洋葱细胞有丝分裂临时装片制作

后期
模 式 图
观 察 图
末期
某同学做“观察植物细胞的有丝分裂”实验，步
骤和结果记录如下：切取洋葱根尖2—3毫米，放入 l0％的龙胆紫溶液中染色3—5分钟，再放入丙酮溶 液中解离3—5分钟，用清水漂洗10分钟，经压片处
理，制成装片。在低倍镜下看到装片，在高倍镜下
找到分生区，可观察到分生区的多数细胞处于分裂
• 同时，解离也可适当清除部分细胞质，使细 胞质背景趋 于透明化，便于观察染色体。
染色
解离后吸出HCl，蒸馏水洗2次，每次3-5min。
将根尖置于载玻片中间，切去根冠，从乳白色分生 组织切取尽可能薄的一片，滴加20μl改良苯酚品 红染液，染色10-15min。
压片方法
在经染色的材料上加一滴染 液，盖上盖玻片，覆一层吸水纸， 用左手一个手指压住盖玻片的一 角，右手用带橡皮头的铅笔/镊子 垂直敲打，或以拇指垂直紧压盖 片（压片必须用力适当，注意勿 使盖片移动），使材料分散压平， 便于观察。
玻璃皿，剪刀，镊子，滴管，解剖针，洋 葱根尖细胞有丝分裂固定装片等。
培养
• 在实验课前3～4天， 取洋葱一个，放在广 口瓶上，装满清水， 让洋葱的底部接触瓶 内的水面。把广口瓶 放在温暖的地方培养。 待根长约5 cm时，取 健壮的根尖制成临时 装片。
材料预处理
• 本实验中：切取长约5mm的洋葱根尖，浸0.1%秋水仙 素中或0.002mol/L 8-羟基喹啉，以药液浸没根尖为度， 室温下处理3-6小时。
• 本任务中固定的目的是为了有利于对有丝分裂中染色体 的观察和计数。通过抑制和破坏纺锤丝的形成来获得更多 的中期分裂相；同时还可改变细胞质的粘度，促使染色体 缩短和分散，便于压片和观察。
材料固定
材料经预处理后，用蒸馏水冲洗2次，然后投 入卡诺固定液中固定20～24h（材料不要 太多，温度4-15℃），用95％的乙醇洗两 次后，转入70％乙醇中4℃保存备用。
解离
将根尖用蒸馏水冲洗后，放入1mol/L的盐 酸 （1.5ml离心管，每管放入2根）中， 60℃水浴，恒温条件下解离10-15min。
解离的目的
• 植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用， 分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体，因此 在压片之 前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使 细胞间易于分离， 这一操作称为解离。
二、固定装片的观察 1、取（洋葱根尖有丝分裂）固定装片，置于显 微镜通光孔中央。 2、低倍镜下找到生长点区域（细胞呈正方形，排 列紧密整齐），移到视野正中央。 3、高倍镜下用指针指出前期，中期，后期，末 期细胞。
实验现象
根据固定装片，观察和记录 根据临时装片，观察和记录
前期
模 式 图
观 察 图
中期
洋葱细胞有丝分裂临时装片制作
实验步骤
培养 取材百度文库解离 固定 漂洗 染色 压片
实验材料用具
• 1．生物材料：洋葱（或蒜、葱等）。 • 质量分数为15%的盐酸溶液； • 体积分数为95%的酒精溶液； • 质量浓度为0.01 g/mL或0.02 g/mL的龙胆紫
溶液（或醋酸洋红液）。 • 2．实验用具：显微镜，载玻片，盖玻片，
期。处于分裂前期、中期、后期的细胞，染色体数
目清晰可辨。
请你纠正上述记录中的六处错误：
(1)
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(1) 切取根尖后，应先放入解离液中解离， 而不是先染色
(2) 解离液应用15％HCl和95％酒精混合液 (1:1)，而不是用丙酮溶液
(3) 染色液应用质量分数为0.0lg／mL或 0.02g／mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色
(4) 应首先在低倍镜下看清楚物像后，再移动 装片，找到分生区细胞
(5) 因细胞分裂间期较长，因此，在高倍镜下 看到的分生区的多数细胞应处于分裂间期
(6) 在高倍镜下，看到处于分裂中期的细胞， 染色体数目清晰可辨，而不是前期或后期
汇报完毕 谢谢大家
固定目的
– （1）迅速防止细胞死亡后的变化，如自溶、腐败等， 尽量保持生长状态结构。
– （2）使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物 质，以保持生前的形态。
– （3）使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于 观察和鉴定。
– （4）是不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染 色。
– （5）防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。