几种免疫活性肽的研究进展_郑云峰

酪蛋白磷酸肽 （ Ｃｐｐｓ， Ｃａｓｅｉｎ ｐｈｏｓｐｈｏｐｅｐｔｉｄｅｓ） 是 用肠道蛋白酶分解牛乳酪蛋白， 然后提纯水解产物得 到的一类磷酸肽。Ｃｐｐｓ 是一类含有磷酸丝氨酸和谷 氨酸簇的短肽， 目前已从牛、人、大鼠的 α、β酪蛋白中 分离得到 ５ 种 Ｃｐｐｓ， 这些 Ｃｐｐｓ 的分子量不一， 分布于 酪蛋白的不同区域， 其活性中心是成串的磷酸丝氨酸 和谷氨酸簇， 基本结构为： － ＳｅｒＰ－ ＳｅｒＰ－ ＳｅｒＰ－ Ｇｌｕ－ Ｇｌｕ［６］。 在 Ｃｐｐｓ 结构中起免疫调节作用的部位是含有 ３ 个氨 基酸残基的小肽且 Ｎ 端和 Ｃ 端分别是一个磷酸丝氨 酸残基， 即 Ｓｅｒｐ－ Ｘ－ Ｓｅｒｐ 结构。
近几年的研究发现许多免疫活性细胞能释放少 量 ＶＩＰ， 在 其 表 面 也 有 ＶＩＰ 高 亲 合 力 受 体 存 在 ， 并 证 实它是神经系统和免疫系统之间相互作用的一种信 号分子， 在机体免疫， 尤其是局部粘膜免疫中起着一 定的调节作用［１４］。研究表明， ＶＩＰ 能抑制胸腺细胞的增 殖和迁移， 进而促进机体 Ｔ 淋巴细胞的成熟； 同时 ＶＩＰ 能抑制糖皮质激素诱导 的胸 腺 细胞 调 亡 ； ＶＩＰ 还 能促进在 ＩＬ－ ２ 的诱导下淋巴母细胞穿透 Ｍａｔｒｉｇｅｌ 基 底膜［１５］。ＶＩＰ 对外周免疫系统的作用同样非常广泛， 能 抑制 ＮＫ 细胞的活性， 调节 Ｔ、Ｂ 细胞的增殖、粘附， 细 胞因子的分泌以及免疫球蛋白的合成。 １．４ 胸腺肽
抗菌肽在宿主防御中除了能直接杀死病原菌， 还 有其它功能： 充当单核细胞和 Ｔ 淋巴细胞的趋化因 子， 使它们能快速聚集在炎症反应部位； 促进化学因 子的表达和 Ｔ 辅助淋巴细胞的增殖反应； 抑制细菌产 物（如脂多糖、脂壁酸） 诱导产生对宿主有害的细胞因 子， 避免内毒素血症的发生； 促使巨噬细胞及激活的 淋巴细胞的凋亡， 也就是指具有潜在消灭感染细胞的 功能。 ２ 讨论
胸腺肽最早是从小牛的胸腺提取的， 它是由胸腺 上皮细胞分泌的分子量不同的多种肽类物质组成， 能 增强动物机体的免疫功能。余斌等（ １９９７） ［１６］研究日粮 中 添 加 胸 腺 肽 对 肉 鸡 增 重 、免 疫 及 内 分 泌 影 响 的 结 果 表明， 在日粮中添加胸腺肽能显著提高 ３８ 日龄肉鸡 血清中的 Ｔ 淋巴细胞， 同时血浆中的 Ｔ３、Ｔ４ 的水平也 显著提高。王护宾等（１９９８）［１７］在研究乳猪胸腺 肽 对小 鼠 Ｔ 淋巴细胞增殖和活化的影响时得出， 胸腺肽在 １～５μｇ／ｍｌ 时， 对小鼠脾总体细胞的 ３Ｈ２ＴｄＲ 自发掺入 具 有 促进 作用 ； 在 ５～２５μｇ／ｍｌ 时 ， 对 植 物 凝 集 素 诱 导 的淋巴细胞转化具有促进作用， 这表明胸腺肽作用的
最早的研究发现， Ｃｐｐｓ 能与多种矿物元素结合形 成可溶性的有机磷酸盐， 充当许多矿物元素特别是钙 离子在体内运输的载体， 促进小肠对钙离子和其它矿 物质元素的吸收［７， ８］。Ｃｐｐｓ 调节 动 物的 免 疫功 能是 最 近才被人们所关注的， Ｏｔａｎｉ 等（ ２０００） ［９］向 ３ 周龄 仔 猪 饲料中添加 ０．５％的 Ｃｐｐｓ－ Ｉ， 结果显示， 试验组的猪血 清和粪便中抗 β－ 乳球蛋白 ＩｇＡ 的含量显著高于对照 组， 同时试验组猪粪便和肠道总 ＩｇＡ 的含量也显著高 于对照组， 这些表明 Ｃｐｐｓ－ Ｉ 能增强仔猪粘膜 ＩｇＡ 的 反 应 水 平 。 Ｋｉｔａｍｕｒａ 等 （ ２００２） ［１０］ 给 怀 孕 母 猪 饲 喂 Ｃｐｐｓ－ Ｉ， 试验期从妊娠第 ４５ｄ 到分娩后第 ２１ｄ， 结果母 猪血清和粪便 ＩｇＡ 含量都是升高， 试验组 １０ 日龄仔 猪血清中 ＩｇＧ 含量高于对照组。以上结果表明， 可以 通过给怀孕母猪饲喂 Ｃｐｐｓ－ Ｉ 进而通过母源抗体的方
自免疫活性肽被发现和大量研究以来， 由于其活 性检测方法相当复杂， 且需要做大量的动物试验才能
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得出结论， 到目前为止， 免疫活性肽的研究仍处于实 验水平， 还没有一套较为有效的制备方法。随着研究 手段和研究方法的不断提高， 免疫活性肽的研究必将 不断深入， 将有更多新的免疫活性肽被发现。由于这 些 免 疫 活 性 肽 具 有 分 子 量 小 、稳 定 性 强，且 免 疫 原 性 弱、生物活性高等诸多优点， 可制成各种免疫制剂， 用 于 免 疫 功 能 低 下 、自 身 免 疫 性 疾 病 、肿 瘤 、移 植 排 斥 反 应等的治疗， 应用前景十分广阔。
靶细胞为经伴刀豆蛋白活化的 Ｔ 细胞。 许多研究还表明， 胸腺肽能够促进 Ｔ 淋巴细胞的
成熟和分化。成熟的 Ｔ 淋巴细胞根据其表面分子的表 达又可以分为 ２ 个主要的亚群： ＣＤ４＋和 ＣＤ８＋Ｔ 淋巴细 胞。ＣＤ４＋Ｔ 淋巴细胞识别第二类组织相容性抗原， 为辅 助细胞， 而 ＣＤ８＋Ｔ 淋巴细胞识别第一类组织相容性抗 原， 大部分的 ＣＤ８＋Ｔ 淋巴 细 胞具 有细 胞 毒素［１８］。Ａｌａｎ 等（１９９９）实 验 发 现， 胸 腺 肽 增 强 单 核 细 胞 增 殖 ， 刺 激 ＣＤ３＋细 胞 表 达 ， 促 进 ＣＤ３＋、ＣＤ４＋基 质 细 胞 成 熟 及 向 ＣＤ３＋、ＣＤ４＋的转化， 促进 ＣＤ４＋细胞亚群成熟和表达。 １．５ 抗菌肽
大量的研究表明， 抗菌肽不仅具有广谱的抗菌作 用， 而且还有高效的抗真菌、抗病毒、抗原虫和抗肿瘤 活性。Ｂｏｍａｎ 等（ １９９３） ［２１］在研究猪 ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｐ１ 和 ＰＲ－ ３９ 对 大 肠 杆 菌 的 作 用 机 理 时 发 现 ， ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｐ１ 是 通 过改变细菌细胞膜通透性而杀菌的， 其杀菌机理为： 带 正 电荷 的抗 菌 肽， 通 过 正、负 电荷 间 的 静 电 作 用 吸 附到细菌等病原体的细胞膜表面， 然后把疏水尾插入 到细胞膜的疏水区域， 从而改变膜构象， 形成众多离 子通道， 接着， 膜内的 Ｋ＋通过离子通道大量外流， 造成 ＡＴＰ 合成下降， 最后菌体因细胞呼吸受阻而死亡。
《 饲料工业》·２００６ 年第 ２７ 卷第 ５ 期
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（ 本栏目由上海邦成生物科技有限公司协办）
几种免疫活性肽的研究进展
邦成生物科技
郑云峰 王祖平 徐云英
免疫活性肽的研究始于 １９８１ 年， Ｊｏｌｌｅｓ 等首次报 道。用胰蛋白酶水解人乳蛋白， 从水解产物中分离得 到 一 种 具 有 免 疫 活 性 的 肽 段 。这 个 短 肽 在 体 外 试 验 中 能增强小鼠腹腔巨嗜细胞对绵羊红细胞的吞噬作用； 静脉注射， 则能增强小鼠抗肺炎克氏杆菌感染的能 力。此后， 科学家进行了大量免疫活性肽方面的研究， 具有不同生物学功能的免疫活性肽相继被报道， 如抗 血 栓 转 化 酶 抑 制 肽 、酪 蛋 白 磷 酸 肽 、抗 菌 肽 等 。免 疫 活 性肽能够刺激机体淋巴细胞的增殖， 增强巨嗜细胞的 吞噬功能， 进而提高机体抵御外界病原体感染的能 力， 降低机体发病率， 并具有抗肿瘤功能［１］。本文就近 年研究较多的几种免疫活性肽作一综述。 １ 免疫活性肽的分类及其作用
研究表明， 阿片肽几乎可参与免疫应答的全部环
郑云峰， 上海邦成生物科技有限公司， ２００２３１， 上海。 王祖平、徐云英， 单位及通讯地址同第一作者。 收稿日期： ２００６－ ０１－ １６
节， 而且活化的免疫细胞也可以合成并释放阿片肽， 并 主 要 以 内 分 泌 和 旁 分 泌 的 方 式 参 与 免 疫 调 节 ［４］。 Ｌｉｎｎｅｒ 等在新生胸腺组织培养中， 加入拮抗剂 ＮＴＩ 或 ＰＥＡｍＲＮＡ 特异的反义 ｃＤＮＡ， 使脑啡肽不能与受体 结合或细胞自分泌的脑啡肽降低。结果发现， 胸腺细 胞增殖， 但其分化成熟受抑， 这表明脑啡肽可加速细 胞分化。从细胞介导的免疫应答来说， 阿片肽主要是 促进 ＣＤ４ 淋巴细胞的分化、成熟来调节免疫反应。研 究表明， 应激与阿片肽有关， 应激的免疫反应不仅仅 是 ＨＰＡ 的激活， 阿片肽同样发挥重要作用。阿片肽可 以使机体在各种应激条件下保持稳态， 进而减少由于 应 激 造 成 的 免 疫 抑 制 ［５］。 １．２ 酪蛋白磷酸肽
血 管 活 性 肠 肽 （ Ｖａｓｏｃａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｐｅｐｔｉｄｅ ＶＩＰ） 于 １９７０ 年首次由 Ｓａｉｄ 和 Ｍｕｔｔ 从猪小肠分离出 来， ＶＩＰ 是一个直链肽， 由 ２８ 个氨基酸残基构成， 分 子量 ３ ３２３Ｄａ， 属胰高血糖素－ 胰泌素家族。ＶＩＰ 在体 内分布非常广泛， 主要由中枢和外周神经产生， 在胃 肠道粘膜神经、内分泌细胞等也有少量 ＶＩＰ 产 生［１３］。 ＶＩＰ 是中枢和外周神经系统的重要递质， 能引起平滑 肌和血管扩张以及神经的去极化， 能调节水盐代谢， 促进某些酶类和激素的释放， 增强破骨细胞活性， 还 可促进或抑制某些肿瘤细胞或正常细胞的增殖。
抗菌肽（ Ａｎｔｉ－ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ， ＡＢＰ） 是指氨基酸 数 目 小 于 １００， 常 带 正 电 荷 ， 并 具 广 谱 抗 菌 性 的 一 类 小肽， 是动物在诱导条件下， 免疫防御系统产生的一 类对抗外源性病源体致病作用的防御性肽类活性物 质， 是动物免疫防御系统的一个重要组 成部 分［１９］。到 目前为止已有约 ５００ 多种抗菌肽被分离鉴定， 这些抗 菌 肽大 致分 为 ４ 大类 ： ｃｅｃｒｏｐｉｎ（ 杀 菌 肽 ） 类 、富 含 Ｐｒｏ 残基的 ｍａｇａｉｎｉｎ （ 蛙皮素） 、富含 Ｇｌｙ 残基的 ｍｅｌｉｔｔｉｎ （ 蜂毒素） 和富含 Ｃｙｓ 残基的 ｄｅｆｅｎｓｉｎ（ 防御素） 。虽然 这些 抗 菌肽 的分 子 量、结 构 千差 万 别 ， 但 几 乎 所 有 的 抗菌肽在本质上是阳离子型的， 大多具有两亲 α－ 螺 旋或两亲 β－ 折叠结构［２０］。
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式提高仔猪的免疫功能。大量的研究证实， Ｃｐｐｓ 通过 以下几种机制调节动物的免疫功能： ①钙离子是触发 淋巴细胞增殖反应的第一信号， 钙离子载体 Ａ２３１８７ 对淋巴细胞增殖反应具有丝裂原作用， 因为它能促进 钙离子的吸收。而 Ｓｅｒｐ－ Ｘ－ Ｓｅｒｐ 结构中 Ｓｅｒｐ 能和钙离 子形成复合物， 从而促进钙离子的吸收， 这是 Ｃｐｐｓ 调 节动物免疫功能的主要原因［１１］。②Ｃｐｐｓ 还通过调节淋 巴细胞因子的水平来调节动物免疫功能， 大量研究表 明， Ｃｐｐｓ 能通过促进 ＩＬ－ ５ 和 ＩＬ－ ６ 的分泌进而刺激 Ｂ 淋巴细胞增殖并分化成 ＩｇＡ 生成细胞［１２］。 １．３ 血管活性肠肽