞争法、捕获包被法等 4、严格遵守实验室标准操作规程(SOP)。
为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的,比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV感染 (4)艾滋病唾液检测卡:在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原,可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体,原理为酶 免疫间接法。 监测(为了知晓人群流行状况) Introduction to HIV Testing ⑥在2h内置于酶标仪读数,单波长450nm,或双波长450/630nm测OD值。 常用HIV抗体检测方法: 加受检标本,保温反应。 (1)明胶颗粒凝集试验(PA):PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法,是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体,与待检样品作用,混匀后 保温(一般为室温)。
ELISA的原理
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗 体复合物与液体中的其他物质分开。再 加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应 而结合在固相载体上。此时固相上的酶 量与标本中受检物质的量呈一定的比例 。
ELISA的原理
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有 色产物,产物的量与标本中受检物质的量 直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性 或定量分析。由于酶的催化效率很高,间 接地放大了免疫反应的结果,使测定方法 达到很高的敏感度。
ELISA
酶联免疫吸附试验 + ve
HIV
包被了HIV 抗
原的检测板
患者的抗体
艾滋病实验室检查课件
艾滋病实验室检查课件一、教学内容本课件主要基于《医学微生物学》第十二章关于艾滋病病毒检测的内容。
详细内容包括:艾滋病病毒的基本结构及生命周期,实验室检查艾滋病病毒的方法与技术,常用的检测手段如ELISA、Western blot、PCR等,以及它们的原理、操作步骤和结果判读。
二、教学目标1. 理解艾滋病病毒的基本结构、生命周期,以及实验室检查艾滋病病毒的重要性。
2. 掌握常用的艾滋病病毒检测方法及操作步骤,学会判读检测结果。
3. 能够运用所学知识,分析实验室检查结果,为临床诊断和治疗提供依据。
三、教学难点与重点教学难点:艾滋病病毒实验室检查方法的技术细节,以及结果判读。
教学重点:常用的艾滋病病毒检测方法及操作步骤,实验室检查结果的临床意义。
四、教具与学具准备1. 教具:多媒体课件、黑板、粉笔。
五、教学过程1. 实践情景引入:展示一份实验室检查报告单,让学生分析其中艾滋病病毒检测的结果。
2. 讲解艾滋病病毒的基本结构、生命周期,引导学生了解实验室检查的必要性。
3. 详细介绍ELISA、Western blot、PCR等检测方法的原理、操作步骤和结果判读。
4. 例题讲解:以具体病例为例,讲解如何根据实验室检查结果诊断艾滋病。
5. 随堂练习:让学生分析实验室检查报告单,判断检测结果是否为艾滋病病毒感染。
六、板书设计1. 艾滋病病毒基本结构、生命周期2. 常用实验室检查方法:ELISA、Western blot、PCR原理操作步骤结果判读3. 检查结果的临床意义七、作业设计1. 作业题目:(1)简述艾滋病病毒的基本结构和生命周期。
(2)比较ELISA、Western blot、PCR三种检测方法的优缺点。
2. 答案:(1)艾滋病病毒的基本结构包括:核心蛋白、膜蛋白、包膜糖蛋白等。
生命周期包括:吸附、融合、逆转录、整合、复制、组装、释放等。
(2)ELISA:操作简便,适用于大量样本检测;Western blot:灵敏度和特异性较高,但操作复杂;PCR:灵敏度高,可检测病毒核酸,但易受污染。
2024年hiv实验室检测及规范操作课件
2024年hiv实验室检测及规范操作课件一、教学内容二、教学目标1. 理解HIV实验室检测的基本原理和方法。
2. 学会规范操作HIV实验室检测流程。
3. 掌握HIV检测质量控制措施。
三、教学难点与重点教学难点:HIV实验室检测方法的原理、操作步骤及质量控制。
教学重点:规范操作HIV实验室检测流程,确保实验结果的准确性。
四、教具与学具准备1. 教具:PPT课件、实验操作视频、HIV实验室检测操作手册。
2. 学具:实验室检测器材(如离心机、移液器等)、实验试剂、个人防护用品。
五、教学过程1. 实践情景引入(5分钟)通过展示HIV实验室检测在实际工作中的应用案例,引导学生了解HIV检测的重要性。
2. 理论知识讲解(15分钟)介绍HIV实验室检测的基本原理、方法及操作步骤。
3. 例题讲解(10分钟)通过具体例题,讲解HIV实验室检测中可能遇到的问题及解决方法。
4. 随堂练习(10分钟)学生分组进行HIV实验室检测操作练习,教师巡回指导。
5. 规范操作演示(15分钟)播放实验操作视频,讲解操作要领及注意事项。
6. 质量控制讲解(10分钟)介绍HIV检测质量控制措施,包括实验室内部质量控制、实验室间质量控制等。
六、板书设计1. 2024年HIV实验室检测及规范操作2. 内容:HIV实验室检测基本原理实验室检测方法操作步骤质量控制七、作业设计1. 作业题目:(1)简述HIV实验室检测的基本原理。
(2)列举三种常用的HIV实验室检测方法。
(3)结合实验操作流程,说明如何进行HIV实验室质量控制。
2. 答案:(1)HIV实验室检测基本原理:通过检测病毒核酸、病毒抗原或抗体等指标,来判断待检样本中是否存在HIV感染。
(2)常用的HIV实验室检测方法:免疫印迹法、ELISA法、PCR法。
(3)HIV实验室质量控制:实验室内部质量控制包括实验器材校准、试剂质量检查、操作人员培训等;实验室间质量控制包括参加外部质控活动、进行室间比对等。
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艾滋病检测方法的意义
HIV核酸检测
►辅助诊断:在特殊情况下,如出现某些非典型的抗 体反应,特别是不确定反应时,RNA的测定可提供有用 的证据。
►感染早期:在HIV感染的窗口期,无法使用抗体检测 进行诊断,此时RNA的测定具有特殊的意义,提示是否 有感染的可能,但仍需追踪检测HIV抗体,最终根据抗 体的检测情况做出诊断。
▪ 填写HIV阳性标本送检单,并随标本送至
当地筛查中心实验室,或直接送确认实验室。
▪ 筛查中心实验室应尽快用两种试剂进行复
测,如结果均阳性或一阴一阳,则应将该标本 和送检单一并送至省艾滋病确认实验室确认。
▪阳性标本必须送省确认中心,筛查实验室不 能随意处理。
▪ 做好检测后的咨询
结果的解释 问题: HIV抗体检测结果阴性是否表明未感染? 对不确定结果如何解释? 怎么样知道婴儿是否感染了HIV?
H不确定的原因
(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗 体。
(2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体 水平下降。
(3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫 性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖 等,此时,身体产生的一些抗体与P24核 心蛋白抗体相似。
(4)以前接种过HIV疫苗。
HIV抗体初筛检测结果解释
如何判断婴儿是否感染了HIV?
通过胎盘,感染了HIV的母亲所生的婴儿可 能带有来自母体的HIV抗体,此时HIV抗体检 测阳性并不意味着已被感染。 ►建议在婴儿9个月时进行HIV初筛检测 如阴性,则判定为未感染HIV。 如阳性,则应在婴儿18个月时进行复检
酶联免疫吸附试验 ▪间接法 ▪直接法(双抗原夹心法) ▪抗体竞争法 明胶颗粒凝集试验(PA) 快速法
HIV/AIDS的筛查,但初筛阳性结果不能做为艾滋 病诊断依据,需将该标本送地区筛查中心实验室用两 种方法进行复核,仍为阳性或一阴一阳则须送省确认 中心。
艾滋病检测方法的意义
HIV抗体确认检测(免疫印迹试验) HIV/AIDS诊断的唯一依据,省CDC确认实验室负责全省 监测哨点以及常规检测中阳性及可疑标本的确认和省内 HIV初筛实验室的质量管理.另外,省检疫系统有一个确认 实验室,设在省检疫局保健中心.
►病程监控:帮助确定疾病发展的阶段。
►指导治疗方案及疗效测定
►预测疾病进程
国家对HIV抗体检测试剂的要求
◆初筛试剂
筛查试剂必须是HIV1+2混合型的、经国 家食品药品监督管理局注册批准、批批检合 格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。
◆确认试剂
必须经国家食品药品监督管理局注册批准。
我国常用的HIV抗体检测试剂
阴性:判定为未感染。 阳性:则将血样送至省CDC确认中心进 行 HIV抗体的确认试验。
HIV抗体初筛检测
酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) ELISA法中有间接法、夹心法和竞争 法。目前使用最多的是夹心法。
HIV抗体初筛检测(ELISA实验原理)
HIV抗体检测程序及流程图
1、筛查试验 标本验收合格后,用筛查试剂进行检测,如 呈阴性反应,报告为HIV抗体阴性;对呈阳性 反应的标本须进行重复检测。
2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家 的试剂重复检测,如两种试剂复测均呈阴性 反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应, 或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确 认。
►HIV抗体筛查试剂 ▪酶联免疫:初筛实验室的常用基本试剂。 ▪明胶颗粒凝集 ▪其它快速诊断试剂:在尚未建立艾滋病筛
查实验室的偏远地区由经过培训的技术人员 在规定的场所使用。 ►HIV抗体确认试剂
▪免疫印迹试剂
快速检测试剂的优缺点
硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ►优点 所需时间短 操作简便,不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ►缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。
HIV抗体初筛检测结果解释
什么是不确定结果?
HIV抗体确认试验时,试验条带上出现的蛋白带型 不足以判断为HIV抗体阳性,应建议其3个月后复查. ►如果复查结果阳转,表明受检者已感染HIV; ►如复查时条带全部消失,则为阴性结果; ►如复查时条带没有变化或有变化但仍不足以判断 为阳性,则应建议其3个月后再复查一次,如还不能 判断为阳性结果,则应作为阴性对待.
酶球(酶标记抗原) 抗体
HIV抗体初筛检测 ELISA夹心法
原理
将HIV抗原包被到固相载体上,标本中的HIV抗体 与包被的HIV抗原结合形成复合物,利用抗体的多 价性,又与酶(HRP)标记的同类HIV抗原也即酶 标板内的球状复合物,形成一个HIV抗原抗体酶标 记的HIV抗原复合物,最后加入底物,避光30分钟, 在酶作用下,产生显色反应,加2N硫酸终止后呈 黄色,在450/620nm双波长下测定光密度值,与 标准进行比较,以判定标本 的结果。
3、筛查试验的流程图
样品
原有试剂加 另一种筛查试剂
筛查检测 阳性反应 重复检测
均阳性反应
一阴一阳
送确认实验室 进行确认
筛查试剂 阴性反应
均阴性反应 阴性报告
HIV抗体筛查结果的报告和处理
►筛查试验呈阴性反应,出具HIV抗体阴性报告 (提示应考虑窗口期的可能)。
►筛查试验呈阳性反应,可出具“HIV待复查”报 告,不能出阳性报告。同时尽快进行以下处理:
HIV实验室检测及规范操作
xxx
艾滋病检测的方法
HIV抗体检测
HIV抗体初筛检测 HIV抗体确认检测(免疫印迹试验)
HIV核酸检测
▪核酸序列依赖性扩增(NASBA) ▪HIV定量逆转录PCR系统(RT-PCR) ▪HIVRNA定量检测的分支测定法(bDNA)
艾滋病检测方法的意义
HIV抗体检测
HIV抗体初筛检测结果解释
阴性 (1)未感染HIV (2)可能感染了HIV,但处于窗口期,或HIV-1/2抗
体和HIV-1O亚型抗体低于检测下限。 (3)疾病晚期,免疫功能缺损,抗体可能呈阴性. 确认阳性
感染了HIV,样品含有HIV-1/2抗体和 HIV-1O亚型抗体(未满18个月的婴儿除外). 不确定:建议追踪检测.