Agilent1200型高效液相色谱仪操作手册

Agilent 1200 LC

（中文版 B01.01）

现场培训教材

安捷伦科技有限公司

生命科学与化学分析仪器部

一、培训目的：

●基本了解1200LC硬件操作。

●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。

二、培训准备：

1、仪器设备：Agilent 1200LC

●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。

● G1313A（标准型自动进样器）。

● G1316A（柱温箱）。

● G1314A（VWD检测器）。

● G1362A（示差检测器）。

●色谱柱: Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column P/N 993967-902

2、溶剂准备：

●色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。

●二次蒸馏水

基本操作步骤:

(一)、开机：

1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。

2、打开 1200 LC 各模块电源。

3、待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与1200LC

通讯，进入的工作站画面如下所示。

4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“显示顶部工具栏”，“显示状态工具栏”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中。

6、打开冲洗阀。

7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。

8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。

9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。

11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：1.0ml/min。

12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击“确定”。

（二）数据采集方法编辑：

1、开始编辑完整方法：

●从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，

点击“确定”，进入下一画面。

2、方法信息：

●在“方法注释”中加入方法的信息（如：测试方法）。

●点击“确定”，进入下一画面。

3、泵参数设定：（以四元泵为例）

●在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表” ,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。

●点击“确定”，进入下一画面。

4、自动进样器参数设定:（以标准G1313为例）

●选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 5.0ul ,洗瓶位置为6号。“标准进样”----

只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式

针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“使用进样器程序”---可以点击“编辑”按钮进行进

样程序编辑。

●点击进“确定”，进入下一画面。

5、柱温箱参数设定:

●在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。并选中它,点击“更多>>”键,如图所示,选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。

●点击“确定”，进入下一画面。

6、VWD检测器参数设定:

●在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。

●在“时间表”中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。点击“确定”，进入下一画面。

7、RID检测器参数设定:

●色谱条件:

进样体积: 20ul 。光学单元温度: “关闭”。

极性: “正极性”。峰宽(响应时间) : 4s 。

●如图所示: “光学部件温度”---若环境温度控制在±2℃,设定为“关闭”, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“峰宽 (响应时间)”---大多数分析设为“4s”，只有在高速分析下设为更短。“分析后自动循环”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。

● ***** 点击RID图标，选择RID Control ：Heater 设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为ON。手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。

8、在“运行时选项表”中选中“数据采集”，点击“确定”。

9、点击“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定”。

10、从菜单“视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后点击“改变…”钮,

将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。(如同时检测二个信号,则重复10,选中“信号窗口2”。

单击“改变”键，即可弹出右侧的

“编辑信号图谱”窗口，进而选择

所需的谱图信号。

11、从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，如下图所示，输入操作者名称，如“安

装工程师”；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。

区别: 手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。 Pr—在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001，vwd数据0002……。

12、点击“确定” ,从“仪器”菜单选择“系统开启”。

13、等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”，进样。(若无自

动进样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。)

（DAD, VWD色谱图如下所示：）