泥鳅实验报告

泥鳅的催青、人工授精和胚胎发育的整体观察

11级生科三班程旖、陈晓凤、杨祖勤、苏巧、巩雪、程程、张金萍、陈宇霖、崔凯一、实验目的

掌握泥鳅的催青和人工授精技术，观察鱼类胚胎发育过程的形态变化。

二、实验原理

HCG（人绒毛膜促性腺激素）可促进雌雄性腺的发育而产卵或排精。人工获取精子和卵子并使两者在体外融合形成受精卵的过程即称为人工受精。在显微镜下可观察到受精卵在孵化过程中出现细胞数目和形态的显著变化。

三、材料用具和试剂

1.材料用具

泥鳅（8条雌性，2条雄性）、塑料盆2个、漏盆1个、培养皿8个、纱布1块、吸管2支、解剖剪、镊子、注射器

2.试剂

HCG、曝气水

四、实验步骤

1.催青

5月9日晚19:00取雌鱼，在腹部注射HCG（浓度为500µl/ml），150µl/条。

2.人工授精

5月10日早8:00取雌性泥鳅，用右手指由前向后挤压鱼的腹部挤出鱼卵，置于培养皿中。取雄性泥鳅剪掉头部，从泄殖孔剪开腹部。用镊子取出背部的两条白色精巢，放在干净的培养皿中（不要有水），用剪刀剪碎。精子加水激活，倒到装有卵的培养皿中进行授精（1~2min内完成）。

3.整体观察

在显微镜4x物镜下观察受精卵发育过程，并拍照记录。

五、观察结果

表1 泥鳅的胚胎发育时序表(水温: 20~25℃)

序号发育时期各发育时期简要特征记录时间历时(h: min) 图序

1 受精卵圆粒状,淡黄色,卵质分布均匀0:00

2 胚盘期胞质集中到动物极，胚盘隆起

3 2细胞期第1次卵裂,纵裂为2个细胞9:21 1

4 4细胞期第2次卵裂,纵裂为2排4个细胞9:56 2

5 8细胞期第3次卵裂,8个细胞分列2排10:08 3

6 16细胞期第4次卵裂,16个细胞分列4排10:23 4

7 32细胞期第5次卵裂,产生32个细胞10:49 5

8 64细胞期第6次卵裂,产生64个细胞11:13 6

9 多细胞期细胞越分越小,由单层变为多层11:26 7

10 高囊胚期囊胚层隆起12:02 8

11 低囊胚期囊胚层下降14:36 9

12 原肠早期胚层下包1/3~1/2 15:03 10

13 原肠中期胚层下包1/2~2/3 15:32 11

14 原肠晚期胚层下包2/3~5/6 15:59 12

16 神经胚期胚层下包5/6,形成卵黄栓16:37 13

17 胚孔封闭期胚孔完全封闭17:53 14

18 肌节出现期胚体头部增大,肌节出现19:21 15

19 眼囊期出现眼囊21:09 16

20 尾芽期尾端伸出锥状尾芽00:11 17

21 肌肉效应期肌肉微抽动03:12 18

22 嗅囊出现期眼前端出现嗅囊04:34 19

23 心脏原基期心脏原基出现,尾向上弯至头部05:43 20

24 耳石出现期听囊出现2颗耳石06:42 21

25 心脏搏动期心脏有节律搏动,尾部剧烈摆动,胚08:00 22

体在卵膜内转动

26 孵出期胚体破膜而出,初孵仔鱼全长4mm 12:18 23

泥鳅胚胎发育图

1. 2细胞期；

2. 4细胞期；

3. 8细胞期；

4. 16细胞期；

5. 32细胞期；

6. 64细胞期；

7.多细胞期；

8.高囊胚期； 9.低囊胚期； 10.原肠早期； 11.原肠中期； 12.原肠晚期； 13.神经胚期； 14.胚孔封闭期； 15.肌节出现期； 16.眼囊期； 17.尾芽期； 18.肌肉效应期； 19.嗅囊出现期； 20.心脏原基期；

21.耳石出现期； 22.心脏搏动期； 23.孵出期

（备注：有些时期的照片由于拍得不清楚或无法展示动态过程而不能完全反映胚胎的形态特

征，如肌肉效应期，心脏原基期，耳石出现期，心脏搏动期等。）

参考文献：

［1］王宝森,姚艳红,王志坚.短体副鳅的胚胎发育观察［J ］.淡水渔业,2008.38(2):70~73.

［2］孟庆磊,朱永安,王玉新,郑玉珍,王锡荣,赵传勇.大鳞副泥鳅胚胎发育观察［J ］.齐鲁渔业,

2010.27(11):8~10.