花粉活力测定
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花粉活力测定
一、实验原理:
TTC染色法——TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲潛(TTF)。用TTC的水溶液浸泡花粉,使之渗入花粉内,如果花粉具有生命力,其中的脱氢酶就可以将TTC作为受氢体使之还原成为红色的TTF;如果花粉死亡便不能染色;花粉生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色。因此,可以根据花粉染色的深浅程度可鉴定花粉的生命力。
二、实验仪器:载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、毛笔、滤纸、培养皿、三角瓶、天平、烧杯、恒温箱、量筒、吸管
三、实验药品:0.5%TTC溶液、琼脂、硼酸、氯化钙、蒸馏水、蔗糖(浓度分别为5%、10%、15%、20%)
四、实验步骤:
TTC法:将采集到的花粉(虞美人、三色堇),取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC 溶液,搅匀后盖上盖玻片,并用清水做对照,置37℃恒温箱中,30min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。每片取3个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
五、实验结果:
TTC法:虞美人花粉活力——26.1%
三色堇花粉活力——23%
六、结果分析:
1、TTC法:三色堇花粉染色在30分钟时观察时基本没有染色,50分钟左右观察,才有明显染色的划分出现,原因可能是花粉对TTC的敏感度不同