SCG蛋白纯化系统仪器介绍
AKTAavant25全自动工艺开发蛋白纯化系统参数精
AKTAavant25全自动工艺开发蛋白纯化系统1.工作条件1电力供应:单相220V±10%,50 Hz (±12工作温度:4 ℃ - 35 ℃3相对湿度:20 - 95%,没有冷凝水4仪器运行的持久性:仪器可连续正常运行。
5工作条件及安全性要求符合中国及国际有关标准或规定。
2.设备用途及功能快速纯化多种生物分子，如蛋白质、多糖、肽类、寡核甘酸、核甘酸疫苗及病毒等，适合分离纯化活性物质。
其自动化的配置尤其适合方法优化和工艺开发。
1简单迅速启动:预编应用工艺，编程模板,自动缓冲液制备。
2全自动操作:从进样、编程、分离、峰收集、准确结果比较、数据处理以至打印报告皆自动化。
3标配多种自动化配置:自动选择缓冲液、自动选择样品、自动选择柱位、自动选择收集位置和收集方式，便于方法优化和工艺开发。
4人工智能:多种缓冲液配方(内置26种配方，可自行添加,一百多根层析柱数据库,多种纯化方案，内置层析专家。
5整合专业的Design of Experiment实验设计理念，推荐实验方案，进行数据分析，模型建立，为条件优化提供系统的建议。
6高效率功能:蛋白纯化量微克级以至百毫克级。
3.技术规格1.系统泵及样品泵1.1系统泵1.1.1精确的全自动微量柱塞泵,双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀。
*1.1.2 流速:0.001-25ml/min1.1.3 压力范围:0-20 MPa (200bar,2900psi*1.1.4 流速重复性:条件:0.25-25 ml/min, < 3 MPa, 0.8-2 cP流速准确度:±1.2%,流速精度:RSD<0.5%1.1.5增量:1ul/min1.1.6粘度:0.35-10 cP*1.1.7具备恒压调速功能,自动根据压力调节流速输出，使压力保持稳定。
1.2样品泵1.2.1精确的全自动微量柱塞泵，单泵两泵头，每个泵头都有独立除气阀。
1.2.2流速:0.01-25ml/min1.2.3压力范围:0-10Ma (100bar,1450psi*1.2.4 流速重复性:条件:0.25-25 ml/min, < 3 MPa, 0.8-2 cP流速准确度:±2%,流速精度:RSD<0.5%1.2.5 粘度:0.7-10 cP*1.2.6样品泵有压力控制模式，确保压力不变的情况,自动调节流速II.检测器2.1紫外可见检测器2.1.1使用单一氙灯光源，紫外/可见光切换时无需换灯，无需预热。
GST蛋白纯化
GST bestarose 4FF说明书默认分类2010-01-18 09:32:34 阅读257 评论0 字号：大中小GST bestarose 4FF是专门用于纯化pGEX系列载体表达的GST标签蛋白，其它谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用蛋白的分离介质，操作简单，快速。
GST bestarose 4FF 可直接从预处理的细胞裂解物中纯化GST-tagged蛋白，纯化条件温和，可以保证蛋白的生物活性。
GST bestarose 4FF 具有高流动性，易于放大，GST bestarose 4FF有快速方便的预装柱，Ez-Fast bestarose 4FF 1ml和5ml。
介质性能谷胱甘肽是通过10碳原子的连接臂偶联到4%高度交联的琼脂糖上。
最优的偶联作用使介质具有高GST-tagged蛋白及与谷胱甘肽相互作用蛋白的结合能力。
总的蛋白结合能力约为每毫升填料结合10mg标签蛋白，动态结合能力随着外界因素改变，如不同的目标蛋白，流速等等。
如果需要去除GST部分（天然蛋白分子量为26KD），当蛋白吸附在柱上，或在洗脱后用位点专一的蛋白酶消化，选用前种方法，可减少额外分离目的蛋白与GST步骤，消化后，目的蛋白直接用结合液洗脱即可。
表1 GST bestarose 4FF性能配体谷胱甘肽与10碳原子连接臂配体浓度 120-320μmol谷胱甘肽/ml填料蛋白结合能力≈ 10mg重组GST-tagged蛋白/ml填料，GST，Mr26000动态结合能力≈11mgGST-tagged蛋白/ml填料，Mr43000平均颗粒大小90μm组成 4%高度交联的琼脂糖最大流速* 450cm/h（15ml/min），XK层析柱，柱高5cm,水溶性缓冲液，室温纯化建议的流速** 上样：＜100cm/h（＜3ml/min ，XK层析柱）洗涤与洗脱：100-300cm/h（3-10ml/min，XK层析柱）化学稳定性所有常用的水溶性缓冲液中稳定，如：1M醋酸盐，pH7.4，6M 盐酸胍，室温，1hpH稳定性 pH3-12贮存温度 +4-30℃贮存液 20%乙醇* 水是室温的。
纯化层析系统介绍
客户比较关注的设备方面的问题
5.收集方面： 我公司生产的SCG蛋白纯化系统收集方式分为两
种：阀收集和组分收集器收集。阀收集优点是收集 体积较大，可自己设定收集体积，缺点是组份收集 少。组分收集器收集具有以下优点：1. 支持多种收 集方式；2. 配制多种收集架，方便样品转移（96孔 板收集架，15m收集架，50ml收集架等）；3. 自动、 手动灵活收集；4. 可通SCG工作站控制，进行多种方 式收集；5. 组份收集多，且控制方便。缺点是收集 体积较少。客户可根据需要，选择合适的收集方式 及收集架等。采用进口元件，保证了收集的稳定性 及准确性。
Sepax Instruments
客户比较关注的设备方面的问题
7.清洗方面： SCG纯化系统中泵有自冲洗功能，防止泵头因缓
冲液导致的盐析出损伤其使用寿命，避免造成交叉 污染。运行过程中更换缓冲液，无需将柱子拆掉， 泵冲洗即可快速更换缓冲液以及排气泡。当实验完 成后，可实现在线清洗（CIP），因管路及流通池的 体积很小，整个流路的清洗方便，无卫生死角。
Sepax Instruments
模块：色谱工作站
方法编辑
Sepax Instruments
模块：色谱工作站
运行功能
1.运行过程中实时显示各种参数，如时间、体积、流速、压力、pH、UV、电导等，参数显示可 调整及颜色标记等。 2.软件全程LOGBOOK记录，可随时查看仪器任意时刻的运行状态记录。 3.实时方法编缉，可在线修改各种参数，修改后可选择运行完梯度并可设置自动暂停和自动停止， 方便实时修改和优化实验条件。 4.可手动快速运行模式，操作方便快捷，提高纯化方法探索的便捷性。 5.自动上样阀上样，软件可标上时间位置，并将当前运行时间重置归零，方便纯化后数据分析与 整理。 6.过压报警、收集报警等保护功能，能实时保护层析柱与系统。实时自动保存数据功能，可防止 意外断电导致的数据丢失。 7.SCG独有的手机、平板远程控制功能，可随时控制及观察当前的运行状态，调整方法，做到在 办公区即可对实验监控，方便操作，更安全，更健康。 8.全中文操作界面，友好图形交互，操作简单、功能全面、性能稳定。 9.可对数据进行分析，验证实验方法、填料、柱子等的稳定性、可靠性。 10.收集方式的多样性，可选择阀收集或收集架收集，且收集架具有自动识别及记忆功能。 11.可设置多个方法，采用不同方法对一个或多个样品，通过不同的柱子，采用不同的缓冲液对 样品进行纯化洗脱，可实现过夜无人值守等。 12.各种参数校正可通过软件控制，方便操作及管理。 13.动态混合器使得缓冲液的配比更精确；气泡传感器可检测到管路液体有无气泡，避免气泡进 到柱子，对填料造成损伤；泵头的自冲洗功能避免 盐析出污染泵头；更换缓冲液无需拆柱子，且 较大流速可以很快完成缓冲液的更换及气泡的排出。
蛋白质纯化仪的使用 (1)
蛋 白 质 纯 化 仪 使 用 说 明1.认识机器本机器常规流程图：使用机器前所有端口请按如图所示连接，将“A 泵溶液进口线”“B 泵溶液进口线”放进超纯水中。
按如图所示先不要连接柱子。
建议一般使用A 泵进液，如需梯度洗脱时才用B 泵。
***除上样样品（14000 rpm/12000 rpm 离心30min ）外，所有在此机器上要用的溶液必须要经过0.22 μm 滤膜过滤。
***样品泵A 泵B 泵 多波长检测器 pH 计 混合池 层析柱 切换阀进样环 溶液由A/B 泵进入仪器 进样阀层析柱切换阀多波长检测处 自动收集器 废 液 出 口A 泵溶液进口线B 泵溶液进口线 整合电导检测2.开机打开计算机、蛋白质纯化仪（电源在右侧下角）、自动收集器（电源在后面右侧）。
此时蛋白质纯化仪上部分指示灯会亮，有黄色的、有蓝色的，开机较慢，请稍等，当蛋白质纯化仪上所有指示灯不亮时，才可进行操作。
3.启动电脑“ChromLab”软件双击电脑“ChromLab”应用程序，进入如下界面：4.洗泵单击“Manual Run”进入：我们主要看右下方这块（图中所示模块均可双击设置参数）：双击“样品泵”模块出现如图所示对话框：双击“层析柱切换阀”模块如下图所示：此步骤主要是洗泵工作，请确保层析柱不在程序中，点击“Bypass ” 点击此处可让可更改溶液的流动方向。
点击1-5可设置连接不同的层析柱端口 设置流速 设置压力，小于选择的柱子承受最大压力。
在下面“控制流速以防止超压”前面打对勾，以保护柱子。
不特殊设置，默认A 泵工作此处可控制机器的运行与停止。
双击“样品泵”模块出现如下图所示：选择“System Pump Waste”模式后，轻按仪器上“A泵”的“Purge”按钮，稍等片刻，即将进行A泵的洗泵工作，此时流速将会达到最大10 mL/min。
如果想洗B泵（凝胶过滤时不需要），轻按仪器上“B 泵”的“Purge”按钮即可。
蛋白纯化仪——精选推荐
蛋白层析纯化系统FPLC：快速蛋白液相色谱（Fast protein liquid chromatography）一、操作流程：（一）开始层析实验前的准备注意：紫外灯：如果只是平衡层析柱，关闭紫外灯。
UPC-900面板旋钮逆时针旋转，进入Lamp（on），点击OK，通过旋钮选择ON或OFF。
一般在上样前15min打开紫外灯。
1、检测系统管路中是否有气泡。
若有小气泡，可以使用pump wash，以大流速冲走气泡；若有大气泡，需要用注射器手动排气。
2、打开FPLC的电源，系统立即进行自检3、打开电脑电源4、双击unicon 5.11图标，进入系统窗口。
ÄKTA层析软件有四个窗口：UNICORN Main Menu、Method Editor、System Control、Evaluation。
如使用程序运行，在Method Editor窗口里编方法设置各种参数；如使用手工运行，在System Control窗口里设置各种参数。
（1）清洗及管路准备：System Control设置参数Pump→Pump Wash 选择要冲洗的泵（Pump A和Pump B）→Execute，冲洗完成后系统自动停止，之后可进行报警压力的设置：Alarms＆Mon→Alarm_Pressure→HighAlarm，设置最高报警压力（柱压力加0.2MPa）→Execute（2）安装层析柱设置较小的流速Pump→Flow 0.5mL/min。
将层析柱接入系统：样品阀1号为的连接管有液体滴出时，将层析柱上端堵头去掉，把连接管插入，注意不要拧紧；打开下端堵头，与UV检测器上的接头连接，再把上端接头拧紧。
（拆层析柱时，先把连接UV检测器端的接头拧开，堵上堵头，在把上方连接去掉。
）（3）在Method Edit窗口中进行方法编辑（也可参照下一部分进行手动运行）进入Method Edit窗口，点击“新建方法”。
New Method→Use中选择Method Editor→OK→Prameters：Base（用于确定各个命令的开始点），可选择Time、Volume和CV（柱体积），现在按体积Volume来确定命令开始点→Insert Alarm＆Mon→Alarm_Pressure→HighAlarm（柱压力加0.2MPa）→InsertPump→Flow：1 mL/min→Insert以上设置的命令都是在0 mL的breakpoint时进行的，之后在Breakpoint中输入需要插入新命令的点（可以是时间、体积或柱体积，这里以体积为例）：5 mL，以及需要执行的命令：Flowpath→Injection Valve：Inject→Insert，以此类推，将需要执行的命令插入到相应段点中。
液相色谱系统梯度延迟体积测算方法
第26卷 第10期2019年10月仪器仪表用户INSTRUMENTATIONVol.262019 No.10液相色谱系统梯度延迟体积测算方法李泓文，聂大林（苏州赛谱仪器有限公司，江苏 苏州 215200）摘 要：本文讨论了一种可应用于大部分液相色谱系统延迟体积的测算方法。
本次测算的对象是北京卫星制造厂在科技部重大专项《高精度超高压液相泵的开发与应用》（项目编号：2016YFF0101000）项目中研制的高精度超高压液相泵（UHPLC-BSC-02型），以及SCG 蛋白纯化系统中的色谱泵。
该方法配合赛谱仪器UV 检测器使用，是一种方便可靠的测算方法，测算对象灵活，应用范围广且具有良好的重复性。
根据实际情况，可以用于大多数液相系统的延迟体积、泵死体积、样品泵加载体积、柱外死体积等测量。
关键词：液相色谱；梯度延迟体积；高精度超高压液相泵中图分类号：TH38 文献标志码：ADetermination of Gradient Delay Volume in LiquidChromatography SystemsLi Hongwen ，Nie Dalin（Suzhou Sepure Instrument Co., LTD., Jiangsu, Suzhou, 215200, China）Abstract：In this paper, a method for measuring the delay volume of most liquid chromatography systems is discussed. The ob-ject of this measurement is the high precision ultra-high pressure chromatography pump (UHPLC-BSC-02)developed by Beijing satellite manufacturing co. LTD, and a chromatography pump in SCG system. This method is a convenient and reliable measure-ment method, which need to be used in combination with UV detector of Sepure Instrument co. LTD. It has flexible measurement objects, wide application range and good repeatability. According to the actual situation, it can be used to measure gradient delay volume, pump dead volume, sample pump loading volume, and dead volume outside column in most liquid chromatography sys-tems.Key words：liquid chromatography；gradient delay volume；UHPLC pump收稿日期：2019-08-08作者简介：李泓文（1988-），男，江苏扬州人，本科，工程师，从事仪器研发工作。
SCG层析工作站操作手册V3.7
SCG层析⼯作站操作⼿册V3.7SCG层析⼯作站操作⼿册苏州赛谱仪器有限公司版权@2013苏州赛谱仪器有限公司版权所有。
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⽬录第⼀章SCG简介 (6)1.1关于SCG (6)1.1.1简介 (6)1.1.2操作环境 (6)1.1.3Windows功能 (6)1.2⼯作流程 (6)1.3帮助功能 (7)1.4关于本⼿册 (7)1.4.1基础知识 (7)第⼆章SCG概念 (8)2.1概念定义 (8)第三章SCG登录管理 (9)3.1启动和登录SCG层析系统 (9)3.1.1⽤户名与密码 (9)3.1.2启动SCG层析⼯作站 (9)3.1.3登录SCG层析⼯作站 (9)3.1.4修改密码 (10)3.2⽤户管理 (11)3.2.1部门定义 (12)3.2.3⽤户定义 (12)3.2.3⾓⾊定义 (14)第四章⽅法运⾏ (15)4.1⽅法编辑 (15)4.1.1⽅法命令 (15)4.1.2功能模块 (16)4.2查看⽅法 (23)4.2.1⽅法列表右键功能 (24) 4.3运⾏⽅法 (24)4.3.3仪器配置 (24)4.3.2仪器连接 (25)4.3.3⽅法运⾏ (25)4.3.3 Scouting⽅法 (28) 4.3.4⽅法序列 (29)4.3.5⽂件签名 (30)第五章仪器控制 (32)5.1仪器控制窗⼝布局 (32) 5.2仪器控制属性 (33)5.3曲线图 (34)5.4运⾏数据 (35)5.4流路图 (36)5.5操作记录 (36)5.6⼯具栏和状态栏 (37) 5.6.1⼯具栏 (37)5.6.2状态栏 (37)第六章⼿动控制 (39)6.1输液泵 (39)6.1.1流速 (39)6.1.2梯度 (40)6.1.3泵冲洗 (40)6.1.4系统冲洗 (41)6.1.5样品环进样 (41)6.1.6输液泵进样 (42)6.1.7进样停⽌ (43)6.2 流路 (43)6.2.1泵A⼊⼝ (43)6.2.2泵B⼊⼝ (44)6.2.3进样阀 (44)6.2.4柱位阀 (44)6.2.5收集阀切换 (45)6.2.6 组分收集器阀切换 (45) 6.2.7组分收集器归位 (45) 6.2.8 InjectMark (46)6.3监测 (46)6.3.1波长 (46)6.3.2⾃动清零 (47)6.3.3灯 (47)6.3.5 压⼒ (48)6.4组分收集器 (48)6.4.2信号收集 (49)6.4.3循环收集 (50)6.4.4电导收集 (50)6.4.5阶段信号收集 (51)6.4.6阶段时间收集 (51)6.4.7停⽌收集 (52)6.4.4收集中移动位置 (52) 6.4.5最⼩峰宽 (53)6.5其它 (53)6.5.1计划停⽌ (53)6.5.2计划暂停 (53)6.5.3标记 (54)6.5.4记录数据_开始 (54) 6.5.5柱体积 (55)第七章系统管理 (56)7.1层析柱库 (56)7.1.1层析柱参数类型 (56) 7.1.2层析柱记录 (59)7.2仪器控制（模拟） (59) 7.3参数设置 (60)7.4 样品信息维护 (61)第⼋章数据分析 (62)8.1积分 (62)8.2对⽐曲线 (63)8.3标准曲线 (64)8.4运⾏结果 (65)8.4.1仪器信息 (66)8.4.2⽅法信息 (67)8.4.3积分信息 (67)8.4.4⾊谱图操作信息 (68)8.4.5运⾏⽅法Log信息 (68)8.4.6结果处理Log信息 (69)8.5计算 (70)8.5.1加 (70)8.5.2减 (71)8.5.3除 (72)8.5.4斜率 (72)8.5.5平滑 (73)8.5.6平移 (74)8.6⼯具栏 (75)8.7右键功能 (76)8.7.1属性 (77)8.8打印报表 (78)8.8.1创建⾃定义报表 (78)8.8.2编辑报表 (79)8.8.3⼯具栏图标 (79)联系我们 (82)第⼀章SCG简介1.1关于SCG1.1.1简介SCG层析⼯作站是集数据采集和分析于⼀体的软件。
蛋白纯化层析柱--GE 详细介绍---精品资料
蛋白纯化层析柱2011-06-15 15:19:14 易生物仪器浏览次数：1164 网友评论0 条关键词：蛋白离子交换分离分子物质树脂从个人学术性实验室到大型的医药制造企业，小型或者大规模的蛋白纯化通常都需要几种类型的液相色谱仪。
这些相关的大部分技术已应用了多年，但是新型柱料的发展为这些利用蛋白物理和化学特性进行分离的，经过时间考验的方法注入了新的力量。
其中最值得提到的就是凝胶过滤层析技术（gel filtration，GF），离子交换层析技术（ion exchange，IEX），羟基磷灰石层析（hydroxyapatite，HAP）和疏水作用层析（hydrophobic interaction，HI)，以及亲和层析和高效液相色谱方法（high-performance liquid chromatography，HPLC）。
对于一个初接触蛋白纯化的新手而言，从哪儿下手也许是令人头疼的一件事，但是幸运的是目前这些流程都已经逐步系统化了。
GE Healthcare（原Amersham Biosciences）的技术顾问Andrew Mitchell解释道，通常利用液相色谱技术进行蛋白纯化有三步：捕获——从细胞其它成份，比如DNA和RNA中分离需要的蛋白；区分——从与目的蛋白具有相近的大小，或者相似的物理/化学特征的污染物中分离蛋白；修饰——使分离得到的样品处于可使用状态。
这每一个纯化的步骤都有特定的色谱层析技术和最佳的beads大小。
第一步捕获步骤，也就是从细胞裂解物粗成份中分离蛋白，这需要一个具有高容量和高流量（flow rate）的填料。
bead大小比较大，范围比较宽（比较于bead大小平均值）的“fast flow”填料比较理想，这种填料也有利于防止目标蛋白被水解——因为速度比较快。
第二步则对分辨率要求更高，需要更好的从混合物中分离需要的成份。
通常bead的大小与分辨率成反比，因此在这一部中比较小的bead比较合适。
GST融合蛋白纯化磁珠
GST融合蛋白纯化磁珠规格：5mL/2×50mL保存：2-8℃，保质期2年产品内容：GST融合蛋白纯化磁珠是专为高效、快速纯化谷胱甘肽巯基转移酶（GST）融合蛋白而设计的一种新型功能化材料，可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白，极大地简化纯化工艺和提高纯化效率，适合科研和工业领域便捷地进行GST融合蛋白的纯化。
与传统的柱层析纯化方式相比，采用磁珠纯化GST融合蛋白，无需对粗蛋白样品进行多次长时间的高速离心及滤膜过滤、无需控制流速、更不需要昂贵的层析设备。
样品与磁珠的特异性结合、洗涤及目标蛋白洗脱变得非常简单、快速、易操作。
对于熟练的操作者而言，在1h内就能获得高纯度的目的蛋白，且能轻松实现高通量和大规模样品的平行处理，为研究者节省了时间和成本。
产品特性：产品名称GST融合蛋白纯化磁珠磁珠粒径30μm~150μmGSH配基含量20~30μmol/mL（100%磁珠）GST融合蛋白结合可达10mg/mL（100%磁珠）量悬液浓度10%（v/v）磁珠悬液保存液20%（v/v）乙醇化学稳定性常温可耐受70%乙醇、6M盐酸胍、0.1M氢氧化钠、0.1M醋酸1h注意：1、磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性有关，此处仅做参考值2、1mL磁珠悬液中包含100µL磁珠适用范围：适用于谷胱甘肽巯基转移酶（GST）融合蛋白、谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用的其它蛋白的分离纯化。
操作步骤：目标蛋白与磁珠的结合性能将直接影响目标蛋白的纯化效率，各种缓冲液配制也将在一定程度上影响目标蛋白的回收率和纯度。
因此，在较大规模蛋白纯化之前，用户应该自行设计实验，筛选出适合目标蛋白的缓冲液。
以下提供一个较强结合力的GST标签蛋白的纯化流程，供供参考。
1、缓冲液的准备Buffer A：140mM NaCl，2.7mM KCl，10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，pH7.4Buffer B：50mM Tris-HCl，10mM还原型谷胱甘肽，pH8.0（0.1M Tris溶液50mL，0.307g还原型谷胱甘肽，然后用0.1M盐酸调pH到8.0，加去离子水至100mL。
SCG蛋白纯化系统仪器介绍
SCG蛋白纯化系统仪器介绍SCG蛋白纯化系统是一种用于分离和纯化蛋白质的仪器。
它采用了多种高效的纯化技术，能够快速、准确地从混合物中分离出目标蛋白质，并去除杂质和干扰物，从而得到高纯度的蛋白质样品。
下面将详细介绍SCG蛋白纯化系统的原理、功能和使用方法。
SCG蛋白纯化系统的原理主要是利用蛋白质的化学和物理性质的差异进行分离。
它包括多个步骤：样品制备、蛋白质捕获、洗脱和纯化。
首先，将待测样品进行预处理，如细胞破碎、溶解等，以得到蛋白质混合物。
然后，通过蛋白质与特定亲和基质之间的特异性相互作用，将目标蛋白质从混合物中选择性地捕获到亲和基质上。
接下来，通过洗涤去除杂质和干扰物，最后通过洗脱步骤将目标蛋白质从亲和基质上解离下来。
这样就得到了高纯度的目标蛋白质样品，可以用于后续实验和应用。
SCG蛋白纯化系统具有多种功能，适用于不同类型的样品和目标蛋白质。
首先，它提供了多种亲和基质的选择，包括亲和柱、亲和浮游悬浮液等。
这样可以根据目标蛋白质的特性选择最适合的亲和基质。
其次，它支持多种纯化方法，如钼石蓝染色、融合蛋白纯化、离子交换纯化等。
这样可以根据不同样品和需求选择最合适的纯化方法。
此外，它还提供了高效的洗脱和浓缩功能，可以更好地去除杂质和干扰物，得到更纯净的目标蛋白质样品。
SCG蛋白纯化系统的使用方法相对简单，以下为一般操作流程。
首先，准备样品，并根据目标蛋白质的特性选择合适的亲和基质。
接下来，将样品加载到亲和基质上，使目标蛋白质与亲和基质发生特异性相互作用。
然后，进行洗涤步骤，以去除非特异性结合的杂质和干扰物。
最后，通过适当的条件改变，如pH值、离子浓度等，使目标蛋白质与亲和基质解离，从而得到纯净的目标蛋白质。
整个操作过程需要根据不同的系统和样品进行优化。
总之，SCG蛋白纯化系统是一种高效、灵活的仪器，可用于从复杂混合物中纯化蛋白质。
它具有多种亲和基质和纯化方法的选择，适用于不同类型的样品和目标蛋白质。
国产高精度超高压液相泵梯度洗脱性能分析
第26卷 第1期2019年1月仪器仪表用户INSTRUMENTATIONVol.262019 No.1国产高精度超高压液相泵梯度洗脱性能分析李泓文，聂大林（苏州赛谱仪器有限公司，江苏 苏州 215200）摘 要：通过将国产高精度超高压液相泵与赛谱仪器紫外检测器组成的液相色谱系统进行梯度性能测试，并且与赛谱仪器原有的由进口液相泵组成的蛋白纯化系统进行对比，分析该国产高精度超高压液相泵的梯度洗脱性能。
关键词：液相色谱；梯度洗脱；高精度超高压液相泵中图分类号：O657.7 文献标志码：AAnalysis of Gradient Elution Performance of OneUHPLC Pump Made in ChinaLi Hongwen, Nie Dalin（Suzhou Sepure Instrument Co., LTD., Jiangsu, Suzhou,215200,China）Abstract：Compared with the liquid chromatographic system composed of Sepure pump(Made in America) and Sepure UV-Vis detector, the gradient elution performance of the UHPLC pump was analyzed by testing the gradient performance of the liquid chromatographic system composed of the UHPLC pump and the Sepure UV-Vis detector.Key words：liquid chromatography；gradient elution；UHPLC pump0 引言本次分析的对象是由北京卫星制造厂在科技部重大专项《高精度超高压液相泵的开发与应用》（项目编号：2016YFF0101000）项目中研制的高精度超高压液相泵（UHPLC-BSC-01型），使用该在研液相泵替代SCG蛋白纯化系统中的输液系统与原系统进行梯度性能对比测试并分析结果。
蛋白纯化AKTA操作说明(二)2024
蛋白纯化AKTA操作说明（二）引言概述：本文档旨在提供关于蛋白纯化AKTA操作的详细说明。
蛋白纯化是生物化学和生物技术中常用的实验技术之一，能够用于从复杂的生物样品中纯化目标蛋白质。
AKTA操作是常用的蛋白纯化系统，本文将介绍该系统的操作步骤和注意事项，帮助用户顺利进行蛋白纯化实验。
正文：一、AKTA操作之仪器准备1. 确保AKTA蛋白纯化系统已经连接好电源，并打开主机电源开关。
2. 检查液氮罐中的液氮是否充足，并确保液位高于所需运行温度。
3. 打开冰盒，准备好所需的离心管、移液器和其他实验器材。
二、AKTA操作之列柱装配1. 按照实验要求选择合适的色谱柱和填料，并正确装配到AKTA系统中。
2. 使用力学手套松开色谱柱底部的螺丝，将填料注入色谱柱中，确保填料均匀。
3. 同时，注意将填料与色谱柱的连接口处用黑色硅胶密封，以免液体泄漏。
三、AKTA操作之流程设置1. 打开AKTA系统的软件界面，并选择“新建方法”。
2. 在方法设置界面中，设定蛋白纯化的各个步骤，如进样、洗脱等流程参数。
3. 根据实验需求，选择合适的梯度洗脱方案，并输入相应的洗脱液体浓度。
四、AKTA操作之样品处理1. 将待纯化的生物样品进行预处理，如离心、过滤等，以去除杂质。
2. 根据纯化需求，可进行某些特定试剂的添加，如酶切剂、亲和标记剂等。
3. 根据方法设置，将样品装入进样器中，并调整进样量和进样流速。
五、AKTA操作之运行实验1. 保存并加载所设置的方法，确保参数设定正确。
2. 启动AKTA系统，开始实验运行，并监控过程中的各项参数指标。
3. 及时记录实验数据，并根据需要进行样品采样、保存等操作。
总结：通过本文所述的蛋白纯化AKTA操作说明，用户可以了解到系统准备、列柱装配、流程设置、样品处理和运行实验等关键步骤。
合理而正确的操作，将帮助用户获得高质量的蛋白纯化结果。
同时，用户还需根据实际操作中的具体情况，进一步优化实验参数，以满足各自的研究需求。
GST蛋白纯化试剂盒说明书及操作指南
GST蛋白纯化试剂盒说明书及操作指南GST蛋白纯化试剂盒是一种常用的实验工具，用于从细胞裂解液中高效纯化谷胱甘肽S转移酶（GST）标签融合蛋白。
下面将详细介绍试剂盒的组成、使用步骤以及注意事项，以帮助用户顺利进行GST蛋白纯化实验。
一、试剂盒组成蛋白纯化试剂盒由以下几个主要组分组成：1、离心管：提供用于样品处理和离心过程的离心管。
2、细胞裂解缓冲液：含有适量的洗脱缓冲液和辅助物质，在细胞裂解过程中保护目标蛋白的完整性。
3、离心管悬浮粉末：用于牢固固定GST亲和树脂。
4、清洗缓冲液：用于去除非特异性结合物质，保证目标蛋白的纯度。
5、洗脱缓冲液：用于洗脱目标蛋白，使其从GST亲和树脂上解离。
二、操作步骤以下是使用GST蛋白纯化试剂盒进行GST蛋白纯化的基本步骤：1、细胞裂解：将经过表达的GST标签融合蛋白的细胞用细胞裂解缓冲液裂解，并加入适量的离心管悬浮粉末。
轻轻摇晃或旋转离心管，使粉末均匀分布。
2、离心：将裂解液转移至离心管中，并以适当的速度离心使GST亲和树脂沉淀到离心管底部。
3、除去上清：谨慎倒出上清液，避免破坏沉积的GST亲和树脂。
4、清洗：加入适量的清洗缓冲液，轻轻摇晃离心管，使清洗缓冲液与GST 亲和树脂充分接触，去除非特异性结合物质。
重复此步骤两次以确保清洗。
5、洗脱：加入适量的洗脱缓冲液，轻轻摇晃或旋转离心管，使目标蛋白从GST亲和树脂上洗脱。
6、收集洗脱液：将洗脱液收集于新的离心管中，这样就得到了纯化的GST 标签融合蛋白。
三、注意事项在使用蛋白纯化试剂盒过程中，请注意以下几点：1、严格按照说明书中的步骤进行操作，避免操作失误导致结果不准确。
2、所有悬浮粉末和缓冲液应按照说明书中的要求储存，并避免暴露在高温、阳光直射或湿度过高的环境中。
3、使用前请检查试剂盒是否有损坏或过期，如有问题请勿使用。
4、操作过程中请佩戴适当的实验防护设备，避免对自己和他人造成伤害。
准确使用GST蛋白纯化试剂盒可以高效地纯化目标蛋白，为科研工作者提供了一个有效的实验工具。
蛋白质纯化层析设备操作流程
蛋白质纯化层析设备操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!蛋白质纯化层析设备操作流程一、准备工作阶段。
在使用蛋白质纯化层析设备之前，要做好充分的准备。
参考技术参数第一包蛋白层析纯化系统设备名称数量技术参数
参考技术参数第一包蛋白层析纯化系统一、层析纯化系统（一）工作条件1.主电源：100-240 V，50-60 Hz2.工作温度：4︒C-35︒C3.其他：工作条件及安全性符合中国有关标准和规定；配置符合中国有关标准要求的插头，如没有，则需提供适当的转换插座；防尘，抗震动。
（二）设备用途仪器能快速纯化多种生物活性物质，如蛋白质、多糖、肽类、基因疫苗、病毒及天然小分子等物质，且具备国家计量局颁发的《计量器具型式批准证书》。
（三）性能指标3.1系统泵3.1.1全自动微量柱塞泵，双泵四泵头，每个泵头都有独立除气阀3.1.2流速：0.001-25ml/min（单泵），装柱可以双泵模式运行，双泵流速：0.1–50ml/min3.1.3压力范围：0–20 MPa (200bar，2900 psi)3.1.4 流速重复性：0.25–25 ml/min，流速准确度：±1.2%，流速精度：RSD<0.5%3.1.5梯度准确度: ±0.6%（5~95%B，梯度流速范围：0.5-25ml/min，压力：0.2~2MPa，黏度：0.8~2cP）3.2 检测器3.2.1 紫外可见检测器3.2.1.1 LED单一紫外光源（280nm）检测，冷光源、无热辐射，不会使样品升温，无需预热3.2.1.2检测范围：-6 到+6 AU，线性：2%（在0–2 AU之间）3.2.1.3 光源和流动池分开设计，避免光源过热对样品的影响，测定准确度高3.2.1.4 标准流通池：2mm光径，2ul 流通池体积，30ul总体积。
第二包全自动细胞成像系统第三包生物安全柜等进口设备。
蛋白质纯化及常用设备简介
表面活性剂处 理法
反复冻融法： 将待破碎的细胞置-20℃冰箱内完全冻结，然后 在室温融化，如此反复2-3次，大部分组织细胞及 细胞内颗粒可被融破，此法主要适用于对组织细 胞的处理。如果要提取细菌或病毒中的蛋白或核 酸，可用类似的冷热交替法，先将细胞置于沸水 浴中，90℃左右维持数分钟，然后立即置于冰浴 中使之迅速冷却，绝大部分细胞被破碎。
此法主要由于组织匀浆液中分离细胞器和病毒， 其优点是：操作简易，离心后用倾倒法即可将上 清液与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子。 缺点是：须多次离心，沉淀中有夹带，分离效果 差，不能一次得到纯颗粒，沉淀于管底的颗粒受 挤压，容易变性失活
2. 密度梯度区带离心法（简称区带离心法）： 区带离心法是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降 平衡，在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上， 形成不同区带的分离方法。 此法的优点是：①分离效果好，可一次获得较纯颗粒；②适应 范围广，能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒，又 能分离有一定浮力密度差的颗粒；③颗粒不会挤压变形，能保 持颗粒活性，并防止已形成的区带由于对流而引起混合。 此法的缺点是：①离心时间较长；②需要制备惰性梯度介质溶 液；③操作严格，不易掌握。
表面活性剂处理法： 在适当的温度、pH值和低离子强度的条件下， 表面活性剂能与脂蛋白形成微泡，使细胞膜通透 性改变而导致细胞溶解。常用的表面活性剂有 SDS、去氧胆酸钠、二乙基十六烷基溴、吐温、 Triton-100等。本法作用较温和，多用于细菌的破 碎
组织捣碎机：使用时，将材料配成稀 糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧 筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动 开关后，逐步加速至所需速度。一般 用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩 的叶芽等，转速可高达10000rpm/M以 上。由于旋转刀片的机械切力很大,制 备一些较大分子如核酸则很少使用。
SCG蛋白纯化系统仪器介绍
样品泵 泵类型 流速范围 最大压力 入口
动态混合器 混合方式 混合腔体积
系统泵入口 A 泵入口 B 泵入口 气泡传感器 *表示：SCG300 暂不支持 9 个入口
高精度柱塞杆泵，良好生物兼容性 0.001~36ml/min 0.01~100ml/min 4000psi（27MPa） 1500psi（10MPa） 标配：1 个入口 选配：6 个入口（样品选择阀）
SCG 系列标准配置： 型号 SCG 二元输液泵
流速范围 最大压力 动态混合器 流量精度、精密度 梯度类型 DAD 400EX 紫外检测器波长范围 波长精度、重复性 漂移、噪声 进样阀
电导检测器
SCG-300 进口中低压 PEEK 泵，生物惰性材料，可提供连续、稳 定的精准流速
0.1-300ml/min 500psi(3.4Mpa) 5ml ±1.2%、0.5%RSD 线性、等度、阶梯梯度，可在线修改梯度比例 2 个波长，采用进口氘灯作为光源，, ±1nm、±0.5nm 1×10-3 AU/Hr、±4×10-5 AU（1s） 自动进样，软件控制切换 Load、Inject、Waste 功能， 支持定量环和定量杯进样 检测范围 0.001-999.99mS/cm，精度±2%，检测池体积 20ul
磁力搅拌 SCG-030：标配 2ml，选配 0.6ml 或 5ml SCG-100：标配 2ml，选配 5ml 或 10ml SCG-300：标配 5ml，选配 10ml 或 15ml
1 个（标配）， 2 个（A1/A2），6 个，9 个* 1 个（标配），2 个（B1/B2），6 个，9 个* 检测到气泡，系统暂停或进入下一步方法
签名等功能，保证了数据的可靠性及安全性。
SCG 蛋白纯化系统可用于:
蛋白纯化仪
蛋白纯化仪1、采购内容：2工作条件：(1) 环境条件：低温(4度)-常温(40度)常湿条件(2) 电源条件：220V±10％，50Hz(3) 相对湿度：20~70%3性能指标及要求：电脑控制单机可完成质检，小试到中试流速范围宽广：0.001－100ml/min压力范围宽广：0－3675psi(25MPa)，满足质检和生产不同的压力需求专利模板编程和Scouting快速探索，快速优化纯化条件Unicorn控制软件，通过FDA验证，符合cGMP12进口高精度缓冲液自动制备功能UV 检测 190-700 nm 同时 3 波长电导检测 1 μSLcm - 999.9 mSLcmp H 检测 2-12阀门：8 通道缓冲液切换阀8 通道大组分切换阀8 通道层析柱切换阀8 通道样品切换阀液体流动方向切换阀样品泵组分收集器（11）配件：4 提供所投标产品原厂出具的详尽的、可被验证的技术参数中英文说明书。
必须附上投标产品所示彩页，支持技术资料，点对点实质应答。
（加盖投标单位公章）5、商务条款：5.1售后服务：三年免费全包保修，终身免费维护，免收人工费，免费提供技术咨询和软件升级服务。
5.2在接到用户报修通知后，厂家保证12小时内尽快做出响应；需至用户现场维护的，保证响应后3-5日内尽快派工程师至现场；若维修时间超过二十天，厂家需提供样机供用户使用，特殊情况可商议。
5.3 自验收合格之日起半年内，若因质量问题，产品出现三次及以上同样故障的，视为产品不合格，供应商必须在买方下发通知起1个月内，产品退换。
5.4培训：中标方应负责在现场或培训基地培训买方的技术人员、操作和维护人员，在买方认可培训开始的一个月前推荐培训计划提供培训资料，培训后的人员应能熟练操作设备，了解设备结构、工作原理，并能排除一般故障。
5.5 备品、备件：投标单位对必须由原厂提供的常用备件和消耗品进行报价，该价格作为考查其售后服务能力的重要指标。
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SCG 系列标准配置： 型号 SCG 二元输液泵
流速范围 最大压力 动态混合器 流量精度、精密度 梯度类型 DAD 400EX 紫外检测器波长范围 波长精度、重复性 漂移、噪声 进样阀
电导检测器
SCG-300 进口中低压 PEEK 泵，生物惰性材料，可提供连续、稳 定的精准流速
0.1-300ml/min 500psi(3.4Mpa) 5ml ±1.2%、0.5%RSD 线性、等度、阶梯梯度，可在线修改梯度比例 2 个波长，采用进口氘灯作为光源，, ±1nm、±0.5nm 1×10-3 AU/Hr、±4×10-5 AU（1s） 自动进样，软件控制切换 Load、Inject、Waste 功能， 支持定量环和定量杯进样 检测范围 0.001-999.99mS/cm，精度±2%，检测池体积 20ul
签名等功能，保证了数据的可靠性及安全性。
SCG 蛋白纯化系统可用于:
蛋白纯化；疫苗纯化；单抗纯化；血液制品分离
纯化
多肽纯化；基因治疗药物纯化；天然药物和多糖
的纯化等领域
SCG 系统特点: 主要元部件自精选欧美知名厂商，性能优越，品质可靠。 泵： 原装进口双柱塞杆二元梯度泵，泵头为 PEEK 材质，前置设计并自带控制面板。 与蛋白等生物样品具有良好的兼容性，耐强酸、强碱、高盐； 不仅耐受高压并且在低温低压下具备良好的稳定性，具有优异的输液精度； 泵头带有自冲洗功能，避免纯化生物样品时，盐等在泵头析出，造成仪器损坏和污染； SCG 输液泵采用电子压力脉动抑制技术，为蛋白层析系统提供极佳的梯度精度和重复性，保证 纯化结果的重现性； 检测器： 紫外检测器为进口 DAD 检测器，同时提供多个波长的信号输出，可方便实时监测分离组分的纯 度； 各种阀(收集阀、八通阀、柱位阀、进样阀、柱选择阀、电磁阀等)均为国际知名厂商定制,用户 可根据实际需要选择; 液路接触部分：包括管路、流通池、动态混合器等，采用 PEEK、蓝宝石、红宝石等生物惰性 材料，与生物样品具有良好的兼容性。
柱支架
独立柱支架，适用 ID：6.6-50mm 内径的层析柱
和 1ml、5ml 预装柱
Wifi 模块
无线监控，适用 Android 手机或平板
磁力搅拌 SCG-030：标配 2ml，选配 0.6ml 或 5ml SCG-100：标配 2ml，选配 5ml 或 10ml SCG-300：标配 5ml，选配 10ml 或 15ml
1 个（标配）， 2 个（A1/A2），6 个，9 个* 1 个（标配），2 个（B1/B2），6 个，9 个* 检测到气泡，系统暂停或进入下一步方法
宝枫林
温度传感器
层析工作站 工具包
pH 检测器（推荐） 溶剂托盘（推荐）
读数范围 0-100℃，精度±1℃，可对电导、pH 进行温
度补偿 SCG 层析工作站 （包括 SCG 层析工作站软件，电脑，正版 Win7 操作系 统， 显示器） SCG 启动包 检测范围 pH 0-14，精度±0.1 溶剂放置更方便，节约空间
样品泵 泵类型 流速范围 最大压力 入口
动态混合器 混合方式 混合腔体积
系统泵入口 A 泵入口 B 泵入口 气泡传感器 *表示：SCG300 暂不支持 9 个入口
高精度柱塞杆泵，良好生物兼容性 0.001~36ml/min 0.01~100ml/min 4000psi（27MPa） 1500psi（10MPa） 标配：1 个入口 选配：6 个入口（样品选择阀）
柱位选配 柱位阀 柱选择模块 柱压差模块
收集模块 收集阀
支持 Column、Bypass 和层析柱反向流路切换 支持同时并联 5 个柱子，自动切换 支持检测柱前柱后压力变化，计算压差，保护填 料
双通道大体积收集阀（1 废液，1 收集出口）
宝枫林
六通道大体积 纯化系列-选配清单 紫外检测器 DAD600EX 紫外检测器 DAD800EX 紫外检测器 DF2EX 紫外检测器 DF1 单波长检测器 RI050 示差检测器 紫外流通池
波长范围 200-600nm，同时监测 4 个波长，2mm 光程 190-840nm，同时监测 4 个波长，2mm 光程 280/254nm，同时监测 2 个波长，2mm 光程 280nm， 仅能监测 1 个波长， 2mm 光程 2.5-5120uRIU（流速范围：1-50ml/min） 标配 2mm，可选配 5mm 或 10mm 光程
十通道大体积收集阀（1 废液，9 收集出口）
收集器型号
SCG FC-S2*
收集管数
120 个 15ml 试管 42 个 50ml 试管
180 个 8ml 试管
4 个 96 孔板
*表示：新款 FC-S2 体积更小巧，精度更高，支持的试管架种类更丰富，可支持两种不同类型
收集架-如同时放置 15ml（60 个）和 50ml（24 个）试管的收集架。
宝枫林
详情
SCG 蛋白纯化系统是为蛋白、抗体等生物样品的纯化制备而专门设计的。模块化、功能化、智
能化的设计，便于操作，方便客户根据自己的实际需要选择最适合自己的纯化系统。满足 GMP
/GLP 规范要求，符合 FDA 和 CFDA 相关法规要求，具有用户权限控制、操作记录跟踪、数字