2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
CLSI_M100_S26_药敏试验解读
表1A.美国临床微生物学实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有FDA临床适应证的抗菌药物建议分组•'警告•：对分舅于脑臀液（CSF）中的细菌.下列抗菌药物不应作为选择药物进行常规报告.因为用这些药物治疗某些微生物（即•表2A至2J所包括的细苗）引起的CSF感染可能是无效的：仅通过口服途径给药的药物第•和第二代头砸苗倉（除外头池决*注射刑）和头零素类克林右卷人环内曲类四环素类緘咋诺刷类总注释:A. 对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而，某些对四环素中介或耐药的菌株可能对多西环素、米诺环素或二者敏感。
B. 利福平不能单独用于抗菌治疗。
C. 分离于泌尿道菌株不被常规报告。
肠杆菌科：D. 头抱噻吩仅被用于预报口服药物结果，包括头抱氨苄、头抱泊肟、头抱氨苄和氯碳头抱。
以前关于头抱噻吩结果可预报其他头抱菌素敏感性建议仍然正确，但近年来还没有数据证实此建议。
E. 当测试粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时，只有氨苄西林、一种氟喹诺酮类和复方新诺明可用于常规报告。
另外，对肠道外感染沙门菌粉分离株，应测试并报告一种三代头抱菌素，假如需要，也可测试和报告氯霉素。
分离于肠道和肠道外伤寒样沙门菌（伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌A-C）需进行药敏试验。
分离于肠道非伤寒样沙门菌不需进行常规药敏试验。
F. 从CSF中分离菌株，试验和报告头抱噻肟和头抱曲松，以取代头抱唑林。
其他非肠杆菌科：G. 其他非肠杆菌科细菌包括假单胞菌和其他非苛养、非发酵葡萄球菌的革兰阴性杆菌，但不包括铜绿假单胞菌、不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌，因为对这些菌种的建议试验和报告药物表格已分开。
鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌试验和报告药物建议请参阅CLSIM45 文件。
葡萄球菌属：H. 仅对金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA ）I. 青霉素敏感的葡萄球菌对葡萄球菌感染具有临床疗效的其他B酰胺类药物也敏感。
CLS 产品解析
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2016年CLSI-M100S主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读张雅薇? ? 王辉（通讯作者）北京大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI 制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）
微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）说起临床微生物的CLSI文件，大家首先想到的就是CLSI M100S——《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》。
但是其实，与临床微生物相关的CLSI文件很多，截至2017年7月，已多达43个。
下面，小编就给您简单介绍一下吧。
1、M02-A12:Approved Standard中文：抗菌药敏试验的性能标准英文：Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests内容与解释：介绍药物纸片扩散法的质量控制标准和最新折点标准。
2、M06-A2: Approved Standard中文：脱水MH琼脂的评估程序英文：Protocols for Evaluating Dehydrated Mueller-Hinton Agar内容与解释：略3、M07-A10:Approved Standard中文：需氧菌稀释法抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility T ests for Bacteria That Grow Aerobically内容与解释：描述了肉汤稀释法和琼脂稀释法，而且还包含这些方法的标准化操作流程和CLSI推荐方法的性能，局限性，适应性。
4、M11-A8:Approved Standard中文：厌氧菌抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria内容与解释：在过去的几年内，大部分厌氧菌的耐药表型都发生了很大的改变，导致了许多菌种的经验用药的面临很大的挑战。
对于厌氧菌，琼脂稀释法仍然是参考方法，对于调查研究和科研同样都适用。
而且其他的方法的对比标准也进行了说明，肉汤稀释法也应用于临床实验室，但是现在对脆弱拟杆菌和一些抗生素没有标准。
2015CLSI折点的重要修改和临床意义
折点（µg/ml） S I R ≤16 ≤2 ≤16 4 ≥32 ≥8 ≥32
剂量 1g每12h 2g每8h PO (various)
标本类型：尿液 临床诊断：尿路感染 大肠埃希菌
口服头孢菌素 包括头孢氨苄 和头孢泊肟。 按照 Dr. Jones 的要求报告了 头孢唑林的结 果
目前我国的临床微生物实验室均以CLSI文 件作为药敏试验指导文件进行操作和报告
2015/4/12
zhu_dm@
2
临床微生物实验室的药敏试验对临床合理选用抗 菌药物有着重要的作用
•缺乏临床微生物实验室药敏试验的证据 就不能达到有效地抗感染治疗
•不能制定方案，进行个体化给药 •没有目标性治疗的处方 •影响感染控制政策的应用
碳青霉烯酶的检测
耐药机制 检测方法比较
29
碳青霉烯类耐药SBL和/或AmpC酶, 合并膜孔蛋白缺失
碳青霉烯类酶
丝氨酸 -内酰胺酶
A类 (2f组) KPC-1 to -12; GES-2 to -4， Sme-1, -2, -3 D类 (2d组) – OXA家族-OXA-23, -24, -51, -58 -主要在不动杆菌属
2015/4/12
zhu_dm@
7
M100-S25
Enterobacteriaceae
Enterococcus spp.
8
急性膀胱炎
非复杂性的尿路感染（uUTIs) IDSA 指南
关于磷霉素（Fosfomycin）
口服、单次给药，剂量“一小包”(sachet) 美国FDA批准用于治疗因大肠埃希菌和粪肠球菌引起的女性非复杂性
•体外药敏结果可以预测治疗的结果
【指南与规范】2016年CLSI M100S(第26版)主要更新内容解读
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
同时也删除了美洛西林和替卡西林对厌氧菌的折点。
三、常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法鉴定抗菌药物的敏感和耐药M100S（第26版）增加了常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法的说明，见表3～7。
1.常规药敏试验：用于临床常规检测的纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法。
CLSI临床微生物实验室标准解读
CLSI临床微生物实验室标准解读CLSI折点变更的官方说明Janet Hindler, MCLS MT(ASCP) UCLA Medical Center Los Angeles, California CLSI M100-S20编者本文由Hindler教授提供，并允许梅里埃公司翻译及印发Janet Hindler教授现任美国加利福尼亚州洛杉矶医学中心(UCLA)资深专家，华盛顿D.C.公共健康实验室协会顾问等职。
自1994年开始在CLSI细菌抗生素药敏试验委员会的工作，参加制定每年细菌药敏标准，现任CLSI“不常见细菌和苛养菌药敏指南“学组主席，CLSI“累积抗生素药敏试验数据指南(M39-A3)”学组主席等多个CLSI分委会任职。
术语/流程A. 似乎CLSI和其他一些机构在使用术语“折点”和“判读标准”时候可交替使用。
在这两个词之间有区别吗？无区别，折点和判读标准所指的都是同一个数值。
B. 在哪里我可以找到关于CLSI如何建立药敏折点的标准？在CLSI M100-S20的第17页有关于药敏折点建立的简要说明。
关于药敏折点建立的详细指南参见CLSI 文件M23- 体外敏感性试验标准和质控参数的发展C-15682C-1562C. CLSI修订药敏折点的流程和程序是什么？简而言之，修订药敏折点包括系统性的回顾来自微生物学，药物学和临床的数据。
知名专家，赞助商(来自制药工业)和管理者参与药敏制定流程包括在每年2次的CLSI 药敏试验小组委员会会议的公开讨论。
在制定新上市药物的初始药敏折点时候，需要有对照临床试验数据。
尽管在修订药敏折点时最好能够提供对照临床试验数据，这些数据在应对快速变化的细菌耐药机制和“老药”时多数情况下是不可行的。
因此，委员会必须要依赖发表的文献，专家意见和共同商议的流程。
在药敏折点修订时必须要考虑到流行病，临床治疗和监管意见。
CLSI 分委会的会议纪要在下面的链接可以获取。
/Content/NavigationMenu/Committees/Microbiology/AS T/AST.htm在美国FDA和CLSI都建立自己的药敏折点，某些时候这两个机构所设立的药敏折点会有不同。
维泰克2客户信-clsi折点性能参数补充说明书
VITEK 2客户信编号: CSN 4757-2尊敬的生物梅里埃用户：2020年7月, 生物梅里埃发布了客户信CSN-4757通知VITEK®2用户梅里埃已经完成了气单胞菌和弧菌多个抗生素CLSI折点的验证工作。
如果您在2020年7月收到通知后已经更新了折点, 我们抱歉地通知您当时发布的客户信表2性能参数部分存在笔误。
此次客户信的表2已经进行了更新，为便于识别，更新部分用黄色高亮显示。
该客户信其它部分同此前版本保持一致。
该评估使终端用户可以在VITEK® 2软件中应用CLSI折点。
表1中的CLSI折点都已经成功验证，均满足可接受标准，可用于患者或其它菌株测试，某些情况下需要增加一些限制信息.为了应用这些折点，需要在AES中创建自定义参数。
请参考VITEK® 2软件用户手册（修改折点部分）中的详细信息。
这些折点会被整合进未来新版本VITEK® 2软件Global CLSI-based参数集。
表2提供了应用CLSI折点下这些抗菌药物的性能参数信息。
之前出版的VITEK® 2文档尚未公布这些性能参数信息。
假如您选择实施这些CLSI折点，请留存该客户信。
附录1：举例如何创建高级报告工具(BIOART)规则，用于管理该客户信5-8页中的局限。
做为我们持续改善项目的一部分，梅里埃致力于提升产品质量，功能和易用性。
感谢您选择使用VITEK® 2系统，如果您有任何问题，请随时联系您当地的生物梅里埃代表。
此致敬礼梅里埃诊断产品（上海）有限公司2022年5月10日bioMérieux (Shanghai) Company Limited/梅里埃诊断产品(上海)有限公司表1:使用更新后的CLSI折点，表格中抗菌药物性能满足要求bioMérieux (Shanghai) Company Limited/梅里埃诊断产品(上海)有限公司*以下抗生素/细菌组合的结果存在局限，需要屏蔽报告。
clsi-m100-s20_2010抗菌药物敏感性试验解释标准(中文)
目 录 表
20 10 年 1 月
M1 0 0 - S 20
目录（续前）
2F. 淋病奈瑟菌….........................................................................................................................….............78 2G. 肺炎链球菌………………….........……………….........................................................................…...82 2H-1.β-溶血群链球菌…………………………...................................................................……………..…86 2H-2. 草绿色群链球菌……………………….............................................................……....................….90 2I. 霍乱孤菌.........................................................….………………......................…...…............................93 2J. 脑膜炎奈瑟菌..................................................................……...........……………...…...........................94 2K 炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克霍尔德菌/、土拉弗朗西斯菌和 布鲁氏菌.........................................................................................................................................................98 表3. 非苛养菌质控标准菌株纸片扩散法抗微生物药物敏感试验抑菌环直径的质控允许范围 （使用不加血或其他补充物的Mueller-Hinton 培养基） ....................................................................101 表3A. 纸片扩散法——苛养菌质控菌株抑菌圈直径（mm）质控允许范围..........................................103 表 3B. 纸片扩散法—质控频率参考指南...................................................................................................105 表 3C. 纸片扩散法质控缺陷解决指南......................................................................................................107 表 4. 非苛养菌 MIC 药敏试验质控——非苛养菌质控标准菌株的质控允许范围（ μg/mL），使用不 加血或其他补充物的 Mueller-Hinton 培养基（如果如果使用 Mueller-Hinton 肉汤，需要调整钙离子浓 度）...............................................................................................................................................................109 表 4E. MIC 试验——质控频率参考指南...................................................................................................111 表 4F. MIC 药敏试验质控缺陷解决指南...................................................................................................112 表 5. 制备抗微生物药物储存液的溶剂和稀释液.....................................................................................116 表 5A. 制备以活性单位表达的抗微生物药物的贮存液..........................................................................119 附录A. 关于药敏试验结果查证及细菌鉴定结果确认的建议.................................................................121 附录B.药敏试验所用质控标准菌株...........................................................................................................123
PCT、SAA、CRP、NLR、PLR、RDW、PDW 在血流感染的诊断价值
经验交流52P C T、S A A、C R P、N L R、P L R、RDW、PDW在血流感染的诊断价值范小军 （天水市中西医结合医院，甘肃天水 741020）摘要：目的 探讨PCT、SAA、CRP、NLR、PLR、RDW、PDW在血流感染的诊断价值。
方法 对2015年1月~2021年7月天水市中西医结合医院住院患者血培养检查的七种常用实验室炎症指标［降钙素原（PCT）、血清淀粉样蛋白A（SAA）、C反应蛋白（CRP）、中性淋巴细胞比率(NLR)、血小板淋巴细胞比率(PLR)、血小板分布宽度(PDW)以及红细胞分布宽度(RDW)］进行回顾分析，系统评估不同炎症指标对血流感染辅助诊断的临床价值。
结果 PCT、SAA、CRP、NLR、PLR、RDW、PDW水平中，除RDW外，不同组别之间水平不全相同，差异具有显著性（P＜0.05）。
其中，革兰阴性杆菌感染509例（71.49%），以大肠埃希菌306例、肺克雷伯菌126例、阴沟肠杆菌17例、铜绿假单胞菌14例、鲍曼不动杆菌11例为主；革兰阳性球菌感染197例（27.67%）,以表皮葡萄球菌62例、人葡萄球菌22例、金黄色葡萄球菌20例、溶血葡萄球菌18例、屎肠球菌12例为主；真菌感染6例（0.84%）。
结论 不同炎症指标之间对血流感染的辅助诊断价值不同，三组之间的炎症指标水平比较中，PCT、CRP指标在革兰阴性菌组中均显著高于革兰阳性菌组水平；PCT、NLR、CRP、PLR、SAA、PDW对于由革兰阴性菌导致血流感染具有诊断意义，而RDW诊断价值不明显；NLR、PLR、SAA、PDW对于由革兰阳性菌导致血流感染有诊断意义，PCT、RDW、CRP诊断价值不显著。
关键词：PCT；诊断；炎症指标；血流感染目前，临床主要采用血培养的方法对血流感染进行起初的诊断，但有其自身的缺陷，如耗费时间长、容易受到外界其他因素影响等，不能较好地满足临床诊疗需求。
基于此，本研究主要探讨PCT、SAA、CRP、NLR、PLR、RDW、PDW在血流感染的诊断。
2016CLSI更新解读
临床适应症
FDA2007.10.17批准
治疗复杂性尿路感染与左氧氟沙星相仿 治疗复杂性腹腔内感染与美罗培南相仿
FDA不推荐治疗呼吸机相关肺炎，其与使用亚胺培南/西司他丁注射液 （Pri maxin）相比，患者死亡风险增加，且临床治愈率较低
FDA对一项为期3年、在2011年因上述安全性原因提前中止临床试验 FDA在对呼吸机相关肺炎患者使用多利培南时，提出应权衡风险与获益的警示。
Carba NP试验
Carba NP试验是一种肠杆菌科、铜绿假单胞菌和不动菌属细菌中碳青霉
烯酶的表型检测方法。该试验采用比色法，目前主要用于流行病学研究 或感染控制，尚不推荐作为临床常规使用。
研究表明，Carba NP试验在检测KPC、NDM、VIM、IMP、SPM和SME
型碳青霉烯酶方面具有较好的敏感性（>90%）和特异性（>90%）。但 检测OXA-48型碳青霉烯酶敏感性很低仅为11%，部分MIC较低的产酶株 可能不能被检出。
1.Test 的含义
常规试验：纸片扩散法，肉汤或琼脂稀释法的常规临床测试。 补充试验：用来测定一种药物或一类药物的敏感性或耐药性试验，非 常规实验，也不需要用其他试验来确证。一些补充试验为鉴定一个特 殊的耐药机制，必需或选择性的报告临床。 筛选试验：提供推测性结果，需要进一步的附加试验来确证药物的敏 感及耐药性。 替代试验 一种抗菌药对耐药性的检测较靶位药物的检测更具可靠、 稳定！ 等价试验 一类抗菌药对受试菌的作用机制、抗菌活性是相仿的，只 需测定其中一种抗菌药的敏感性，就可预测受试菌对其他该类抗生素 的敏感性。
替代试验—举例
用头孢西丁检测mecA 基因 介导对苯唑西林的耐药性 用头孢唑林检测大肠埃希菌 等引起的非复杂性尿路感染 的药敏结果可以指导口服头 孢菌素类的敏感性 培氟沙星的药敏结果可以检 测沙门菌属细菌对氟喹诺酮 类敏感性的降低 萘啶酸的药敏结果可以检测 沙门菌属细菌对氟喹诺酮类 敏感性的降低
CLSI M100- S26 药敏试验解读(参考仅供)
表1A. 美国临床微生物学实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有FDA 临床适应证的抗菌药物建议分组总注释：A.对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而，某些对四环素中介或耐药的菌株可能对多西环素、米诺环素或二者敏感。
B.利福平不能单独用于抗菌治疗。
C.分离于泌尿道菌株不被常规报告。
肠杆菌科：D.头孢噻吩仅被用于预报口服药物结果，包括头孢氨苄、头孢泊肟、头孢氨苄和氯碳头孢。
以前关于头孢噻吩结果可预报其他头孢菌素敏感性建议仍然正确，但近年来还没有数据证实此建议。
E.当测试粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时，只有氨苄西林、一种氟喹诺酮类和复方新诺明可用于常规报告。
另外，对肠道外感染沙门菌粉分离株，应测试并报告一种三代头孢菌素，假如需要，也可测试和报告氯霉素。
分离于肠道内和肠道外伤寒样沙门菌（伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌A-C）需进行药敏试验。
分离于肠道内非伤寒样沙门菌不需进行常规药敏试验。
F.从CSF中分离菌株，试验和报告头孢噻肟和头孢曲松，以取代头孢唑林。
其他非肠杆菌科：G.其他非肠杆菌科细菌包括假单胞菌和其他非苛养、非发酵葡萄球菌的革兰阴性杆菌，但不包括铜绿假单胞菌、不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌，因为对这些菌种的建议试验和报告药物表格已分开。
鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌试验和报告药物建议请参阅CLSIM45文件。
葡萄球菌属：H.仅对金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）I.青霉素敏感的葡萄球菌对葡萄球菌感染具有临床疗效的其他β-内酰胺类药物也敏感。
青霉素耐药葡萄球菌对青霉素酶不稳定青霉素类耐药。
除具有抗-MRSA活性新的头孢菌素外，苯唑西林耐药葡萄球菌对当前所有使用的β-内酰胺类药物均耐药。
因此，仅测试青霉素和头孢西丁或苯唑西林二者中任一种，则可推测对各种β-内酰胺类药物的敏感或耐药性。
除具有抗-MRSA 活性药物外，不建议常规测试其他β-内酰胺类药物。
2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读张雅薇王辉（通讯作者）北京大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
2016CLSIM100S(第26版)主要更新内容解读
目录
摘要…………………………………………………………………………1 委员会成员…………………………………………………………………5 本文件主要变化简介 ……………………………………………………13 CLSI建立解释标准和质量控制过程简介 ………………………………22 CLSI参考方法与商品化方法和CLSI与FDA解释标准（折点）…………23 自2010年以来CLSI折点的增加及修订 …………………………………24
Added new section defining routine, supplemental, screening, surrogate agent, and equivalent agent tests, which replaced the original “Screening Tests” section (p. 33).
设、提高临床检验质量和 规范化管理方面具有重要意义。
第1页，共41页。
M100S (第26版)
M100S,26th Edition --Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility
Testing , 26th Edition.--抗菌药物敏感性试验执行标准; 第二十六版
MRSA 筛 选 琼脂法
金黄色葡萄球菌
生长增强试验检测碳青霉烯类 水解
显色试验检测碳青霉烯类水解
对于碳青霉烯类敏感性 下降的菌株
结果指示产生某些碳青 霉烯
对于碳青霉烯类敏感性 下降的菌株
结果指示产生某些碳青 霉烯
琼脂稀 释法， 含4%Nacl 和6 检 测 MRSA ， 建 议 使 用
mg/L苯唑西林的MHA
剂和稀释剂
2013年CLSIM100_S23文件主要更新内容的解读_孙长贵
关键词：抗菌药物； 微生物敏感性试验； 参考标准
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１３．１６．００１
文献标识码：Ａ
文章编号：１６７３－４１３０（２０１３）１６－２０６５－０３
２０１３ 年 １ 月 美 国 临 床 和 实 验 室 标 准 化 协 会 （Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＬＳＩ）出版了《抗菌药物敏感试 验执行标准第２３版资料增刊》（Ｍ１００－Ｓ２３）［１］，以取代 Ｍ１００－ Ｓ２２［２］。本文主要 介 绍 了 ＣＬＳＩ抗 菌 药 物 敏 感 试 验 执 行 标 准
４ ＱＣ变化 表３Ａ 中，修订了庆大霉素和妥布霉素对铜绿假单胞菌
ＡＴＣＣ２７８５３纸片扩散法 ＱＣ允许范围分别为１７～２３和２０～ ２６ｍｍ。文件表３Ｂ中，新增ｃｅｆｔｏｌｏｚａｎｅ－他唑巴坦对肺炎链球 菌 ＡＴＣＣ４９６１９纸片扩散法 ＱＣ允许范围：２１～２９ｍｍ。文件 表 ４Ａ 中，新 增 头 孢 他 啶－阿 维 巴 坦 对 铜 绿 假 单 胞 菌 ＡＴＣＣ２７８５３和非那沙星对大肠埃希菌 ＡＴＣＣ２５９２２ＱＣ允许范 围，分别为０．５／４～４／４μｇ／ｍＬ 和 ０．００４～０．０３μｇ／ｍＬ。文 件 表 ４Ｂ 中，增 加 了 头 孢 他 啶－阿 维 巴 坦 对 肺 炎 链 球 菌 ＡＴＣＣ４９６１９和流感嗜血杆菌 ＡＴＣＣ４９７６６ＱＣ允许范围，分别 为０．２５／４～２／４μｇ／ｍＬ 和 ０．０１５／４～０．０６／４μｇ／ｍＬ。修订 头 孢他啶－阿维巴坦对流感嗜血杆菌 ＡＴＣＣ４９２４７ＱＣ 允许范围 为０．０６／４～０．５／４μｇ／ｍＬ。增加ｃｅｆｔｏｌｏｚａｎｅ－他唑巴坦对肺炎 链球菌 ＡＴＣＣ４９６１９和非那沙星对流感嗜血杆菌 ＡＴＣＣ４９７６６ ＱＣ允许范围，分别为０．２５／４～１／４μｇ／ｍＬ 和０．００２～０．００８ μｇ／ｍＬ。
中文版clsi更新PPT课件
ECVs和临床折点
临床折点建立根据： 抗菌药物的MIC分布 相关细菌 PK/PD 临床疗效
ECVs建立根据： and 仅仅是MIC的分布
临床微生物室如何使用ECVs
Ø万古霉素可用于治疗痤疮丙酸杆菌感染，但目前尚无临 床相关折点。
抗生素 万古霉素
痤疮丙酸杆菌
ECV（ug/ml）
野生型
非野生型
≤2
≥4
Table1A-1C抗菌药物的分组 Table2A-2J 纸片法及MIC法的解释标准 Table3A-3I筛选实验及确证实验的解释 Table4A-5G质量控制 Table6A-8B制备方案 AppendixA-Glossary3补充说明及术语表
变化的概要
M100-S25 第 13-15页.
重大的变化2015（1）
Ø环丙沙星体外虽然“S”，但临床疗效不是很好
Crump et al. 2008. Antimicrob Agents Chemother. 52:1278.
氟喹诺酮类非敏感——怎么办？
—— P49
沙门氏菌属ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ—氟喹诺酮类折点
抗生素
纸片 含量
环丙沙星 5ug
左氧氟沙星 -
氧氟沙星
-
培氟沙星 5ug
阳性菌株，不需要更改碳青霉烯类敏感性试验结果的解释。
目前不推荐作为临床常规使用。
—— P120
（使用M100-S20 (January 2010)）解释标准 在实验室实施修订的碳青霉烯类抗生素的MIC标准之前，如 果肠杆菌科亚胺培南，美罗培南的MIC值为2-4ug/ml或厄他 培南MIC值为2ug/ml，则可能产碳青霉烯酶，需做此试验。
最大变化
Ø引入 Carba NP试验 Ø引入流行病学cutoff值（ECVs）的概念
CLSIM1002018更新（中文）
CLSI M100 2018 更新菌名和专有名词更新：1. 痤疮丙酸杆菌的菌名发生了变更：Propionibacterium acnes to Cutibacterium (formerlyPropionibacterium) acnes2. 艰难梭菌的菌名发生了变更：Clostridium difficile to Clostridioides (formerlyClostridium) difficile3. 产气肠杆菌更名为产气克雷伯菌：Klebsiella (formerly Enterobacter) aerogenes4. 核粒梭杆菌更名为梭杆菌某种5. β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂复核剂（β-lactam/β-lactamase inhibitor combinations）更名为β内酰胺类复核剂（β-lactam combination agents）6. 叶酸途径抑制剂（folate pathway inhibitor）变更为叶酸途径拮抗剂（folate pathwayantagonist）7. 将耐甲氧西林葡萄球菌（MRSA）盐琼脂更正为苯唑西林盐琼脂8. 同国际标准组织（ISO）一致，将在接种物制备章节中生长法（growth method）变更为肉汤培养法（broth culture method）并将直接菌悬液（direct colony suspension）变更为菌悬液（colony suspension）更新折点：1. 增加了头孢他啶-阿维巴坦（Ceftazidime-avibactam）对于肠杆菌和铜绿假单胞菌的折3. 增加了达巴万星（Dalbavancin）对于葡萄球菌，肠球菌（万古霉素敏感），β溶血链球菌和草绿色链球菌的折点历史折点更新汇总表格：CLSI 网站上备份了2010年后折点的更新汇总和药敏方法的变更。
药敏表格注释：1. 肠杆菌方面：a) 头孢唑啉增加了如下注释：Cefazolin as a surrogate may overcall resistance to cefdinir, cefpodoxime, andcefuroxime. If cefazolin tests resistant, test these drugs individually if needed fortherapy.b) 碳青霉烯类药物添加了如下注释：增加了eCIM的相关内容c) 吉米沙星添加了如下注释：仅适用于肺炎克雷伯2. 革兰阴性非发酵菌（药敏表格B）a) 铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌黏菌素：添加注释：唯一推荐测试MIC的方法为微量肉汤稀释法，不能纸片扩散法和梯度扩散法进行测试The only approved MIC method for testing is broth microdilution. Disk diffusionand gradient diffusion methods should not be performed.3. 葡萄球菌：a) 修改了施氏葡萄球菌苯唑西林药敏判读方法，将其中假中间葡萄球菌同组，不能使用头孢西丁进行替代试验。
不同地区4家医院临床分离菌株对吉米沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐药性分析
不同地区4家医院临床分离菌株对吉米沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐药性分析黄湘宁;喻华;郭燕;苏丹虹;魏莲花【摘要】目的:了解国内不同地区4家医院临床分离菌株对吉米沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐药性,为临床合理使用氟喹诺酮类抗菌药物提供参考.方法:收集2015年四川省人民医院、复旦大学附属华山医院、广州医科大学附属第一医院和甘肃省人民医院临床分离菌株,参照2016年美国临床和实验室标准协会相关要求,采用E试验测定细菌对抗菌药物的敏感性.采用纸片法筛选和酶抑制剂增强确证试验检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamase,ESBL)菌株.结果:共收集到临床分离菌株539株,其中大肠埃希杆菌120株,肺炎克雷伯菌117株,肺炎链球菌108株,流感嗜血杆菌111株,卡他莫拉菌83株.大肠埃希菌对吉米沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为56.7％、48.3％,其中产ESBL菌株对吉米沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为66.7％、62.2％,非产ESBL菌株对吉米沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为41.5％、34.0％.肺炎克雷伯对吉米沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为36.8％、19.7％,其中产ESBL菌株对吉米沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为81.6％、39.5％,非产ESBL菌株对吉米沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为14.7％、12.1％.肺炎链球菌对吉米沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐药率分别为2.8％、4.6％和2.8％;吉米沙星、左氧氟沙星和莫西沙星对流感嗜血杆菌的MIC90范围为0.5～0.75μg/ml,左氧氟沙星、莫西沙星对流感嗜血杆菌的敏感率分别为100％、93.7％;吉米沙星对卡他莫拉菌的MIC50、MIC90分别为0.016、0.125μg/ml.结论:大肠埃希菌和肺炎克类伯菌对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率较高,但肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌对上述3种氟喹诺酮类抗菌药物高度敏感.【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2019(019)005【总页数】4页(P631-634)【关键词】吉米沙星;左氧氟沙星;莫西沙星;大肠埃希菌;肺炎克雷伯菌;肺炎链球菌;流感嗜血杆菌;卡他莫拉菌【作者】黄湘宁;喻华;郭燕;苏丹虹;魏莲花【作者单位】四川省医学科学院/四川省人民医院检验科,四川成都610072;四川省医学科学院/四川省人民医院检验科,四川成都610072;复旦大学附属华山医院检验科,上海 200040;广州医科大学附属第一医院检验科,广东广州510120;甘肃省人民医院检验科,甘肃兰州 730000【正文语种】中文【中图分类】R978.1吉米沙星是一种结构新颖的氟喹诺酮类抗菌药物，其除与大多数氟喹诺酮类抗菌药物一样对革兰阴性菌具有良好抗菌活性外[1]，对革兰阳性菌，尤其是肺炎链球菌的活性优于环丙沙星、左氧氟沙星等第3代氟喹诺酮类抗菌药物[2-3]。
2014 年 CLSI M100-S24 主要更新内容解读
九、关于药敏试验操作的更新
新增了 4 种抗菌药物母液配制的方法：比
阿培南溶解液和稀释液均为 O.85%~0.9%NaCl(w／v) 的生理盐水； Eravacycline 和 Surotomycin 的溶解液和稀 释液均为水；特拉万星的稀释液为二甲基 亚砜。复合药物氯曲南一 Avibactam 药敏 试验母液配制，需将 Avibactam 浓度固定 为 4mg／L，氨曲南则倍比稀释。
四、葡萄球菌属的相关更新
对于β内酰胺酶的筛选试验，文件增加
了金黄色葡萄球菌 ATcc 29213 作为补充 性质控菌株，用于青霉素抑菌圈周边试 验 (β内酰胺酶阳性为锐利清晰抑茵圈边 缘、“绝壁样”)。补充性质控可用于评 价新试验、人员培训和实验室能力评估， 每日常规或每周药敏试验的质控不需要 包括补充性质控菌株。
谢谢
3. 设定“sDD”的剂量方案
随着抗菌药物药代动力学和药效学的不
断发展，它们对 MIc 折点的制定也愈发 重要。对肾功能正常的成年患者，折点 的恰当使用要求临床在感染部位采用符 合或超过预期的全身给药剂量，以达到 临床疗效。建立“敏感”或“sDD”折 点的剂量方案，
4. 如何在临床执行和使用“sDD”
对于肠球菌，氨苄西林药敏结果有不同
的其他药物敏感性预测作用；应用于阿 莫西林抗菌活性的预测；可能预测阿莫 西林一克拉维酸、氨苄西林一舒巴坦、 哌拉西林和哌拉西林一他唑巴坦对非产 β内酰胺酶肠球菌的敏感性；可以用于 预测亚胺培南对粪肠球菌的药敏活性。
六、其他菌种的相关更新
l. 铜绿假单胞菌：删除常规质控菌株中入常规试验和
报告药物 u 组 (补充试验仅用于泌尿道 组)，作为单纯性泌尿道感染的替代试验。 治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇 异变形杆菌引起的单纯性泌尿道感染时， 头孢唑林可预测口服药物头孢克洛、头 孢地尼、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢呋 辛酯、头孢氨苄和氯碳头孢的疗效。
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2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读
张雅薇王辉（通讯作者）
北京大学人民医院检验科
此文发表在《中华检验医学杂志》
2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI 批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016
年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新
CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄
食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新
2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，
不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
同时也删除了美洛西林和替卡西林对厌氧菌的折点。
三、常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法鉴定抗菌药物的敏感和耐药
M100S（第26版）增加了常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法的说明，见表3～7。
1.常规药敏试验：用于临床常规检测的纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法。
2.补充（非常规）药敏试验：通过常规纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法以外的方法检测某种或某类药物的敏感性或耐药性，且该方法无需额外试验确证药物的敏感性或耐药性。
3.初筛药敏试验：结果用于预测，需要额外的试验确证药物的敏感性或耐药性。
4.替代药物检测法：当目标抗菌药物的药敏无法检测或替代药物的药敏操作优于目标抗菌药物时，该药物可替代目标抗菌药物进行药敏试验。
5.等效药物检测法：可预测与其密切相关的同类药物的药敏结果，并通过减少多种密切相关药物的药敏检测数量以提高检测效率。
四、福氏志贺菌和宋内志贺菌的流行病学临界值（epidemiological cutoff value, ECV）
流行病学临界值是CLSI M100-S25引入的新概念，指根据体外药敏表型（MIC值）来区分有无获得性和（或）突变耐药细菌，该MIC 值即为ECVs。
2016年新增了阿奇霉素对福氏志贺菌和宋内志贺菌的ECVs。
当阿奇霉素抑菌圈直径≥16mm或MIC≤8mg/L时，可以推断福氏志贺菌为野生型；当阿奇霉素抑菌圈直径≤15mm或MIC≥16mg/L时，则该福氏志贺菌为非野生型。
此外，阿奇霉素对宋内志贺菌野生型和非野生型的流行病学临界值分别为MIC≤16mg/L和MIC ≥32mg/L。
五、关于药敏质控的相关更新
2016年文件新增和修订了下列药物对部分质控菌株纸片扩散法和MIC法的质控范围，包括氨曲南-阿维巴坦、Delafloxacin、Gepotidacin、Levonadifloxacin和Lefamulin等，见表8~9。
六、关于药敏试验操作和结果读取的建议
对于葡萄球菌属、肺炎链球菌、β溶血链球菌和草绿色链球菌，当通过微量肉汤稀释法检测氯霉素、克林霉素、红霉素、利奈唑胺、泰地唑胺和四环素的MIC时，细菌拖尾生长可能造成结果误读。
对于上述情况，CLSI建议读拖尾现象开始的最低浓度为其MIC值，应忽略细菌微量生长[3]。
当培养基中含有甲氧苄啶和磺胺时，拮抗剂可能使细菌微量生长，终点判读为80%抑制生长的药物浓度。
此外，当通过微量肉汤稀释法检测氯霉素、红霉素、利奈唑胺、泰地唑胺和四环素对肠球菌的MIC时，CLSI建议将拖尾现象开始的最低浓度作为其MIC值，以避免拖尾现象影响判读终点。
此外，M100S（第26版）新增了某些药物（包括Cadazolid、Delafloxacin、Gepotidacin、Lefamulin、Levonadifloxacin和塞
克硝唑）的溶剂和稀释剂选择，以及新型复合制剂（阿米卡星-磷霉素、头孢吡肟-他唑巴坦和亚胺培南-relebactam）的制备方法。
七、其他主要更新
CLSI M100S（第26版）未包括部分不常见细菌，而CLSIM45文件[4]提供了这些细菌药敏试验的标准化方法，包括药物选择、结果解释和质控。
新版M45文件新增了对气球菌属、孪生球菌属、乳球菌属、微球菌属和胶胨罗斯氏菌的药敏试验。
此外，M100S（第26版）文件附录A（药敏结果确证与微生物鉴定）将奥利万星、特拉万星和泰地唑胺加入肠球菌属、金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌和草绿色链球菌的耐药表型检测中。
附录B新增某些细菌对部分药物的天然耐药情况，包括肠杆菌科细菌对泰地唑胺、奥利万星和特拉万星，梭菌属对氨基糖苷类，无害梭菌对万古霉素和氨基糖苷类，拟杆菌属对氨基糖苷类、青霉素和氨苄西林，以及猫狗梭杆菌对氨基糖苷类和喹诺酮类天然耐药。
同时删除了铜绿假单胞菌对磷霉素的天然耐药。
参考文献
[1]Clinical and Laboratory Standards Institute. M100S. Performance Standards forAntimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Sixth Edition [S]. Wayne, PA:CLSI, 2016. [2]Clinical and Laboratory Standards Institute. M100-S25. Performance Standardsfor Antimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Fifth Informational Supplement[S]. Wayne, PA: CLSI, 2015.
[3]Clinical and Laboratory Standards Institute. M07-A10—Methodsfor Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That GrowAerobically; Approved Standard-Tenth Edition [S]. Wayne. PA: CLSI.
[4] Clinical and LaboratoryStandards Institute. M45 Methods for Antimicrobial Dilution and DiskSusceptibility Testing of Infrequently Isolated of Fastidious Bacteria [S].Wayne, PA: CLSI.。