藻类生长抑制试验课件
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化学农药环境安全评价试验准则 第14部分：藻类生长抑制试验-最新国标
化学农药环境安全评价试验准则第14部分：藻类生长抑制试验1 范围本文件规定了化学农药藻类生长抑制试验的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、质量控制以及试验报告等的基本要求。
本文件适用于为化学农药登记而进行的藻类生长抑制试验。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
NY/T 3273 难处理农药水生生物毒性试验指南NY/T 4195.6 农药登记环境影响试验生物试材培养第6部分：近头状尖胞藻3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1半效应浓度median effective concentration在生长抑制试验中，与对照相比，引起受试藻生物量增长或者平均生长速率下降50％时的被试物浓度，用EC50表示。
在本文件中，通过藻类生物量增长的抑制率计算而得到的EC50用E y C50表示，通过藻类平均生长速率的抑制率计算而得的EC50用E r C50表示。
注：单位为毫克每升（mg/L）。
3.2平均生长速率average growth rate （average specific growth rate）特定暴露时段内的平均生长速率，即暴露结束与暴露开始时受试藻生物量的自然对数值之差除以时长（如3 d），用μ表示。
3.3生物量增长量yield特定暴露时段内的生物量增长量，即暴露结束时的生物量减去暴露开始时的生物量，用Y表示。
4 原理用被试物及藻类培养基配制一系列不同浓度的试验药液，将试验药液与藻液混合后，连续染毒72 h。
试验期间观察受试藻的生长抑制情况，求出半效应浓度72 h- EC50（E y C50、E r C50）及其95％置信区间。
5 试验条件试验期间应满足以下条件：a) 环境温度21 ℃～24 ℃，但单次试验应控制在±1 ℃；b) 连续均匀光照，光源为400 nm～700 nm波长的冷白灯或日光灯，光照强度4440 lux～8880 lux，不同位点光照强度差异应控制在15%范围内；c) 空白对照pH变化范围不超过1.5；d) 以一定转速持续振荡或搅拌藻液，例如每分钟（100±20）转。
藻类生长抑制实验PPT学习教案
第7页/共12页
数据处理
• 两边取对数，则 lnNt=lnN0+t/G × ln2 对于某一特定系统，G为定值，设ln2/G=μ，则
：
lnNt=lnN0+ μ t μ称为藻类的平均生长率。
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实验数据处理分析
数据处理前工作(1) 由组长负责对每小组的原始数据， (2) 进行汇总并传给同组内的同学 (3) 计算藻类平均生长率
0.030 0.100 0.025
FeCl3(1%) 土壤浸出液
水
含量(g/L) 0.080 0.015 0.500 1000
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实验步骤
1. 藻类培养 光照培养箱中培养。培养温度为24 ±2 ℃；光照强度4000 ±400lx；培 养容器用棉塞封闭。
2. 受试液的配制(污染物质) 设置至少5个构成对数间距系列的浓度，浓度比不超过2.2。本实验中 设置7个浓度。
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数据处理
对数生长期藻细胞浓度生长规 律：
N=N0×2n 其中N为细胞最终数目； N0为细胞初始数目； n为指数生长期细胞繁殖代数。
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数据处理
• 细胞每分裂一次所需要的时间称为代时， 以G表示，若培养时间为t，则：n=t/G。
• 上式可表示为： Nt=N0×2（t/G） 其中： Nt为培养时间t后的细胞浓度； N0为初始细胞浓度； t为培养时间。
培养基的配制：
配制营养基ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ可将营养盐类按所需浓度直接加
入无菌蒸馏水或去离子水中。应按顺序逐个加入， 待一种盐类完全溶解后再加另外一种。亦可先配 制各种营养盐类溶液，经灭菌后避光冷藏。
“水生4号”培养基 营养盐
含量/(g/L)
数据处理
• 两边取对数，则 lnNt=lnN0+t/G × ln2 对于某一特定系统，G为定值，设ln2/G=μ，则
：
lnNt=lnN0+ μ t μ称为藻类的平均生长率。
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实验数据处理分析
数据处理前工作(1) 由组长负责对每小组的原始数据， (2) 进行汇总并传给同组内的同学 (3) 计算藻类平均生长率
0.030 0.100 0.025
FeCl3(1%) 土壤浸出液
水
含量(g/L) 0.080 0.015 0.500 1000
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实验步骤
1. 藻类培养 光照培养箱中培养。培养温度为24 ±2 ℃；光照强度4000 ±400lx；培 养容器用棉塞封闭。
2. 受试液的配制(污染物质) 设置至少5个构成对数间距系列的浓度，浓度比不超过2.2。本实验中 设置7个浓度。
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数据处理
对数生长期藻细胞浓度生长规 律：
N=N0×2n 其中N为细胞最终数目； N0为细胞初始数目； n为指数生长期细胞繁殖代数。
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数据处理
• 细胞每分裂一次所需要的时间称为代时， 以G表示，若培养时间为t，则：n=t/G。
• 上式可表示为： Nt=N0×2（t/G） 其中： Nt为培养时间t后的细胞浓度； N0为初始细胞浓度； t为培养时间。
培养基的配制：
配制营养基ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ可将营养盐类按所需浓度直接加
入无菌蒸馏水或去离子水中。应按顺序逐个加入， 待一种盐类完全溶解后再加另外一种。亦可先配 制各种营养盐类溶液，经灭菌后避光冷藏。
“水生4号”培养基 营养盐
含量/(g/L)
藻类生长抑制实验
2. 藻试液的配制
从储备液中取出一定的藻液，接种到新鲜的无菌培养液中，
接种浓度约为104个/mL。在与试验要求相同的条件下进行预
培养，要求在2–3天内藻类能达到对数生长，然后再次转移到 新鲜的培养液中。如此反复转接培养2–3次，藻类生长健壮并
开始处于对数生长期时即可用来制备实验中需要的藻类试验
液。
营养盐 (NH4)2SO4 Ca(H2PO4)2∙H2O NaHCO3 KCl
MgSO4∙7H2O
0.080
*取少量菜园土，加2–3倍自来水，煮沸10余分钟，冷却后用滤纸
过滤即可使用。
4. 实验器材 电子天平(2台)、立式压力蒸汽灭菌器(2台)、无菌操作台(4 台)、显微镜(4台)、生化培养箱(2台)、pH计(4套)、气浴恒温摇 床(4台)、可见分光光度计(4台)、数字照度计(2台)、血球计(4 套)、血小球记数板(200块)、4到7只30W的普通白色荧光灯、 ф60漏斗(4个)、锥形瓶、温度计、滤纸和纱布等若干。 5. 实验药品 硫酸铵、磷酸二氢钙、碳酸氢钠、氯化钾、硫酸镁、氯 化铁均为分析纯，土壤浸出液。
表 2 实验记录表格
时间 24 h 48 h 藻类平均 生长率 对照 浓度1 浓度2 浓度3 浓度4 浓度5
根据直线内插法或概率单位图解法估算24h和48h藻类生长
பைடு நூலகம்
受到抑制的EC50。
注意事项
1.在正式试验前必须进行必要的预试验。 2. 实验藻种的选择和预培养应注意：藻细胞大小均匀，颜色 鲜绿，处于对数生长期。试验开始3天内，对照组藻细胞浓 度至少应增加16倍。
藻类生长抑制实验
主要内容
一、实验目的与内容 二、实验原理 三、实验材料与方法 四、实验步骤 五、实验结果
藻类生长抑制试验课件
藻类生长抑制试验可以用于检测水体、土壤等环境中的有毒物质，评估其对生态 系统的危害。
生态修复
通过藻类生长抑制试验，可以了解不同环境因素对藻类生长的影响，为生态修复 提供科学依据。
在水产养殖领域的应用
养殖水体质量监测
藻类生长抑制试验可以用于监测养殖水体的质量，评估水质 是否符合养殖要求。
饲料添加剂筛选
试验误差控制
保证试验的一致性
在藻类生长抑制试验中， 应保证试验条件的一致性， 包括温度、光照、pH值等， 以减小误差。
重复试验
为确保试验结果的可靠性， 应进行重复试验，并对结 果进行统计分析，以减小 误差对结果的影响。
标准化操作
在试验过程中，应遵循标 准化的操作流程，确保每 一步操作的准确性，以减 小误差。
为环境风险评估和化学品管理提供科 学依据。
试验原理
基于藻类生长速率测定
通过比较不同浓度的化学物质对藻类生长速率的影响，评估其抑 制作用。
荧光测定法
利用荧光光度计测定藻细胞内的荧光物质，从而快速、准确地测定 藻类生物量。
显微计数法
通过显微镜观察和计数藻细胞，计算藻类密度和生长率。
试验步骤
配置化学物质溶液
培养基
抑制剂
选择具有代表性的藻种， 如蓝藻、绿藻、硅藻等。
选择适宜藻类生长的培 养基，如BG-11、f/2等。
选择具有代表性的化学 物质或天然物质作为抑
制剂。
其他试剂
如无水乙醇、丙酮等。
试验设备
01
02
03
04
培养箱
用于培养藻类，控制温度和光 照。
分光光度计
用于测定藻细胞密度和光合作 用速率。
显微镜
感谢您的观看
数据整理
生态修复
通过藻类生长抑制试验，可以了解不同环境因素对藻类生长的影响，为生态修复 提供科学依据。
在水产养殖领域的应用
养殖水体质量监测
藻类生长抑制试验可以用于监测养殖水体的质量，评估水质 是否符合养殖要求。
饲料添加剂筛选
试验误差控制
保证试验的一致性
在藻类生长抑制试验中， 应保证试验条件的一致性， 包括温度、光照、pH值等， 以减小误差。
重复试验
为确保试验结果的可靠性， 应进行重复试验，并对结 果进行统计分析，以减小 误差对结果的影响。
标准化操作
在试验过程中，应遵循标 准化的操作流程，确保每 一步操作的准确性，以减 小误差。
为环境风险评估和化学品管理提供科 学依据。
试验原理
基于藻类生长速率测定
通过比较不同浓度的化学物质对藻类生长速率的影响，评估其抑 制作用。
荧光测定法
利用荧光光度计测定藻细胞内的荧光物质，从而快速、准确地测定 藻类生物量。
显微计数法
通过显微镜观察和计数藻细胞，计算藻类密度和生长率。
试验步骤
配置化学物质溶液
培养基
抑制剂
选择具有代表性的藻种， 如蓝藻、绿藻、硅藻等。
选择适宜藻类生长的培 养基，如BG-11、f/2等。
选择具有代表性的化学 物质或天然物质作为抑
制剂。
其他试剂
如无水乙醇、丙酮等。
试验设备
01
02
03
04
培养箱
用于培养藻类，控制温度和光 照。
分光光度计
用于测定藻细胞密度和光合作 用速率。
显微镜
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七年级生物水中的藻类植物(PPT)4-4
靠：他办事很～。 【把握】①动握；拿：司机～着方向盘。②动抓住（抽象的东西）：～时机｜透过现象，～本质。③名成功的可靠性（多用于“有”和
“没”后）：球赛获胜是有～的。 【把戏】名①杂技：耍～｜看～。②花招；蒙蔽人的手法：鬼～｜收起你这套～，我不会上当的。 【把兄弟】名指结拜的 弟兄。年长的称把兄，年轻；酒店住宿预订https:// ； 的称把弟。也叫盟兄弟。 【把斋】∥动封斋。 【把盏】〈书〉动端着酒杯（多用于斟 酒敬客）：轮流～，向客人敬酒。 【把捉】动把握；抓住（多用于抽象事物）：～事物的本质｜～文件的精神实质。 【把子】?①名把东西扎在一起的捆子： 秫秸～。②量a）人一群、一帮叫一把子（多含贬义）：一～土匪。）一手抓起的数量，多用于长条形东西：一～韭菜。）用于某些抽象的事物：加～劲儿。 【把子】?名戏曲中所使用的武器的总称，也指开打的动作：练～｜单刀～。 【把子】?名见页〖拜把子〗。 【?】〈方〉①名屎；粪便：屙～。②动拉屎： 想尿就尿，想～就～。 【??】?ɑ〈口〉名屎；粪便（多用于小儿语）。 【钯】（鈀）名金属元素，符号（aa）。银白色，化学性质不活泼，能大量吸附氢气。 用作催化剂，也用来制特种合金等。 【靶】名靶子：打～｜环～｜胸～｜中～。 【靶标】名靶子：瞄准～。 【靶场】名打靶的场地。 【靶船】名海上演习 时当靶子用的船。 【靶点】名医学上进行某些放射治疗时，放射线从不同方位照射，汇集到病变部位，这个病变部位叫做靶点。 【靶机】ī名当空中靶子用 的无人驾驶飞机。 【靶器官】名指某一疾病或某一物所影响或针对的器官。如心脏、大脑、肾脏、血管是高血压的靶器官，甲状腺是碘的靶器官。 【靶台】
实验九 蓝藻门、裸藻门、黄藻门、硅藻门
3．念珠藻属 Nostoc 属于颤藻目，念珠藻科。该属藻类常生于水中、潮湿土壤或石面上，是一种不同大小的 胶质球或木耳状的胶质片。供食用的地木耳mune和发菜N.flagelliforme都属于该 属。地木耳又叫地皮菜或葛仙米，生于山溪边潮湿的土壤上，夏季雨后较易采到，为不 规则的胶质片或胶团。发菜则为名贵干菜，群体外观为头发状的胶质丝，在我国主要分 布于内蒙、宁夏、青海、甘肃等省。
藻类活动抑制试验
任务5.2 在网页中插入图像
5.2.1 网页中常用的图像格式 网页中使用的图像通常有三种，即GIF、 JPEG和PNG。
• GIF（图形交换格式）：GIF文件最多使用256种颜色，适合显示色调不连 续或具有大面积单一颜色的图像，如导航条、按钮、图标、徽标或其他具有 统一色彩和色调的图像。GIF文件的扩展名为.gif。 • JPEG（联合图像专家组）：JPEG文件格式是用于摄影或连续色调图像的较 好格式，包含数百万种颜色。可以通过压缩JPEG文件在图像品质和文件大小 之间达到较好的平衡。JPEG文件的扩展名为.jpg或.jpeg。 • PNG（可移植网络图形）：PNG文件可保留所有原始层、矢量、颜色和效
用CSS调整图像的显示尺寸也需要设置图像对象的width和height属 性，但是，在CSS规则中不仅可以使用px为单位，还可以使用%、cm、 in等单位。用CSS调整图像显示尺寸，参考代码如下。
.image1 { height: 200px; width: 50%;
}
/*图像高200px*/ /*图像宽占窗口的50%*/
}
/*上边距为50px*/ /*右边距为50px*/ /*左边距为100px*/
任务5.2 在网页中插入图像
3．用CSS设置图像边框
使用CSS可以为图像的四边分别设置边框
的样式、粗细和颜色。 .image3{
border-top-width: medium;
/*上边框粗细为medium（中）*/
border-right-width: thick; /*右边框粗细为thick（粗）*/
border-bottom-width: 4px;
任务5.2 在网页中插入图像
5.2.2 在网页中添加图像元素 在HTML中添加图像元素应用的是<img>标 签，需要预先准备好图像文件，然后将光标 定位于网页文档需要插入图像的位置，按以 下方法之一插入图像。 •选择“插入”→“Image”菜单命令。 • 单 击 “ 插 入 ” 面 板 “ HTML” 选 项 卡 中 的 【 Image】按钮。 •使用<Ctrl+Alt+I>组合键。 •在“文件”或“资源”面板中选择所需图 像文件，直接拖动图像文件到文档窗口中。
水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验
3mg/L
3µg/L
CoCl2·6H2O
1.5mg/L
1.5µg/L
CuCl2·2H2O
0.01mg/L
0.01µg/L
贮备液 4：NaHCO3
Na2MoO4·2H2O NaHCO3
7mg/L 50g/L
生长抑制试验指南（Water quality–Guidance for algal growth inhibition tests with pooly soluble
materials ,volatile compounds ,metals and waste water）
BS EN ISO 8692:2004
3.2 比生长率 specific growth rate
指单位时间内细胞浓度的增长比率，以 μ 表示。计算公式为： μ = 1 ⋅ dx 。 x dt
式中： μ ——比生长率，d-1；
x ——细胞浓度，细胞数/ml；
t——时间，用 d 表示。 3.3
生长培养基 growth medium 混合水（5.2）和营养物质组成的培养基，绿藻细胞在其中培养生长，主要用于前期培 养和空白对照。
环境保护部
发布目次Βιβλιοθήκη 前 言..........................................................................................................................................................II 1 适用范围.................................................................................................................................................. 1 2 规范性引用文件...................................................................................................................................... 1 3 术语和定义.............................................................................................................................................. 1 4 方法原理.................................................................................................................................................. 2 5 试剂和材料.............................................................................................................................................. 2 6 仪器和设备.............................................................................................................................................. 3 7 分析步骤.................................................................................................................................................. 3 8 质量保证和质量控制 .............................................................................................................................. 5 9 结果计算与表示...................................................................................................................................... 5 10 精密度.................................................................................................................................................... 7 11 试验报告 ................................................................................................................................................ 7 附录 A（资料性附录）本标准章条编号与 BS EN ISO 8692:2004 章条编号对照.................................. 9 附录 B（资料性附录）本标准与 BS EN ISO 8692:2004 的技术性差异及其原因 ................................ 10 附录 C（规范性附录）废水中绿藻生长抑制试验的快速筛选方法........................................................11
《实验藻类鉴定一》ppt课件
实验步骤安排：
1. 集中讲解〔25分钟〕
2. 校园采集〔25分钟〕
3. 对比察看、绘图 〔160分钟)
4. 完成作业 (绘制好草图,回去 完成)
需求抓紧时间、多做片子、多 看、留意适当记录和绘图。
作业
▪ 1、对校园池塘水样藻类与滇池水样藻类种类进 展简单鉴定并比较分析察看结果。描画所察看 到的藻类简图，留意不同藻类生存情况〔采自 何处、环境特点〕
浮游藻类察看与鉴定根本方法
1. 普通均需运用显微镜进展显微察看； 2. 首先藻类由细胞构成的，藻类细胞普通都具有
一定色素质或色素体的并具有细胞壁的〔除裸 藻〕有生命的植物体〔确定杂质与生物，动物 与植物〕。 3. 其次经过抓住藻类的分门特征中有关藻体外形 与细胞构造、细胞色素等特点来判别属于何门 藻类； 4. 最后经过分属分种特征有关藻体外形与细胞色 素、内含物、构造等特点来鉴定属种。
实验二 淡水藻类植物察看 及其形状、生境特点
实验目的
1、学习藻类的根本采集与鉴定方法。 2、经过代表水样的制片察看，认识淡水浮
游藻类常见种类的形状、生存特点。 3、经过代表植物察看，认识丝状、叶状体
藻类植物的形状、生境和生存特点。
实验资料与实验内容
1. 察看颤藻(Oscillatoria) 2. 察看念珠藻属〔Nostoc):发菜、地木耳 3. 了解鱼腥藻属〔Anabaena)：与蕨类共生 4. 察看本部校园池塘水样藻类 5. 察看滇池水样藻类
蓝藻察看与操作
2.念珠藻属：发菜、地木耳察看 取芝麻大小的胶质丝，做水封片，用镊子
或解剖针将胶质丝适当破碎，盖上盖片， 用手指轻压盖片，使资料均匀散开，即可 镜检。 察看外形特点：胶群体内藻丝数量与外形， 能否分枝？组成藻丝的细胞类型：异形胞、 营养细胞、厚壁孢子。
《实验二藻类植物》PPT课件
低倍镜下观察其藻体形态，注意是否有横隔？什么情况下
会产生横隔？注意观察其基部用于固着的无色分枝的假根。然
后再转至高倍镜下，观察细胞的结构，包括多个细胞核和载色
体。移动载玻片仔细在分枝顶端检查有否膨大的孢子囊。如有
注意观察其形状、横隔产生的部位、有否复式游动孢子。同时
仔细观察无隔藻的有无有性生殖器官，如有观察精子囊和卵囊
的形状
精选ppt
2
实验二 黄藻门、红藻门、褐藻门
精选ppt
3
实验二 黄藻门、红藻门、褐藻门
(二) 红藻门Rhodophyta
植物体多为多细胞体，形态多样。光合色素除叶绿素a和d，胡萝卜素、叶 黄素外，还含有藻红素和藻蓝素，因而藻体紫红色较多，贮藏产物为红藻淀 粉。红藻生活史中不产生游动细胞，有性生殖为卵式生殖。多数为海产，淡 水种类较少。
实验二 黄藻门、红藻门、褐藻门
1、观察无隔藻形态 2、观察紫菜形态，示精子囊、果孢子囊、丝状体 3、观察多管藻形态，示精子囊、囊果 4、观察水云形态，示单室孢子囊、多室孢子囊 5、观察海带(昆布)形态，示孢子囊、配子体 6、观察马尾藻（石衣藻）形态，示精子囊、卵囊 7、常见褐藻门、红藻门植物标本
作业：绘海带生活史简图
(2) 观察水云的单室孢子囊、多室孢子囊和多室配子囊。水云为同形世代交 替。孢子体既有单室孢子囊又有多室孢子囊，而配子体只有多室配子囊。
精选ppt
9
实验二 黄藻门、红藻门、褐藻门
精选ppt
10
实验二 黄藻门、红藻门、褐藻门
2．海带Laminaria japonica Aresch．
植物体有组织分化，典型的异型世代交替。为冷温性海藻，原产前苏联 远东地区、日本及朝鲜北部沿海。目前我国由北至南沿海均可人工养殖。 (1) 孢子体的外形观察：取海带腊叶标本观察，区分固着器、带片、带柄， 注意其形状和大小。 (2) 藻体的解剖结构观察：
实验十二藻类植物和真菌35页PPT
B
海带(B)
2、菌类植物观察
（1）粘菌门(Myxomycota)发网菌属
（Stemonitis）
本属为常见的粘菌，腐生，营养期为变 形虫状，多生于阴湿的朽木烂叶上，生殖时 爬到光亮干燥的地方，形成孢子囊。实验时 可以取其永久制片观察其孢子囊和变形体结 构。
发网菌
（2）真菌门（Eumycota）
（5）红藻门（Rhodophyta）： 紫菜属
（Porphyra）
紫菜属为海产红藻，从我国海南岛东北 部直至最北方的海滨均有分布，多为重要经 济藻类。实验时可取其市售干品少量，（提 示：最好选取颜色较深者， 以便观察其生 殖器官） 于烧杯中加水浸泡一会儿，待其 完全展开后观察。实验时先观察藻体的外形， 然后做临时装片观察营养细胞的结构及果孢 子囊和果孢子等。
轮藻
（4）硅藻门（Bacillariophyta）（示范）
本属硅藻分布极广，为单细胞浮游硅 藻，在淡水中普遍存在，一般水中均能采 集到。实验时用吸管吸取含舟形硅藻的标 本液做临时装片或用硅藻永久制片观察， 识别常见的硅藻种类的形态，如小环藻属
（Cyclotella）、羽纹硅藻属 （Pinnularia）等。
葛仙米)。肉眼所见到的木耳状的胶质片状体或胶团 是它的群体。标本采回后可晾干保存，实验前2小时 将其用清水浸泡，然后装镜观察。实验时， 用小镊 子从 地木耳上撕取一小块，放在载玻片中央的一滴 清水中，盖上盖玻片，并施以轻压，使其成一均匀的 薄层，然后置显微镜下观察：先用低倍镜观察其藻丝 形态，再用高倍镜仔细观察其细胞结构。
团藻
C．水绵属（Spirogyra）
本属为最常见的淡水丝状绿藻，大量生长在稻田、 池塘和水沟中，常成团生长在水底或漂浮在水面上， 为碧绿色的丝状物，手摸时有粘滑感。实验时用镊子 取少量水绵于载玻片中央，加一滴清水，用解剖针将 丝状体拨散，盖上盖玻片，置于显微镜下观察即可。 取水绵的有性生殖制片或观察水绵的有性生殖情况， 水绵有性生殖为接合生殖，多为梯形接合，给出细胞 质的配子为雄性的，接受细胞质的配子为雌性的，形 成厚壁合子后萌发成新个体。此外还有侧面结合。
实验七藻类观察及识别ppt课件
态。区别营养细胞与果孢、果孢子细胞特点：
a.营养细胞：形状不规则，细胞分布均匀，一层，各细胞间的胶质较厚。
b.果孢与果胞子：叶状体边缘浅色区域；细胞排列整齐，果胞细胞较大， 果孢子表面观常常是4个细胞较紧密的排在一起，调节细螺旋可见它们 不)
紫菜生活史图解
甘紫菜 Porphyra tenera Kjellm
作业
1. 对各种淡水水样中的藻类进行简单鉴定， 比较分析观察结果并将结果记录于实验记 录本。
2. 拍摄颤藻丝状体一部分并标注，示营养细 胞、死细胞、隔离盘和藻殖段（实验指导 P76 ）。
3. 拍摄水绵结构、海带切片结构并标注。
蓝藻观察与操作
2.念珠藻属：发菜观察
– 取芝麻大小的胶质丝，做水封片，用镊子或解 剖针将胶质丝适当破碎，盖上盖片，用手指轻 压盖片，使材料均匀散开，即可镜检。
– 观察外形特点：胶群体内藻丝数量与形状，是 否分枝？组成藻丝的细胞类型：异形胞、营养 细胞、厚壁孢子。
蓝藻观察与操作
3.鱼腥藻属制片观察（考察）：
淡水水样常见藻类
水绵
空球藻
双星藻
鼓藻
盘星藻
实球藻
栅藻
角星鼓藻
淡水水样常见藻类
舟形硅藻 角星鼓藻
微芒藻
盘星藻 星芒藻
盘星藻 栅藻
小环藻
针杆藻
绿藻门代表植物—水绵观察
a) 用镊子夹取少量水绵丝状体作水封片。
b) 观察：1.藻体形态，有无细胞分化；
c)
2.细胞结构：带状叶绿体，叶绿体上蛋白核；加
I2—KI溶液染色观察：细胞壁、叶绿体、细胞核、细胞质 丝、细胞质、蛋白核。
① 表皮：1~2层小形、排列紧密并具较多色素体的细胞组成。 ② 皮层：表皮内的多层细胞，紧靠表皮下方的几层细胞较小，中空，
a.营养细胞：形状不规则，细胞分布均匀，一层，各细胞间的胶质较厚。
b.果孢与果胞子：叶状体边缘浅色区域；细胞排列整齐，果胞细胞较大， 果孢子表面观常常是4个细胞较紧密的排在一起，调节细螺旋可见它们 不)
紫菜生活史图解
甘紫菜 Porphyra tenera Kjellm
作业
1. 对各种淡水水样中的藻类进行简单鉴定， 比较分析观察结果并将结果记录于实验记 录本。
2. 拍摄颤藻丝状体一部分并标注，示营养细 胞、死细胞、隔离盘和藻殖段（实验指导 P76 ）。
3. 拍摄水绵结构、海带切片结构并标注。
蓝藻观察与操作
2.念珠藻属：发菜观察
– 取芝麻大小的胶质丝，做水封片，用镊子或解 剖针将胶质丝适当破碎，盖上盖片，用手指轻 压盖片，使材料均匀散开，即可镜检。
– 观察外形特点：胶群体内藻丝数量与形状，是 否分枝？组成藻丝的细胞类型：异形胞、营养 细胞、厚壁孢子。
蓝藻观察与操作
3.鱼腥藻属制片观察（考察）：
淡水水样常见藻类
水绵
空球藻
双星藻
鼓藻
盘星藻
实球藻
栅藻
角星鼓藻
淡水水样常见藻类
舟形硅藻 角星鼓藻
微芒藻
盘星藻 星芒藻
盘星藻 栅藻
小环藻
针杆藻
绿藻门代表植物—水绵观察
a) 用镊子夹取少量水绵丝状体作水封片。
b) 观察：1.藻体形态，有无细胞分化；
c)
2.细胞结构：带状叶绿体，叶绿体上蛋白核；加
I2—KI溶液染色观察：细胞壁、叶绿体、细胞核、细胞质 丝、细胞质、蛋白核。
① 表皮：1~2层小形、排列紧密并具较多色素体的细胞组成。 ② 皮层：表皮内的多层细胞，紧靠表皮下方的几层细胞较小，中空，
《实验2藻类鉴定》课件
藻类的生物化学分类学原理
生物化学分类学原理是根据藻类 细胞的生物化学特性进行分类的
方法。
生物化学分类学原理包括对藻类 细胞中的色素、脂肪酸、氨基酸 等生物化学成分的分析和比较。
生物化学分类学原理可以更深入 地揭示藻类之间的亲缘关系和演
化历程。
藻类的分子生物学分类学原理
分子生物学分类学原理是基于对藻类细胞中DNA、RNA等核酸分子的结 构和序列进行分析和比较进行分类的方法。
藻类生物化学成分分析结果
生物化学成分分析是通过分析藻类细胞 内的化学物质，如色素、脂肪酸、氨基 酸等，来推断藻类的种类和属性的方法
。
在实验中，我们采用了色谱分析、光谱 分析和质谱分析等技术，对藻类样品进
行了生物化学成分的提取和测定。
分析结果表明，不同种类的藻类具有不 同的生物化学成分组成，这有助于我们 进一步了解它们的生物特性和生态功能
。
藻类分子生物学鉴定结果
分子生物学鉴定是通过分析藻类基因组的DNA序列信息，来进行藻类分类和鉴定的方法。
在实验中，我们采用了PCR扩增和DNA测序等技术，对藻类样品进行了基因组的DNA提取 和测序。
鉴定结果表明，不同种类的藻类具有不同的DNA序列特征，这为我们提供了更准确、可靠 的分类依据。
综合分析结果与鉴定结论
育地位。
04
实验结果与分析
藻类形态特征分析结果
藻类形态特征分析是利用显微镜观察藻类细胞和组织的形态、大小、排列等特征， 从而对藻类进行分类和鉴定的方法。
在实验中，我们观察了不同种类的藻类，包括蓝藻、绿藻、红藻等，记录了它们的 形态特征，如细胞壁的厚度、细胞内色素的颜色和分布等。
通过比较不同藻类的形态特征，我们能够初步判断它们的种类和亲缘关系。
生物监测课件-第四章 第三节藻类生长抑制试验
问卷星操作说明
问卷星是一款功能强大的在线调查问卷平台，它提供了丰富的
问卷设计和数据分析功能，为用户提供了便捷的问卷调查服务。
本
文将详细介绍如何在问卷星上进行问卷的创建、设计和发布。
一、创建问卷
1. 打开浏览器，输入问卷星的官方网址。
2. 点击网页上的“注册”按钮，填写注册信息并完成注册。
3. 登录账号后，在问卷星的首页点击“创建问卷”按钮。
4. 在新建问卷页面上，填写问卷的基本信息，包括问卷的标题、描述和语言选择等。
5. 确认信息后，点击“确定”按钮，问卷创建成功。
二、设计问卷
1. 在问卷创建成功后，进入到问卷设计页面。
2. 在设计页面的左侧工具栏上，可以选择不同类型的题目，如
单选题、多选题、填空题等。
3. 点击题目类型后，将题目拖动到问卷的右侧空白区域中。
4. 根据需要，对每个题目进行设置，包括题目的标题、选项、逻辑跳转等。
5. 点击“保存”按钮，保存问卷设计。
三、发布问卷
1. 在设计完成后，点击问卷设计页面上方的“发布”按钮。
2. 确认问卷的发布方式，可以选择通过链接、二维码或嵌入代码等方式进行发布。
3. 如果选择通过链接发布，问卷星会自动生成一个问卷链接，将该链接复制并发送给目标受众。
4. 如果选择通过二维码发布，问卷星会生成一个二维码图片，受众可以使用扫码工具扫描该二维码进入问卷。
5. 如果选择通过嵌入代码发布，问卷星会生成一段嵌入代码，用户可以将其复制并嵌入到自己的网页中。
四、数据分析。
藻类生长抑制实验new
具体要求：（图的大小为：长7cm－宽5cm）
a) 横坐标为生长时间（天） b) 纵坐标为藻细胞浓度（个/ml） c) 图题：某？ 浓度下斜生栅藻的生长变化趋势。 d) 最后文字描述
备注：每一小组一张图。 附加:绘制一个不同浓度条件下的时间同步生长趋势线
以自己、对照、其它（最高浓度），或者全部
（二） ErC50（半数效应浓度）的计算分析: 96h（培养4天后） （1） 时间要求： 数据来源—96h（培养4天后）的藻类平均生长
2. 数据处理
生长率是单位时间内藻类细胞增长的量。对数生长期的藻类平均生长率 可用下式计算（）：
μ＝(lnNt－lnN0)/t μ——藻类平均生长率； t——藻类培养时间； N——藻类细胞生长量，N0为起始细胞数，Nt为培养时间t后的细胞数。
实验记录表
培养时间(d)
01 2 3 4
56
7
藻细胞浓度(个/mL)
图题：藻类平均生长率与毒物浓度间的关系
（5）计算ErC50：根据上述关系式计算该参数，即a=50%时，求 算C＝？？
（6）文字说明
实验一
藻类生长抑制实验
实验目的和意义
• 实验目的
1. 了解藻类的生长规律 2. 掌握藻类的培养方法 3. 掌握化学物质对单细胞绿藻生长影响的评价方法
• 意义
藻类是水体中的初级生产者,藻类的死 Nhomakorabea影响次 级生产者如浮游动物和鱼类等的生存,进而对整个水 生生态系统产生破坏。因此考察污染物对藻类生长的 抑制，有助于了解污染物对水生生态系统的污染效应。 单细胞藻类世代时间短，可在短期内获得化学物质对 其许多世代及种群水平上的影响。
数据资料处理要求：
1. 每小组资料绘制生长趋势图（时间序列生长动态）
a) 横坐标为生长时间（天） b) 纵坐标为藻细胞浓度（个/ml） c) 图题：某？ 浓度下斜生栅藻的生长变化趋势。 d) 最后文字描述
备注：每一小组一张图。 附加:绘制一个不同浓度条件下的时间同步生长趋势线
以自己、对照、其它（最高浓度），或者全部
（二） ErC50（半数效应浓度）的计算分析: 96h（培养4天后） （1） 时间要求： 数据来源—96h（培养4天后）的藻类平均生长
2. 数据处理
生长率是单位时间内藻类细胞增长的量。对数生长期的藻类平均生长率 可用下式计算（）：
μ＝(lnNt－lnN0)/t μ——藻类平均生长率； t——藻类培养时间； N——藻类细胞生长量，N0为起始细胞数，Nt为培养时间t后的细胞数。
实验记录表
培养时间(d)
01 2 3 4
56
7
藻细胞浓度(个/mL)
图题：藻类平均生长率与毒物浓度间的关系
（5）计算ErC50：根据上述关系式计算该参数，即a=50%时，求 算C＝？？
（6）文字说明
实验一
藻类生长抑制实验
实验目的和意义
• 实验目的
1. 了解藻类的生长规律 2. 掌握藻类的培养方法 3. 掌握化学物质对单细胞绿藻生长影响的评价方法
• 意义
藻类是水体中的初级生产者,藻类的死 Nhomakorabea影响次 级生产者如浮游动物和鱼类等的生存,进而对整个水 生生态系统产生破坏。因此考察污染物对藻类生长的 抑制，有助于了解污染物对水生生态系统的污染效应。 单细胞藻类世代时间短，可在短期内获得化学物质对 其许多世代及种群水平上的影响。
数据资料处理要求：
1. 每小组资料绘制生长趋势图（时间序列生长动态）
实验七、 藻类植物27页PPT
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
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营养盐 (NH4)2SO4 Ca(H2PO4)2∙H2O NaHCO3 KCl
MgSO4∙7H2O
0.080
*取少量菜园土，加2–3倍自来水，煮沸10余分钟，冷却后用滤纸
过滤即可使用。
4. 实验器材 电子天平(2台)、立式压力蒸汽灭菌器(2台)、无菌操作台(4 台)、显微镜(4台)、生化培养箱(2台)、pH计(4套)、气浴恒温摇 床(4台)、可见分光光度计(4台)、数字照度计(2台)、血球计(4 套)、血小球记数板(200块)、4到7只30W的普通白色荧光灯、 ф60漏斗(4个)、锥形瓶、温度计、滤纸和纱布等若干。 5. 实验药品 硫酸铵、磷酸二氢钙、碳酸氢钠、氯化钾、硫酸镁、氯 化铁均为分析纯，土壤浸出液。
藻类生长抑制实验
主要内容
一、实验目的与内容 二、实验原理 三、实验材料与方法 四、实验步骤 五、实验结果
六、注意事项
七、讨论与思考
实验目的与内容
一、实验目的
1. 了解藻类的生长规律；
2. 掌握藻类的培养方法；
3. 掌握化学物质对单细胞绿藻生长影响的
评价方法。
二、实验内容
1. 运用毒理学实验方法，观察藻类在含有化学污 染物的水环境中的生长抑制情况；
2. 藻试液的配制
从储备液中取出一定的藻液，接种到新鲜的无菌培养液中，
接种浓度约为104个/mL。在与试验要求相同的条件下进行预
培养，要求在2–3天内藻类能达到对数生长，然后再次转移到 新鲜的培养液中。如此反复转接培养2–3次，藻类生长健壮并
开始处于对数生长期时即可用来制备实验中需要的藻类试验
液。
长：①细胞计数；②测光密度；③测叶绿素含量。
推荐使用方法①和②。
2. 数据处理
将不同浓度试验培养液和对照培养液的藻细胞浓度与测
试时间绘制成曲线图，再用下面方法确定浓度效应关系。
生长率是单位时间内(tn-t1)藻类细胞增长的量(Nn-Nt)。 对数生长期的藻类平均特定生长率可用下式计算： （1）
3. 受试物试验液的配制
根据初步试验确定产生效应的浓度范围，至少设置五个构
成对数间距系列的浓度，浓度比不超过2.2。最低测定的浓度 必须对海藻生长没有影响。最高测定浓度必须抑制相对对照
实验至少50%的绿藻生长，最好使绿藻生长完全停止。至少
设置3个平行样，每一系列设一个对照。实验前应测定受试液 的pH，必要时用盐酸或氢氧化钠溶液将pH调到7.5±0.2。试
ln N n ln N 1
tn t
1
ln N n ln N 1
tn t
1
式中： μ——藻类平均生长率；
t——培养时间，t1为起始时间，tn为终了时间；
N——藻类细胞生长量，N1为起始细胞数，Nn为 最终细胞数。 以不同浓度组中藻类生长率的下降比例与对数浓度作图， 可直接从图上读出EC50，再标明测定时间，如24 h EC50。也 可求出回归关系式，再算出EC50。
表 2 实验记录表格
时间 24 h 48 h 藻类平均 生长率 对照 浓度1 浓度2 浓度3 浓度4 浓度5
根据直线内插法或概率单位图解法估算24h和48h藻类生长
受到抑制的EC50。
注意事项
1.在正式试验前必须进行必要的预试验。 2. 实验藻种的选择和预培养应注意：藻细胞大小均匀，颜色 鲜绿，处于对数生长期。试验开始3天内，对照组藻细胞浓 度至少应增加16倍。
验结束时应测定被测物质的实际浓度。
4. 测试液的配制 先在每个试验锥形瓶中加入50mL藻液，再加50mL受试物 溶液。对照组只加50mL培养液。将各瓶摇动混匀后，放入
光照培养箱中培养。实验开始后，每隔24h(即在24，48h)测
定各组藻类的细胞密度。
实验结果
1.藻类生长的测定 藻类生长是指在试验期间每毫升溶液中藻类细胞 数目的增加量。一般用以下三种方法测定藻类的生
实验步骤
1. 藻类培养 培养温度为：24±2 ℃；白色荧光灯均匀光照，光照强度为 4000±400 lux，连续光照或以12：12或14：10光暗比光照；机 械震荡(100±10次/min)；培养容器用棉塞、滤纸、纱布(2~3层) 或锡箔纸等封闭，对挥发性化学物质采用磨口玻璃瓶塞完全封 闭。 可根据实验需要选择容量不同的实验容器，125 mL锥形瓶 中测试液的体积为40-60 mL；250 mL锥形瓶中测试液体积为 70-100 mL；500 mL锥形瓶中测试液的体积为100-150 mL。
2. 求出受试化合物对藻类生长抑制的EC50；
3. 阐明受试化合物的剂量－效应关系与生长抑制
特征。
实验原理
单细胞藻类个体小、世代时间短，是水体中的初级生产者。 因为可在短期内获得化学物质对其许多世代及种群水平上的影 响，所以利用污染物对藻类生长的抑制作用，能反映污染物水 平对水体中的初级生产者的作用情况。 通过将不同浓度的受试物加到属于对数生长期的藻类中，在 规定的实验条件下继续培养，每隔24 h测定藻类种群的浓度或 生物量，以观察受试物对藻类生长的抑制作用。经方差分析或t 检验，显著低于对照(P < 0.05)的生长率表明藻类生长受到抑制。
3. 需要明确受试化合物的理化特性，有针对性的进行实验。
思考与讨论
实验仪器与试剂
1. 受试物 研究藻类生长抑制实验的受试物应当是挥发性低、环境稳定 性好且可溶于水的物质。如果需要助溶剂，它在水中的浓度不能 超过0.1 mL/L。 2. 藻种 斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)或蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)。 3. 培养基 藻类的培养基很多，其成分和浓度各不相同，小球藻和栅藻 可用“水生4号”培养基培养。
配制培养基时可将营养盐类按所需浓度直接加入无菌蒸 馏水或去离子水中。应按顺序逐个加入，待一种盐类完全溶解 后再加另一种。亦可先配制各种营养盐类的浓度储液，经灭菌 后避光冷藏保存。当需要配制营养基时，将一定量的浓储备液
摇匀，依次加入到蒸馏水或去离子水中即可。
表1
水生4号小球藻和栅藻培养基
含量(mg) 0.200 0.030 0.100 0.025 营养盐 FeCl3(1%) 土壤浸出液* 水 含量(mL) 0.015 0.500 1000