用薄层层析法检查石榴皮的鞣质

用薄层层析法检测石榴皮的鞣质Ξ

龙云惠,黄兆龙,郭亚力,郭俊明

(红河学院理学院,云南蒙自661100)

摘　要:　硅胶薄层层析法分离石榴皮的鞣质成份,斑点清晰,重现性好,灵敏度高.薄层结果证实,石榴皮鞣质含没食子酸成分,为石榴皮药用价值的研究提供科学依据.

关键词:　石榴皮;鞣质;没食子酸;薄层层析;显色剂

中图分类号:　O658 文献标识码:　A 文章编号:　1008-9128(2005)06-0025-02

石榴为石榴科,石榴属落叶灌木,原产于伊朗,我

国南北均有种植.石榴皮为石榴的果皮,中医认为,石

榴皮具有解毒止泻、止血、驱虫等作用.石榴皮含有的

化学成分主要有鞣质、树脂等,其中鞣质为石榴皮药

用的有效成分类型.现代医学研究证明[1]273-274,鞣质

还具有抑菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤抗癌变、调节血

脂[2]等作用.鞣质的结构和化学性质复杂,常分为可

水解鞣质、缩合鞣质和新型鞣质,不同结构的鞣质具

有不同的生物活性.

近年来,对石榴皮鞣质提取[3]、药理的临床研

究[4]报道甚多,但对石榴皮鞣质结构的研究却少见报道.笔者认为,确定石榴皮鞣质的类型是其医学临床研究的基本依据.常用的化学方法无法分离石榴皮的复杂成分,而纸色谱层析法[5]则有分离效果差,斑点重叠等现象.本实验采用硅胶薄层层析法,分离石榴皮鞣质,并检测到石榴皮含有可水解鞣质没食子酸,方法简便可靠,可为研究石榴皮的药用价值和其它含鞣质的中药材的有效成分提取分离提供科学依据.

1　实验部分

1.1材料与试剂

石榴皮(产地:蒙自),鞣酸(分析纯,遵义第二化工厂生产),没食子酸(分析纯,遵义第二化工厂生产),G F

254

(青岛海洋化工厂生产),无水乙醇、甲苯、甲酸乙酯、甲酸、三氯化铁、亚硝酸钠、醋酸、氢氧化钠等试剂均为分析纯.

新鲜石榴皮洗净,晾干或低温烘干,粉碎,过80目筛,称取2克石榴皮粉,用无水乙醇常温浸提24h

,过滤,得澄清提取液.对照品鞣酸配制成0.1%乙醇溶液,没食子酸配制成0.05%乙醇溶液.

1.2层析方法

提取液和对照品点样量各为5ul,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(1∶5∶1)为展开剂,卧式上行.经薄层展开后,日光下观察,鞣酸的分解产物没食子酸斑点显蓝灰色,置于紫外灯下检视,显粉红色荧光斑;喷1%三氯化铁溶液显色剂,各斑点呈深蓝色;喷亚硝酸钠-醋酸-氢氧化钠显色剂[6],没食子酸斑点显橙红色,其余斑点显黄色或灰黄色.

1.3层析结果

石榴皮提取液、没食子酸、鞣酸的层析

其T LC图见图1.

1.石榴皮提取液

2.鞣酸

3.没食子酸　a.深蓝色斑

图1　石榴皮提取液的T LC图

由图1可见,石榴皮提取液和鞣酸,在与没食子酸色谱相应的位置显相同颜色的色斑,说明石榴皮提取液中有可水解鞣质没食子酸.

2　小结与讨论

(1)硅胶薄层层析检测石榴皮鞣质,未见报道.层析

　第3卷　第6期 红河学院学报 V ol.3　N o.6　2005年12月 Journal of H onghe University Dec.2005Ξ收稿日期:2005-10-11

作者简介:龙云惠(1974-),女,云南个旧人,讲师,主要从事分析化学教学及科研工作.

后,得石榴皮有效成分的5个斑点,斑点清晰,无拖尾,重现性好,灵敏度高.

(2)从薄层结果可知,石榴皮鞣质含没食子酸成分.文献介绍[1]274,鞣质的驱虫作用,与分子中含四个以没食子酰基的可水解鞣质的协同作用有关.石榴皮具有的抗病毒[8]、抑菌等作用,是否仅与此没食子酸成分有关,或是石榴皮中还含有其它类型的鞣质成分,这些都需进一步的研究.

(3)鞣质结构不稳定,容易受温度等因素影响.由于石榴皮中含有糖、树胶等成分,高温回流时会产生凝胶,影响鞣质的提取分离.要使用石榴皮鞣质中没食子酸的药效,应使用乙醇、丙酮等有机溶剂在常温下浸提.

(4)常用的鞣质显色剂1%三氯化铁、三氯化铁-铁氰化钾等,样品的有效成分与没食子酸显示相似的斑点.本法采用36%醋酸-0.1m olΠL亚硝酸钠混匀,喷湿层析板,待干透后,用10%氢氧化钠喷至碱性色.亚硝酸钠使没食子酸斑点独显橙红色,其它斑点呈现黄色或灰黄色,无干扰,专属性强.

(5)由资料可知[1]258,本文使用甲苯-甲酸乙酯-甲酸(1∶5∶1)进行层析,近似于分离鞣花酸鞣质的比例,石榴皮的水解鞣质有可能既含有没食子酰基,又含鞣花酰基.虽然水解鞣质分为没食子鞣质和鞣花酸鞣质在化学上并无重要意义,但在制革工业中,鞣花酸可使皮革坚固而美观.笔者将对石榴皮鞣质的结构做进一步研究.

参考文献:

[1]　姚新生.天然药物化学[M].北京:人民卫生出版社,

1997.

[2]　孟甄,孙立新,陈芸芸,杜立军等.石榴叶鞣质对高血脂

高血压模型动物代谢的影响[J].中国实验方剂学杂志, 2005,(1):23-24.

[3]　陈志勇,张玉霞.石榴皮重天然黄黄色素的提取与性能

测试[J].林产化工通讯,2002,(4):16-18.

[4]　张　杰,周江桥,詹炳炎.中药石榴皮队淋球菌感染的体

内外抑制作用[J].中国皮肤性病学杂志,1996,(2):75-

76.

[5]　林顺.中草药,1984,15(11):18.

[6]　雷其云,赵越平,罗洪汉等.用薄层层析法检测鞣质[J].

中国中药杂志,1997,(5):287-289.

[7]　张杰,詹炳炎,姚学军等.石榴皮队乙型肝炎病毒(H BV)

的体外灭活作用及其临床意义[J].中药药理与临床意义,1997,(4):29-31.

[责任编辑　自正发]

Determination of the T annis in G ranatum by T LC

LONG Yun-hui,HUANG zhao-long,G UO Ya-li,G UO Jun-ming

(Chenistry Department,Science C ollege,H onghe University,Mengzi,661100,China) Abstract:　The tannis,which is separated by T LC(silic gel),leads to clear spots,high recurrence,and g ood sensi2 tivty.The result show that the tannis in granatum contains gallic acid.It gives scientific testim ony for study on medical value of granatum.

K ey w ords:　granatum;tannis;T LC;gallic acid;color-develop in agent

62红河学院学报 2005.6Π科学技术与应用