药物含量测定方法与验证

→银量法
如：泛影酸测定
第二节 定量分析样品的前处理方法
• 泛影酸（卤素原子与芳环相连，化学键牢固）
COOH I CH3COHN I I
COONa
NaOH 回流
Zn粉
NHCOCH3
5ml，置100ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇
匀，在 229nm的波长处测定吸光度为 0.480；另精 密称取奥沙西泮对照品 0.0149g，同法操作，测得 229nm的波长处测定吸光度为 0.460；药典规定本 品 按 干 燥 品 计 算 ， 含 C15H11CIN2O2 应 为
98.0%~102.0%。该供试品含量是否合格？
含量%
（V V0） T F 103 W
100% 0.1003 10 3 0.1 100%

(14.86 0.05)33.07 0.4988
98.48%
例2. 司可巴比妥钠原料药含量测定
取本品0.1041g，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶 解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立 即密塞并振摇 1 分钟，在暗处静置 15 分钟后，注意微开瓶塞， 加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定 液（0.1012mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续 滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每ml溴滴 定液（0.05mol/L）相当于 13.01mg的C12H17N2NaO3。按干燥 品计算，含C12H17N2NaO3不得少于98.5%。已知样品消耗硫 代硫酸钠滴定液（ 0.1012mol/L ） 17.20ml ，空白实验消耗硫 代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L） 25.02ml。
含卤素元素 1 卤素与脂肪链的碳原子相连 结合不牢固。 2 卤素与芳环相连结合牢固。 1 含金属有机药物: 金属离子不直接与碳原子相连。 为有机酸及酚的金属盐或配位 化合物,金属原子结合不牢固, 在溶液中可直接离解出金属离子。 2 有机金属药物: 金属离子直接与碳原子以共价键 相连。结合状态比较牢固,在溶液 中不能直接离解出金属离子。
3. 含量的计算
V F T 含量％ 100 % W
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
例1 呋塞米含量测定
取本品 0.4988g ，加乙醇 30ml ，微温使溶解，放 冷，加甲酚红指示液 4 滴与麝香草酚蓝指示液 1 滴， 用氢氧化钠滴定液（ 0.1003mol/L）滴定至溶液显紫 红色，消耗氢氧化钠滴定液 （ 0.1003mol/L ） 14.86 ml ；并将滴定的结果用空白试验校正，消耗氢氧化 钠滴定液（0.1003mol/L）0.05ml。每1ml氢氧化钠滴 定液（ 0.1mol/L）相当于 33.07mg 的呋塞米。按干燥 品计算，含C12H11CIN2O5S不得少于99.0%。
不 经 有 机 破 坏 的 方 法
Fra Baidu bibliotek 第二节 定量分析样品的前处理方法
（2）酸水解后测定法
十一烯酸锌+ 盐酸
共沸
十一烯酸＋氯化锌
氯化锌 + EDTA-2Na
滴定
第二节 定量分析样品的前处理方法
3. 经还原分解后测定法
不 经 有 机 破 坏 的 方 法 (1)碱性还原后测定
苯环-I→碱性下＋还原剂（如锌粉） →加热回流 →无机碘
第四章 药物的含量测定方法与验证
第一节 定量分析方法的分类与特点
一、容量分析法
（一）容量分析法的特点与适用范围 方法简便易行，仪器价廉易得、操作简便、快速；
方法耐用性高；
结果准确、相对误差<0.2％； 专属性差。 适用于化学原料药的含量测定。
(二) 计算
1.滴定度（T） 每ml规定浓度的滴定液相当于被测药物的质 量（mg），单位mg/ml。 2. T的计算 aA＋bB→cC+dD
进样口温度：高于柱温30～35℃
进样量：≯数微升 检测器：FID
三、色谱法分析法 （二）气相色谱法
2. 测定方法
内标法 外标法 标准溶液加入法
第二节 样品分析的前处理方法
前处理： 分析前采用一定方法 使待测药物或元素 转化为适宜状态 满足分析方法对试样的要求
样 品 前 处 理
第二节 定量分析样品的前处理方法
含量%
A CR X D AR
m
100 %
0.0149 5 0.480 100 200 5 100 % 200 100 0.460 0.0159 99.0%
例2. 对乙酰氨基酚原料药含量测定
精 密 称 取 对 乙 酰 氨 基 酚 0.0411g ， 置 250ml容量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液 50ml， 加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml 容量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水 至刻度，摇匀。依照分光光度法，在 257nm 波长处测得吸收度为0.582。按C8H9NO2的百 分吸收系数为 719 。计算对乙酰氨基酚的百 分含量。
1% E1 cm
3. 仪器校正和检定
波长校正用汞灯中较强谱线 237.83,253.65,275.28,296.73, 313.16,334.15,365.02,404.66,435.83,546.07nm 与 576.96nm 或 用 仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm进行校正。
吸收度的检定：用 K2CrO7(60mg)+0.005mol/LH2SO4 液至
经有机破坏的分析方法
第二节 定量分析样品的前处理方法
一 不 经 有 机 破 坏 的 方 法
1. 直接测定法
（1） C-M不直接相连
配位滴定法 例如：乳酸钙 0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA滴定 钙紫红素指示剂
第二节 定量分析样品的前处理方法
（2） 适用于C-M (金属原子直接与 不 经 有 机 破 坏 的 方 法 碳原子相连）键结合不牢固的有机金
样 品 前 处 理
含金属元素
HC O C O
C
O
CH O Fe
富马酸亚铁
O HO As OH
卡巴胂 金属有机药物
NHCONH2
第二节 定量分析样品的前处理方法
根据卤素或金属在分子中结合牢固程 度不同而异。
样 品 前 处 理
不经有机破坏的分析方法
直接测定法 经水解后测定法 经还原分解后测定法
湿法破坏法 干法破坏法
1000ml。 波长(nm) 235(最小) 257(最大) 313(最小) 350(最大) 1% E1 124.5 144.0 48.62 106.6 cm 杂散光检查： 试剂 浓度(g/ml) 测定波长 透光率(%)
NaI
NaNO2
1.00
5.00
220nm
340nm
＜ 0.8
＜ 0.8
4. 对溶剂的要求:
m：滴定液的摩尔浓度 b：滴定液的摩尔数
a T M m b
a：被测药物的摩尔数
M：被测药物的毫摩尔质量
碘量法测定维生素 C （ M=176.13 ）的含量，碘 例： 滴定液的摩尔浓度为 0.05mol/L ，化学反应式如 下：
C6H8O6+I2→C6H6O6+2 HI
a 1 T m M 0.05 176 .13 8.806 (mg / ml ) b 1
C样 D C样＝ 1% 含量％＝ 100% E1cm 100 W
A
A样
含量%
1% E1 cm

1 D 100 100% W
c. 标准曲线法 A=a+bC d. 计算分光光度法 e .比色法
A
C（浓度）
例1. 奥沙西泮原料药含量测定
精密称定 0.0150g ，置 200ml 容量瓶中，加乙 醇 150ml ，于温水浴中加热，振摇使奥沙西泮溶 解，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取
第二节 定量分析样品的前处理方法
（2）酸水解后测定法 含金属的有机药物与适当的矿酸共 热，将不溶性金属盐类水解置换为可 溶性盐，然后选用配位滴定或剩余酸 碱滴定法测定。
Mg(C17H35COO)2 +H2SO4 H2SO4 + NaOH MgSO4 + 2 C17HCOOH Na2SO4 + H2O
3. 系统适用性试验 ①理论板数（n） n=5.54（tR/Wh/2）2=16（tR/W）2 ②分离度（R）
R
2(t R 2 t R1 ) W1 W2
三、色谱法分析法
③拖尾因子（T） T=W0.05h/2d1 T=0.95～1.05 ④重复性
取对照溶液，连续进样5次
其峰面积的相对标准偏差应≯2.0%
第二节 定量分析样品的前处理方法
三氯叔丁醇
不 经 有 机 破 坏 的 方 法
CCl3—C(CH3 ) 2— OH + 4NaOH
回流
(CH3 ) 2 CO+3NaCl + HCOONa +2H2O NaCl + AgNO3（定、过） AgNO3（过） + NH4SCN AgCl↓+NaNO3 AgSCN+NH4NO3
属药物,在水溶液中可以电离。
氧化还原滴定法
例如：富马酸亚铁溶于热硫酸，同时
分解释放出亚铁离子，可选用铈量法
进行测定。
O C O
HC
C
O
CH O Fe
第二节 定量分析样品的前处理方法
（3）利用药物中可游离的金属离子的氧 化性测定含量。 含锑药物游离Sb5+具有氧化性，在酸性下 氧化KI析出I2，可用Na2S2O3 滴定。 例如：葡萄糖锑钠
三、色谱法分析法
（一）HPLC
采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂 的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。 1. 对仪器的一般要求 色谱柱、检测器、流动相 2. 测定方法 内标法 外标法 如：氨酚待因片的含量测定
三、色谱法分析法
（二）气相色谱法
样品中各组分在固定相与载气间分配因分配系
数不同而分离。 1. 一般要求 载气：氮气 色谱柱：填充柱；毛细管柱
三、色谱分析法
1. 特点
高灵敏度，可达10-15g/ml ～ 10-12g/ml;
高专属性; 高效能与高速度; 分离分析同时进行。
三、色谱分析法
2.色谱法分类 吸附色谱法 分配色谱法 分离原理 离子交换色谱法 分子排阻色潽法 分离方式 纸色谱法 TLC 柱色谱法 GC HPLC
三、色谱法分析法
Sb5++2KI I2 +2Na2S2O3 Sb3+ +I2 2NaI +2Na2S4O6
O C O Sb
-
不 经 有 机 破 坏 的 方 法
CH O
CH O Sb O CH
C O-
O
2K+ 3H2O O C O
O C
O CH
O
第二节 定量分析样品的前处理方法 2. 经水解后测定法
不 经 有 机 破 坏 的 方 法 （1）碱水解后测定法 适用卤素原子与碳原子结合不牢固药 物。如卤素与脂肪碳链相连。 将含卤素的有机药物溶于适当溶剂 （如乙醇）中 , 加氢氧化钠溶液回流使其 水解 , 将有机结合的卤素转变为无机的卤 素离子,然后选用间接银量法进行测定。
220～240nm 241～250nm 251～300nm 300nm以上
溶剂+吸收池A
≤0.40
≤ 0.20
≤ 0.10
≤ 0.05
5. 含量测定 a. 对照法
A样 A标
＝
C样 C标
C样 D 含量％＝ 100% D 稀释体积 W
AX CR D AR 含量% 100% W
b. 吸收系数法
含量%
（V0 V） T F 103 W
100 %
0.1012 (25.02 17.20)13.01 10 3 0. 1 100 % 0.1041 98.9%
二、光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法（200nm～760nm) 灵敏度高，可达10-7g/ml ～ 10-4g/ml 1. 特点 准确度高，RSD（%）为2% ～5% 仪器价格低廉，操作简单，易普及，应用范围广。 2. 朗伯-比耳定律 A = Ecl
A
含量%
1% E1 cm

1 D 100
W
100%
0.582 1 100 250 5 100% 719 100 0.0411 98.5%
（二）荧光分光光度法
灵敏度高，可达10-12g/ml ～ 10-10g/ml； 1.特点 在低浓度进行测定，防止F与C不成正比及自熄灭作用； 用基准物溶液校正仪器灵敏度，防止样品液荧光衰减； 制备荧光衍生物，可提高其灵敏度和选择性。 2.干扰因素的排除 溶剂、溶液、玻璃仪器、温度 3.含量测定 常用的方法对照品比较法。 Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr