实验四 食品中细菌菌落总数的测定
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中新口腔
•
7、为使菌落能在平板上均匀分布
，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基
并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检
样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用
时间不宜超过20min，以防止细菌有所死
亡或繁殖。
中新口腔
•
8、培养温度一般为37℃（水产品
的培养温度，由于其生活环境水温较低
，故多采用30℃）。培养时间一般为48h
1、 以无菌操作取检样25g（mL），放于 225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 的灭菌玻璃
瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，
经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。
•
固体和半固体检样在加入稀释液后，最好
置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理 1～2min，制成1:10的均匀稀释液。
在有几条不同来源的链，则每条链均
应按一个菌落计算，不要把链上生长
的每一个菌落分开计数。
中新口腔
• （三）菌落总数的计算
• 1、若只有一个稀释度平板上的菌落数在
适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的 平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数， 作为每g（mL）中菌落总数结果。
中新口腔
试样 稀释度
例次 10-2
长，则应按<1乘以最低稀释倍数计算。
中新口腔
试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
32
10-3，10-4
2.6x105
48
10-3，10-4
3.5x105
• 5、倾注用培养基应在46℃水浴内保温 ，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂 易于凝固而不能与菌液充分混匀。如无 水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。
中新口腔
• 6、倾注培养基的量规定不一，从12～ 20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过 厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时 ，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去， 以免与菌落混淆而影响计数观察。
• 1、菌落总数
•
是指食品检样经过处理，在一定条
件下培养后，所得1g或1mL检样中形成
的细菌菌落总数。以 CFU/g（mL）来表
示。
•
一定条件包括培养基成分、培养温
度和时间、pH、是否需要氧气等。
中新口腔
•
按国家标准方法规定，即在需氧情
况下， 36 ±1℃培养48±2 h，能在平板
计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。
一点，宜多采几个部位。固体样品必须
经过均质或研磨，液体样品须经过振摇
，以获得均匀稀释液。
中新口腔
• 3、稀释液
•
样品稀释液主要是灭菌生理盐水，
或磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），
后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的
保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱
油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。
中新口腔
• 4、每递增稀释一次即换用1支1ml灭 菌吸管。
所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求
的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件
不能满足其生理需求，故难以繁殖生长
。
中新口腔
•
菌落总数并不表示实际中的所有细菌
总数，也不能区分其中细菌的种类，只包
括一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中
温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数，所
以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
•
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•
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10-3，10-4
2.6x105
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10-2，10-3
9.0x104
5
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6
无法计数 568
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中新口腔
•
4、若所有稀释度平板菌落数均<30
，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍
数计算。
•
5、若所有稀释度平板均无菌落生
•
中新口腔
•
2、其中一个平板有较大片状菌落
生长时，则不宜采用，而应以无片状菌
落生长的平板作为该稀释度的菌落数；
若片状菌落不到平板的一半，而其余一
半中菌落分布又很均匀，则可以计算半
个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落
数。
中新口腔
•
3、当平板上有链状菌落生长时
，如呈链状生长的菌落之间无任何明
显界限，则应作为一个菌落计，如存
，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记 下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的 各平板平均菌落数。 • 到达规定培养时间，应立即计数。如 果不能立即计数，应将平板放置于0～4℃ ，但不要超过24h。
中新口腔
•
• 1、 平皿菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平板作为
菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用 两个平皿，大于300的可记为多不可计。
中新口腔
• 生活饮用水卫生标准（GB5749-2006 ）
• 菌落总数cfu/ml： ≤100 • 总大肠菌群cfu/100ml或MPN/100ml ：不得检出 • 耐热大肠菌群cfu/100ml或MPN/100ml ：不得检出 • 大肠埃希氏菌cfu/100ml或MPN/100ml ：不得检出
价。
中新口腔
• 2、细菌总数
•
指一定数量或面积的食品样品．经
过适当的处理后，在显微镜下对细菌进
行直接计数。其中包括各种活菌数和尚
未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直 接显微镜数。通常以1 g或1 mL样品中的 细菌总数来表示。
中新口腔
三 、 材料
• 1、 食品检样 2、 培养基 平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸盐 缓冲液 3、 其它 无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培养 箱等。
• 全脂奶粉、脱脂奶粉（GB5410-1999） ：
•
特级 一级
二
级
• 细菌菌落总数：≤20000 ≤50000
≤30000
• （CFU/ml）
• 大肠菌群
≤40
≤90
≤90
• （MPN/100g） • 肠道致病菌： 不得检出 不得检出 不得中新口腔
• 巴氏杀菌乳（GB5408.1-1999）
• 细菌菌落总数： ≤30000 CFU/mL • 大肠菌群： ≤90 MPN/100mL • 肠道致病菌： 不得检出
菌落总数主要作为判别食品被污
染程度的标志，也可以应用这一方法观
察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被
检样品进行卫生学评价时提供依据。
中新口腔
•
食品中细菌菌落总数越多，则食品
含有致病菌的可能性越大，食品质量越
差；菌落总数越小，则食品含有致病菌
的可能性越小。须配合大肠菌群和致病
菌的检验，才能对食品做出较全面的评
•
4、根据标准要求或对污染情况的
估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在
制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀
释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中
，每个稀释度做两个平皿。
•
同时分别取1ml稀释液（不含样
品）加入两个灭菌平皿内作空白对照。
•
中新口腔
•
5 、稀释液移入平皿后，将冷却至
46℃琼脂培养基注入平皿约15～20ml，
3.1x106
中新口腔
•
3、 若所有稀释度的平板菌落数均
>300，则取最高稀释度的平均菌落数乘
以稀释倍数计算。
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试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
？ 3、在食品卫生检验中，为什么要以细菌 菌落总数为指标？ • 4、为什么营养琼脂培养基在使用前要 保持在46±1℃的温度？
中新口腔
• 酱油（GB/T2717-2003）： • 细菌菌落总数： ≤30000 CFU/mL • 大肠菌群： ≤30MPN/100mL • 肠道致病菌： 不得检出
中新口腔
入报告两位有效数字。
•
2、菌落数≥ 100时，第三位数字按
四舍五入计算，取前面两位有效数字，为
了缩短数字后面的零数，也可以10的指数
表示。
中新口腔
•
3、若所有平板上为蔓延菌落而无法
计数，则报告菌落蔓延。
4、 若空白对照上有菌落生长，则此次检
测结果无效。
5、称重取样以CFU/g 为单位报告，体积
取样以CFU/mL 为单位报告。
10-3
1
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2 均 526
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菌
3 落 435
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数
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菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
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wk.baidu.com
6
无法计数 568
•
1、 将实验测出的样品数据以表格的
方式报告。
2 、对样品菌落总数作出是否符合卫生
要求的结论。
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报告方 式
样品
稀释液及 菌落数
选择稀 释度
10-2 10-3 10-4
原始
样品 数据
平均
名称
报告(CFU/g,ml)
计算公式 报告
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七、思考
• 1、 什么是细菌菌落总数（cfu）？ • 2、 影响杂菌总数准确性的因素有哪些
中新口腔
•
2、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释
液1 mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL灭
菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的试管内，
振摇试管或反复吹打混合均匀，制成
1:100的稀释液。
•
中新口腔
•
3 、另取1 mL灭菌吸管，按上项
操作顺序，制10倍递增稀释液，如此
每递增稀释一次即换用1支1 mL吸管
。
中新口腔
并转动平皿，混合均匀。
中新口腔
•
6、 待琼脂凝固后，翻转平板，置
36±1℃温箱内培养48±2h，水产品 30±1℃温箱内培养72±3h。
•
如样品中可能含有在琼脂培养基表面
弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面
覆盖一薄层琼脂培养基（约4毫升），凝固 后培养。
中新口腔
中新口腔
• （二） 菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察
中新口腔
• 例如：
稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）
菌落数
232，244
33，35
232+244+33+35
•
(2+0.1×2) ×10-2
•
=544/0.022=24727
• 四舍五入表示为: 2.5 × 104
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试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
食品微生物学检验 菌落总数的测定
(GB 4789.2—2010)
中新口腔
• 一、 目的
• 1、 学习并掌握食品中菌落总数测定 方法和原理。 2 、了解菌落总数测定在对被样品进行卫 生学评价中的意义 。
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二、原理
•
细菌数量的表示方法由于所采用
的计数方法不同而有两种：菌落总数和
细菌总数。
中新口腔
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注意事项
• 1、无菌操作
•
操作中必须有“无菌操作”的概念，所
用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、镊
子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包 装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌 室进行。
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• 2、采样的代表性
•
如系固体样品，取样时不应集中
312 10-4
2.6x103
3.1x106
中新口腔
• 2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜
计数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1 ) 式中： N ― 样品中菌落数； ∑C ― 平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数 之和； nl ― 第一个适宜稀释度平板数； n2 ― 第二个适宜稀释度平板数； d ― 稀释因子（第一稀释度）。
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10-2，10-3
9.0x104
5
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无法计数 568
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• 6、若所有稀释度均不在30～300之 间，有的>300，有的又<30，则应以最 接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数 计算。
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（四） 菌落计数报告方法
•
1、菌落数在1～100时，按四舍五
，有些方法只要求24h的培养即可计数。
培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培
养48h后，培养基失重不应超过15％。
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•
9、为了避免食品中的微小颗粒或
培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不
易分辨，可同时作一稀释液与琼脂培基
混合的平板，不经培养，而于4℃环境中
放置，以便计数时作对照观察。
•
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六、 结果
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
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菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
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5.2x104
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2.6x105
48
10-3，10-4
3.5x105
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无法计数 568
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四、 流程
• 1、检样
• 2、做几个适当倍数的稀释液
• 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加 入灭菌平皿内
• 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混 匀
• 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2） 小时
• 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数
量
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五、 步骤
• (一) 取样、稀释和培养
•
7、为使菌落能在平板上均匀分布
，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基
并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检
样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用
时间不宜超过20min，以防止细菌有所死
亡或繁殖。
中新口腔
•
8、培养温度一般为37℃（水产品
的培养温度，由于其生活环境水温较低
，故多采用30℃）。培养时间一般为48h
1、 以无菌操作取检样25g（mL），放于 225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 的灭菌玻璃
瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，
经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。
•
固体和半固体检样在加入稀释液后，最好
置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理 1～2min，制成1:10的均匀稀释液。
在有几条不同来源的链，则每条链均
应按一个菌落计算，不要把链上生长
的每一个菌落分开计数。
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• （三）菌落总数的计算
• 1、若只有一个稀释度平板上的菌落数在
适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的 平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数， 作为每g（mL）中菌落总数结果。
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试样 稀释度
例次 10-2
长，则应按<1乘以最低稀释倍数计算。
中新口腔
试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
32
10-3，10-4
2.6x105
48
10-3，10-4
3.5x105
• 5、倾注用培养基应在46℃水浴内保温 ，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂 易于凝固而不能与菌液充分混匀。如无 水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。
中新口腔
• 6、倾注培养基的量规定不一，从12～ 20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过 厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时 ，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去， 以免与菌落混淆而影响计数观察。
• 1、菌落总数
•
是指食品检样经过处理，在一定条
件下培养后，所得1g或1mL检样中形成
的细菌菌落总数。以 CFU/g（mL）来表
示。
•
一定条件包括培养基成分、培养温
度和时间、pH、是否需要氧气等。
中新口腔
•
按国家标准方法规定，即在需氧情
况下， 36 ±1℃培养48±2 h，能在平板
计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。
一点，宜多采几个部位。固体样品必须
经过均质或研磨，液体样品须经过振摇
，以获得均匀稀释液。
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• 3、稀释液
•
样品稀释液主要是灭菌生理盐水，
或磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），
后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的
保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱
油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。
中新口腔
• 4、每递增稀释一次即换用1支1ml灭 菌吸管。
所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求
的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件
不能满足其生理需求，故难以繁殖生长
。
中新口腔
•
菌落总数并不表示实际中的所有细菌
总数，也不能区分其中细菌的种类，只包
括一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中
温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数，所
以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
•
中新口腔
•
32
10-3，10-4
2.6x105
48
10-3，10-4
3.5x105
37
10-2，10-3
9.0x104
5
26
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10-2
6
无法计数 568
312 10-4
2.6x103
3.1x106
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•
4、若所有稀释度平板菌落数均<30
，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍
数计算。
•
5、若所有稀释度平板均无菌落生
•
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•
2、其中一个平板有较大片状菌落
生长时，则不宜采用，而应以无片状菌
落生长的平板作为该稀释度的菌落数；
若片状菌落不到平板的一半，而其余一
半中菌落分布又很均匀，则可以计算半
个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落
数。
中新口腔
•
3、当平板上有链状菌落生长时
，如呈链状生长的菌落之间无任何明
显界限，则应作为一个菌落计，如存
，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记 下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的 各平板平均菌落数。 • 到达规定培养时间，应立即计数。如 果不能立即计数，应将平板放置于0～4℃ ，但不要超过24h。
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•
• 1、 平皿菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平板作为
菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用 两个平皿，大于300的可记为多不可计。
中新口腔
• 生活饮用水卫生标准（GB5749-2006 ）
• 菌落总数cfu/ml： ≤100 • 总大肠菌群cfu/100ml或MPN/100ml ：不得检出 • 耐热大肠菌群cfu/100ml或MPN/100ml ：不得检出 • 大肠埃希氏菌cfu/100ml或MPN/100ml ：不得检出
价。
中新口腔
• 2、细菌总数
•
指一定数量或面积的食品样品．经
过适当的处理后，在显微镜下对细菌进
行直接计数。其中包括各种活菌数和尚
未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直 接显微镜数。通常以1 g或1 mL样品中的 细菌总数来表示。
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三 、 材料
• 1、 食品检样 2、 培养基 平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸盐 缓冲液 3、 其它 无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培养 箱等。
• 全脂奶粉、脱脂奶粉（GB5410-1999） ：
•
特级 一级
二
级
• 细菌菌落总数：≤20000 ≤50000
≤30000
• （CFU/ml）
• 大肠菌群
≤40
≤90
≤90
• （MPN/100g） • 肠道致病菌： 不得检出 不得检出 不得中新口腔
• 巴氏杀菌乳（GB5408.1-1999）
• 细菌菌落总数： ≤30000 CFU/mL • 大肠菌群： ≤90 MPN/100mL • 肠道致病菌： 不得检出
菌落总数主要作为判别食品被污
染程度的标志，也可以应用这一方法观
察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被
检样品进行卫生学评价时提供依据。
中新口腔
•
食品中细菌菌落总数越多，则食品
含有致病菌的可能性越大，食品质量越
差；菌落总数越小，则食品含有致病菌
的可能性越小。须配合大肠菌群和致病
菌的检验，才能对食品做出较全面的评
•
4、根据标准要求或对污染情况的
估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在
制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀
释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中
，每个稀释度做两个平皿。
•
同时分别取1ml稀释液（不含样
品）加入两个灭菌平皿内作空白对照。
•
中新口腔
•
5 、稀释液移入平皿后，将冷却至
46℃琼脂培养基注入平皿约15～20ml，
3.1x106
中新口腔
•
3、 若所有稀释度的平板菌落数均
>300，则取最高稀释度的平均菌落数乘
以稀释倍数计算。
中新口腔
试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
？ 3、在食品卫生检验中，为什么要以细菌 菌落总数为指标？ • 4、为什么营养琼脂培养基在使用前要 保持在46±1℃的温度？
中新口腔
• 酱油（GB/T2717-2003）： • 细菌菌落总数： ≤30000 CFU/mL • 大肠菌群： ≤30MPN/100mL • 肠道致病菌： 不得检出
中新口腔
入报告两位有效数字。
•
2、菌落数≥ 100时，第三位数字按
四舍五入计算，取前面两位有效数字，为
了缩短数字后面的零数，也可以10的指数
表示。
中新口腔
•
3、若所有平板上为蔓延菌落而无法
计数，则报告菌落蔓延。
4、 若空白对照上有菌落生长，则此次检
测结果无效。
5、称重取样以CFU/g 为单位报告，体积
取样以CFU/mL 为单位报告。
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
32
10-3，10-4
2.6x105
48
10-3，10-4
3.5x105
37
10-2，10-3
9.0x104
5
26
12
5
10-2
wk.baidu.com
6
无法计数 568
•
1、 将实验测出的样品数据以表格的
方式报告。
2 、对样品菌落总数作出是否符合卫生
要求的结论。
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报告方 式
样品
稀释液及 菌落数
选择稀 释度
10-2 10-3 10-4
原始
样品 数据
平均
名称
报告(CFU/g,ml)
计算公式 报告
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七、思考
• 1、 什么是细菌菌落总数（cfu）？ • 2、 影响杂菌总数准确性的因素有哪些
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•
2、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释
液1 mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL灭
菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的试管内，
振摇试管或反复吹打混合均匀，制成
1:100的稀释液。
•
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•
3 、另取1 mL灭菌吸管，按上项
操作顺序，制10倍递增稀释液，如此
每递增稀释一次即换用1支1 mL吸管
。
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并转动平皿，混合均匀。
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•
6、 待琼脂凝固后，翻转平板，置
36±1℃温箱内培养48±2h，水产品 30±1℃温箱内培养72±3h。
•
如样品中可能含有在琼脂培养基表面
弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面
覆盖一薄层琼脂培养基（约4毫升），凝固 后培养。
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• （二） 菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察
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• 例如：
稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）
菌落数
232，244
33，35
232+244+33+35
•
(2+0.1×2) ×10-2
•
=544/0.022=24727
• 四舍五入表示为: 2.5 × 104
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试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
食品微生物学检验 菌落总数的测定
(GB 4789.2—2010)
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• 一、 目的
• 1、 学习并掌握食品中菌落总数测定 方法和原理。 2 、了解菌落总数测定在对被样品进行卫 生学评价中的意义 。
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二、原理
•
细菌数量的表示方法由于所采用
的计数方法不同而有两种：菌落总数和
细菌总数。
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注意事项
• 1、无菌操作
•
操作中必须有“无菌操作”的概念，所
用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、镊
子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包 装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌 室进行。
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• 2、采样的代表性
•
如系固体样品，取样时不应集中
312 10-4
2.6x103
3.1x106
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• 2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜
计数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1 ) 式中： N ― 样品中菌落数； ∑C ― 平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数 之和； nl ― 第一个适宜稀释度平板数； n2 ― 第二个适宜稀释度平板数； d ― 稀释因子（第一稀释度）。
37
10-2，10-3
9.0x104
5
26
12
5
10-2
6
无法计数 568
312 10-4
2.6x103
3.1x106
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• 6、若所有稀释度均不在30～300之 间，有的>300，有的又<30，则应以最 接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数 计算。
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（四） 菌落计数报告方法
•
1、菌落数在1～100时，按四舍五
，有些方法只要求24h的培养即可计数。
培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培
养48h后，培养基失重不应超过15％。
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•
9、为了避免食品中的微小颗粒或
培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不
易分辨，可同时作一稀释液与琼脂培基
混合的平板，不经培养，而于4℃环境中
放置，以便计数时作对照观察。
•
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六、 结果
2 均 526
205
菌
3 落 435
210
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
18
10-3
5.2x104
32
10-3，10-4
2.6x105
48
10-3，10-4
3.5x105
37
10-2，10-3
9.0x104
5
26
12
5
10-2
6
无法计数 568
312 10-4
2.6x103
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四、 流程
• 1、检样
• 2、做几个适当倍数的稀释液
• 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加 入灭菌平皿内
• 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混 匀
• 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2） 小时
• 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数
量
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五、 步骤
• (一) 取样、稀释和培养