赤霉素检测方法

赤霉素检测方法

1、原理

试样经甲醇提取、浓缩并净化后，用高效液相色谱法检测，外标法定量。2、试剂

以下试剂，除特殊说明外，均为分析纯。

1）甲醇：色谱纯。

2）冰乙酸。

3）赤霉素标准品。

4）0.6%冰乙酸溶液：准确称取0.6mL冰乙酸，加水并定容至100 mL。

5）0.1mg/mL赤霉素标准液：准确称取0.010g赤霉素标准品于100 mL容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度。

3、仪器

高效液相色谱仪：配紫外检测器。

分析天平：感量0.0001g一台。

超声波清洗器。

容量瓶：25mL、100mL。

微孔滤膜：0.45μm。

4、测定

4.1 样品制备

准确称取样品0.10g，置于25mL容量瓶中，加约20mL甲醇，在超声水浴中超声20min，用甲醇定容至刻度，放置4 h后经0.45μm滤膜过滤，备用。

4.2 标品处理

将配制的标准液经0.45μm滤膜过滤，过滤后所得滤液作为对照溶液。

4.3 测定

4.3.1色谱条件

色谱柱：C18色谱柱，150 mm×4.6 mm，5 μm，或性能相当者。

流动相：甲醇：0.6%冰乙酸溶液= 35：65。

紫外检测器：波长为211 nm。

柱温：30℃。

流速：1.0 mL/min。

进样体积：20 μL。

4.3.2 色谱分析

分别注入20 μL赤霉素标准液及试样溶液，按上述列出的条件进行液相色谱分析测定，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根据标准品的保留时间定性，外标法定量。

4.4结果计算

样品中赤霉素含量（X）以毫克每克（mg/g）表示，按下式计算：

式中：

X：样品中赤霉素含量，单位为毫克每克（mg/g）。

A2：样品峰面积。

c: 赤霉素标准液浓度数值，单位为毫克每毫升（mg/mL）。

V：试样体积，单位为毫升（mL）。

A1：标品峰面积。

M：样品质量，单位为克（g）。

5、方法定量检出限

本方法定量检出限为：2mg/g。