MCT1在肝癌中表达的意义

MCT1在肝癌中表达的意义

摘要】目的通过免疫组化方法检测人肝癌中MCT1的表达，探讨其表达与肿瘤

临床及病理学的关系。方法收集2002年-2009年间40例肝癌手术切除标本，对

照组30例为正常肝组织。将肝癌标本和对照正常肝组织标本制成石蜡切片并进

行免疫组化染色，检测不同病理级别及临床分级肝癌组织标本和对照标本MCT1

的表达水平。结果肝癌标本中有MCT1高表达，且临床病理级别高的肝癌组中表

达水平低于临床病理级别低的肝癌组，差异有统计学意义。结论肝癌中存在MC

T1的高表达，且M C T1表达水平与病理分级程度密切相关。MCT1与肝癌患者临

床预后相关，表达水平高，更易复发，且生存期较短。

【关键词】单羧酸转运蛋白-1(MCT1) 肝癌

肝细胞癌(H C C)是世界范围内常见的恶性肿瘤，是目前发病率高、治疗困难、死亡率高的恶性肿瘤，我国肝癌的死亡率在所有恶性肿瘤中居第二位。如何预测

和防治肝癌的侵袭转移和复发是当今肝癌研究的重点之一。目前在宫颈癌及恶性

黑色素瘤细胞上已经证实，M C T s与肿瘤细胞的糖酵解及细胞外低P H密切相关，而通过s i R N A抑制M C T s的表达可以导致细胞糖酵解代谢能力下降，细胞泵出

乳酸能力下降，细胞外P H上升，从而导致细胞凋亡，达到抑制肿瘤生长的作用[1]。而目前国内外在肝癌上进行M C T的研究还较少，本研究希望通过免疫组化

方法检测人肝癌中M C T1的表达，探讨其表达与肿瘤临床及病理学的关系，从而为肝癌的临床治疗提供理论基础。

1 资料与方法

1.1临床资料收集本院病理科正常肝组织标本30例（肝良性病变旁的正常肝

组织)，外科肝癌(H C C)手术切除组织标本(2002-2009年)40例，肝癌组中男性28例，女性12例，年龄34.8-68.5（51.2±10.5)岁。所有肝癌患者术前均未接受放疗、化疗和免疫治疗。

1.2实验试剂及设备 M C T1鼠抗人单克隆抗体(浓缩型，工作浓度1:100)（S A

N T A公司)；链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)免疫组化试剂盒（北京中山生

物有限公司)；D A B显色试剂盒（北京中山生物有限公司)。

1.3实验方法正常组织及肿瘤组织均制作组织切片，进行HE染色及免疫组化

染色，采用SP免疫组化染色方法。

1.4结果判定 M C T1阳性表达表现为主要在细胞膜上的棕黄色线条状染色，

在细胞浆内亦可见少量黄色点片状染色，但比胞膜染色浅。M C T1表达强度根据

阳性表达细胞所占的百分比来判断：<20%细胞呈阳性表达为阴性“－”；≥20%细胞

呈阳性为阳性“+”，阳性标本中若≥40%细胞呈阳性则再定为强阳性“++”[2]。

1.5统计学方法所有数据采用S P S S11.5统计学软件进行统计学分析，计数资料采用x2检验，计量资料采用t检验，相关性分析采用S p e a r m a n等级相关

性分析，P<0.05为具有统计学意义。M C T1的表达以“－”，“+”，“++”来表示为计

数资料，统计3种表达等级各自的切片数量，所得数据资料进行x2检验。

2 结果

2.1实验组及对照组患者一般情况及病例情况分析

实验组及对照组在性别构成、年龄构成等一般情况无统计学差异，具有可比

性（P>0.05)，详见表1。

2.2 MCT1在肝癌组织及正常肝组织的表达

在肝癌组织中，M C T1阳性物质主要定位于细胞膜上，表现为细胞膜上的棕

黄色条状染色，在细胞浆内表现为部分黄色点片状染色，比胞膜染色浅，阳性细

胞在整个肿瘤实质中呈均匀散在分布，但在肿瘤间质和正常组织中较少或几乎无

表达，而在分化程度较低，或出现转移的肿瘤细胞，则呈现深黄染，细胞浆及细

胞质均分布黄色条片状物质。而在正常肝组织，M C T1呈现阴性或部分“+”表达，主要表现为细胞膜上部分黄色颗粒状染色，而小血管内皮，组织间隙多为阴性表达。而根据临床病理因素分析，M C T1的表达与C h i l d分级无关，而随着分化

程度的增加（E d m o n s o n分级的增加）M C T1的表达阳性率逐渐增高，转移阳性肝癌组织M C T1阳性率高于无转移肝癌组织，而随着T N M分期的增加，M C

T1的表达也增加，而与肿瘤的大小无关，详见表2。

2.3 MCT1在肝癌以及正常肝组织中表达情况的比较

M C T1在正常组织也有一定表达（50%)，主要在细胞的胞膜表达，部分在细胞浆可见少

量颗粒状或条带状黄染，M C T1在正常组织表达率远低于在肝癌组织中的阳性表达率(77.5%)，具有统计学意义（P=0.000)，详见表3。

2.4 MCT1的表达与临床因素的关系

M C T1在肝癌的表达与患者的年龄及性别构成无关，本组40例患者均有完整的随访资料，最长随访5年，共有17例患者在随访期复发，23例未复发，研究显示，M C T1的表达与复

发及生存时间有关，未复发患者M C T1阳性率低于复发者，而生存时间较长患者M C T1阳

性率则明显低于死亡患者（P<0.01）,详见表4。

3 讨论

M C T1在正常组织、肿瘤细胞中均主要表达于细胞膜，表现为沿细胞膜分布的条状或线

状棕黄色染色，这与其在细胞内担任单羧酸转运体的功能有关。M C T对于组织细胞的作用

主要在于两个方面：一方面它可以将乳酸运入细胞内作为糖异生的原料，再通过葡萄糖氧化

供能;另一方面它可以将细胞糖酵解所产生的大量代谢产物乳酸运出细胞，以保证糖酵解反应

得以不断向正方向进行，同时通过运出乳酸也调节了细胞内P H值使其不致过低，稳定了细

胞内环境。因M C T1在M C T s家族中在人体内数量最多，分布最广，对于代谢和内环境调

节的意义最为重要。故我们选择其作为MCTs家族中的研究对象。

本研究中希望探讨的是，在肿瘤细胞中M C T1的含量变化及其对肿瘤恶性程度、预后等

的指示作用。大多数正常组织只有在缺氧时才进行糖酵解，而肿瘤组织即使在氧供应充分的

情况下仍主要依靠糖酵解供能，这可能是由于肿瘤代谢酶谱改变，代谢需求增强，肿瘤的生

长速度相对大于其毛细血管生成使肿瘤组织处于相对缺氧环境。M C T对于肿瘤代谢的意义

同样在于前面所述两方面:内运乳酸等单羧酸作为供能原料和外运糖酵解产生的乳酸，调节细

胞内环境。旺盛的糖酵解代谢在为肿瘤细胞迅速供给能量的同时，在细胞内产生了大量以乳

酸为主的代谢产物。从生物化学角度来说，反应产物侧浓度的增加会严重影响反应过程的方

向和速度，如果这部分乳酸不能迅速转运至细胞外，整个糖酵解过程将逐渐减慢，最终陷于

停顿。此外，乳酸在细胞内的大量堆积同时可使细胞内p H值(p H i)降低，影响细胞内其他反

应进行，直接导致细胞死亡。

因此可以推测，增值能力强、侵袭能力强、转移能力强的肿瘤细胞的代谢水平也较高，

这也意味着需要更高水平的M C T1来维持p H i及乳酸水平。在本研究结果中，可见在正常

肝组织中，M C T1的阳性表达为15例（50%），而在肝癌组织中阳性表达为31例（77.5%），与正常肝组织相比具有显著统计学差异（P<0.01），且在T N M分期Ⅲ-Ⅳ级或E d m e n s o n

分级为Ⅲ-Ⅳ级的肿瘤细胞，M C T1的阳性表达率明显增高，且在具有转移倾向的肿瘤组织，M C T1阳性表达率也较高，验证了我们的推断，恶性程度高的肿瘤细胞，代谢水平高，M C

T1表达水平也高。

总之，通过我们的研究认为，在肝癌组织中，M C T1的表达水平高于在正常肝组织中，

且M C T1的表达水平与肿瘤的病理分级，转移倾向，临床分期有关，而与肿瘤的大小无关，