高效液相色谱和气相色谱的异同点
高效液相色谱法与气相色谱法的异同点
高效液相色谱法与气相色谱法的异同点
高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）是两种常用的色谱分析技术，它们在很多方面有着相似之处，但也存在一些重要的异同点。
相同点：
1. 原理基础：HPLC和GC都是基于色谱技术原理进行分析的方法，通过样品在固定相上的分离和柱后检测，以实现对样品组分的定性和定量分析。
2. 色谱柱：两种方法都需要使用色谱柱，根据分析需要选择合适的柱材、柱长、柱内填料等参数。
异同点：
1. 原理差异：HPLC使用液相作为流动相，样品在固定相上通过向下流动的方式进行分离；GC使用气相作为流动相，样品在固定相上通过向上升华/蒸发的方式进行分离。
2. 适用性差异：HPLC适用于溶解性较好的化合物，包括有机化合物、药物、天然产物等；GC主要适用于易挥发性和热稳定性较好的样品，如气体、揮發性有机物等。
3. 检测器差异：HPLC常用的检测器包括紫外可见光谱检测器、荧光检测器、电化学检测器等；GC常用的检测器包括火焰离子检测器（FID）、氮磷检测器（NPD）、质谱检测器等。
4. 分离效果差异：由于液体的性质更容易充分覆盖样品分子的各种结构，使得HPLC的分离效果更好；而气相色谱的分离效果较差，相对于HPLC而言，GC
更加适合分离在液相色谱中无法分离的化学物质。
5. 分析速度差异：HPLC分析速度相对较慢，通常需要几分钟到几十分钟不等；GC分析速度较快，通常只需要几秒到几分钟不等。
综上所述，HPLC和GC方法在原理、适用性、检测器、分离效果和分析速度等方面存在一定的异同点，根据不同的分析需求和样品特性选择合适的方法进行分析。
液相色谱与气相色谱的异同点
液相色谱与气相色谱的异同点
液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）
和气相色谱（Gas Chromatography，GC）都是常见的分离分析方法，它们的主要异同点如下：
相同点：
1. 原理：都是基于样品在移动相和固定相之间的分配平衡来实现分离的。
2. 色谱柱：都需要特定的色谱柱用于分离分析，色谱柱的选择对于分离效果至关重要。
3. 检测器：可以使用不同类型的检测器，如紫外/可见光检测器、荧光检测器等。
4. 数据处理：都需要对检测到的数据进行处理和分析。
异同点：
1. 移动相：液相色谱使用液体作为移动相，气相色谱使用气体作为移动相。
2. 固定相：液相色谱使用固定于色谱柱内部的固定相，气相色谱使用涂覆在固定相上的液体固定相。
3. 分析范围：液相色谱适用于分析极性化合物，气相色谱适用于分析非极性化合物。
4. 分析速度：液相色谱分析速度较慢，气相色谱分析速度较快。
5. 样品状态：液相色谱适用于液态样品，气相色谱适用于气态和固态样品。
6. 分离机理：液相色谱分离主要基于样品与固定相之间的物理相互作用，如极性、氢键等；气相色谱分离主要基于色谱柱中的固定相与样品的挥发性和热性质之间的相互作用。
7. 使用领域：液相色谱常用于生物医药、食品安全、环境监测等领域，气相色谱常用于石油化工、环境监测、毒理学等领域。
需要注意的是，液相色谱和气相色谱并不是互相替代的，而是根据不同的分离需求和样品特性选择使用的。
简述高效液相色谱法与气相色谱法的异同点
高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）是两种常用的色谱分析技术，它们在原理和应用上有一些异同点。
相同点：
原理：HPLC和GC都是基于分离样品中不同成分的相互作用力差异来实现分析的。
两者都利用了色谱柱对样品中的化合物进行分离，然后通过检测器检测分离后的化合物。
分离机制：HPLC和GC的分离机制不同，HPLC是基于样品中化合物在固体或液态固定相上的相互作用力差异进行分离，而GC是基于化合物在气相载气流动相中的分配与迁移行为进行分离。
检测器：HPLC和GC都需要使用不同的检测器来检测分离后的化合物。
常见的检测器包括紫外-可见吸收检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
异同点：
载流相不同：HPLC中使用液相作为载流相，而GC中使用气相作为载流相。
样品状态：HPLC适用于液态样品的分析，如水溶液、溶液等；而GC适用于气态或易挥发化合物的分析，如气体、揮发性有机化合物等。
分析速度：通常情况下，GC的分析速度比HPLC更快，因为气相色谱分析中气相载气流动相的流速较高。
分析范围：HPLC适用于对各种物质的分析，包括极性、非极性和大分子化合物；而GC主要适用于易挥发有机化合物的分析。
分析灵敏度：HPLC通常具有较高的灵敏度，可以检测到较低浓度的物质；而GC的灵敏度相对较低，一些浓度较低的化合物可能无法被检测到。
总体而言，HPLC和GC在分析原理、应用范围和分离机制上有一些区别，选择哪种方法取决于待分析物的性质和分析要求。
气相色谱与液相色谱的异同点
气相色谱与液相色谱的异同点
气相色谱与液相色谱是常见的两种色谱分离技术，它们有一些明显的异同点。
下面是它们的异同点：
异同点：
1. 色谱原理
气相色谱和液相色谱的分离原理不同。
气相色谱是基于化合物在不同的气相和固相之间平衡分配系数不同来实现分离的，而液相色谱则是利用化合物在不同移动相和固定相之间的相互作用力来实现分离的。
2. 色谱柱
气相色谱使用的是毛细管柱，直径通常在0.1-0.53毫米之间，长度通常在30-100米之间。
液相色谱使用的是液相色谱柱，直径通常在2.1-4.6毫米之间，长度通常在30-250毫米之间。
3. 检测器
气相色谱和液相色谱使用的检测器不同。
气相色谱通常使用热导检测器、火焰离子化检测器、质谱检测器等，而液相色谱则常用紫外可见光谱法、荧光谱法和电导检测器等。
4. 分离速度
气相色谱的分离速度比液相色谱快，这是因为气体流动速度快于液体流动速度。
5. 适用范围
气相色谱适用于气体和揮发性化合物的分离，如石油产品、烷烃、酮类、醇类等；而液相色谱适用于分离不易挥发的物质，如有机酸、药物、脂肪酸等。
6. 应用领域
气相色谱适用于食品、医药、环境监测等领域，而液相色谱适用于农业、食品、医药、环境监测等领域。
总的来说，虽然气相色谱和液相色谱有一些相同之处，但是它们的分离原理、柱型、检测器、应用领域等方面也有很多不同之处，因此在具体应用时需要根据实际情况选择合适的色谱技术。
气相色谱法和高效液相色谱法的相同和不同之处
气相色谱法和高效液相色谱法的相同和不同之处
气相色谱法和高效液相色谱法是两种常用的分离和分析方法，二者在某些方面有相同之处，也存在一些不同之处。
相同之处：
1. 都可以用于分离和分析复杂的混合物。
2. 都需要使用仪器进行分析。
3. 都可以采用不同的检测方法，如紫外光谱检测、荧光检测等。
4. 都需要使用特定的柱子和填料来实现分离。
不同之处：
1. 气相色谱法是利用气相作为流动相，样品在柱子中被气相携带进行分离，而高效液相色谱法则是利用液相作为流动相，样品在柱子中被液相携带进行分离。
2. 气相色谱法可以分离挥发性和半挥发性物质，而高效液相色谱法则更适合分离不挥发性的物质。
3. 气相色谱法的分离速度较高，而高效液相色谱法的分离速度较慢。
4. 气相色谱法常用于分析有机化合物，而高效液相色谱法可以用于分析有机化合物、生物化学物质和无机化合物等。
5. 气相色谱法的检测灵敏度较高，而高效液相色谱法的检测灵敏度较低。
总的来说，气相色谱法和高效液相色谱法都有其各自的优缺
点，在实际应用中需要根据不同的分析目的和样品的特性来选择合适的方法。
气相与液相色谱的异同点
气相色谱法与高效液相色谱法的异同点气相色谱法和高效液相色谱法是色谱法中的一种，因流动相物态不同，才有此分类。
一、气相色谱法与高效液相色谱法的不同点1、流动相气相色谱法的流动相是气体（又称载气），液相色谱法的流动相为液相（又称淋洗液）。
2、分类（按固定相不同）气相色谱法中，按固定相不同可分为：气---固色谱法；气---液色谱法。
高效液相色谱法中，按固定相不同可分为：液---固色谱法；液---液色谱法。
3、固定相气固（液固）色谱的固定相：多孔性的固体吸附剂颗粒，如活性炭，活性氧化铝，硅胶等。
气液（液液）色谱的固定相：化学惰性的固体微粒（担体），固定液+担体。
4、特点气相色谱法的特点：高效能、选择性好、灵敏度高、操作简单、应用广泛。
高效液相色谱法的特点：高压、高速、高效、高灵敏度。
5、应用范围气相色谱法的应用范围：对于难挥发和热不稳定的物质是不适用的。
高效液相色谱法的应用范围：从原则上说，高沸点难挥发且相对分子质量大的有机物都适用。
6、分离机理（1）气相色谱法：气相色谱是一种物理的分离方法。
利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。
（2）液相色谱法：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
概括为：气固色谱的分离机理: 吸附与脱附的不断重复过程；气液色谱的分离机理：气液(液液)两相间的反复多次分配过程。
液固色谱的分离机理：溶质分子和溶剂分子对吸附剂活性表面的竞争吸附。
7、仪器构造（1）气相色谱法：由载气系统、进样系统、色谱柱、检测系统和数据处理系统组成。
进样系统、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
（2）液相色谱法：高效液相色谱仪主要由进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。
高效液相色谱分析法和气相色谱法的区别
高效液相色谱分析法和气相色谱法的区别高效液相色谱分析法(HPLC)，它的基本概念及理论基础（如保留值、塔板理论、速率理论、容量因子、分离度等），与气相色谱是一致的，但又有不同之处：高效液相色谱与气相色谱的主要区别可归结于以下几点：
(1)进样方式的不同：高效液相色谱只要将样品制成溶液，而气相色谱需加热气化或裂解；
(2)流动相的不同，在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力；
(3)由于液体的粘度较气体大两个数量级，使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在气体流动相中约小4~5个数量级；
(4)由于流动相的化学成分可进行广泛选择，并可配置成二元或多元体系，满足梯度洗脱的需要，因而提高了高效液相色谱的分辨率（柱效能）；
(5)高效液相色谱采用5~10Lm细颗粒固定相，使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小，流动阻力增大，必须借助高压泵输送流动相；
(6)高效液相色谱是在液相中进行，对被测组分的检测，通常采用灵敏的湿法光度检测器，例如，紫外光度检测器、示差折光检测器、荧光光度检测器等；
(7)液相色谱与气相色谱相比较，高效液相色谱同样具有高灵敏度、高效能和高速度的特点。
高效液相色谱的定性和定量分析，与气相色谱分析相似，在定性分析中，采用保留值定性，或与其他定性能力强的仪器分析法连用；在定量分析中，采用测量峰面积的归一化法、内标法或外标法等，但高效液相色谱在分离复杂组分式样时，有些组分常不能出峰，因此归一化法定量受到限制，而内标法定量则被广泛使用。
气相色谱和高效液相色谱的异同点
气相色谱和高效液相色谱的异同点介绍如下：
异同点：
1.原理不同：气相色谱使用气体作为移动相，通过样品与固定相
之间的分配来分离化合物；高效液相色谱使用液体作为移动相，通过样品与固定相之间的分配来分离化合物。
2.分离效率不同：高效液相色谱的分离效率相对较低，适用于分
离大分子化合物；气相色谱的分离效率相对较高，适用于分离
小分子化合物。
3.操作复杂度不同：气相色谱需要对样品进行蒸发和气化，需要
比较复杂的样品处理步骤；高效液相色谱的样品处理相对较简
单，但需要更高的样品纯度和精度。
4.适用范围不同：气相色谱适用于分析挥发性化合物，如有机溶
剂、香料和挥发油等；高效液相色谱适用于分析非挥发性化合
物，如大分子化合物、药物、天然产物和化妆品等。
5.仪器设备不同：气相色谱需要气相色谱仪器，包括气相色谱柱、
进样器和检测器等；高效液相色谱需要高效液相色谱仪器，包
括高效液相色谱柱、进样器和检测器等。
相同点：
1.都是色谱分析技术，可以用于分离和检测化合物。
2.都需要标准品和校准曲线进行定量分析。
3.都需要对样品进行前处理和处理步骤。
简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。
简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。
高效液相色谱法和气相色谱法是两种常用的分离分析技术，它们的主要异同点如下：
相同点：
1.都是基于化学物质在不同的移动相中具有不同的亲和性来实现分离的。
2.都是一种高效、灵敏、快速和准确的分离分析方法。
3.都可以被用于分离分析各种类型的化合物，如有机物、无机物、生物分子等。
4.都会产生检测数据，检测标准基于化合物的比较。
不同点：
1.高效液相色谱法的分离是在液相中进行的，而气相色谱法的分离是在气相中进行的。
2.高效液相色谱法主要适用于那些不太易于挥发的化学物质，而气相色谱法主要适用于具有足够蒸发性和揮發性的样品。
3.两种方法所需的设备和技术协议不同，高效液相色谱法需要一个柱和高压泵，而气相色谱法需要一个装有固定相的管道和可变压力气瓶。
4.两种方法在较高和较低的分子量范围内的分离效率和样品分析速度可能也略有不同。
综上所述，高效液相色谱法和气相色谱法有相似之处，但是它们都有其自己的适用场景和技术妥协方案，包括用于分离、检测物质的属性、分析仪器和条件的型号和适用范围，以及液-气和气-液之间模式的差别。
简述高效液相色谱法与气相色谱法的主要异同点
简述高效液相色谱法与气相色谱法的主要异同点高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）是现代化学分析领域中最常用的两种色谱技术。
它们都是利用色谱柱对混合物进行分离和分析的方法，但是它们在操作和应用上有一些主要的异同点。
本文将简述这些异同点。
一、HPLC和GC的基本原理HPLC和GC都是基于色谱柱的原理，但是它们所用的色谱柱不同。
HPLC通常使用液相色谱柱，而GC则使用气相色谱柱。
液相色谱柱是由一种固体填料填充的管道，内部涂有一层液相，通常是水或有机溶剂。
样品通过柱时，会与液相发生相互作用，从而分离成不同的组分。
气相色谱柱是由一种固体填料填充的管道，内部涂有一层涂层，通常是聚硅氧烷或聚乙烯醇。
样品通过柱时，会与气相发生相互作用，从而分离成不同的组分。
二、样品的适用范围不同HPLC和GC都可以用于分离和检测不同种类的化合物，但是它们所适用的样品范围不同。
HPLC通常用于分离和检测极性化合物，如药物、氨基酸、糖类和核酸等。
GC则适用于分离和检测非极性化合物，如烃类、脂类、酯类和醛类等。
这是由于液相色谱柱和气相色谱柱的物理化学性质不同所致。
三、分离效率不同HPLC和GC的分离效率也存在差异。
HPLC的分离效率相对较高，可以分离较小的分子，分离效率高达99.9%。
这是由于液相色谱柱的填充物可以提供更多的相互作用位点，从而实现更好的分离效果。
GC 的分离效率相对较低，分离效率通常在90%左右。
这是由于气相色谱柱的填充物相互作用位点较少，从而导致分离效果不如液相色谱柱。
四、检测灵敏度不同HPLC和GC的检测灵敏度也存在差异。
HPLC通常具有较高的检测灵敏度，可以检测到极小的样品量，达到ng/ml级别。
这是由于液相色谱柱可以使用高灵敏度检测器，如荧光检测器和质谱检测器。
GC的检测灵敏度相对较低，一般达到pg/ml级别。
这是由于气相色谱柱所使用的检测器灵敏度较低，如火焰离子化检测器和热导检测器。
五、操作难度不同HPLC和GC的操作难度也存在差异。
请简述液相色谱和气相色谱的异同点及其应用范围
请简述液相色谱和气相色谱的异同点及其应用范围
液相色谱和气相色谱分别是化学分析中常用的两种技术手段。
液相色谱是一种通过将样品溶解在液相中，利用液态流动相和固态或液态固定相之间的作用力进行分离的方法。
而气相色谱则是将样品挥发成气态后，利用气态流动相和固态或液态固定相之间的作用力进行分离。
液相色谱和气相色谱的异同点如下：
相同点:
1. 都是化学分析中常用的技术手段。
2. 均采用固定相和流动相进行分离。
不同点：
1. 工作状态：液相色谱在液态条件下进行，而气相色谱在气态条件下进行。
2. 固定相和流动相：液相色谱的固定相是液态或固态，流动相是液态，而气相色谱的固定相是固态或液态，流动相是气态。
3. 可适用的样品类型：液相色谱可适用于固态或液态的样品，而气相色谱仅适用于气态或挥发性较强的样品。
4. 分离机理: 液相色谱分离机理主要是根据样品在固定相和流动相之间的亲疏性不同进行分离。
而气相色谱则是利用样品在固定相和流动相之间的协同作用进行分离。
应用范围:
液相色谱常用于分离大分子化合物，如蛋白质、核酸等，也可用于分离极性化合物和非极性化合物。
气相色谱则常用于分离非极性化
合物，如脂肪酸、芳香族化合物、杀虫剂等。
两种技术手段还可结合使用，例如在分析复杂混合物时，可以先采用液相色谱进行预处理，再使用气相色谱进行进一步分离和分析。
液相色谱和气相色谱的异同点
液相色谱和气相色谱的异同点
液相色谱和气相色谱是常见的分析化学方法。
它们在原理、操作、应用等方面都有一些异同点，具体如下：
1. 原理：液相色谱和气相色谱的原理不同。
液相色谱是以溶液为移动相，在固定相上进行分离，根据样品与固定相的亲疏性不同，进而实现分离。
气相色谱则是以气体为移动相，在固定相上进行分离，根据样品与固定相的揮发性不同，进而实现分离。
2. 操作：液相色谱和气相色谱的操作方式也不同。
液相色谱需要将样品溶解在移动相中，通过进样器注入色谱柱，然后根据某些条件（如流速、温度、压力等）控制移动相的流动速度和性质，最终得到分离结果。
气相色谱需要将样品蒸发成气体，通过进样口注入色谱柱，然后根据某些条件（如温度、流速、压力等）控制移动相的流动速度和性质，最终得到分离结果。
3. 应用：液相色谱和气相色谱的应用范围也不同。
液相色谱可以应用于许多有机物、无机物和生物大分子的分离，如药物、农药、天然产物、蛋白质、核酸等。
气相色谱则主要应用于易挥发物的分离，如烃类、酮类、醛类、氨基酸等。
总之，液相色谱和气相色谱虽然有一些异同点，但它们都是非常重要的分析化学方法，广泛应用于化学、生物、医学等领域。
- 1 -。
气相色谱法和高效液相色谱法的相同和不同之处
气相色谱法和高效液相色谱法的相同和不同之处
气相色谱法和高效液相色谱法是常用的色谱分离技术，它们的相同点和不同点主要如下：
相同点：
1. 都是分离技术，可用于分离和分析混合物中的化合物。
2. 都是基于不同化合物在色谱柱中的分配行为进行分离。
3. 都需要一定的仪器设备和操作技能。
不同点：
1. 形态：气相色谱法是以气体作为载气相进行分离，而高效液相色谱法是以液相作为载流相进行分离。
2. 原理：二者的工作原理不同，气相色谱法是基于化合物的挥发性和极性进行分离，而高效液相色谱法是基于化合物在液相中的相互作用力（如吸附、分配、离子交换等）进行分离。
3. 适用性：二者适用的范围也不同，气相色谱法适用于易挥发化合物的分离，而高效液相色谱法适用于不易挥发的化合物的分离。
4. 操作：操作条件也有所不同，气相色谱法需要控制温度、流速、柱长、柱径等参数，而高效液相色谱法则需要控制流速、
柱料、洗脱剂等参数。
5. 效果：二者分离效果和分离速度也有所不同，气相色谱法分离效果好，分离速度快，但分离的化合物极性范围较窄；高效液相色谱法分离效果不如气相色谱法，但适用范围广，能够分离极性和不极性化合物。
HPLC高效液相色谱和GC气相色谱的异同点
HPLC高效液相色谱和GC气相色谱的异同点
高效液相色谱(ＨＰＬC）和气相色谱(GC)的异同点不同点：
一、流动相不同:ＨＰLC为液体流动相,GＣ为永久性气体作流动相（通常叫做载气)
二、进样器不同：高效液相为平头进样针，气相色谱为尖头进样针
三、色谱柱长不同:
（1)气相色谱柱通常几米到几十米
(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大，故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱长，以提高柱效)。
ﻫ（２)液相色谱柱通常为几十到几百毫米ﻫ
四、分析种类有差异:
气相色谱分析的对象多为(不适绝对）：分子质量小于10００，低沸点，易挥发,热稳定性好的化合物。
ﻫ液相色谱：更适用于分析高沸点,难挥发,热稳定性差，分子质量较大(1000- -2000）的液体化合物。
五:样品柱前变化不同:气相色谱的样品在柱前必须变为气体（气化室汽化），而液相色谱的样品在柱前则无变化。
ﻫ
六、所用检测器有差异：
液相主要为:紫外检测器,荧光检测器、示差折光检测器．．...
气相色谱主要为：氢火焰离子化检测器(FID），热导检测器(TCＤ),电子捕获检测器(EＣD）,火焰光度检测器（FＰD)，氮磷检测器（NPD)．.．．.
相同点：基本原理相同。
都是利用物质在流动相和固定相中的分配系数的差别,从而在两相间反复多次(次,甚至更多)的分配，使原来分配系数差别很小的各组分分离开来。
高效液相色谱与气相色谱的异同点
高效液相色谱与气相色谱的异同点
相同点：
1.分离能力高：HPLC和GC都具有较高的分离能力，能够分离复杂混
合物中的组分，并提供精确和可靠的结果。
2.高效性：两种技术在同一时间内能够分离许多不同的样品，并能快
速完成分析。
3.用途广泛：HPLC和GC可以用于许多不同的样品类型，包括化学品、药品、生物样品等。
异同点：
1.分离原理不同：HPLC是一种溶液相技术，是利用溶质分子在流动
液相中的亲疏性质与固定相发生相互作用，实现分离的，而GC是一种气
相技术，其分离原理在于利用样品在固定相和气相中的物理和化学性质的
不同导致分离的。
2.适用样品的物理状态不同：HPLC适用于液态和溶液态的样品，而
GC主要适用于气态和揮发性液态的样品。
3.检测器类型不同：GC常用的检测器包括火焰离子化检测器（FID）、电子捕获检测器（ECD）等，而HPLC的常用检测器有紫外检测器、荧光检
测器和电化学检测器等。
4.不同的应用领域：HPLC主要用于分析生物样品和药物，如分析蛋
白质、基因、药品中的杂质等；而GC主要用于分析环境、化学品、石油
化学等领域，如污染物中的残留物、揮发性有机化合物等。
总的来说，HPLC和GC虽然有许多共同点，但仍然有很多不同之处。
针对分析的样品类型和所需的分析结果和准确性等不同要求，选择HPLC 或GC进行化学分析。
高效液相色谱和气相色谱地异同点
高效液相色谱和气相色谱的异同点不同点：一、流动相不同：HPLC为液体流动相，GC为永久性气体作流动相（通常叫做载气）二、进样器不同：高效液相为平头进样针，气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同：（1）气相色谱柱通常几米到几十米（气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以增加柱长，以提高柱效）。
（2）液相色谱柱通常为几十到几百毫米四、分析种类有差异：气相色谱分析的对象多为（不适绝对）：分子质量小于1000，低沸点，易挥发，热稳定性好的化合物。
液相色谱：更适用于分析高沸点，难挥发，热稳定性差，分子质量较大（1000 - -2000）的液体化合物。
五：样品柱前变化不同：气相色谱的样品在柱前必须变为气体（气化室汽化），而液相色谱的样品在柱前则无变化。
六、所用检测器有差异：液相主要为：紫外检测器，荧光检测器、示差折光检测器.....气相色谱主要为：氢火焰离子化检测器（FID）,热导检测器（TCD）,电子捕获检测器（ECD）,火焰光度检测器（FPD）,氮磷检测器（NPD）.....相同点：基本原理相同。
都是利用物质在流动相和固定相中的分配系数的差别，从而在两相间反复多次（1次，甚至更多）的分配，使原来分配系数差别很小的各组分分离开来。
❖Owen发现异卵双生牛的天然免疫耐受现象(1945)，明确自身识别问题，伯耐特(Burnet，1949)提出免疫耐受理论，梅德华(Medawar，1953)实验证实胚胎期耐受理论。
耶那(Jerne，1955)提出天然抗体选择学说，完成免疫网络学说(1974)，伯耐特等(Burnet & Talmage, 1957)完善克隆选择学说等免疫防御(immunologic 抗感染defense)免疫稳定(immunologic 消除炎症或衰老细胞homeostasis)免疫监视(immunologic 控制癌变细胞surveilance)1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
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高效液相色谱和气相色谱的异同点不同点：一、流动相不同：HPLC为液体流动相，GC为永久性气体作流动相（通常叫做载气）二、进样器不同：高效液相为平头进样针，气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同：（1）气相色谱柱通常几米到几十米（气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以增加柱长，以提高柱效）。
（2）液相色谱柱通常为几十到几百毫米四、分析种类有差异：气相色谱分析的对象多为（不适绝对）：分子质量小于1000，低沸点，易挥发，热稳定性好的化合物。
液相色谱：更适用于分析高沸点，难挥发，热稳定性差，分子质量较大（1000 - -2000）的液体化合物。
五：样品柱前变化不同：气相色谱的样品在柱前必须变为气体（气化室汽化），而液相色谱的样品在柱前则无变化。
六、所用检测器有差异：液相主要为：紫外检测器，荧光检测器、示差折光检测器.....气相色谱主要为：氢火焰离子化检测器（FID）,热导检测器（TCD）,电子捕获检测器（ECD）,火焰光度检测器（FPD）,氮磷检测器（NPD）.....相同点：基本原理相同。
都是利用物质在流动相和固定相中的分配系数的差别，从而在两相间反复多次（1000-1000000次，甚至更多）的分配，使原来分配系数差别很小的各组分分离开来。
Owen发现异卵双生牛的天然免疫耐受现象(1945)，明确自身识别问题，伯耐特(Burnet，1949)提出免疫耐受理论，梅德华(Medawar，1953)实验证实胚胎期耐受理论。
耶那(Jerne，1955)提出天然抗体选择学说，完成免疫网络学说(1974)，伯耐特等(Burnet & Talmage, 1957)完善克隆选择学说等免疫防御(immunologic 抗感染defense)免疫稳定(immunologic 消除炎症或衰老细胞homeostasis)免疫监视(immunologic 控制癌变细胞surveilance)1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
一般可达150～3.5万KPa。
2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。
高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于 1h 。
3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。
如荧光检测器灵敏度可达10-11g。
另外，用样量小，一般几个微升。
5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。
而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。
对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的 75% ～ 80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。
高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。
用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。
其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好，且须在色谱仪中进行。
编辑本段主要类型及其分离原理根据分离机制的不同，高效液相色谱法可分为下述几种主要类型：1 ．液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。
流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。
当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。
达到平衡时，服从于下式：式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm--溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。
LLPC与GPC有相似之处，即分离的顺序取决于K，K大的组分保留值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。
a. 正相液—液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。
b. 反相液—液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。
c. 液—液分配色谱法的缺点：尽管流动相与固定相的极性要求完全不同，但固定液在流动相中仍有微量溶解；流动相通过色谱柱时的机械冲击力，会造成固定液流失。
上世纪70年代末发展的化学键合固定相（见后），可克服上述缺点。
现在应用很广泛（70~80%）。
2 ．液—固色谱法流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。
这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。
其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（未进样时，所有的吸附剂活性中心吸附的是S），可表示如下：Xm + nSa ====== Xa + nSm式中：Xm--流动相中的溶质分子；Sa--固定相中的溶剂分子；Xa--固定相中的溶质分子；Sm--流动相中的溶剂分子。
当吸附竞争反应达平衡时：K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]式中：K为吸附平衡常数。
[讨论：K 越大，保留值越大。
]3 ．离子交换色谱法(Ion-exchange Chromatography)IEC是以离子交换剂作为固定相。
IEC 是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。
以阴离子交换剂为例，其交换过程可表示如下：X-(溶剂中) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) + Cl- (溶剂中)当交换达平衡时：KX=[-R4N+X-][ Cl-]/[-R4N+Cl-][ X-]分配系数为：DX=[-R4N+ X-]/[X-]= KX[-R4N+Cl-]/[Cl-][讨论：DX与保留值的关系]凡是在溶剂中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法来进行分离。
4 ．离子对色谱法(Ion Pair Chromatography)离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。
其原理可用下式表示：X+水相 + Y-水相 === X+Y-有机相式中：X+水相--流动相中待分离的有机离子（也可是阳离子）；Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对（如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等）；X+Y---形成的离子对化合物。
当达平衡时：KXY = [X+Y-]有机相/[ X+]水相[Y-]水相根据定义，分配系数为：DX= [X+Y-]有机相/[ X+]水相= KXY [Y-]水相[讨论：DX与保留值的关系]离子对色谱法(特别是反相)发解决了以往难以分离的混合物的分离问题，诸如酸、碱和离子、非离子混合物，特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。
5 ．离子色谱法(Ion Chromatography)用离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相。
以电导检测器为通用检测器，为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰，设置了抑制柱。
试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。
以阴离子交换树脂（R-OH）作固定相，分离阴离子（如Br-）为例。
当待测阴离子Br-随流动相（NaOH）进入色谱柱时，发生如下交换反应（洗脱反应为交换反应的逆过程）：抑制柱上发生的反应：R-H+ + Na+OH- === R-Na+ + H2OR-H+ + Na+Br- === R-Na+ + H+Br-可见，通过抑制柱将洗脱液转变成了电导值很小的水，消除了本底电导的影响；试样阴离子Br-则被转化成了相应的酸H+Br-，可用电导法灵敏的检测。
离子色谱法是溶液中阴离子分析的最佳方法。
也可用于阳离子分析。
6 ．空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography)空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。
它类似于分子筛的作用，但凝胶的孔径比分子筛要大得多，一般为数纳米到数百纳米。
溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离，而是按分子大小进行分离。
分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。
试样进入色谱柱后，随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。
在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻，因此就直接通过柱子，首先在色谱图上出现，一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中，这些组分在柱上的保留值最大，在色谱图上最后出现。
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、．分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。
1．进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。
这对提高分析样品的重复性是有益的。
2．输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。
高压泵的一般压强为l．47～4．4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。
流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。
这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。
3.分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。
色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。