血脂及血浆脂蛋白检验ppt

3.抗凝剂 我国多用血清作血脂分析。如果用血浆，多主 张用EDTA ·2Na 抗凝
4.标本处理
标本应尽快送往实验室，室温下放置30 - 45 min 后离心，分离血清。
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血清或血浆外观 （血清/浆静置试验）
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血清（浆）静置试验
将患者空腹12h后采集静脉血分离出血清置4℃冰箱中过夜，然后观 察其分层现象及清澈度。
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（一）血浆脂蛋白的分类
超速离心法：
• 电泳法:
乳糜微粒 CM
－－－－－－－－－－ 乳糜微粒（CM）到 电
密 度
极低密度脂蛋白 VLDL
β脂蛋白
快泳 速
从 中间密度脂蛋白 IDL
度
低 低密度脂蛋白 LDL 到 脂蛋白(a) Lp(a) 高 高密度脂蛋白 HDL
前β脂蛋白
由
慢
α-脂蛋白
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血
浆
CM↑↑
TC N/↑,TG↑↑ （I型）
TG↑↑
VLDL↑↑
TC N/ ↑,TG ↑↑ （IV型）
TC↑↑,TG↑↑ （ IIb型/III型） CM及VLDL↑↑
TC↑↑,TG↑↑ （III型/V型）
TC、TG均正 （正常人） 常TC↑↑,TG正常 （IIa型）
TC↑↑,TG↑ （IIb型）
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ApoB100缺陷 不清楚
ApoE异常
不清楚
临床特征
表型分类
以胆固醇升高为主，可伴轻度甘油三酯升 高，LDL明显增加，可有肌腱黄色瘤，多有 冠心病和高脂血症家族史。
同上
胆固醇和甘油三酯均升高，VLDL和LDL都增 加，无黄色瘤，家族成员中有不同型高脂 蛋白血症，有冠心病家族史。
胆固醇和甘油三酯均升高，乳糜微粒和 VLDL残粒以及IDL明显增加，可有掌皱黄色 瘤，多为Apo E2（2/2）表型。
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TC测定 TG测定 HDL-C测定 LDL-C测定
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血清（浆）总胆固醇（TC）测定
血清中TC包括CE和FC， 其中CE占70％，FC占30％。
化学法
酶法
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（一）化学测定法 （直接法和间接法）
1.胆固醇与醋酐 – 硫酸试剂产生蓝绿色
L – B反应： Liberman发现胆固醇在硫酸、醋酐溶液中显色， Burchard 用此反应测定胆固醇称为L-B反应。（条件要求严格、试剂腐蚀性强、对FC 与CE的显色强度不一致、呈色不稳定 ） Abell法（ALBK法）：公认的参考方法 皂化（KOH乙醇溶液水解CE成为FC）、抽提（正己烷或石油醚提取FC）、 显色（L-B反应）。
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分布及特点：
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（四）脂蛋白受体
定义：
脂蛋白受体是一类位于细胞膜上的糖蛋白。它能以高 度的亲和方式与相应的脂蛋白配体作用，从而介导细胞对 脂蛋白的摄取与代谢，进一步调节细胞外脂蛋白的水平。
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脂蛋白受体的作用：
位于各种细胞的膜上，脂蛋白转化分解后的残基主要通过脂 蛋白受体被摄入细胞。不仅是运送脂蛋白至细胞所必需，也是从 血和外周组织中有效清除具有潜在致动脉粥样硬化的脂蛋白所必 需的。
2.胆固醇与高铁 – 硫酸试剂产生稳定的紫红色
Zak反应： Zak提出用硫酸、醋酸和Fe3+等与胆固醇作用生成紫红色化合物 来测定胆固醇，称为Zak反应。 （比L-B反应的灵敏度高，呈色稳定不需要皂 化，反应特异性差）
脂蛋白电泳分析
其他测定： 有关的蛋白质、酶 和受体测定
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血脂测定标பைடு நூலகம்化：
➢准确测定应从分析前的准备开始，包括受试者的准备，标本 采集，合格的试剂、校准物的选用，检测方法选择。
➢血脂分析前变异来源于： ①生物因素，如年龄、性别、种族等因素的个体差异。 ②生活方式，包括饮食习惯、吸烟、运动及应激等。 ③临床方面包括疾病或药物引起的脂代谢改变。 ④血标本采集与处理方面
➢残粒受体： 分布在代谢活跃的心肌、骨骼肌、脂肪等组织细胞。 识别、结合含ApoE的脂蛋白如CM残粒和β-VLDL残粒
➢清道夫受体： 存在于巨噬细胞表面 识别、结合修饰的LDL（氧化型LDL和β-VLDL）
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（五）脂代谢有关的酶类与特殊蛋白质
酶：
LPL、肝脂肪酶（HL或HTGL）、LCAT、HMG-CoA还原酶 参与TG分解、FC合成和酯化
低密度脂蛋白－胆固醇(LDL- C)
载脂蛋白等。
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本章内容概要
第一节 概述 第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定
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第一节 概 述
一、血脂及血浆脂蛋白
定义：
血脂：是血浆中脂类（脂质）物质的总称。包括 中性脂肪（甘油三酯TG）和类脂（胆固醇Ch、胆固 醇酯CE 、磷脂、糖脂、游离脂肪酸）。
脂蛋白：脂类难溶于水，正常血浆脂类物质 与蛋白质结合成脂蛋白的形式运输和代谢 。
➢原发性：
在排除继发性高脂血症后，可诊断为原发性。已知部分原发性高脂 血症由先天性基因缺陷所致
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3.高脂血症的基因分型法
表10-5 家族性高脂血症的临床特征
常用名 家族性高胆固醇血症
家族性Apo B100缺陷症 家族性混合型高脂血症
家族性异常β脂蛋白血 症 家族性高甘油三酯血症
基因缺陷 L LDL受体缺陷
原因：因某种原因使脂蛋白合成减少，另外分解代谢旺盛也可导致。
分类：原发性和继发性
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第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定
血清脂质和脂蛋白检测的分析程序及项目选择
血清或血浆外观 （血清/浆静置试验）
TC测定 TG测定 HDL-C测定 LDL-C测定
Lp（a）测定
ApoAI测定 ApoB测定
代谢过程：
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功能： VLDL转运内源性TG ；LDL转运胆固醇到肝外组织
新生VLDL B-100
脂酸 胆固醇
HL
肝 LDL受体
E
TG C
C A
apo C、apo E
E
P C
C
HDL
apo C
VLDL
B-100 TG
E CC
LPL
B-100 CE
B-100 TG C E
IDL
甘油
外周组织 脂酸
LDL
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蛋白质：脂质转运蛋白
定义：
血浆中脂蛋白部分含有一种特殊的转运蛋白，能促进血浆各脂蛋白间 胆固醇酯、甘油三酯和磷脂的单向或双向转运和交换，这类特殊转运蛋 白称脂质转运蛋白（lipid transfer protein,LTP）。
组成：
胆固醇酯转运蛋白（CETP）：可将LCAT催化生成的胆固醇酯由HDL 转移至VLDL、IDL和LDL中，在胆固醇的逆向转运中起关键作用
第十章 血脂及血浆脂蛋白检验
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血脂、血浆脂蛋白及载脂蛋白检验的重要性 血脂代谢异常
动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS) 冠心病（CHD）等心、脑血管疾病
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临床常规血脂和脂蛋白测定项目:
总胆固醇（totalcholesterol，TC，包括FC和CE）
甘油三酯(TG)
高密度脂蛋白－胆固醇(HDL-C)
➢方法学上应该采用美国疾病控制中心（CDC）或中华医学 会检验分会推荐的操作方法。
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标本采集与处理
1.受检者的准备
抽血前应有两周时间保持平常的生活习惯，近期内体重稳 定，无急性病、外伤、手术等意外情况，24小时内不饮酒， 禁食12-14小时，早上空腹、安静状态下采血。
注意事项：
（1）检验前，应根据药物的特性，尽可能停止用药数天或数周。
C-Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ
E
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功能：
①与脂质的亲和作用而使脂质溶于水性介质中。
②运转胆固醇和甘油三酯。
③作为脂蛋白外壳的结构成分，与脂蛋白外生物信息相联系。
④以配体的形式作为脂蛋白与特异受体的连接物。（如： apoB100和apoE参与LDL受体的识别；apoE能被CM受体识别）
⑤激活某些与血浆脂蛋白代谢有关的酶类（如：ApoAI和CI能 激活卵磷脂-胆固醇酰基转移酶LCAT，ApoCⅡ激活LPL）
VLDL 前β脂蛋白
0.95~1.006
90~95% TG多
（次于CM）
最少, 1%
5~10%
转运外源性TG 转运内源性 TG
LDL β脂蛋白
1.006~1.063
75~80% 含胆固醇及其 酯最多
20~25%
转运胆固醇 到肝外组织
HDL α脂蛋白
1.063~1.210
含脂类50%
最多，约50%
逆向转运肝外 胆固醇回肝
CM带明 显
β脂蛋白明显增高
（常见）
前β及β脂蛋白均增高
或透明
（罕见） CM残粒 及VLDL 残粒 （IDL）
（极常见）
前β及β脂蛋白带融合，宽 而浓染的“宽β带”
前β脂蛋白明显增高
（罕见）
CM带明显，前β脂蛋白增高-
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2.按是否继发于全身性疾病分类
➢继发性高脂血症：
继发性者由一些全身性疾病引起血脂异常，如糖尿病、肾病综合征、 肾功能衰竭、甲状腺功能减退症、肝胆疾病、系统性红斑狼疮、肥胖症、 饮酒等。此外，某些药物如β-受体阻断剂、降压药等也可引起血脂异常。
（2）妊娠前、后期各项血脂都会增高，产后、终止哺乳3个月后， 才能反映其基本血脂水平。
（3）血脂水平有季节性变动，对于体检者建议应在每年同一季节 检查。
（4）结合生理和临床情况，综合、动态分析检验结果。