胚胎移植课件
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2.胚胎移植技术的发展简史
• 2.1初始阶段 • 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内， 分别获得仔兔2只。 • 2.2初级阶段 • 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左 右。
素②注射促性腺激素释放激素③注射前列腺素 等。
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同期发情的方法
1.孕激素阴道栓法 孕激素可通过口服、注射、皮下
埋植和阴道放置孕激素缓慢释放装置等方法。皮 下埋植或阴道放置缓慢释放装置使用方便易行、 效果可靠、成本低廉，尤其是阴道栓法。 2.前列腺素及其类似物处理法 对有功能性黄体的母 畜于注射后4896h内发情：一次PG法、二次PG 法
一 、胚胎移植概述
1.胚胎移植的概念 2.胚胎移植技术的发展简史 3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
2018/11/9
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1.胚胎移植的概念
胚胎移植（embryo transfer,ET）也称受精 卵移植，是指将一头良种母畜配种后的早期 胚胎取出，或者由体外受精及其他方式获得 的胚胎，移植到另一头同种的生理状态相同 的母畜体内，继续发育成为新个体，所以又 称之为人工授胎或借腹怀胎。 • 提供胚胎的个体称为------供体（donor） • 接受胚胎的个体称为------受体（recipient）
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4、供体配种
• 人工授精
• 自然交配 配种次数应比平常多12次
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5、胚胎回收与鉴定
• 收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间，从超排供体回 收其胚胎，以备给受体移植，亦称胚胎回收或胚胎采集， 简称采卵。采卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均有 关系。 （1）采卵时间：一般将配种当日定为0 天，由配种后第二 天开始计算采卵天数。根据采集目的不同，决定在第几天 采卵。 （2）采卵方法：有手术法和非手术法两种。在大家畜基本 上已将手术法淘汰，但在绵羊、山羊、猪和实验动物由于 受解剖特点的限制，一直采用手术方法。不管用何种方法， 一般收集卵子数只能相当于黄体数的40～80％。
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• 2.3发展阶段 • 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功， 之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎 移植成功率达70-80%。
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• 2.4实用化初始阶段 1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司， 1973年牛冻胚移植成功（英）。 • 2.5实用化研究阶段 1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、 胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日 德广泛开展。克隆羊诞生。
1.胚胎移植的生理学基础 2.胚胎移植的基本原则
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1.胚胎移植的生理学基础
• 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在外源激 素作用下，每个发情期的卵泡发育和排卵数可达十 数个； • 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育； • 早期胚胎处于游离状态； • 胚胎发育不存在免疫问题； • 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组联系； • 胚胎的遗传性不受受体的影响；
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3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
1.提高优良母畜繁殖力,加快优良品种改良和动物育
种步伐； 2.诱导双胎； 3.濒危动物的拯救与保护。将胚胎移入同种或近缘 种生殖道内，以获得存活动物；
4.保存遗传资源、胚胎库；
5.胚胎移植是胚胎工程操作的重要步骤。
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二、胚胎移植的生理学基础与 基本原则
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2. 胚胎移植的基本原则
① 种的一致性：供体和受体属于相同的种
② 动物生理状态的一致性：黄体期
wenku.baidu.com
③ 解剖部位的一致性：子宫角或者输卵管
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胚胎移植原则图解
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三、胚胎移植的技术程序
1、供受体的选择与饲养管理
供体
– 遗传品质优秀 – 繁殖性能良好 – 营养状况好，体格健壮 – 无疾病
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各种动物的超排程序
牛：供体发情后913d中的任何一天开始（日本
进口FSH为9~11天）连续4d （8次）递减注射 FSH，在FSH注射结束前1d，上、下午分别注射 氯前列烯醇0.6mg和0.4mg 绵羊：FSH剂量（150300 IU）周期为12天，开 始注射，6次3d，递减，在第4天注射FSH时，肌 肉注射氯前列烯醇0.2mg。
超排应用的主要激素
– 促性腺激素 FSH（中科院动物所 宁波 加拿大 日本）
PMSG（eCG）及APMSG（抗PMSG） LH hCG
– GnRH（促排3号）
–
P4
– PG（氯前列烯醇 Cloprostenol，ICI-80996）
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• 超排方法：在发情周期的一定时期， 用PMSG或FSH促进卵泡发育，于发 情开始后12-16h和20-24h各配种 （输精）一次，并于第一次配种后 静脉注射hCG或LH，以便排出多数 卵子。
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超排效果不好的 卵巢黄体
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3.受体的同期发情
对母畜进行同期发情一般采取两种手段：
– 一种是延长黄体期：最常用的方法是进行孕激素处理。
常用的有孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、氯地孕
酮等。处理方法是皮下埋植、阴道栓、口服和肌肉注
射等。
– 另一种方法是缩短黄体期的方法有①注射促性腺激
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各种动物的超排程序
山羊：减量法6次注射3d， 100IU×1＋75IU×1＋
50IU×3＋25IU=350IU 或 100＋50×4＋ 25×1=325IU，首次注射后36h撤栓，并在36h和
48h分别注射PG 0.1mg。
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超排效果好的卵巢 黄体
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三、胚胎移植的技术程序
受体
– 土种动物或者本地品种 – 体格接近，营养良好 – 无疾病 – 繁殖生理特点与供体相似，比如多周期发情
移植前2个月进行编号和补饲
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三、胚胎移植的技术程序
2.供体超数排卵 Superovulation or Multiple ovulation
2.胚胎移植技术的发展简史
• 2.1初始阶段 • 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内， 分别获得仔兔2只。 • 2.2初级阶段 • 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左 右。
素②注射促性腺激素释放激素③注射前列腺素 等。
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同期发情的方法
1.孕激素阴道栓法 孕激素可通过口服、注射、皮下
埋植和阴道放置孕激素缓慢释放装置等方法。皮 下埋植或阴道放置缓慢释放装置使用方便易行、 效果可靠、成本低廉，尤其是阴道栓法。 2.前列腺素及其类似物处理法 对有功能性黄体的母 畜于注射后4896h内发情：一次PG法、二次PG 法
一 、胚胎移植概述
1.胚胎移植的概念 2.胚胎移植技术的发展简史 3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
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1.胚胎移植的概念
胚胎移植（embryo transfer,ET）也称受精 卵移植，是指将一头良种母畜配种后的早期 胚胎取出，或者由体外受精及其他方式获得 的胚胎，移植到另一头同种的生理状态相同 的母畜体内，继续发育成为新个体，所以又 称之为人工授胎或借腹怀胎。 • 提供胚胎的个体称为------供体（donor） • 接受胚胎的个体称为------受体（recipient）
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4、供体配种
• 人工授精
• 自然交配 配种次数应比平常多12次
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5、胚胎回收与鉴定
• 收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间，从超排供体回 收其胚胎，以备给受体移植，亦称胚胎回收或胚胎采集， 简称采卵。采卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均有 关系。 （1）采卵时间：一般将配种当日定为0 天，由配种后第二 天开始计算采卵天数。根据采集目的不同，决定在第几天 采卵。 （2）采卵方法：有手术法和非手术法两种。在大家畜基本 上已将手术法淘汰，但在绵羊、山羊、猪和实验动物由于 受解剖特点的限制，一直采用手术方法。不管用何种方法， 一般收集卵子数只能相当于黄体数的40～80％。
2018/11/9 3
• 2.3发展阶段 • 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功， 之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎 移植成功率达70-80%。
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• 2.4实用化初始阶段 1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司， 1973年牛冻胚移植成功（英）。 • 2.5实用化研究阶段 1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、 胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日 德广泛开展。克隆羊诞生。
1.胚胎移植的生理学基础 2.胚胎移植的基本原则
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1.胚胎移植的生理学基础
• 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在外源激 素作用下，每个发情期的卵泡发育和排卵数可达十 数个； • 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育； • 早期胚胎处于游离状态； • 胚胎发育不存在免疫问题； • 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组联系； • 胚胎的遗传性不受受体的影响；
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3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
1.提高优良母畜繁殖力,加快优良品种改良和动物育
种步伐； 2.诱导双胎； 3.濒危动物的拯救与保护。将胚胎移入同种或近缘 种生殖道内，以获得存活动物；
4.保存遗传资源、胚胎库；
5.胚胎移植是胚胎工程操作的重要步骤。
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二、胚胎移植的生理学基础与 基本原则
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2. 胚胎移植的基本原则
① 种的一致性：供体和受体属于相同的种
② 动物生理状态的一致性：黄体期
wenku.baidu.com
③ 解剖部位的一致性：子宫角或者输卵管
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胚胎移植原则图解
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三、胚胎移植的技术程序
1、供受体的选择与饲养管理
供体
– 遗传品质优秀 – 繁殖性能良好 – 营养状况好，体格健壮 – 无疾病
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2018/11/9
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各种动物的超排程序
牛：供体发情后913d中的任何一天开始（日本
进口FSH为9~11天）连续4d （8次）递减注射 FSH，在FSH注射结束前1d，上、下午分别注射 氯前列烯醇0.6mg和0.4mg 绵羊：FSH剂量（150300 IU）周期为12天，开 始注射，6次3d，递减，在第4天注射FSH时，肌 肉注射氯前列烯醇0.2mg。
超排应用的主要激素
– 促性腺激素 FSH（中科院动物所 宁波 加拿大 日本）
PMSG（eCG）及APMSG（抗PMSG） LH hCG
– GnRH（促排3号）
–
P4
– PG（氯前列烯醇 Cloprostenol，ICI-80996）
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• 超排方法：在发情周期的一定时期， 用PMSG或FSH促进卵泡发育，于发 情开始后12-16h和20-24h各配种 （输精）一次，并于第一次配种后 静脉注射hCG或LH，以便排出多数 卵子。
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超排效果不好的 卵巢黄体
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3.受体的同期发情
对母畜进行同期发情一般采取两种手段：
– 一种是延长黄体期：最常用的方法是进行孕激素处理。
常用的有孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、氯地孕
酮等。处理方法是皮下埋植、阴道栓、口服和肌肉注
射等。
– 另一种方法是缩短黄体期的方法有①注射促性腺激
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各种动物的超排程序
山羊：减量法6次注射3d， 100IU×1＋75IU×1＋
50IU×3＋25IU=350IU 或 100＋50×4＋ 25×1=325IU，首次注射后36h撤栓，并在36h和
48h分别注射PG 0.1mg。
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超排效果好的卵巢 黄体
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三、胚胎移植的技术程序
受体
– 土种动物或者本地品种 – 体格接近，营养良好 – 无疾病 – 繁殖生理特点与供体相似，比如多周期发情
移植前2个月进行编号和补饲
2018/11/9 12
三、胚胎移植的技术程序
2.供体超数排卵 Superovulation or Multiple ovulation